菌種保藏方法

第六章菌種保藏目的和管理規(guī)程原理、方法、要點(diǎn)菌種保藏機(jī)構(gòu)菌種保藏主要內(nèi)容菌種衰退？生產(chǎn)菌株性狀的劣化或遺傳標(biāo)記的丟失：1.菌落形態(tài)的改變2.生長速度緩慢3.生產(chǎn)能力下降4.抗不良環(huán)境能力減弱（抗噬菌體、低溫等）什么原因引起菌種退化？1.基因突變2.連續(xù)傳代3.不良培養(yǎng)條件及不良保藏條件菌種退化的防止1.減少傳代次數(shù)2.用單核細(xì)胞和單菌落移種傳代3.菌種純化4.采用良好培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件5.科學(xué)保藏第一節(jié)菌種保藏的目的和管理規(guī)程1.菌種保藏（cuclturecollection）將微生物菌種用各種適宜的方法妥善保存，避免死亡、污染，保持其原有性狀基本穩(wěn)定。目的：保持菌種的存活率、優(yōu)良性能、生產(chǎn)能力2.菌種保藏的管理規(guī)程·符合國家相關(guān)法律法規(guī)·復(fù)核、鑒定、純度檢驗(yàn)、資源信息整理·菌種信息菌種保藏方法、出入庫、異地保藏備份、高致病性病原微生物和專利菌種、菌種保藏設(shè)施定期檢查純度、生物學(xué)活性3.菌種的生物安全性分類一類微生物（對個(gè)體和群體危害程度高）二類微生物（對個(gè)體危害程度高，對群體危害較高）三類微生物（對個(gè)體危害程度中度，對群體危害較低）四類微生物（對個(gè)體和群體危害程度低）3.菌種的防護(hù)級別一級生物防護(hù)二級生物防護(hù)三級生物防護(hù)四級生物防護(hù)第二節(jié)菌種保藏的原理、方法及要點(diǎn)1.

低營養(yǎng)2.

干燥3.隔氧4.低溫降低代謝速率使細(xì)胞處于休眠狀態(tài)一、菌種保藏的原理二

菌種保藏的方法1.斜面保藏法條件：4℃冰箱，相對濕度50%～70%保存期：1～6個(gè)月適用：細(xì)菌、放線菌或酵母菌影響因素：培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件優(yōu)點(diǎn)：簡便、成本低，隨時(shí)觀察菌株性狀、缺點(diǎn)：自發(fā)突變、染菌、菌種退化2.液體石蠟保藏法適用范圍：廣泛保存期：1～2個(gè)月方法：滅菌、傾注、封口、直立放置缺點(diǎn)：占據(jù)空間、菌種生產(chǎn)能力下降二菌種保藏的方法3.沙土管保藏法過篩、滅菌、干燥沙土保存期：數(shù)年適用：產(chǎn)孢子或形成芽孢的微生物缺點(diǎn)：存活率低制備菌種接種真空干燥、密封二

菌種保藏的方法4.麩皮保藏法（曲法保藏）方法：滅菌、接種、干燥、低溫保存適用：產(chǎn)孢子的霉菌和部分放線菌保存期：1年以上優(yōu)點(diǎn)：簡單、經(jīng)濟(jì)二菌種保藏的方法5.冷凍干燥保藏法保存期：4℃冰箱，保存5-10年適用：廣泛優(yōu)點(diǎn)：繁瑣、設(shè)備技術(shù)要求高處理安瓿管制備菌懸液保護(hù)劑冷凍干燥真空封口安瓿管的保藏預(yù)凍6.液氮超低溫保藏法二菌種保藏的方法保存期：-150℃～-196℃，保存15年適用：最為廣泛優(yōu)點(diǎn)：高效缺點(diǎn)：購置設(shè)備、費(fèi)用高

分裝入安瓿管

預(yù)凍

置液氮內(nèi)

細(xì)胞

保護(hù)劑

封口

二菌種保藏的方法7.甘油保藏法懸浮于滅菌的10%-15%甘油介質(zhì)保存期：-20℃冰箱，保存0.5～1年超低溫冰箱（-70℃）保存10年優(yōu)點(diǎn)：簡便缺點(diǎn)：需要設(shè)備超低溫冰箱三、菌種保藏的注意事項(xiàng)菌種保藏前的培養(yǎng)無菌操作制備過程菌種的存放與使用第三節(jié)菌種保藏機(jī)構(gòu)中心名稱縮寫所在地郵碼保藏范圍中國典型培養(yǎng)物保藏中心

普通微生物菌種保藏中心

農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏中心

工業(yè)微生物保藏中心

醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心

抗生素菌種保藏管理中心

獸醫(yī)微生物菌種保藏中心

林業(yè)微生物菌種保藏中心

CCTCC

CCGMC

ACCC

CICC

CMCC

CACC

CVCC

CFCC武漢大學(xué)

中國科學(xué)院微生物研究所中國科學(xué)院病毒研究所

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所輕工部食品發(fā)酵工業(yè)研究所中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所中國藥品生物制品檢定所中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所國家醫(yī)藥管理局四川抗生素工業(yè)研究所華北制藥廠抗生素研究所農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)藥品監(jiān)察所

中國林業(yè)研究所武漢430072

北京100080武漢430071

北京100081

北京100027

南京210042北京100050北京100050

成都610051石家莊050015北京100081

北京100091專利菌種

真菌，細(xì)菌