




版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
生物制藥學實驗實驗1-5產淀粉酶菌株的篩選及誘變系列實驗實驗需知實驗分組:2個實驗室,每個實驗室分6組(名單上報),每次實驗結束留1組同學值日實驗成績:占期末總成績的20%,包括實驗出勤、實驗操作、實驗結果及實驗報告撰寫實驗結束:將實驗用品收拾整齊,由實驗老師確認實驗結束后方可離開實驗報告:實驗目的、實驗原理、實驗步驟(注意事項)、實驗結果、思考題系列實驗內容實驗1土壤中產淀粉酶菌株的篩選(1、2)實驗2產淀粉酶菌株的誘變劑量選擇實驗3紫外誘變劑突變菌株的初篩實驗4紫外誘變劑突變菌株的復篩實驗5高產淀粉酶生產菌株的穩(wěn)定性及淀粉酶活力測定
背景知識淀粉酶(amylase,Amy,AMS):能水解淀粉、糖原和有關多糖中的O-葡萄糖鍵的酶藥物:助消化藥,治療功能性消化不良背景知識產淀粉酶微生物:細菌、真菌等菌種分離與篩選步驟:采樣——培養(yǎng)——分離——篩選誘變育種步驟:誘變——初篩——復篩——性能檢測背景知識實驗1土壤中產淀粉酶菌株的篩選(1)實驗目的掌握菌種分離與篩選的方法從土壤中篩選出能夠合成分泌淀粉酶的微生物實驗原理自然界微生物種類繁多,有些微生物能夠以淀粉作為碳源進行生長繁殖,這是因為它們能夠合成分泌淀粉酶。當能合成淀粉酶的微生物在含有淀粉的固體培養(yǎng)基中生長時,會將淀粉酶分泌到菌體周圍,使菌落周圍的淀粉水解成為小分子量的糊精、聚糖和單糖。這些水解產物不能與碘作用,從而在菌體周圍形成透明圈。實驗步驟
1.篩選培養(yǎng)基的配制(已完成)可溶性淀粉2g,NaCl5g,牛肉膏5g,蛋白胨10g,瓊脂20g,水1000mL。2.倒平板(每組6個,每個平板10mL左右)實驗步驟3.土樣的采集各實驗室分別取三種不同環(huán)境的土樣并記錄當時取樣環(huán)境情況(1-2、3-4、5-6每兩小組在同一個地方進行取樣),通常取離地面5~15cm處的土壤。4.稀釋分離取土樣1g,加入9mL無菌水,逐步稀釋至105、106、107
(單數組)或106、107、108(雙數組)
,每個梯度涂2個平板。10ml1g9ml9ml9ml9ml9ml9ml10-110-210-710-610-510-410-31ml1ml1ml1ml1ml稀釋1ml分離實驗步驟5.各組做好標記,置于30℃恒溫培養(yǎng)48h(倒置培養(yǎng)??)6.產淀粉酶菌株的鑒定(下次課)
6.產淀粉酶菌株的鑒定倒平皿(注意培養(yǎng)基狀態(tài)、體積、表面平整):3個用接種環(huán)挑取單菌落到無菌瓶皿上(點植法:用接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面接觸幾點),同時用簽字筆按對應順序對各單菌落進行標號。在原培養(yǎng)皿表面噴灑稀碘液,記錄有水解圈的單菌落,與此對應找出合成淀粉酶的菌株1-2株。注意:未分離得到菌落的小組可與其他組合作,挑取其他組鑒定得到的菌落進行后續(xù)實驗(實驗報告中注明使用哪一組的菌落)。7.產淀粉酶菌株的增殖培養(yǎng)液體培養(yǎng)基分裝:10ml/瓶,每個菌株對應1瓶(每組1-2瓶,參考鑒定結果)液體培養(yǎng)基接種:用接種環(huán)從固體培養(yǎng)基表面上沾取少許菌苔,將接種環(huán)在液體培養(yǎng)基內振搖幾次即可。做好標記,放入搖床中振蕩培養(yǎng)24h。8.產淀粉酶菌株的純化——平板劃線法灼燒接種環(huán),冷卻后用接種環(huán)挑取少量菌苔左手持平皿,將皿蓋打開一條縫隙,右手將接種環(huán)伸入皿中,劃3-4條平行線灼燒接種環(huán),60°旋轉平皿,劃線(注意:后一區(qū)要求與前一區(qū)首尾相連,但不得與其他區(qū)域搭在一起)灼燒接種環(huán),將劃線平板倒置,于30℃培養(yǎng)48h后觀察。實驗結果及分析1.取樣環(huán)境情況2.記錄產淀粉酶菌株數量(比透明圈??)及對菌落的初步鑒定結果3.
分析:從不同地點獲得的結果為什么會出現差異?可以初步得出什么樣的結論?(未分離出菌株的原因?)細菌菌落特征較濕潤、光滑、透明、易挑取菌落正反面或邊緣與中央部位的顏色一致質地均勻、小而突起(或大而平坦)有臭味或酸敗味酵母菌菌落特征(與細菌相似)
圓形或卵圓形較濕潤、較粘稠、光滑,易挑取菌落質地均勻正反面、邊緣和中心顏色一致比細菌菌落大而厚,較不透明,顏色多呈乳白色多帶酒香味霉菌菌落特點大而疏松,呈絨毛狀(曲霉)、絮狀(毛霉)、地毯狀(青霉)或蜘蛛網狀(根霉)有的無固定大小,延至整個培養(yǎng)基中產色素,使菌落顯色放線菌菌落特征干燥、不透明,小而緊密,呈放射狀菌落初期表面光滑或呈致密的絲絨狀,當產生孢子之后,其菌落表面呈粉狀、顆粒狀菌落和培養(yǎng)基連接緊密,難以挑取,或者整個菌落被挑起而不致破碎菌落顏色多樣,菌落正反面顏色常不一致帶有泥腥味思考題1.為什么要用淀粉作為碳源?2.為什么同一個土樣要稀釋不同梯度進行涂平板?實驗報告本次實驗與上次實驗合寫一份實驗報告即可實驗報告在本周六實驗課時上交注意每次實驗課前5分鐘由各實驗室本次值日小組將
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 5大技巧優(yōu)化安全培訓
- 五年級數學(小數乘法)計算題專項練習及答案
- 智能化標準化廠房建設規(guī)劃設計方案
- 活動推廣的廣告設計方案試題及答案
- 對比不同年份的紡織工程師考試內容試題及答案
- 《深入解析電腦內存維修》課件
- 佛山市中考試題及答案
- 深國交英語試題及答案
- 常見紡織物的市場需求考題及答案
- 紡織品檢驗員考試注意事項試題及答案
- hellp綜合征的護理查房
- ISO27001:2022信息安全管理手冊+全套程序文件+表單
- 《電力建設施工企業(yè)安全生產標準化實施規(guī)范》
- 產后肺栓塞護理查房
- 2.4.1基于解析算法的問題解決課件人教-中圖版高中信息技術必修1
- 國測省測四年級勞動質量檢測試卷
- 2023年-2024年《西方經濟學》考試題庫及答案
- 匠作匠場手風滇南“一顆印”民居大木匠作調查研究
- 《道德經》的智慧啟示智慧樹知到期末考試答案2024年
- 黔靈山景區(qū)介紹
- 交警酒駕案件培訓課件
評論
0/150
提交評論