果蠅培養(yǎng)基制備與保存注意事項

果蠅培養(yǎng)基制備與保存注意事項沈妍（果蠅資源與技術(shù)平臺）果蠅是經(jīng)典的模式生物，具有生長迅速、繁殖力強、遺傳物質(zhì)簡單、突變體多等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于遺傳，發(fā)育，生理和行為學(xué)等研究領(lǐng)域。果蠅培養(yǎng)基是一切以果蠅為模式動物開展試驗的基礎(chǔ)，在果蠅品系保存以及各項果蠅相關(guān)試驗中適宜的培養(yǎng)基能達到事半功倍的效果。本文總結(jié)果蠅培養(yǎng)基配制與保存的注意事項。培養(yǎng)基制備前注意事項原料果蠅培養(yǎng)基的配方主要包含水、玉米粉、大豆粉、蔗糖、麥芽糖、酵母、瓊脂、丙酸和苯甲酸鈉等。玉米粉是培養(yǎng)基制備的主要原料。目前，市場上玉米粉種類繁多，我們需選擇糯性玉米粉。糯性玉米粉制成的培養(yǎng)基蓬松粘稠，更適合幼蟲生長。而非糯性（粳性）玉米粉顆粒粗，制成的培養(yǎng)基較為稀薄，冷卻凝結(jié)后會出現(xiàn)分層現(xiàn)象。瓊脂粉影響培養(yǎng)基硬度。每一批次效價不同。每次新訂購的瓊脂粉應(yīng)先做預(yù)試驗，根據(jù)食物硬度確定瓊脂粉的用量。培養(yǎng)基制備容器的選擇根據(jù)培養(yǎng)基制備體積的不同，我們需選擇不同的加熱工具。配制少量培養(yǎng)基，1L以下，選用微波爐。配制1L到5L培養(yǎng)基，選用電飯鍋。配制10L以上的培養(yǎng)基，選用專業(yè)的帶有攪拌功能的加熱容器。培養(yǎng)基配制過程中的注意事項1加熱前的準(zhǔn)備在加熱前，應(yīng)先將玉米粉、大豆粉、蔗糖、麥芽糖等原材料用冷水?dāng)嚢杈鶆?，勿用熱水?dāng)嚢瑁瑹崴畷褂衩追?、大豆粉結(jié)塊，溶解不充分。2酵母粉發(fā)酵溫度的控制干酵母粉需要和溫水混勻后發(fā)酵。在發(fā)酵過程中應(yīng)注意水溫的控制，水溫以25°C到30°C為宜，高溫會使酵母失活。發(fā)酵時間以十五分鐘左右為佳。水位的控制在配制過程中，培養(yǎng)基的體積最多只能加到容器體積的三分之二，必須留出三分之一沸騰的空間。在培養(yǎng)基接近沸騰時要時刻關(guān)注其狀態(tài)，以免培養(yǎng)基因沸騰過度而漫出容器外，而沸騰不充分會導(dǎo)致培養(yǎng)基分層。一般100L的鍋，我們最多只能配制60L培養(yǎng)基。攪拌培養(yǎng)基不管使用哪種加熱工具，在加熱過程中，都需要不停攪拌培養(yǎng)基，防止粘鍋和結(jié)塊。培養(yǎng)基配制完成后的注意事項培養(yǎng)基配制完成后，應(yīng)放在陰涼通風(fēng)處降溫冷凝。待培養(yǎng)基完全冷卻后保存于低溫環(huán)境中。新配制的培養(yǎng)基應(yīng)在兩周內(nèi)使用完。保存不當(dāng)會導(dǎo)致培養(yǎng)基發(fā)霉或者干裂。1培養(yǎng)基發(fā)霉培養(yǎng)基發(fā)霉的原因主要有以下三個：一是保存環(huán)境不合適。新制備好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在低溫環(huán)境中。一般以4°C左右為宜。若環(huán)境溫度較高，濕度大時，培養(yǎng)基易發(fā)霉。二是防腐劑添加不當(dāng)。防腐劑應(yīng)當(dāng)在培養(yǎng)基溫度降到75C以下時添加，否則防腐劑的作用將大大降低，培養(yǎng)基易變質(zhì)。三是防腐劑變質(zhì)也會導(dǎo)致培養(yǎng)基變質(zhì)。2培養(yǎng)基開裂培養(yǎng)基放置時間過長，往往會出現(xiàn)培養(yǎng)基萎縮開裂的情況，尤其是在干燥的冬季。因此在保存培養(yǎng)基時應(yīng)注意保濕。主要方法包括低溫保存和用不透氣材料包裹培養(yǎng)基。另外盡量不要把培養(yǎng)基放在空調(diào)的出風(fēng)口處。總結(jié)培養(yǎng)基對于果蠅生長發(fā)育有著重要的影響。在配制前，配制中以及配制后都有許多注意事項。配制前，要保證玉米粉和瓊脂粉等原材料的質(zhì)量，防止出現(xiàn)培養(yǎng)基分層或者凝結(jié)不充分的現(xiàn)象。配制中需要對溫度有良好的控制，讓酵母粉得到充分發(fā)酵，讓培養(yǎng)基得到充分的沸騰。配制后，需要妥善保存培養(yǎng)基，防止它發(fā)霉或者干裂。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基異常，應(yīng)當(dāng)及時丟棄，配制新的培養(yǎng)基?？傊渲婆囵B(yǎng)基是一個需