探討丁香葉含漱液對(duì)外周血中TNF-α水平的作用,口腔科學(xué)論文

探討丁香葉含漱液對(duì)外周血中TNF-α水平的作用,口腔科學(xué)論文外周腫瘤壞死因子(TNF－)是牙周病發(fā)生經(jīng)過(guò)中的一個(gè)重要炎癥因子，在牙周炎病變經(jīng)過(guò)中，TNF－是繼IL－1的又一較強(qiáng)的骨吸收刺激因子，可使骨構(gòu)成受阻，已有研究表示清楚它可通過(guò)自分泌和(或)旁分泌途徑，作用于免疫細(xì)胞而導(dǎo)致組織毀壞和骨吸收，以及各種炎癥反響的發(fā)生，在血清中的水平升高與牙周組織毀壞密切相關(guān)。本研究通過(guò)檢測(cè)中重度牙周炎患者基礎(chǔ)治療合并使用丁香液含漱劑前后外周血中TNF－水平的變化，及臨床牙周指數(shù)的差異，討論丁香葉含漱液對(duì)外周血中TNF－水平的影響，以其證實(shí)基礎(chǔ)治療后使用丁香葉含漱的輔助療效。1材料與方式方法本研究收集在2018－12～2020－06間80例就診于黑龍江省口腔病防治院牙周科的患者。根據(jù)衛(wèi)生部規(guī)劃教學(xué)資料(牙周病學(xué)〕中的有關(guān)內(nèi)容，制定納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)。1.1病例納入標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷符合中重度牙周炎的診斷標(biāo)準(zhǔn):中度牙周炎:牙周袋6mm、附著喪失3～4mm、X線片顯示牙槽骨水平吸收或是角形吸收超過(guò)根長(zhǎng)1/3，但不超過(guò)根長(zhǎng)1/2，牙齒有輕度的松動(dòng)。重度牙周炎:牙周袋＞6mm、附著喪失5mm、X線片顯示牙槽骨吸收超過(guò)根長(zhǎng)1/2，甚至達(dá)根長(zhǎng)2/3。1.2病例排除標(biāo)準(zhǔn)侵襲性牙周炎(局限型或廣泛型)患者;患者在1年內(nèi)進(jìn)行過(guò)牙周治療，伴有糖尿病、腎炎、類風(fēng)濕，心血管等系統(tǒng)性疾病的患者;廣泛的齲壞、牙齒錯(cuò)合畸形、排列不齊等影響臨床指標(biāo)測(cè)定的患者;3個(gè)月內(nèi)有急性感染性疾病;長(zhǎng)期服用引起牙齦增生或是影響牙周恢復(fù)的抗生素或免疫抑制劑如環(huán)孢菌素、苯妥英鈉等;婦女妊娠和哺乳;出現(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)藥品過(guò)敏者。每位患者口腔內(nèi)至少有20顆天然牙，每個(gè)象限至少有1個(gè)位點(diǎn)知足牙周袋探診深度(PD)5mm。每人選取1顆符合以上實(shí)驗(yàn)分組條件的第1或者第2磨牙作為受試牙。1.3實(shí)驗(yàn)分組本研究經(jīng)黑龍江省口腔病防治院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意，所有受試者均簽署知情同意書。采用隨機(jī)、單盲、本身對(duì)照的方式方法，以基礎(chǔ)治療為對(duì)照組，將80例患者華而不實(shí)男49例，女31例;年齡28～60歲，平均年齡(43.5410.19)歲，隨機(jī)分為治療組(牙周基礎(chǔ)治療后使用丁香制劑含漱)40例，對(duì)照組(單純牙周治療)40例。治療組和對(duì)照組的年齡、性別等基本情況比擬無(wú)顯著差異(P＞0.05)。1.4全口牙周情況檢查及臨床觀察指標(biāo)的記錄1.4.1菌斑指數(shù)(plaqueindex，PLI):不同學(xué)者所提出的菌斑指數(shù)由于制定的標(biāo)準(zhǔn)不同，其臨床適應(yīng)證也有所不同。由Le和Silness在1964年提出的劃分標(biāo)準(zhǔn)，將菌斑指數(shù)分為0～3級(jí)，它是根據(jù)齦緣附近牙菌斑的厚度和量記分，而不是用菌斑顯示劑，根據(jù)菌斑覆蓋面積記分。詳細(xì)方式方法:看牙體外表菌斑分布的部位及范圍，之后用探針輕刮牙面，再次確認(rèn)菌斑的量并記錄結(jié)果。分級(jí)如下:0級(jí):齦緣區(qū)無(wú)菌斑;1級(jí):齦緣區(qū)牙面有薄的菌斑，但視診不可見，若用探針尖的側(cè)面可刮出菌斑;2級(jí):在齦緣或鄰面可見中等量菌斑;3級(jí):齦溝內(nèi)或齦緣區(qū)及鄰面有大量軟垢。1.4.2牙齦指數(shù)(gingivalindex，GI):根據(jù)Le和Sil-ness的劃分標(biāo)準(zhǔn)，用牙周探針在牙齦邊緣齦溝開口處觸及牙齦組織，輕輕滑動(dòng)，觀察牙齦出血情況記分。該方式方法客觀而簡(jiǎn)便，廣泛被用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床療效評(píng)價(jià)，但操作者需要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的訓(xùn)練才能把握探針深度和氣力，使記分到達(dá)客觀而準(zhǔn)確。據(jù)出血程度分為下面0～3級(jí):0級(jí):牙齦健康;1級(jí):牙齦輕度炎癥，牙齦的顏色有輕度改變，并輕度水腫，探診不出血;2級(jí):牙齦中度炎癥，牙齦紅腫，外表光亮，探診時(shí)出血;3級(jí):牙齦重度炎癥，紅腫明顯，可有潰瘍構(gòu)成，有自發(fā)性出血傾向。1.4.3牙周袋最大探診深度(probingdepth，PD):實(shí)驗(yàn)中均用牙周探針，探測(cè)從齦溝底到齦緣的距離，即為齦溝的最深距離記錄結(jié)果。詳細(xì)方式方法:用握筆式探針插入齦溝內(nèi)，應(yīng)注意力度要輕，以輕輕插入指甲內(nèi)而不引起疼痛為最佳力度，該力值約為20～25g。在測(cè)量牙周袋深度時(shí)，牙周探針的尖端始終緊貼牙面，探針必須與牙體長(zhǎng)軸平行。探測(cè)鄰面時(shí)由于接觸區(qū)的干擾，可將探針僅靠接觸點(diǎn)斜向鄰面齦谷區(qū)，使測(cè)得的結(jié)果較為準(zhǔn)確。1.4.4附著喪失(attachmentloss，AL):用牙周探針測(cè)得牙周袋深的距離，記為a，再測(cè)得釉牙骨質(zhì)界到齦緣的距離，記為b，計(jì)算附著喪失，其不同情況時(shí)計(jì)算方式方法如下:若齦緣在釉牙骨質(zhì)界上方，則:附著喪失=a－b;若齦緣在釉牙骨質(zhì)界下方，則:附著喪失=a+b。所有患者均在牙周基礎(chǔ)治療之前和治療后3個(gè)月分別采集靜脈血樣，血樣采集前24h內(nèi)禁食油膩食物，抽取上午8:00～10:00的空腹靜脈血，4000r/min離心5min，收集上清－80℃保存?zhèn)溆?。?biāo)本收集后室溫復(fù)融血漿，采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血漿標(biāo)本TNF－水平，實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格根據(jù)試劑盒的講明書進(jìn)行。2統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件。牙周基礎(chǔ)治療前后臨床牙周指數(shù)和TNF－含量比擬用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組間基礎(chǔ)治療前臨床牙周指數(shù)和TNF－含量比擬用兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn)。3結(jié)果治療組和對(duì)照組在進(jìn)行牙周基礎(chǔ)治療前對(duì)患者的PLI、GI、PD、AL等相關(guān)臨床指標(biāo)進(jìn)行記錄，兩組患者之間的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行比擬，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。表示清楚治療組和對(duì)照組之間的構(gòu)成平衡，具有可比性，見表1。治療組和對(duì)照組在進(jìn)行牙周基礎(chǔ)治療后3個(gè)月，患者的PLI、GI、PD、AL組間(P＜0.05)及組內(nèi)(P＜0.01)進(jìn)行比擬，并對(duì)兩組病人外周血中TNF－含量進(jìn)行測(cè)量，兩組患者之間的指標(biāo)進(jìn)行比擬，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。血清中TNF－于治療前后含量變化:基礎(chǔ)治療前，兩組患者血清中TNF－的含量較高，差異無(wú)顯著性(P＞0.05)?；A(chǔ)治療后兩組血清中TNF－含量均明顯下降，與治療前相比，差異均有顯著性(P＜0．01)，治療組相較于對(duì)照組血清中TNF－含量明顯減少，具有顯著性差異(P＜0.05)，見表3。3討論牙周炎是由牙菌斑中的微生物所引起的牙周支持組織的慢性感染性疾病，導(dǎo)致牙周支持組織的炎癥、牙周袋構(gòu)成、進(jìn)行性附著喪失和牙槽骨吸收等。TNF－作為一種單核細(xì)胞來(lái)源的炎性因子，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，作用于不同靶細(xì)胞可引發(fā)多種生物學(xué)效應(yīng):作用于纖維細(xì)胞可促進(jìn)其增生并產(chǎn)生前列腺素E2(PGE2);作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，可增加血管通透性;作用于骨和軟骨組織，能刺激骨吸收及抑制骨構(gòu)成。在牙周炎發(fā)生發(fā)展經(jīng)過(guò)中，TNF－介入了牙周炎牙槽骨的吸收、牙周膜的增寬，以及各種炎癥反響的發(fā)生。其作用機(jī)制可能為:刺激粘附分子、趨化因子的表示出和炎性介質(zhì)的產(chǎn)生，進(jìn)而啟動(dòng)炎癥反響;刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生膠原酶，導(dǎo)致結(jié)締組織的毀壞和骨吸收;刺激基質(zhì)細(xì)胞的凋亡進(jìn)而限制牙周組織的修復(fù)。丁香屬植物，藥用價(jià)值高，毒副作用小，分布廣泛，所含化學(xué)成分多種多樣，且華而不實(shí)多數(shù)成分能夠入藥，具有重要的研究?jī)r(jià)值。王丹丹等從紫丁香葉中分離得到的酪醇、反式對(duì)羥基肉桂酸、3，4－二羥基苯乙醇、3，4－二羥基苯甲酸及丁香苦甙等5種化合物的甙元，發(fā)現(xiàn)這些化合物對(duì)金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌、大腸桿菌及綠膿桿菌均有不同程度的抑制作用。本實(shí)驗(yàn)治療組丁香葉含漱局部用藥的方式方法治療中重度牙周炎，局部用藥能夠?qū)⑺幬镏苯幼饔糜诓∽儾课?，使牙周組織局部藥物濃度增高、用藥量較少、避免全身用藥的眾多副作用且不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)。藥物進(jìn)行口腔內(nèi)的含漱，能夠減少口腔內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量，減少牙面、舌背、扁桃體、頰黏膜等處的微生物，并能抑制齦上菌斑的堆積，阻止致病菌在牙面和牙周袋內(nèi)的定植。本試驗(yàn)結(jié)果顯示:在中重度牙周炎患者中，牙周基礎(chǔ)治療能夠降低外周血血清中TNF－的水平，基礎(chǔ)治療的同時(shí)使用丁香葉制劑含漱，能夠明顯降低外周血血清中TNF－的水平。結(jié)果分析顯示:兩組病人治療3個(gè)月后外周血中TNF－含量相比擬差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示丁香葉含漱液通過(guò)局部治療牙齦炎癥可降低血液中細(xì)胞因子。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，顯示外周血中TNF－的含量與PLI、GI、PD及AL均存在正相關(guān)關(guān)系，提示隨牙周病變程度的加強(qiáng)TNF－的含量同PLI、GI、PD及AL成正相關(guān)性均增加。本文中外周血液中TNF－水平降低的主要原因可能就是由于患牙經(jīng)過(guò)牙周基礎(chǔ)治療后，去除了菌斑、牙石等牙周炎局部刺激因子，利用丁香葉含漱使牙齦炎癥反響降低，TNF－產(chǎn)生隨之減少。綜上所述，丁香葉口腔含漱液能降低中重度慢性牙周炎患者的血清TNF－水平，改善其各項(xiàng)牙周臨床指數(shù)，有助于牙周病的恢復(fù)治療，為牙周病的治療擴(kuò)展新的治療藥物提供理論根據(jù)。以下為參考文獻(xiàn):［1］徐艷，章錦才，張?zhí)N惠.人可溶性腫瘤壞死因子受體真核表示出載體pcDNA3.1(+)/sTNFＲ的構(gòu)建［J］.華西口腔醫(yī)學(xué)雜志，2005，23(4):335～337.［2］任國(guó)亨，王成，張媛媛.牙周基礎(chǔ)治療后齦溝液中TNF－的變化［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)，2006，22(10):1146～1147.［3］曹采方，主編.牙周病學(xué)［M］.2版.人民衛(wèi)生出版社，2003.［4］SomervilleＲP，OblanderSA，ApteSS.Matrixmetallo-proteinases:olddogswithnewtricks［J］.GenomeBiol，2003，4(6):216.［5］曹采方.臨床牙周病學(xué)［M］.北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2006:117～120.［6］MaYC，ZuoL，ChenJH，etal.Modifiedglomerularfil-trationrateestimatingequationfor