氣相色譜講義（包含很多實際經(jīng)驗其他教材里看不到的）

色譜介紹氣相色譜

陳麗1內(nèi)容色譜的根本理論和根本概念

氣相色譜介紹

氣相色譜的定性和定量分析的方法2首先要了解的信息3氣相色譜在分析技術中的地位氣相色譜是一種相當成熟且應用極為廣泛的復雜混合物的別離分析方法，

1906年，俄國科學家茨威特。石油醚碳酸鈣顆粒色素玻璃柱41906年色譜的誕生〔LC〕1940年左右預言GC色譜的誕生1955年第一臺GC色譜儀器誕生1958年毛細管色譜柱的問世，各種檢測技術的應用，使GC很快從實驗室的技術變成常規(guī)分析手段5氣相色譜與液相色譜的比較流動相固定相GC用氣體做流動相,又叫載氣,常用的載氣有氦氣,氫氣,氮氣,與LC相比,GC流動相的種類少,可選擇范圍小,載氣的主要作用是將樣品帶入GC系統(tǒng)進行別離,其本身對別離結果的影響很有限.而在液相中,流動相種類多,且對別離結果的奉獻很大。另外,GC流動相的本錢低于液相。因為GC流動相的種類較少，別離選擇性主要通過不同的固定相來改變，固定相對別離的好壞起著決定性作用。現(xiàn)在市場上已有數(shù)百種的固定相供我們選擇使用。但常用的LC固定相也就十幾種，因此，LC在很大程度上要通過選用不同的流動相來改變別離選擇性。當然，常用的GC毛細柱的固定相也不過十幾種。在實際分析種，GC一般是選定一種載氣，然后通過改變色譜柱〔即固定相〕以及操作參數(shù)〔柱溫or載氣流速等〕來優(yōu)化別離；LC往往是選定色譜柱后，通過改變流動相的種類和組成以及操作參數(shù)〔柱溫or流動相流速等〕來優(yōu)化別離。6GC能分析的樣品是可揮發(fā)，且熱穩(wěn)定的，沸點一般不超過500℃。在目前的化合物中，大約有20％～25％的可用GC分析，其余的大體都可用LC分析。也就是說GC的分析對象遠沒有LC多。GC常用的檢測技術有很多，如TCD,FID,ECD，NPD等，其中FID對大多數(shù)有機物均有響應，且靈敏度相當高，而在LC中目前還沒有通用性這么好的高靈敏度檢測器。市場上LC儀器通常配置的也就是紫外-可見光吸收檢測器〔UV-VIS〕和示差折光檢測器〔RI〕,前者的通用性遠不及FID,后者的靈敏度又較低。當然，GC和LC都有靈敏度較高的選擇性檢測器，如GC的ECD、NPD,LC的熒光和電化學檢測器。分析對象檢測器7第一部份

色譜的根本理論和根本概念8GC色譜分析流程圖過程：9在色譜法中，將填入玻璃管或不銹鋼管內(nèi)靜止不動的一相〔固體或液體〕稱為固定相；自上而下運動的一相〔一般是氣體或液體〕稱為流動相；裝有固定相的管子〔玻璃管或不銹鋼管〕稱為色譜柱。當流動相中樣品混合物經(jīng)過固定相時，就會與固定相發(fā)生作用，由于各組分在性質(zhì)和結構上的差異，與固定相相互作用的類型、強弱也有差異，因此在同一推動力的作用下,不同組分在在固定相滯留時間長短不同，從而按先后不同的次序從固定相中流出。色譜別離過程：10從不同角度，可將色譜法分類如下：

按兩相狀態(tài)分類氣體為流動相的色譜稱為氣相色譜〔GC〕根據(jù)固定相是固體吸附劑還是固定液〔附著在惰性載體上的一薄層有機化合物液體〕，又可分為氣固色譜〔GSC〕和氣液色譜〔GLC〕。液體為流動相的色譜稱液相色譜〔LC〕同理液相色譜亦可分為液固色譜〔LSC〕和液液色譜〔LLC)。超臨界流體為流動相的色譜為超臨界流體色譜〔SFC〕通過化學反響將固定液鍵合到載體外表，這種化學鍵合固定相的色譜又稱化學鍵合相色譜〔CBPC〕11按兩相狀態(tài)分類

GCLCSFCGSCGLCLSCLLCCBPC……12色譜的根本術語色譜的流出曲線和色譜峰------由檢測器輸出的電信號強度對時間作圖，所得曲線稱為色譜流出曲線。曲線上突起局部就是色譜峰?；€------在實驗操作條件下，色譜柱后沒有樣品組分流出時的流出曲線稱為基線，穩(wěn)定的基線應該是一條水平直線,以〔a〕表示峰高------色譜峰頂點與基線之間的垂直距離，以(h〕表示

13死時間t0------不被固定相滯留的物質(zhì)進入色譜柱時，從進樣到出現(xiàn)峰最大值所需要的時間，它正比于色譜柱的空隙體積。因為這種物質(zhì)不被固定相滯留，其流動速度接近于流動相流速。測定流動相平均線速u時，可用柱長L與to的比值計算，即u＝L/to

保存時間tr------試樣從進樣到柱后出現(xiàn)峰極大點時所經(jīng)過的時間，稱為保存時間tr14調(diào)整保存時間tr’------某組分的保存時間扣除死時間后，稱為該組分的調(diào)整保存時間，即tr’=tr－to由于組分在色譜柱中的保存時間tr包含了組分隨流動相通過柱子所須的時間和組分在固定相中滯留所須的時間，所以tr實際上是組分在固定相中保存的總時間。15

死體積Vo------指色譜柱填充后，柱管內(nèi)固定相顆粒間所剩留的空間、色譜儀中管路和連接頭間的空間以及檢測器的空間的總和。

當后兩項很小可以忽略時，死體積可由死時間與柱出口的載氣流速F計算：VO=toF保存體積Vr------試樣從進樣到柱后出現(xiàn)峰極大點時所通過流動相的體積。保存時間與保存體積的關系：Vr＝trF調(diào)整保存體積Vr’------某組分的保存體積扣除死體積后，稱為該組分的調(diào)整保存體積。Vr’＝Vr－Vo16相對保存值

------某組分2的調(diào)整保存值與組分1的調(diào)整保存值之比，稱為相對保存值。r2,1=tr2/tr1意義:只與柱溫及固定相性質(zhì)有關,與柱徑、柱長、填充情況及流動相流速無關，在定性分析中，通常固定一個色譜峰作為標準〔s〕，然后再求其它峰〔i〕對這個峰的相對保存值，此時可用符號表示，即=tr(i)/tr(s)式中tr(i)為后出峰的保存時間，所以總是大于1的。相對保存值往往可作為衡量固定相選擇性的指標，又稱選擇因子。171.標準偏差：即0.607倍峰高處色譜峰寬的一半。

2.半峰寬W1/2：即峰高一半處對應的峰寬。它與標準偏差的關系為：W1/2=2.354

3.峰底寬度W：即色譜峰兩側拐點上的切線在基線上截距間的距離。它與標準偏差的關系是：W=4區(qū)域寬度

------色譜峰的區(qū)域寬度是色譜流出曲線的重要參數(shù)之一，用于衡量柱效率及反映色譜操作條件的動力學因素。表示色譜峰區(qū)域寬度通常有三種方法。181.根據(jù)色譜峰的個數(shù)，可以判斷樣品中所含組分的最少個數(shù)；2.根據(jù)色譜峰的保存值，可以進行定性分析；3.根據(jù)色譜峰的面積或峰高，可以進行定量分析；4.色譜峰的保存值及其區(qū)域寬度，是評價色譜柱別離效能的依據(jù)；5.色譜峰兩峰間的距離，是評價固定相〔或流動相〕選擇是否適宜的依據(jù)。從色譜流出曲線中，可得到的重要信息

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色譜分析的目的是將樣品中各組分彼此分，組分要到達完全別離，兩峰間的距離必須足夠遠，兩峰間的距離是由組分在兩相間的分配系數(shù)決定的，即與色譜過程的熱力學性質(zhì)有關。20色譜的根本原理分配系數(shù)K和分配比k

K=溶質(zhì)在固定相中的濃度/溶質(zhì)在流動相中的濃度=Cs/Cm

分配系數(shù)是由組分和固定相的熱力學性質(zhì)決定的，它是每一個溶質(zhì)的特征值，它僅與兩個變量有關：固定相和溫度。與兩相體積、柱管的特性以及所使用的儀器無關。k=組分在固定相中的質(zhì)量/組分在流動相中的質(zhì)量=ms/mmk

：容量因子

分配比不僅隨柱溫、柱壓變化而變化，而且還與流動相及固定相的體積有關。21分配系數(shù)K：用來描述樣品分子在兩相間的分配過程的參數(shù)分配比k：衡量色譜柱對被別離組分保存能力的重要參數(shù)分配系數(shù)K與分配比k的關系：K=k.

β稱為相比率，它是反映各種色譜柱柱型特點的又一個參數(shù)。例如，對填充柱，其β值一般為6~35；對毛細管柱，其β值為60~600。柱子的相比值分布越窄，柱與柱之間的重現(xiàn)性也越高假設要使A、B組分完全別離，必須滿足以下三點：第一，兩組分的分配系數(shù)必須有差異；第二，區(qū)域擴寬的速率應小于區(qū)域別離的速度；第三，在保證快速別離的前提下，提供足夠長的色譜柱。22塔板理論

理論塔板數(shù)：n=L/H柱效與n和H的關系：n增加，柱效增加H增加，柱效減小當n>50時,可得到根本對稱的峰形曲線在GC色譜中,n約為103～106,峰形曲線可趨近于正態(tài)分布曲線各組分在進入色譜柱后,兩相間的分配系數(shù)有微小差異，經(jīng)過反復屢次后，仍可獲得良好的別離23n與半峰寬及峰底寬的關系式

:→n=5.54(tr/W1/2)2=16(tr/W)2

tr,W1/2,W為一個單位:距離或時間在tr一定時，如果色譜峰很窄，那么說明:n越大，H越小，柱效能越高?？梢钥闯?例題24例:某組分峰的峰底寬為40s，保存時間為400s，計算此色譜柱的理論塔板數(shù)。解：n=16(tR/W)2=16〔400/40〕2=1600塊25塔板理論的意義:1.解釋了流出曲線的形狀2.提出了計算和評價柱效上下的參數(shù)缺點:1.不能解釋板高受哪些因素影響2.不能說明為什么在不同的流速下，可以測得不同的理論塔板數(shù)

26速率理論H=A+B/u+Cu公式:U:流動相的線速度A:渦流擴散系數(shù)B.分子擴散項系數(shù)C.傳質(zhì)阻力項系數(shù)27A對于毛細柱,A=0B/U對于液相色譜,B/U=0CU采用粒度小的填充物和相對分子質(zhì)量小的氣體〔如氫氣〕做載氣，可使CU減小，提高柱效。28別離度R相鄰兩組分色譜峰保存值之差與兩組分色譜峰底寬總和之半的比值,又稱分辨率.定義:公式:R=2(tr2-tr1)/〔W1+W2〕意義:1.是既能反映柱效率又能反映選擇性的指標,稱總別離效能指標；2.R值越大，說明相鄰兩組分別離越好。一般說，當R<1時，兩峰有局部重疊；當R=1時，別離程度可達98%；當R=1.5時，別離程度可達99.7%。通常用R=1.5作為相鄰兩組分已完全別離的標志。29氣相色譜第二部份30概念回憶:√31氣相色譜的組成:輔助系統(tǒng)檢測系統(tǒng)分離系統(tǒng)進樣系統(tǒng)流動相系統(tǒng)氣相色譜儀器123453233流動相系統(tǒng)-載氣載氣種類:氮氣、氦氣和氫氣(氬氣)使用氫氣時注意:1.平安2.H2與金屬氧化物和不飽和化合物的反響問題3.使用ECD檢測器時對檢測器靈敏度的影響純度:99.99%～99.999%34氣源需通過凈化后使用載氣中的氧的存在會使固定相氧化，損壞色譜柱，改變樣品的保存值載氣中水的存在使局部固定相發(fā)生水解〔甚至包括某些樣品〕，結果損壞柱子，產(chǎn)生極限噪音和托尾現(xiàn)象載氣中有機化合物或其它雜質(zhì)的存在會產(chǎn)生極限噪音和鬼峰載氣中夾雜的粒狀雜質(zhì)可能使氣路控制系統(tǒng)失靈氣相色譜中的很多問題，來源于未經(jīng)處理的氣源35根本流路36進樣系統(tǒng)-進樣口填充柱進樣口毛細柱分流/無分流進樣口冷柱頭進樣PTV進樣口載氣37進樣墊進樣墊的壽命取決于進樣的頻率，針的質(zhì)量和進樣墊的成分，毛刺、銳邊或粗糙的外表會降低進樣墊的壽命。當有進樣墊的碎屑被注入到注射器帶入進樣口就會造成隔墊污染，在日常使用中要經(jīng)常更換進樣墊?！惨话氵M樣40-60次，約2-3天換一次〕進樣墊漏氣的征兆：保存時間增長，響應值減弱〔即峰高變小〕或柱前壓力減小，有時還會檢測器信號噪音加大等。進樣墊被污染的征兆：與樣品，溶劑或色譜柱無關的外來峰出現(xiàn)，在程序升溫時，這種峰在很寬的溫度范圍內(nèi)出現(xiàn)，而且超過分析時長。38隔墊吹掃的作用吹掃掉進樣墊高溫脫落的組分，一般為橡膠中的增塑劑或低聚物，減少鬼峰吹掃溢出襯管的溶劑氣體，減少溶劑拖尾常用流量范圍：3-5ml/min

無隔墊吹掃有隔墊吹掃39玻璃化學惰性好，減少在汽化室樣品分解的可能提供均勻的溫度分布，防止局部過熱

容易拆洗清理

玻璃襯管的作用分類分流襯管不分流襯管40分流比公式:分流比=柱流量/〔分流流量+柱流量〕分流流量>>柱流量時 分流比=柱流量/分流流量分流比的設定要依據(jù)樣品濃度〔濃度越高分流比越大〕分流比的設定要依據(jù)毛細柱容量〔柱容量越低，分流比越大〕常用的分流比范圍:1:20～1:200〔根據(jù)具體情況可用范圍很寬，比方：0.1mm毛細柱快速分析可用1：500以上的分流比〕41柱容量定義:色譜柱容量是指色譜柱對一種溶質(zhì)可容納的最大量值

進樣量一旦超過此數(shù)值，該組分的色譜峰就會發(fā)生畸變，即溶質(zhì)超載。超載的色譜峰可能沿固定方向變化，形成“鯊鰭〞峰。柱容量與固定相的極性，膜的厚度，柱內(nèi)徑和組分保存度等有關。如果色譜柱對一種組分的容量很高，那么說明該組分與固定相的極性很相似。例如：一根極性柱對極性化合物的容量一定大于對非極性化合物的容量。42樣品的進樣量范圍填充柱氣體:0.5-50ml

液體:0.1-1ml

毛細柱氣體:0.1-1ml

液體:0.004-2μl

43填充柱別離系統(tǒng)-色譜柱

由不銹鋼或玻璃材料制成，內(nèi)裝固定相，一般內(nèi)徑為2～4mm，長1～3m。填充柱的形狀有U型和螺旋型二種

毛細柱三局部組成：管身、保護涂層和固定相保護層管身固定相內(nèi)徑毛細柱的構成圖44

毛細柱管身和保護涂層

管身一般使用熔融二氧化硅或不銹鋼作為基質(zhì)材料，通常在其外表涂上一層聚酰亞胺作為保護層,防止色譜柱斷裂。涂層后的熔融毛細石英管呈褐色。涂層后的毛細柱之間的顏色可能不同，色譜柱的顏色對其色譜性能沒有什么影響。經(jīng)過持續(xù)的高溫使用后，聚酰亞胺涂層的顏色會變得比以前更深。45聚酰亞胺〔PI〕超耐高溫特種工程塑料,具有耐高溫(-269～400℃〕、高耐摩擦、自潤滑、高強度、高絕緣、耐輻射、耐腐蝕、熱膨脹系數(shù)小、耐有機溶劑、自熄、無毒等綜合性能。聚酰亞胺〔PI〕局部類別長期工作溫度在350℃以上，短期可達450℃，是目前工程塑料中耐溫性最好的工程塑料，它的綜合性能也是其他特種工程塑料無法比較的，被世人譽為“解決問題的能手〞，廣泛應用于航空、航天、機械、電氣、原子能、微電子、薄膜、液晶顯示等高技術領域。46

固定相聚硅氧烷特點：多用途、性質(zhì)穩(wěn)定，最為常用的固定相最根本的聚硅氧烷由100％甲基取代，當有其它種類的取代基出現(xiàn)時，該基團由百分數(shù)表示：

DB-1:100%二甲基聚硅氧烷DB-5：5%二苯基-95％二甲基聚硅氧烷DB-17:50%苯基-甲基聚硅氧烷A：“二〞表示每個硅原子包含兩個特定基團，當這兩個特定基團完全相同時，“二〞可以省去B:如果甲基的百分數(shù)沒有表征，表示甲基的含量為剩余的100％47“低流失〔MS〕〞用低流失或MS來表征一類固定相：低流失固定相在硅氧烷聚合物中鏈接一定數(shù)量的苯基或苯基類的基團〔稱之為：亞芳基〕，由于它們的參加，使得聚合物的鏈接變得更加鞏固穩(wěn)定，保證在高溫時，固定相不會降解，進一步降低色譜柱的柱流失，提高色譜柱的使用溫度。同類普通型和低流失型固定相的別離性能相同或極為相似，但是在某些方面還有微小的差異。48聚乙二醇

聚乙二醇由100％的聚乙二醇組成，穩(wěn)定性和使用溫度稍遜一籌聚硅氧烷有多種取代基團，穩(wěn)定性好，使用溫度范圍寬特點：使用壽命較短，容易受溫度的影響，在高溫下，固定相流失很厲害。(最高使用溫度在240℃～260℃)用途：用于各種溶劑和低沸點化合物的別離49如何選擇毛細選擇毛細柱的四點因素：固定相，內(nèi)徑，膜厚和長度50

固定相相似相容原理，選用非極性的固定相分析非極性化合物如果化合物可以用不同極性的固定相分析，首選最小極性的固定相非極性的固定相壽命大于極性固定相應用范圍最廣的幾種固定相：DB-1,DB-5,DB-17,

DB-WAX,能滿足90％以上的分析要求

DB-1

DB-5

DB-35

DB-17

DB-WAX

DB-FFAP非極性中等極性強極性51100℃200℃300℃柱流失圖52柱流失所有色譜柱都有柱流失現(xiàn)象，來源于固定相由于各種原因降解而產(chǎn)生的被洗脫物質(zhì)。柱流失會隨著溫度的升高而加劇，可以通過流失曲線看到這種變化。從流失圖可以看出：

空白試驗的基線在較低溫度區(qū)域相對平坦，到離溫度上限30-40℃時開始急速的上升，直至到達溫度上限。

在上限溫度持續(xù)期間，基線變得平穩(wěn)，直至完全平坦。1.如果空白試驗中得到色譜峰，有可能為GC系統(tǒng)中的污染物，可能來源于進樣墊；2.色譜柱的流失是一種持續(xù)過程，既不會偶然的開始，也不會突然的停止；3.極性固定相的流失率較高，在低溫時流失就很明顯；4.隨著色譜柱的使用，柱流失會不斷的升高。色譜柱暴露在有氧環(huán)境〔空氣〕中或持續(xù)在等于上限溫度下使用，都會加速柱流失。53色譜柱的溫度極限兩個溫度極限-----溫度下限和溫度上限低于溫度下限工作，得到的色譜峰又圓又寬〔柱效降低〕溫度上限一般有兩個固定的數(shù)值。較低的是恒溫極限，在該溫度下色譜柱可以正常的使用，柱流失和壽命不會受到影響。較高的數(shù)值是程升極限，在此溫度下色譜柱使用時間如果在10-15min內(nèi)，柱流失和壽命不會受到影響，但如果持續(xù)時間過長，那么會增加柱流失，縮短色譜柱的壽命，固定相和熔融石英管的惰性都有可能被破壞。54

內(nèi)徑增加直徑意味需要更多的固定相，即使厚度不增加，也有較大的樣品容量。同時也意味著降低了別離能力且流失較大。小口徑柱為復雜樣品提供了所需的別離，因為柱容量低需要分流進樣，如果別離度降低能夠接受的話，大口徑可以防止這一點。同時要考慮儀器的限制和要求：

填充柱進樣口可以用大口徑毛細柱〔0.53mm內(nèi)徑〕，但不能用小口徑柱；

毛細柱的進樣口一般可以用于所有內(nèi)徑范圍的毛細柱；

直接連用的GC/MS需要小口徑柱，因為真空泵不能處理大口徑的大流量。55標準膜厚〔0.25～0.5μm〕：最廣泛的應用薄液膜一般用于高沸點化合物的別離厚液膜一般用于揮發(fā)性化合物的別離，如低沸點溶劑等

膜厚薄膜比厚膜洗脫組分快，峰別離好，出峰溫度低，適用于高沸點化合物和組分密集化合物標準膜厚對于流出達300℃的大多數(shù)樣品來說別離很好，對于更高的出峰溫度，可以用0.1μm的液膜厚膜對低沸點化合物有利，對于流出溫度在100～200℃之間的物質(zhì)，用1～5μm的液膜效果較好，超厚膜〔3～5μm〕用于氣體，溶劑等的分析，以增加樣品組分于固定相的相互作用從而到達別離56

長度

25/30m：標準長度，滿足絕大多數(shù)應用10/15m：通常十個組分以下簡單樣品的快速分析50m以上：復雜化合物分析柱長度在柱子的性能上不是一個重要參數(shù)，例如，加倍柱長，恒溫分析時間可能會加倍但峰分辨率僅增大約40％。如果峰的別離比較好不是特別好時，考慮薄膜，優(yōu)化載氣或用程序升溫比增加柱長的別離效果好。57色譜柱的保存用廢進樣墊將色譜柱的兩端封住，并放回原包裝。再安裝時，要將色譜柱的兩端截取一局部，保證沒有進樣墊的碎屑殘留于柱子中。58檢測系統(tǒng)-檢測器檢測器的分類：√59FID(Flameionizationdetector)FID火焰電離檢測器是利用氫火焰作電離源，使有機物電離，產(chǎn)生微電流而響應的檢測器，又稱氫火焰電離〔或離子化〕檢測器。檢測器的響應值取決于單位時間內(nèi)進入檢測器的組分量，屬于質(zhì)量型檢測器。FID工作原理：FID由電離室和檢測電路兩局部組成。該檢測器檢出的是有機化合物，無機氣體及氧化物在該檢測器無響應。60電離室檢測電路從柱尾流出的組分在噴嘴處與進入的氫氣以及尾吹氣混合，空氣作為助燃氣。極化極和收集極通過高電阻、基流補償和直流電源組成檢測電路，測量氫焰中產(chǎn)生的微電流。當有組分流出時，組分在氫火焰中被電離成正，負離子和電子。在機化極形成的高壓電場下，各離子開始定向移動，形成微電流，經(jīng)放大器放大后，從輸出衰減器中獲得組分電信號.噴嘴極化極61影響檢測器靈敏度的因素：噴嘴直徑的影響：在一定范圍內(nèi)，噴嘴越細靈敏度越高，噴嘴粗，線性范圍也變寬，但太細會造成堵塞和不穩(wěn)定，一般為0.5mm左右

電極形狀和電極間距離的影響：收集極一般不要離噴嘴太近，3～8mm以圓桶狀為佳

電極電壓的影響：低壓時響應值隨電壓升高而迅速增加，超過一定值時就沒有太大的變化，而高電壓會帶來噪聲，一般為150～300V62第三部份氣相色譜的定性及定量分析63保存時間：一.定性分析〔確定各色譜峰所代表的化合物〕缺點:不同物質(zhì)在同一色譜條件下，可能具有相似或相同的保存值，即保存值并非專屬的在了解樣品的來源、性質(zhì)、分析目的的根底上，對樣品組成作初步的判斷，再結合有效的方法那么可確定色譜峰所代表的化合物各種物質(zhì)在一定的色譜條件下均有確定的保存值，保存值可作為一種定性指標64利用純物質(zhì)對照定性

適用于:組分性質(zhì)已有所了解，組成比較簡單，且組分中有純物質(zhì)的未知物。相對保存值法相對保存值αis:指組分i與基準物質(zhì)s調(diào)整保存值的比值公式:αis=tri/trs通常選容易得到的純品，而且與被分析組分相近的物質(zhì)作基準物質(zhì)測定方法:在某一固定相及柱溫下，分別測出組分i和基準物質(zhì)s的調(diào)整保存值，再按上式計算即可。65適用范圍:當未知樣品中組分較多，所得色譜峰過密，用上述方法不易識別時，或僅作未知樣品指定工程分析時均可用此法。定性方法：首先作出未知樣品的色譜圖，然后在未知樣品參加某物，又得到一個色譜圖。峰高增加的組分即可能為這種物。參加物增加峰高法二.定量分析〔求出混合樣品中各組分的百分含量〕定量依據(jù)：當操作條件一致時，被測組分的質(zhì)量〔或濃度〕與檢測器給出的響應信號成正比。即：i=fiAi

i為被測組分i的質(zhì)量；

Ai為被測組分i的峰面積；

fi為被測組分i的校正因子

66進行色譜定量分析時需要：

準確測量檢測器的響應信號—峰面積或峰高；準確求得比例常數(shù)—校正因子；正確選擇適宜的定量計算方法，將測得的峰面積或峰高換算為組分的百分含量。峰面積測量方法〔1〕對稱形峰面積的測量——峰高乘以半峰寬法對稱峰的面積A=1.065h W1/2〔2〕不對稱形峰面積的測量——峰高乘平均峰寬法對于不對稱峰的測量如仍用峰高乘以半峰寬，誤差就較大，因此采用峰高乘平均峰寬法A=1/2h〔W0.15+W0.85〕式中W0.15和W0.85分別為峰高0.15倍和0.85倍處的峰寬。67定量校正因子〔1〕絕對校正因子：fi=mi/Aim，A分別為組份i的質(zhì)量和峰面積〔2〕相對校正因子：fi=fi/fs某組分i的相對校正因子fi為組分i與標準物質(zhì)s的絕對校正因子之比。fi=〔mi/Ai〕/〔ms/As〕=〔mi/ms〕〔As/Ai〕定量計算方法〔1〕歸一化法：把所有出峰組分的含量之和按100%