第三章商品農(nóng)藥分析方法

——農(nóng)藥分析第三章商品農(nóng)藥的一般分析方法

商品農(nóng)藥由于主要只分析有效成分，被分析的對(duì)象化學(xué)結(jié)構(gòu)清楚，而且在出廠前已經(jīng)有了標(biāo)準(zhǔn)的分析方法，并且多為定量分析。相對(duì)而言簡(jiǎn)單易行。商品農(nóng)藥的一般分析方法第三章商品農(nóng)藥的一般分析方法

一般分析方法如下：電位滴定法，極譜分析法分光光度法（紅外、紫外和可見(jiàn)光分析）氣相色譜法液相色譜法等電位滴定法電位滴定法原理：通過(guò)對(duì)被測(cè)溶液電極電位滴定，確定滴定終點(diǎn)，從而達(dá)到容量分析的目的參比電極：電位不隨濃度變化。指示電極：電位隨濃度變化。滴定終點(diǎn)前后被測(cè)物濃度的微小變化引起電極電位急劇變化，突躍點(diǎn)為終點(diǎn)

商品農(nóng)藥的一般分析方法儀器與試劑儀器：酸度劑（pH劑）或自動(dòng)電位滴定儀。2mV或0.02pH精確玻璃電極，甘汞電極及雙鹽橋甘汞、銀、鉑、鋅、鎢離子選擇電極。電磁攪拌器、滴定管被測(cè)樣品反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液商品農(nóng)藥的一般分析方法分析步驟方法：稱取待測(cè)樣品（準(zhǔn)確到0.2mg），溶于適當(dāng)溶劑，插入電極，開(kāi)動(dòng)攪拌器，進(jìn)行滴定。過(guò)程：先加入90%的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)電位或pH次，然后每加1mL測(cè)一次電位或pH

，接近終點(diǎn)前后每加0.1mL測(cè)一次電位或pH

。一直滴到電位或pH改變不大為止。然后按作圖法確定終點(diǎn)，進(jìn)行計(jì)算。商品農(nóng)藥的一般分析方法終點(diǎn)確定與繪圖計(jì)算終點(diǎn)確定：以滴定液的體積為橫坐標(biāo)，pH（或者電位）為縱坐標(biāo)，作滴定曲線。作與縱坐標(biāo)成45°角的兩平行切線切滴定曲線。二切線的平行等分線與曲線交點(diǎn)，為滴定終點(diǎn)。商品農(nóng)藥的一般分析方法二級(jí)微商法計(jì)算滴定終點(diǎn)依滴定體積與電位（pH）變化計(jì)算△V和△E（△pH）兩相鄰體積之差為△V，兩相鄰電位之差為△E（△pH）?！鱁△pH和△V的比值△E/△V為一級(jí)微商。兩相鄰一級(jí)微商之差為二級(jí)微商，即△2E/△V2=（△E/△V）2—（△E/△V）1一級(jí)微商最大，二級(jí)微商為0處為滴定終點(diǎn)。商品農(nóng)藥的一般分析方法E/vΔEV/mLΔV（ΔE/ΔV）（Δ2E/ΔV2

）

E1E2E3E4E5E6V1V2V3V4V5V6A1A2A3A4A5B1B2B3B4B5A1/B1A2/B2A3/B3A4/B4A5/B5C1C2C3C4

二級(jí)微商的計(jì)算公式V0=V+[a/（a-b）]△V

其中V0為終點(diǎn)時(shí)標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積

a是二級(jí)微商為0之前的二級(jí)微商B是二級(jí)微商為0之后的二級(jí)微商△V是a與b之間的△V（mL）V是在a時(shí)所用標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積其中ΔEn=An＋1-An

，單位為mV

ΔVn=Bn＋1-Bn

，單位為mL

（Δ2E/ΔV2

）=[（ΔEn＋1/ΔVn＋1

）-（ΔEn/ΔVn

）]平均體積作圖法也可以用△E/△V對(duì)平均體積V*作圖其中第n次測(cè)量的平均體積V*=總體積/n所得圖形有一極大值為終點(diǎn)或△2E/△V2對(duì)體積作圖，與橫坐標(biāo)交點(diǎn)為終點(diǎn)。商品農(nóng)藥的一般分析方法電位滴定法分析敵百蟲(chóng)含量實(shí)例分析原理：敵百蟲(chóng)在堿性條件下會(huì)分解出氯化鈉。用硝酸銀溶液滴定生成的氯化鈉，一分子硝酸銀相當(dāng)于一分子敵百蟲(chóng)。商品農(nóng)藥的一般分析方法極譜分析法極譜分析法創(chuàng)建于1922年，現(xiàn)在已經(jīng)形成了一系列的近代極譜方法與技術(shù)。極譜分析是以小面積工作電極與參比電極組成電解池，電解被分析物質(zhì)的稀溶液，根據(jù)所得的電流/電壓曲線來(lái)進(jìn)行分析。被分析物質(zhì)滿足的條件:凡在滴汞電極上可以氧化或還原的物質(zhì)均可進(jìn)行分析，分析濃度范圍10-2-10-5mol/L。商品農(nóng)藥的一般分析方法極譜的分類常見(jiàn)極譜技術(shù)有如下類別：交流極譜、示波極譜、方波極譜、脈沖極譜、陽(yáng)極溶出極譜、催化極譜、薄層極譜等。催化極譜的靈敏度可以提高到10-9-10-11mol/L薄層極譜適合于多雜質(zhì)農(nóng)藥分析。商品農(nóng)藥的一般分析方法極譜分析的工作原理基本原理：滴汞電極中的汞以每秒0.2-0.3滴速度從毛細(xì)管滴入電解池（燒杯），甘汞為陽(yáng)極，滴汞為陰極，通過(guò)靈敏檢流計(jì)從0電壓向負(fù)電壓遞增，記下電壓與電流數(shù)值，以電壓為橫坐標(biāo)，以電流為縱坐標(biāo)作圖。當(dāng)負(fù)電壓較小時(shí)被測(cè)物沒(méi)有電解，此時(shí)電流稱殘余電流；當(dāng)負(fù)電壓繼續(xù)增加到某一值時(shí)，電流值會(huì)發(fā)生突躍，此時(shí)被分析物質(zhì)開(kāi)始分解，當(dāng)電流增加至一極限電流時(shí)：極限電流-殘余留電流=極限擴(kuò)散電流，極限擴(kuò)散電流與被分析物濃度成正比，是定量分析的基礎(chǔ)。商品農(nóng)藥的一般分析方法左圖：圓圈表示電流計(jì)；不規(guī)則圈表示電壓計(jì)；

右圖；I表示電流，V表示電壓，A表示極限電流，B(A-C)表極限擴(kuò)散電流，C表示殘余電流，D表示半波電位。極譜分析裝置與電流電壓圖參比電極SCE滴汞電極DME商品農(nóng)藥的一般分析方法擴(kuò)散電流與半波電位

擴(kuò)散電流=1/2極限電流時(shí)的電位稱半波電位，半波電位是被分析物質(zhì)的特性，不隨濃度變化，是定性分析基礎(chǔ)。擴(kuò)散電流：在電解池中支持電解的作用下，滴汞電極加上的電壓等于被測(cè)物質(zhì)的還原電勢(shì)時(shí)，處在滴汞表面可還原或氧化的物質(zhì)就開(kāi)始氧化或還原反應(yīng)。滴汞表面小，電流密度大,電解物質(zhì)很快在表面降低濃度,溶液靜止,電解靠擴(kuò)散維持。擴(kuò)散與液體本體濃度維持平衡時(shí)電流維持不變。商品農(nóng)藥的一般分析方法擴(kuò)散速度與離子濃度的關(guān)系Ilkovic(尤考維奇)公式,

id=607nD1/2m2/3t1/6C平均極限擴(kuò)散電流方程式id:擴(kuò)散電流；n被還原離子的價(jià)數(shù)；D：被還原離子的擴(kuò)散系數(shù);C：被還原離子濃度；

m：汞流濃度mg/s;t:滴汞周期。對(duì)給定物質(zhì)，相同毛細(xì)管汞電極，同一電解質(zhì)溶液則n、D、m、t合并為一常數(shù)：id=kc商品農(nóng)藥的一般分析方法干擾電流:除擴(kuò)散電流外其他原因引起的電流稱干擾電流。干擾電流主要有：遷移電流殘余電流極大現(xiàn)象氧波商品農(nóng)藥的一般分析方法遷移電流及其消除方法遷移電流：在電極靜電作用下，離子遷移至電極表面而產(chǎn)生，不與離子濃度成正比。消除方法：加入大量電解質(zhì)，使陰陽(yáng)離子互相作用，將電極對(duì)離子作用降為0，從而達(dá)到清除目的。加入電解質(zhì)稱支持電解質(zhì)。其濃度為被測(cè)物80-100倍，分解電壓應(yīng)比被測(cè)物高0.2V以上。常用支持電解質(zhì)為NaCl、KNO3、KCl、NH4Cl、LiCl、Me4NBr等。極大現(xiàn)象及其消除方法極大現(xiàn)象：正常極譜波出現(xiàn)的峰形電流（極譜極大）,影響半波電位與擴(kuò)散電流測(cè)量。消除方法：加入0.03%以下的抑制劑。抑制劑種類：動(dòng)物膠、聚乙烯醇，非離子型表面活性劑。（有機(jī)極大比無(wú)機(jī)少）注意：農(nóng)藥本身多含表面活性劑，多加會(huì)降低id。殘余電流：微量雜質(zhì)引起，對(duì)高靈敏極譜測(cè)定干擾大。儀器清除殘留不理想，可以用作圖法扣除。氧波干擾及其消除方法氧波干擾：溶劑中溶解氧而產(chǎn)生。氧在滴汞電極上還原產(chǎn)生兩個(gè)波。第一波：O2+2H++2e=H2O2半波電位E1/2=-0.2V第二波:H2O2+2H++2e=2H2O半波電位E1/2=-0.8V消除方法：溶劑中通過(guò)N2

或H210—15min可消除。堿性溶液中可加適量NaHSO3

除O2。電解池溶劑選擇與影響因素?zé)o機(jī)物用水做溶劑，有機(jī)物用水或有機(jī)溶劑或混合物。有機(jī)物不利于被測(cè)物擴(kuò)散，在保證樣品可溶前提下盡量少用。有機(jī)溶劑的要求：極性強(qiáng)，與水互溶，如:DMSO,DMF,EtOH,Me2COpH值的影響：pH值影響大，不同被測(cè)物質(zhì)需不同pH值。例：五氯硝基苯在pH=6有兩個(gè)不規(guī)則極譜波；pH=2.2一個(gè)極譜波；甲基對(duì)硫磷與雜質(zhì)硝機(jī)酚pH〈7時(shí)互相干擾，pH=8.1可分別測(cè)定。溫度對(duì)擴(kuò)散有影響，每增加1℃，id

增加1.3%。故應(yīng)與標(biāo)樣在相同溫度下做測(cè)定。

定量分析方法一般測(cè)量極譜波圖中擴(kuò)散電流，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)樣品求濃度。波高測(cè)量方法：有延長(zhǎng)線法，三切線法，中點(diǎn)法，平行線法導(dǎo)數(shù)極譜曲線法等。被測(cè)物含量計(jì)算含量計(jì)算可以用直接比較法。用標(biāo)準(zhǔn)樣測(cè)波高h(yuǎn)標(biāo)，試樣測(cè)波高h(yuǎn)試試樣含量=h試m標(biāo)/m試h標(biāo)極譜方法分析實(shí)例:甲基對(duì)硫磷含量分析標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)定：稱取標(biāo)準(zhǔn)樣品0.1-0.15g于50mL容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容。移取2mL此溶液于50mL容量瓶中依次準(zhǔn)確加入無(wú)水乙醇20mL緩沖溶液（PH=8.3）15mL；0.1%聚乙烯醇5mL，水定容。傾注適當(dāng)該溶液于電解槽中，通N2（H2）10min然后從-0.4V至-1.0繪制極譜曲線，用切線法求標(biāo)樣波高試樣含量測(cè)定

稱取樣品0.12-0.17g（如樣品中有晶體，55℃水浴溶解，搖均勻后再取樣稱量）

，操作同標(biāo)準(zhǔn)樣品的操作。測(cè)得波高后按上式計(jì)算含量工作曲線法：對(duì)于大量樣品的分析，可以用一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品，繪制濃度—波高工作曲線。對(duì)于任一樣品，在相同條件下測(cè)得波高后可以在工作曲線上求得樣品的濃度?？梢?jiàn)—紫外光分光光度法分光光度法即光電比色分析法，對(duì)于部分樣品的分析具有儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、方便可靠的特點(diǎn)。紫外光（uv）波長(zhǎng)為10-380nm一般分析用200-380nm，低于200nm屬于真空紫外?？梢?jiàn)光波長(zhǎng)為380-760nm。原理：物質(zhì)受電磁輻射，吸收能量，發(fā)生躍遷。能量吸收分為三類：旋轉(zhuǎn)、振動(dòng)、電子躍遷。在可見(jiàn)—紫外照射下，只有N、O、S、X外層孤電子對(duì)（n電子）和π電子發(fā)生躍遷物質(zhì)結(jié)構(gòu)與吸收波長(zhǎng)的關(guān)系生色基：含π電子的基團(tuán)：烯烴、芳香環(huán)等助色基：飽和的含孤電子對(duì)（稱n電子）的基團(tuán)。兩者相連，發(fā)生p-π(n-π)共軛，改變吸收波長(zhǎng)（向長(zhǎng)波方向移動(dòng)稱紅移）產(chǎn)生顏色。如果助色基與生色基不共軛，吸收重復(fù)加和（即不改變吸收波長(zhǎng)，只改變吸收強(qiáng)度）苯環(huán)上有取代基產(chǎn)生強(qiáng)度和紅移的雙重作用。對(duì)位取代苯環(huán)發(fā)生紅移，間位取代只增加吸收強(qiáng)度，紅移不明顯；金屬螯合物可能增加紅移。離子與配體之間氧化—還原反應(yīng)決定其顏色深淺。經(jīng)過(guò)化學(xué)反應(yīng)，可以使被測(cè)物吸收波長(zhǎng)落有顯色范圍。溶劑影響與朗伯—比耳定律溶劑的作用：應(yīng)該在設(shè)定波長(zhǎng)下無(wú)明顯吸收。許多有機(jī)溶劑對(duì)紫外有吸收，而水對(duì)紫外吸收最小，用紫外測(cè)定時(shí)應(yīng)考慮溶劑的吸收公式：吸光度A=lgI0/I=acL=lg（1/T）T為透光率，L為吸收池厚度，C為濃度I0為入射光強(qiáng)度，I透射光強(qiáng)度，a為吸光系數(shù)上述公式只適用于稀溶液。光譜波長(zhǎng)檢測(cè)KMnO4溶液檢測(cè)法（傳統(tǒng)方法）:取2mL0.1mol/LKMnO4溶液稀釋到100mL(2×10-3mol/L),于1cm比色皿中,以水為空白.在460，480，500，515，520……，550，570nm測(cè)吸光度，并繪制A—λ吸收曲線，其Amax=525nm.如Amax=525±10nm屬正常，否則應(yīng)調(diào)整刻度盤(pán)?，F(xiàn)在有自動(dòng)掃描裝置進(jìn)行掃描，自動(dòng)繪制出吸收曲線，由此確定最大吸收峰。波長(zhǎng)的選擇選擇合適波長(zhǎng)，取最大吸收波長(zhǎng)可以減少雜質(zhì)，溶劑的干擾及儀器夾縫寬度，波長(zhǎng)變化對(duì)測(cè)定的影響。方法：繪制A—λ吸光度曲線，取最大值?；蛴胠gA對(duì)波長(zhǎng)作圖。溶劑往往改變圖形；還與儀器性能，單色分辨率，放大增益，記錄器慣量有關(guān)現(xiàn)在的一起一般可以自動(dòng)繪制A—λ或T—λ曲線。注意：物質(zhì)經(jīng)純化或不純化直接測(cè)。物質(zhì)本身有適合波長(zhǎng)，雜質(zhì)不干擾—直接測(cè)；物質(zhì)本身有適合波長(zhǎng)，雜質(zhì)干擾—純化后測(cè)。物質(zhì)本身無(wú)適合波長(zhǎng)或不易純化—用化學(xué)反應(yīng)，使其轉(zhuǎn)化成符合條件的樣品進(jìn)行測(cè)量：如水解，氧化—還原，加顯色劑等。溶劑選擇與濃度確定農(nóng)藥分析多用有機(jī)溶劑。要求農(nóng)藥在溶劑中可溶，在測(cè)定波長(zhǎng)范圍內(nèi)無(wú)明顯吸收；確定濃度范圍吸光度范圍，吸光度A在0.190—0.700之間測(cè)定誤差較小。另外濃度變化可能會(huì)使被測(cè)組分存在形式發(fā)生變化等致偏離郎伯—比爾定律。用標(biāo)準(zhǔn)溶液確定有效濃度范圍。用控制濃度或改變比色皿厚度方法來(lái)調(diào)節(jié)范圍。紫外分光光度法測(cè)殺蟲(chóng)螟松含量

95%乙醇作溶劑，殺螟松在268nm有最大吸收；而在CHCl3中，殺螟松在270nm有最大吸收。用紫外分光光度法在10—20mg/mL范圍內(nèi)可以測(cè)定。稱取1g樣品，于50mL容量瓶中，用正己烷—CHCl3定溶。400×8mm色譜柱，8g純化硅膠填充；5mL樣品溶液加入柱內(nèi)，用70mL正己烷—CHCl3洗脫。洗脫速度為0.5mL/min；再用50mLCHCl3洗；棄出開(kāi)始流出的70mL洗脫液，收集后流出的50mL洗脫液，取洗脫液2mL，于100mL容量瓶中CHCl3定溶。在271nm測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后一標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定樣品濃度?？梢?jiàn)光分光光度法

農(nóng)藥一般無(wú)色，需要顯色。如殺滅威和速滅威同時(shí)存在下測(cè)定速滅威，其堿性水解物分別在295nm和292nm有極大吸收，故二者互相干擾。如把速滅威在水解后制成偶氮化合物，在495nm最大吸收。而殺滅威無(wú)此反應(yīng)。

不形成偶氮化合物速滅威殺滅威主要的顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)主要有三類：偶氮反應(yīng)，對(duì)位無(wú)取代的活化苯環(huán)，如酚.苯胺?？梢运獬龇?苯胺的農(nóng)藥大多可以用此法，如：西維因、百克威、葉蟬散、萎銹靈。不直接發(fā)生偶連反應(yīng)的化合物苯環(huán)上硝基的化合不偶連，如：對(duì)硫磷、樂(lè)散松、甲基對(duì)硫磷（但是可以水解后用Zn+HCl還原成胺再偶連）。對(duì)硫磷樂(lè)散松甲基對(duì)硫磷苯硫磷殺螟松氯硫磷形成π絡(luò)合物—使用于有機(jī)磷農(nóng)藥

經(jīng)一系列化學(xué)反應(yīng)，生成π絡(luò)合物顯色的化合物有：有機(jī)磷轉(zhuǎn)化成H3PO4，再轉(zhuǎn)化成磷鉬雜多酸或磷鉬藍(lán)特點(diǎn)：不需標(biāo)準(zhǔn)品，但需提純凈化，一切有機(jī)磷均干擾測(cè)定。例如40%稻瘟凈乳油用薄層分離。硝酸氧化，高氮酸分解成H3PO4

，在強(qiáng)酸性條件下與偏釩酸銨和鉬酸銨生成雜多酸H3(PMo3O10)4

在420nm測(cè)定。該反應(yīng)也可用濃H2SO4代替HClO4，可HClO4比H2SO4反應(yīng)快。有機(jī)磷農(nóng)藥分析實(shí)例

0.37g～0.45g樣品于250mL錐型瓶中，緩緩加入10mL濃HNO3及5mL70%HClO4。緩熱至NO2氣體消失。要使有機(jī)物全部分解后加入HClO4,否則爆炸。小心為上磷鉬酸亦可用SnCl2還原成磷鉬藍(lán)。在735nm比色。形成銅鹽絡(luò)合物比色分析形成銅鹽絡(luò)合物亞胺硫磷馬拉硫鱗．形成根或離子進(jìn)行比色分析聯(lián)吡啶農(nóng)藥如百草枯、殺草快，在堿性介質(zhì)中被Na2S2O4還原形成穩(wěn)定蘭色游離基分別在600nm和377nm有最大吸收。能水解出硝基酚的形成離子在400nm處可測(cè)定。硝基酚分光光度法示例對(duì)硫磷水解比色法原理：試劑，儀器（略）實(shí)驗(yàn)過(guò)程：對(duì)硝基酚標(biāo)準(zhǔn)吸收光度工作曲線繪制。稱取0.1g對(duì)硝基酚純品于1000mL容量瓶中，用甲醇稀釋定容。取此溶液1，2，3，4，5，6mL分別置于6個(gè)100mL的容量瓶中。用1mol/LKOH的50%的甲醇溶液2mL。蒸餾水定容。以蒸餾水為空白，在420nm比色。A為縱坐標(biāo)，C為橫坐標(biāo)作吸光度曲線。（6ppm以下符合比爾定律）樣品的測(cè)定取1g待測(cè)樣甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至于50mL容量瓶中，甲醇定容。干燥濾紙濾入100mL錐形瓶。取濾液1mL于直徑3cm試管中，加1mol/L的NaOH

溶液2mL，沸水浴水解20min。水解液轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中，蒸餾水定容后測(cè)吸光度A總另取濾液5mL于50mL容量瓶中，加入10mL甲醇，10mLPH=10的緩沖溶液。蒸餾水定容后測(cè)A游

計(jì)算：由A總、A游在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出C總、C游

偶氮比色法分析實(shí)例測(cè)定內(nèi)容：巴沙含量的測(cè)定(樣品劑型：乳油)測(cè)定原理：巴沙有效成分為氨基甲酸酯，堿性水解出2-叔丁基苯酚。2-叔丁基苯酚與對(duì)硝基苯重氮二氟硼酸鹽反應(yīng)生成偶氮化合物，用分光光度法比色分析。分析步驟標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備與測(cè)定準(zhǔn)確稱取0.1g巴沙，20mL甲醇在燒杯中溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中甲醇定容。移取1mL此液于50mL容量瓶中，甲醇定容（C=2ug/mL）為標(biāo)準(zhǔn)溶液。移取2mL標(biāo)準(zhǔn)溶液入25mL三角瓶中，加入3mL甲醇、0.8mLKOH(0.1mol/l),50℃恒溫水浴60min水解，冷至室溫。加0.03%對(duì)硝基苯重氮二氟硼酸鹽的甲醇溶液，30min后轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶甲醇定容，搖均勻，試劑空白對(duì)照，510nm測(cè)吸光度。樣品的制備與測(cè)定稱取巴沙樣品（約含純品0.1g）,于100mL容量瓶中甲醇定容，取1.0mL點(diǎn)板（距底沿3cm，兩邊緣2cm），冷氣流吹干。用少量甲醇外洗移液管尖的巴沙，洗液點(diǎn)于板上，空氣中15min晾干。用乙酸乙酯-正己烷展開(kāi)，晾干。乙酸乙酯-正己烷二次展開(kāi)，溶劑移動(dòng)14cm以上，晾干30min，紫外燈下觀察譜帶，作計(jì)號(hào)。用吸收管吸收巴沙譜帶硅膠，置于玻璃垂熔漏斗中用10mL甲醇×4洗脫巴沙，洗脫液于50mL容量瓶定容。以下按標(biāo)準(zhǔn)溶液分析操作操作步驟進(jìn)行巴沙含量計(jì)算巴沙含量X=m1A2P×100%/m2A1m1、m2分別是標(biāo)樣、式樣重量A1A2分別是標(biāo)樣、式樣吸光度。P是標(biāo)樣純度。硅膠板制備：50gHF254+140mLH2O,均勻涂6塊20×

20cm的板。厚度0.5mm，干燥過(guò)夜，110℃烘1hr，正己烷：乙酸乙酯=8：2展開(kāi)。分解定磷法分析實(shí)例分析內(nèi)容：稻瘟盡含量測(cè)定分析原理：稻瘟盡屬于硫代磷酸酯，用高氯酸氧化成磷酸。磷酸與喹鉬檸酮試劑反應(yīng)，定量生成穩(wěn)定的、分子量大的喹鉬檸酮沉淀，用重量法分析。分析步驟消化：準(zhǔn)確稱取0.37-0.45g樣品放入250mL錐形瓶，緩緩加入10mL濃HNO3，5mL70%HClO4,緩緩加熱至無(wú)NO2氣體放出。然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶用水定容。中和：取50mL上層清液，在300mL燒杯中用20%NaOH中和，酚酞作指示劑，中和至微紅。沉淀：加10mL1：1的HNO3

，加水至100mL，加入50mL喹鉬檸酮試劑，蓋上表面皿，沸水浴1min，冷至室溫，傾析清液，水洗沉淀1-2次，過(guò)濾，180℃烘45min，干燥器中放冷，然后稱重。稻瘟凈含量計(jì)算稻瘟凈含量X=（G1/G2）0.11749×100%G2為沉淀重，G1為樣品重；0.11749為換算因子。此反應(yīng)非特性反應(yīng)，干擾大。喹鉬檸酮試劑E的制備：試劑A：20g鉬酸鈉+150mL水試劑B：60g檸檬酸+80mLHNO3+150mLH2O試劑C：A+B攪拌制成

試劑D：5mL喹啉+35mLHNO3+100mLH2O

試劑E：D+C混合24hr后過(guò)濾，濾液+280mL丙酮喹鉬檸酮沉淀組成：銅鹽含量比色法實(shí)例分析內(nèi)容：馬拉硫磷含量測(cè)定.分析原理：銅離子有空軌道，硫原子有易于變形的價(jià)層電子，硫原子向銅離子配位，生成螯合物顯色。分析步驟薄板分離純化：稱取0.28—0.30g樣品于25mL容量瓶中，CHCl3定容，0.5mL樣品液點(diǎn)于GF254板（底、側(cè)各2.5cm寬）呈直線狀，風(fēng)干，石油醚+乙酸乙酯（8：2）展開(kāi)，上行14-16cm，揮發(fā)至干。紫外燈下，用大頭針圈譜帶，吸濾器吸收譜帶，用棉球醮乙醇擦空處2次，合并至吸濾器中，加10mL乙醇攪動(dòng)，蓋緊塞子,雙鏈球壓液體于容量瓶,重復(fù)3次，乙醇定容.取5mL洗脫液加入干燥的分液漏斗中，加入5mL乙醇和2mLmol/L的KOH-乙醇溶液，搖10分鐘，靜2min,0.1mol/L,激烈搖1min，分層后取CCl4層用2cm比色皿比色，CCl4空白對(duì)照，10min內(nèi)測(cè)出A樣

用同樣方法測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的A標(biāo)馬拉硫磷含量計(jì)算X=(m1p

×0.05

×0.05

×A2

×1000)

×1.041

×100%(m2

×0.02

×0.1

×A1

×1000）其中m1m2

分別為標(biāo)樣和試樣重A2A1分別為標(biāo)樣和試樣吸光度.1.041為換算因子薄板的制備:12g硅膠+25mL水,制備20

×20cm板,r.T.固化,60℃hr,120130℃1hr標(biāo)準(zhǔn)溶液:亞胺硫磷0.1g+100mL無(wú)水乙醇定容.取5mL,用100mL無(wú)水乙醇定容.游離基比色方法實(shí)例分析內(nèi)容：百草枯含量測(cè)定分析原理：百草枯為聯(lián)吡啶鹽，可以還原成雙游離基顯色。標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)試準(zhǔn)確稱取0.1728g經(jīng)100-120℃恒溫烘干的樣品，500mL水定容，濃度0.25mg/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用。分別移取9.0、10.0、11.0、12.0、13.0mL標(biāo)準(zhǔn)液加入5個(gè)100mL容量瓶，再加70mL蒸餾水。取一瓶，加入10mL1%連二亞硫酸鈉溶液后定容，倒順?lè)磸?fù)三次（不激烈搖，防氧化）立刻倒入1cm比色皿，永久藍(lán)玻璃參考，600nm光測(cè)A，測(cè)定再做第二瓶。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線百草枯樣品測(cè)定稱取含1.6-1.8g百草枯的樣品于250mL容量瓶水定容（A），取該液10mL，于250mL容量瓶水定容（B）。取B液10mL，仿標(biāo)準(zhǔn)品操作.含量計(jì)算X=m1×250×250×100%/m2×10×10×1000m1:依吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查處的重量M2:樣品重量連二亞硫酸鈉溶液保留不超過(guò)3小時(shí);有水亦分解,固體存于真空干燥器中.其他有色物質(zhì)的測(cè)定可以水解生成有色物質(zhì)的農(nóng)藥可以水解后直接比色，如對(duì)硫磷、殺螟松水解生成硝基酚自身有色的物質(zhì)的分析自身有色的物質(zhì)也可以直接比色敵克松黃棕色溶于水，敵鼠黃色，溶于丙酮水解后生成二硫代磷酸的，可以與Cu2+

顯色后比色如馬拉硫磷亞胺硫磷

其它分析方法硫逐磷酸類農(nóng)藥可以和二苯酮反應(yīng)顯藍(lán)色

二苯硫酮，蘭色用薄層分離提純的樣品還可以作極譜分析。亦可以用化學(xué)方法進(jìn)行定量分析。如脂肪鹵可以用堿—乙醇回流脫鹵后分析X含量。芳鹵型分離后可以用Na+戊醇脫鹵后分析X含量。硅膠板中硅膠含Cl0.02%測(cè)定時(shí)空白中加入同量硅膠。溴化（氧化法）分析法溴化（氧化法）法：含硫農(nóng)藥組分如硫代磷酸酯，取代硫豚，沙蠶毒在一定條件下定量被溴氧化；水解成酚或苯胺的農(nóng)藥能定量被溴取代。從薄板上洗脫后可以用溴化法進(jìn)行定量分析，如果分子中還有可以被溴不定量氧化的基團(tuán)如醇、酮?jiǎng)t不能用此法。故用溴化法分析的展開(kāi)劑應(yīng)用烴類（烷烴）溴化（氧化法）分析實(shí)例如殺蟲(chóng)雙、殺蟲(chóng)單和沙蠶毒殺蟲(chóng)雙沙蠶毒殺蟲(chóng)單用KBrO3-KBr/HCl代Br2氧化成H2SO4，剩余溴加KI后用Na2S2O3回滴

中和分析法含-CO2H的農(nóng)藥從板上洗脫后可以直接用NaOH滴定。如2，4—滴用甲基紅作指示劑2—甲—4—氯，用酚紅作指示劑酯類物質(zhì)先加過(guò)量堿皂化（水解）然后回滴過(guò)量堿。如2，4—滴丁酯。銨鹽類農(nóng)藥的分析方法銨鹽類可以用回滴法測(cè)定，如殺蟲(chóng)脒。碘量分析法含不飽和烴基的農(nóng)藥或水解后生成－SH的農(nóng)藥可以用此方法分析，如久效磷、磷胺、甲胺磷、稻瘟凈。氣相色譜分析實(shí)例氣相色譜法測(cè)定葡萄中烯唑醇農(nóng)藥的殘留量

烯唑醇(diniconazole)又稱力克菌、特普唑，是具有保護(hù)和治療作用的三唑類內(nèi)吸殺菌劑和甾醇脫甲基化抑制劑，可預(yù)防各類作物葉部和穗部病害，具有廣譜殺菌作用。純品為白色結(jié)晶體，熔點(diǎn)134-156℃，25℃寸蒸氣壓為4.9rriPa，密度1.32，25℃時(shí)水中溶解度為4mg/L，己烷為700rng/kg，甲醇為95mg/kg。

氣相色譜法測(cè)定葡萄中烯唑醇農(nóng)藥的殘留量

氣相色譜法測(cè)定葡萄中烯唑醇農(nóng)藥的殘留量

主要儀器和試劑ShimadzuGC—17A氣相色譜儀，配備ECD和CR2A數(shù)據(jù)處理器。烯唑醇標(biāo)準(zhǔn)品：純度＞99％。準(zhǔn)確稱取烯唑醇標(biāo)準(zhǔn)品O．1000g，用少量丙酮溶解后，用正己烷定容至l00mL，配成l.00g/L的烯唑醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。再根據(jù)檢測(cè)要求用正己烷稀釋成相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。色譜分析條件色譜柱：OV—170l石英毛細(xì)管柱，30m×O.53mmi.d．×1．μm(膜厚)。柱溫為220℃，進(jìn)樣口溫度為270℃，檢測(cè)器溫度為300℃；載氣為氮?dú)?99．999％)，流速20mL／min，尾吹100kPa；外標(biāo)法定量；進(jìn)樣量：1μL。實(shí)驗(yàn)步驟

提取：將葡萄樣品用組織搗碎機(jī)搗碎，稱取均勻試樣5g(精確到0.0lg)于30mL離心管中，加入5mL丙酮，在混勻器上混勻lmin，以2500r／min的速率離心3min，將上清液倒人另一50mL離心瓶中，殘?jiān)?×5mL丙酮處理，合并提取液。氣相色譜法測(cè)定葡萄中烯唑醇農(nóng)藥的殘留量

氣相色譜法測(cè)定葡萄中烯唑醇農(nóng)藥的殘留量

凈化：在提取液中加入l0mL50g/L硫酸鈉水溶液和7mL正己烷，于混勻器上混勻lmin，以2500r／min的速率離心3min后，用尖嘴吸管將有機(jī)相取到另一試管中，提取液再用2×7mL正己烷提取，合并提取液并于45℃空氣流下濃縮至近干，用2mL丙酮—正己烷(體積比為1：1)溶液溶解殘?jiān)?。氣相色譜法測(cè)定葡萄中烯唑醇農(nóng)藥的殘留量

將固相萃取小柱自上而下的按SupelcleanEN—VI—CarbSPE小柱(3mL)、SupelcleanLC—ALUMN—INANSPE小柱(3mL)的順序串聯(lián)接好，安裝在真空抽濾裝置上，用8mL丙酮—正己烷(體積比為1：1)溶液淋洗小柱；然后在固相萃取小柱下放好收集管，將2mL樣品提取液加到小柱上，再用4×2mL丙酮—正己烷(體積比為1：1)溶液洗滌試管并一起轉(zhuǎn)移至小柱中。收集洗脫液(保持洗脫流速為2mL／min)。將洗脫液于45℃空氣流下吹干，用1．0mL正己烷溶解殘?jiān)筮M(jìn)行GG-ECD測(cè)定。中藥材中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的反相高效液相色譜法儀器與藥品：島律LC—10