紫外-可見吸收光譜

紫外-可見吸收光譜UltravioletvisibleSpectroscopy(UV–VIS)第三章紫外-可見吸收光譜

UV-VIS

§1定義§2可見吸收光譜簡(jiǎn)介§3基本原理§4化合物電子光譜§5儀器§6應(yīng)用§1

定義

物質(zhì)吸收了外來(lái)輻射的能量，分子中的電子從低能級(jí)躍遷到較高能級(jí)。同時(shí)產(chǎn)生分子的振動(dòng)與轉(zhuǎn)動(dòng)。圖雙原子分子的三種能級(jí)躍遷示意圖(實(shí)際上電子能級(jí)間隔要比圖示大很多，而轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)間隔要比圖示小很多。)

1．分子吸收光譜的產(chǎn)生——由能級(jí)間的躍遷引起

▲能級(jí)：電子能級(jí)、振動(dòng)能級(jí)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí).

▲躍遷：電子受激發(fā)，從低能級(jí)轉(zhuǎn)移到高能級(jí)的過(guò)程

2．分子吸收光譜的分類：

分子內(nèi)運(yùn)動(dòng)涉及三種躍遷能級(jí)，所需能量大小順序3．紫外-可見吸收光譜的產(chǎn)生

由于分子吸收中每個(gè)電子能級(jí)上耦合有許多的振-轉(zhuǎn)能級(jí)，所以處于紫外-可見光區(qū)的電子躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜具有“帶狀吸收”的特點(diǎn)。

分子能量的變化是電子運(yùn)動(dòng)能量變化、分子振動(dòng)能量變化與分子轉(zhuǎn)動(dòng)能量變化的總和。

ΔE=Ee+Ev+Er

波長(zhǎng)200～400nm范圍的光稱為紫外光。人眼能感覺到的光的波長(zhǎng)大約在400～750nm之間，稱為可見光。

利用分子吸收200～750nm（紫外-可見光譜區(qū)）的輻射來(lái)進(jìn)行分析測(cè)試的方法稱為分子紫外-可見吸收光譜分析?！?/p>

2吸光光度法簡(jiǎn)介

在分析化學(xué)中，利用有色溶液顏色的深度測(cè)定有色溶液的濃度的方法，叫吸光光度法。它包括比色法、可見及紫外分光光度法?！?/p>

2.1光與吸收光譜一、光的兩象性

光是電磁波的一種，因其波長(zhǎng)很短，故又有粒子性。愛因斯坦用公式表示為：E=hν=hc/λ式中E為光子能量，h為普朗克常數(shù)，

h=6.626×10-34J·S

c為光傳播速度，c=3×1010cm/s

λ為波長(zhǎng)，ν為頻率。二、光譜的劃分

光是電磁波，這些不同顏色的光的頻率，波長(zhǎng)是不同的。白光是由許多種顏色的光復(fù)合而成。一種單一頻率的光，叫單色光。日光（太陽(yáng)光）是由一個(gè)連續(xù)的光譜系列所組成。它可以被三棱鏡分解成一個(gè)連續(xù)變化的光譜系列。電磁波譜可以包括如下種類：無(wú)線電波>微波>遠(yuǎn)紅外>近紅外>可見光>近紫外 >遠(yuǎn)紫外>x射線>γ射線 光的波長(zhǎng)與頻率之間有一定的關(guān)系：ν=c/λ白光與光譜顏色與波長(zhǎng)可見光的波長(zhǎng)范圍：光的吸收與發(fā)射三、吸收光譜1、原子吸收光譜

當(dāng)原子外層電子有選擇地吸收某些波長(zhǎng)的光譜時(shí)，通過(guò)該原子的光中就缺少了該波長(zhǎng)的光。在光譜上就有若干條黑線，象這樣建立起來(lái)的分光光度法叫原子吸收分光光度法。本章不討論。2、分子吸收光譜①電子光譜在多原子分子中，分子軌道中有許多電子能級(jí)，平時(shí)各電子都盡先進(jìn)入低能級(jí)，處于基態(tài)。當(dāng)有光波照射這些分子時(shí)，軌道中的電子會(huì)吸收光波中的某些波長(zhǎng)的光，使這束光中缺少某些波長(zhǎng)的光。電子本身將從低能級(jí)躍遷到高能級(jí)上。象這樣的情況下，被吸收的光往往波長(zhǎng)較短，在紫外和可見光范圍。本章主要討論這一部分內(nèi)容。②紅外吸收光譜在分子內(nèi)部有時(shí)吸收的能量不足以引起電子躍遷，而僅僅是分子振動(dòng)或轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的變化。此時(shí)，分子只吸收波長(zhǎng)較長(zhǎng)、頻率較低的紅外光波。由此建立的分光光度法叫紅外吸收光譜法，本章不討論。

吸收光譜的應(yīng)用■原子吸收法主要用于各種元素的檢測(cè)?！隹梢姽夥止夤舛确ㄖ饕糜诟鞣N無(wú)機(jī)離子及其絡(luò)合物的檢測(cè)、各種染料分析等。■紫外吸收光譜法大量在生物化學(xué)物質(zhì)、蛋白質(zhì)、各種藥物分析中使用。■紅外光譜法廣泛應(yīng)用于有機(jī)官能團(tuán)的鑒定，為有機(jī)結(jié)構(gòu)的研究提供重要信息。四、分子吸收與顯色的關(guān)系1． 補(bǔ)色有色溶液的顏色是由于入射光被選擇性吸收一部分光使透過(guò)光的組成發(fā)生改變而引起的。有色溶液的顏色是被吸收光的補(bǔ)色，各種光的顏色關(guān)系如下：白光綠紫橙青藍(lán)紅青黃藍(lán)物質(zhì)的顏色吸收光顏色波長(zhǎng)范圍／nm黃綠紫400～450黃藍(lán)450～480橙綠藍(lán)480～490紅藍(lán)綠490～500紫紅綠500～560紫黃綠560～580藍(lán)黃580～600綠藍(lán)橙600～650藍(lán)綠紅650～750物質(zhì)顏色和吸收光顏色的關(guān)系思考題二苯硫蹤的CCl４溶液吸收580~620nm范圍內(nèi)的光，它顯

藍(lán)

色。2、吸光物質(zhì)與吸光度

一般來(lái)說(shuō)，吸光物質(zhì)濃度越大，在一些特定頻率上的光被吸收也越多，顏色看上去也越深。故此，可見光的吸光光度法就是根據(jù)這一定律建立起來(lái)的。一般來(lái)說(shuō)，不同物質(zhì)在不同的波長(zhǎng)上有最大吸收。根據(jù)這一性質(zhì)，使用連續(xù)變化的單色光（只含一種頻率的光）進(jìn)行掃描，就可鑒別不同的化合物。光譜定性就是以此為根據(jù)的?！?/p>

2光度分析法的基本原理一、光度分析法的特點(diǎn)1、適用范圍：常用于測(cè)定試樣中１%～10-3%的微量組分，甚至可測(cè)定低至10-4%～10-5%的痕量組份。目前，隨著儀器和方法的改進(jìn)，有的已達(dá)10-9%。一般情況下，相對(duì)誤差為2～5%，這在微量分析中已是十分精確的了。2、特點(diǎn)：靈敏、快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便。§2基本原理§2.1

光吸收定律：朗伯-比耳定律（Lamber-Beer’s

Law）

吸光度A=lg(1/T)=lg(I0/I)=abcA為吸光度，I0為入射光，I

為出射光，b

為溶液厚度，a

為比例常數(shù)，吸光系數(shù)。質(zhì)量吸光系數(shù)K—濃度c單位為g/L；摩爾吸光系數(shù)ε

—濃度c單位為mol/L。

朗伯-比耳定律在一定的條件下待測(cè)溶液的吸光度與溶液濃度呈線性關(guān)系

此便為光度法中最基本的吸收定律，光度法的理論基礎(chǔ)。式中K的數(shù)值與其它個(gè)量的單位有關(guān)。當(dāng)規(guī)定c單位為mol/L,b為cm時(shí)，K用ε代表（稱摩爾吸光系數(shù)）,此ε值手冊(cè)上有許多數(shù)據(jù)可參考。

ε值還與溫度、光的波長(zhǎng)有關(guān)，與吸光物質(zhì)的本性有關(guān)。吸收度的加和性

A總λ＝A1λ+A2λ+A3λ+----+Anλ

透光率T

在光度分析中，有時(shí)還用透光率來(lái)表示光的吸收程度:T=I／I0

。透光率用百分比形式表示。它與吸光度A的關(guān)系為：例：

已知Fe2+濃度為500微克/升的溶液，用鄰二氮菲光度法測(cè)定鐵。比色皿長(zhǎng)2cm，在波長(zhǎng)508nm處測(cè)得吸光度為A=0.19，計(jì)算摩爾吸光系數(shù)ε。解：

根據(jù)：A=εbc答：該絡(luò)合物的摩爾吸光系數(shù)為1.1×104L/mol·cm。2.2比爾定律的局限性和產(chǎn)生偏離的因素在光度法中有一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，應(yīng)該是直線，但是在實(shí)際繪制中卻常常出現(xiàn)彎曲情況。如果標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲，測(cè)定數(shù)據(jù)必帶來(lái)很大的誤差，故應(yīng)努力找出原因設(shè)法解決之。一般來(lái)說(shuō)引起標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲的主要原因有如下幾種。（一）比爾定律的局限性

比爾定律為：A=KC即A∝C

這是在溶液很稀的情況下，即各溶質(zhì)質(zhì)點(diǎn)互不干擾時(shí)才成立。當(dāng)溶液較濃時(shí)，溶液中的有色配合物會(huì)互相吸引、排斥，光線在質(zhì)點(diǎn)之間發(fā)生反射，使出射光線發(fā)生改變，從而使比爾定律失效。一般來(lái)說(shuō)，C越大，偏離也越大。所以比爾定律只在濃度小于0.01mol/L稀溶液中成立，適用。（二）非單色光所引起的偏離

在朗伯-比爾定律中A=εbc，ε是一個(gè)與波長(zhǎng)有關(guān)的常數(shù)，對(duì)于同一個(gè)有色吸光物質(zhì)來(lái)說(shuō)，不同波長(zhǎng)的光其吸收大小不同的，即ε是不同的。如果在分光光度計(jì)中使用的光不是單一波長(zhǎng)的光，而是由許多波長(zhǎng)的光組成的，那么就會(huì)引起A的數(shù)值發(fā)生變化，而且波長(zhǎng)相差越大、波長(zhǎng)范圍越寬誤差越大。故在儀器制造廠里總是盡可能使分光光度計(jì)的波長(zhǎng)寬度小一點(diǎn)，目前普通儀器是6nm,較好一點(diǎn)為2nm。（三）化學(xué)因素引起的偏離(1)有色物質(zhì)的離解、締合、互變異構(gòu)所引起的偏離。由于大多數(shù)的有色物質(zhì)都是弱酸、弱堿或者是配合物。當(dāng)濃度C改變時(shí)，它們的電離度也會(huì)發(fā)生改變，從而當(dāng)C增大時(shí)，電離度變小，使有色質(zhì)點(diǎn)增大過(guò)多，從而使吸光度A也偏大，結(jié)果使之偏離比爾定律。(2)介質(zhì)不均勻性引起的偏離朗伯-比爾定律在均勻、非散射時(shí)可成立，當(dāng)介質(zhì)不均勻，或有膠體、乳濁、懸浮體存在時(shí)，入射光除了被吸收外，還有反射、折射損失，故所測(cè)A值比實(shí)際吸收要大許多，導(dǎo)致偏離比爾定律。引起工作曲線彎曲的原因還有一些，如：溶質(zhì)的性質(zhì)變化、操作不當(dāng)?shù)鹊取！?/p>

2.3影響顯色反應(yīng)的若干因素(一)吸光光度法對(duì)顯色反應(yīng)的要求對(duì)于可見光吸光光度法的顯色反應(yīng)來(lái)說(shuō)，一般應(yīng)該滿足下列要求。1、選擇性好，干擾少，或者干擾容易除去。2、靈敏度高3、有色絡(luò)合物組成恒定，符合確定的化學(xué)式4、有色絡(luò)合物組成穩(wěn)定，不易受光、熱、空氣、時(shí)間等因素的影響。5、有色絡(luò)合物與顯色劑，被測(cè)液之間的色差要大。一般Δλ≧60nm為好。所謂即：Δλ＝∣λMR－λR

∣(二)影響顯色反應(yīng)的因素1、顯色劑的用量一般，顯色反應(yīng)可用下式表示：

M＋Ｒ＝ＭＲ通常有如下幾種情況：(見下圖）

2、溶液的酸度（1）影響有色絡(luò)合物的離解Ｍ＋ＨＲ＝ＭＲ＋Ｈ+

酸度增大，離解也增大。（2）影響被測(cè)離子的存在形態(tài)

Al(H2O)63+

＝[Al(H2O)3(OH)3]↓

＋3Ｈ+

顯色劑的用量

顯色劑的用量對(duì)顯色反應(yīng)是否完全和測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度有很大影響。

R：顯色劑

顯色劑的用量要通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定，也就是作A-R曲線來(lái)確定。

abab吸光度吸光度吸光度顯色劑濃度R顯色劑濃度R顯色劑濃度RAAA（3）影響絡(luò)合物的組成如：磺基水楊酸與Fe3+的顯色反應(yīng)在不同酸度時(shí)可以有1﹕1（pH1.8～2.5），1﹕2（pH4～8），1﹕3（pH8～11.5）三種不同顏色的絡(luò)合物生成。酸度對(duì)吸光度影響如下圖：3、溫度的影響：一般在室溫．有些需加熱．4、顯色時(shí)間的影響

5、溶劑的影響：可提高顯色反應(yīng)的靈敏度．6、共存離子的影響：§2.4光度測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇一、

儀器測(cè)量誤差在吸光光度分析中，除了各種化學(xué)條件所引起的誤差外，儀器測(cè)量不準(zhǔn)確也是誤差的主要來(lái)源．任何光度計(jì)都有一定的測(cè)量誤差，這種誤差可能來(lái)源于光電池不靈敏、光電流測(cè)量不準(zhǔn)和光源不穩(wěn)等。如果測(cè)量誤差以光電流表示為Δi，相當(dāng)于光強(qiáng)的誤差ΔI，由此引起透光率的誤差為ΔT。對(duì)于同一光度儀器，ΔT基本上為一常數(shù)，一般為0.01～0.02

。在光度計(jì)中，透光率的標(biāo)尺刻度是均勻的．吸光度與透光率為負(fù)對(duì)數(shù)關(guān)系，故它的標(biāo)尺刻度是不均勻的．同樣大小的ΔT在不同A時(shí)所引起的吸光度誤差ΔA是不同的。這種情況可以清楚地從下圖吸光度和透光率的關(guān)系標(biāo)尺看出，A值越大，ΔT引起的ΔA也越大。

通過(guò)以下推導(dǎo)可以知道，吸光度在0.2～0.8（透光率在15～65%）范圍內(nèi)的相對(duì)測(cè)量誤差較小。根據(jù)朗伯-比耳定律

A＝-logT

＝abc

＝Ｋc

A＝-lnT/2.3＝Ｋc

對(duì)T微分，得到

dA＝－0.43dT/T

＝Kdc

儀器測(cè)量誤差dT引起濃度的相對(duì)誤差為作圖得：

可見當(dāng)T＝0.368或者Ｔ＝36.8%時(shí)，即：Ａ＝0.434

時(shí)，儀器的測(cè)量誤差最小。從上圖可知，在Ｔ＝15－65%、或者是：Ａ＝0.2－0.8范圍內(nèi)時(shí)，濃度測(cè)量的相對(duì)誤差較小。二、測(cè)量條件的選擇為了使測(cè)定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，必須注意選擇最適合的測(cè)量條件，主要有如下幾點(diǎn)。（一）入射光波長(zhǎng)的選擇為使測(cè)定結(jié)果有較高的靈敏度，在一般情況下，入射光應(yīng)選擇被測(cè)物質(zhì)溶液的最大吸收波長(zhǎng)。如遇干擾時(shí)，則可選另一靈敏度稍低，但能避免干擾的入射光。因此，選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)不僅能提高分析的靈敏度，還能提高分析的準(zhǔn)確度。（二）控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶鷱膬x器測(cè)量誤差的討論中已了解到，為了使測(cè)量結(jié)果得到較高的準(zhǔn)確度，一般應(yīng)控制標(biāo)準(zhǔn)溶液和被測(cè)試液的吸光度在0.2～0.8范圍內(nèi)。為此，可以從下列兩方面來(lái)考慮。

1．控制溶液的濃度，如改變?cè)嚇拥姆Q量和改變?nèi)芤旱南♂尪鹊取?/p>

2．選擇不同厚度的比色皿。（三）選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤涸诠舛葴y(cè)量時(shí)，利用參比溶液來(lái)調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)，以消除由于比色皿壁及溶劑對(duì)入射光的反射和吸收帶來(lái)的誤差?！癞?dāng)顯色劑及制備試液時(shí)所用的其他試劑均為無(wú)色，而且被測(cè)試液中又無(wú)其他有色離子存在時(shí)，可用蒸餾水作參比溶液?！袢绻@色劑為無(wú)色，而被測(cè)試液存在其他有色離子時(shí)，應(yīng)采用不加顯色劑的被測(cè)試液作參比溶液。●如果顯色劑和試劑均有顏色時(shí)，可將一份試液加入適當(dāng)掩蔽劑，將被測(cè)組分掩蔽起來(lái)，使之不再與顯色劑作用，顯色劑及其他試劑均按試液測(cè)定方法加入，以此作為參比溶液，這樣還可以消除一些共存組分的干擾。

§

2.3光度分析法及分光光度計(jì)(一)目視比色法

用眼睛觀察比較試液的顏色與標(biāo)準(zhǔn)溶液顏色之差別來(lái)判斷試液濃度的方法稱為目視比色法。一般是用標(biāo)準(zhǔn)溶液配成系列濃度，覆蓋試液含量。然后使標(biāo)準(zhǔn)系列濃度的溶液發(fā)色，使成為標(biāo)準(zhǔn)色階。再使試液發(fā)色，將其與標(biāo)準(zhǔn)色階相比較，與哪一個(gè)相近，就以標(biāo)準(zhǔn)色階中的這濃度報(bào)出。這一方法簡(jiǎn)單、方便，但報(bào)出數(shù)據(jù)誤差可達(dá)20%

。(二)光電比色法

使用光電比色法時(shí)有幾種方法，比較重要的有標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線法等。

工作曲線法：一般是先從資料上查得某被測(cè)物的最大吸收峰的位置數(shù)據(jù)（λmax），并加適當(dāng)?shù)臑V光片使光源來(lái)的光線中λmax附近的光順利通過(guò)，而吸收其余波長(zhǎng)的光。同時(shí)配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)有色溶液，放在光電比色計(jì)里測(cè)得一系列吸光度值，如下：C1C2C3C4C5A1A2A3A4A5然后在A—C座標(biāo)上作點(diǎn)將各點(diǎn)連起來(lái)，如圖：

最后將試液發(fā)色后測(cè)得吸光度值A(chǔ)，在圖上查找相應(yīng)的濃度C值。光電比色法比目視法好些，用光電池代替人眼可以消除主觀誤差，還有其他優(yōu)點(diǎn)，光電比色法誤差一般在5~20%。(三)分光光度法

分光光度法的操作和原理與光電比色法大體上相同，主要是采用先進(jìn)的分光光度計(jì)，代替老式的光電比色計(jì)。在分光光度計(jì)中采用較好的單色光，其波長(zhǎng)寬度僅2~6nm。而比色計(jì)中用的光單色性很差，有50~100nm寬，甚至更寬，所以分光光計(jì)的測(cè)試靈敏度、選擇性、準(zhǔn)確度較高，一般可達(dá)2~5%。目前最常用的分光光度法主要是標(biāo)準(zhǔn)曲線法，其操作程序與上述比色法中所述相似。（四）分光光度計(jì)

72-G型分光光度計(jì)（帶寬：6nm，波長(zhǎng)精度：2.0nm，波長(zhǎng)范圍：380nm~780nm）分光光度計(jì)的主要組成部分有：

光源

單色器

樣品池

檢測(cè)器

其簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)圖如下所示：其簡(jiǎn)單光路圖如下所示：§3

有機(jī)物的吸收光譜

ultravioletspectrometryoforganiccompounds1．紫外—可見吸收光譜

有機(jī)化合物的紫外—可見吸收光譜是三種電子躍遷的結(jié)果：σ電子、π電子、n電子。分子軌道理論：成鍵軌道—反鍵軌道。當(dāng)外層電子吸收紫外或可見輻射后，就從基態(tài)向激發(fā)態(tài)(反鍵軌道)躍遷。主要有四種躍遷所需能量ΔΕ大小順序?yàn)椋簄→π＊<π→π＊<n→σ＊<σ→σ＊

sp

*s*RKE,BnpECOHnpsH

分子能級(jí)圖基態(tài)電子能級(jí)振動(dòng)能級(jí)轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)激發(fā)態(tài)、第一激發(fā)態(tài)、第二激發(fā)態(tài)電子躍遷所處的波長(zhǎng)范圍與強(qiáng)度2σ→σ＊躍遷

所需能量最大；σ電子只有吸收遠(yuǎn)紫外光的能量才能發(fā)生躍遷；飽和烷烴的分子吸收光譜出現(xiàn)在遠(yuǎn)紫外區(qū)；吸收波長(zhǎng)λ<200nm；例：甲烷的λmax為125nm,乙烷λmax為135nm。只能被真空紫外分光光度計(jì)檢測(cè)到；作為溶劑使用；sp*s*RKE,BnpE3n→σ＊躍遷

所需能量較大。吸收波長(zhǎng)為150～250nm，大部分在遠(yuǎn)紫外區(qū)，近紫外區(qū)仍不易觀察到。含非鍵電子的飽和烴衍生物(含N、O、S和鹵素等雜原子)均呈現(xiàn)n→σ*躍遷。4

π→π＊躍遷

所需能量較小，吸收波長(zhǎng)處于遠(yuǎn)紫外區(qū)的近紫外端或近紫外區(qū)，εmax一般在104L·mol－1·cm－1以上，屬于強(qiáng)吸收。（1）不飽和烴π→π*躍遷乙烯π→π*躍遷的λmax為162nm，εmax為:1×104L·mol-1·cm－1。K帶——共軛非封閉體系的p→p*躍遷

C=C

發(fā)色基團(tuán)，但

→

*200nm。max=162nm助色基團(tuán)取代

→

*（K帶)發(fā)生紅移。165nm217nm

?

?

?

(HOMOLVMO)

max

基-----是由非環(huán)或六環(huán)共軛二烯母體決定的基準(zhǔn)值；無(wú)環(huán)、非稠環(huán)二烯母體：

max=217nm共軛烯烴（不多于四個(gè)雙鍵）

*躍遷吸收峰位置可由伍德沃德——菲澤規(guī)則估算。

max=基+nii

（2）共軛烯烴中的→*異環(huán)（稠環(huán)）二烯母體：

max=214nm同環(huán)（非稠環(huán)或稠環(huán)）二烯母體：

max=253nmniI:由雙鍵上取代基種類和個(gè)數(shù)決定的校正項(xiàng)

(1)每增加一個(gè)共軛雙鍵+30(2)環(huán)外雙鍵+5(3)雙鍵上取代基：?；?OCOR）0鹵素（-Cl，-Br）+5烷基（-R）+5烷氧基（-OR）+6

（3）羰基化合物共軛烯烴中的→*①

Y=H,R

n→*

180-190nm

→

*

150-160nmn→*

275-295nm②Y=

-NH2,-OH,-OR

等助色基團(tuán)K帶紅移，R帶蘭移；R帶max=205nm；10-100K

K

R

R

n

n

165nm

n

③不飽和醛酮K帶紅移：165250nmR

帶蘭移：290310nm

α，β不飽和醛酮酸酯的最大波長(zhǎng)計(jì)算：見Woodward–Fieser－Scott規(guī)則（p91表3.3.2）（4）芳香烴及其雜環(huán)化合物

苯：E1帶180184nm；

=47000E2帶200204nm=7000

苯環(huán)上三個(gè)共扼雙鍵的→*躍遷特征吸收帶；B帶230-270nm

=200

→

*與苯環(huán)振動(dòng)引起；含取代基時(shí)，B帶簡(jiǎn)化，紅移。

max（nm）

max苯254200甲苯261300間二甲苯2633001，3，5-三甲苯266305六甲苯272300乙酰苯紫外光譜圖羰基雙鍵與苯環(huán)共扼：K帶強(qiáng)；苯的E2帶與K帶合并，紅移；取代基使B帶簡(jiǎn)化；氧上的孤對(duì)電子：R帶，躍遷禁阻，弱；CCH3On→p*

;

R帶p

→p*

;

K帶苯環(huán)上助色基團(tuán)對(duì)吸收帶的影響苯環(huán)上發(fā)色基團(tuán)對(duì)吸收帶的影響5.立體結(jié)構(gòu)和互變結(jié)構(gòu)的影響順?lè)串悩?gòu)：

順式：λmax=280nm；εmax=10500反式：λmax=295.5nm；εmax=29000互變異構(gòu)：

酮式：λmax=204nm

烯醇式：λmax=243nm

6.溶劑的影響非極性極性

n

np

n<p

n

p

非極性極性n>pn

→

*躍遷：蘭移；；

→*躍遷：紅移；

；

max(正己烷)max(氯仿)max(甲醇)max(水)*230238237243n*329315309305溶劑的影響1：乙醚2：水12250300苯酰丙酮非極性→極性n

→

*躍遷：蘭移；；

→*躍遷：紅移；；極性溶劑使精細(xì)結(jié)構(gòu)消失；7.生色團(tuán)與助色團(tuán)生色團(tuán)：

最有用的紫外—可見光譜是由π→π＊和n→π＊躍遷產(chǎn)生的。這兩種躍遷均要求有機(jī)物分子中含有不飽和基團(tuán)。這類含有π鍵的不飽和基團(tuán)稱為生色團(tuán)。簡(jiǎn)單的生色團(tuán)由雙鍵或叁鍵體系組成，如乙烯基、羰基、亞硝基、偶氮基—N＝N—、乙炔基、腈基—C≡N等。助色團(tuán)：

有一些含有n電子的基團(tuán)(如—OH、—OR、—NH２、—NHR、—X等)，它們本身沒(méi)有生色功能(不能吸收λ>200nm的光)，但當(dāng)它們與生色團(tuán)相連時(shí)，就會(huì)發(fā)生n—π共軛作用，增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力(吸收波長(zhǎng)向長(zhǎng)波方向移動(dòng)，且吸收強(qiáng)度增加)，這樣的基團(tuán)稱為助色團(tuán)。紅移與藍(lán)移

有機(jī)化合物的吸收譜帶常常因引入取代基或改變?nèi)軇┦棺畲笪詹ㄩL(zhǎng)λmax和吸收強(qiáng)度發(fā)生變化:

λmax向長(zhǎng)波方向移動(dòng)稱為紅移，向短波方向移動(dòng)稱為藍(lán)移(或紫移)。吸收強(qiáng)度即摩爾吸光系數(shù)ε增大或減小的現(xiàn)象分別稱為增色效應(yīng)或減色效應(yīng)，如圖所示。三、金屬配合物的紫外吸收光譜

ultravioletspectrometryofmetalcomplexometriccompounds

金屬配合物的紫外光譜產(chǎn)生機(jī)理主要有三種類型：1.配體微擾的金屬離子d-d電子躍遷和f-f

電子躍遷

在配體的作用下過(guò)渡金屬離子的d軌道和鑭系、錒系的f軌道裂分，吸收輻射后，產(chǎn)生d一d、f一f躍遷；

必須在配體的配位場(chǎng)作用下才可能產(chǎn)生也稱配位場(chǎng)躍遷；

摩爾吸收系數(shù)ε很小，對(duì)定量分析意義不大。2.金屬離子微擾的配位體內(nèi)電子躍遷

金屬離子的微擾，將引起配位體吸收波長(zhǎng)和強(qiáng)度的變化。變化與成鍵性質(zhì)有關(guān)，若共價(jià)鍵和配位鍵結(jié)合，則變化非常明顯。3.電荷轉(zhuǎn)移吸收光譜電荷轉(zhuǎn)移躍遷：輻射下，分子中原定域在金屬M(fèi)軌道上的電荷轉(zhuǎn)移到配位體L的軌道，或按相反方向轉(zhuǎn)移，所產(chǎn)生的吸收光譜稱為荷移光譜。Mn+—Lb-M(n-1)+—L(b-1)-h[Fe3+CNS-]2+h[Fe2+CNS]2+電子接受體電子給予體分子內(nèi)氧化還原反應(yīng)；

>104Fe2+與鄰菲羅啉配合物的紫外吸收光譜屬于此?！?.2有機(jī)化合物的紫外-可見光譜飽和烴及其取代衍生物：

▲σ－σ*飽和單鍵真空紫外10—200nm可作為溶劑.

▲n－σ*n電子，

多數(shù)在遠(yuǎn)紫外，鹵代烴、醇、胺等,可大于200至260nm以上.例如CH3I有兩個(gè)吸收峰：210及259nm.不飽和烴及共軛烯烴：

▲孤立雙鍵

－*大多在遠(yuǎn)紫外,波長(zhǎng)小于200nm,n－*可移至紫外、可見,例如：丙酮194，284nm

亞硝基丁烷300，665nm

▲共軛雙鍵形成新的成鍵和反鍵軌道，能量減低波長(zhǎng)紅移，即變長(zhǎng)。

共軛烯烴的最大波長(zhǎng)計(jì)算：見Woodward–Fieser規(guī)則▲羰基化合物羰基>C=O有躍遷：

n－σ*

－*與雙鍵共軛時(shí)移至220－260nmn－*R帶醛、酮：270－300nm，羧酸類：210nmα，β不飽和醛酮酸酯的最大波長(zhǎng)計(jì)算：見Woodward–Fieser－Scott規(guī)則（p91表3.3.2）苯及其衍生物：三個(gè)乙烯鍵的環(huán)狀共軛系統(tǒng)中，－*所產(chǎn)生的芳香烴所特有的特征吸收E1帶：180nm，ε＝60000E2帶：204nm，ε＝8000B帶：255nm，ε＝200，指頭峰，苯環(huán)精細(xì)結(jié)構(gòu)，苯環(huán)振動(dòng)躍遷在基態(tài)電子躍遷上的重疊

1.

苯環(huán)上有取代基時(shí)苯的三個(gè)吸收帶（尤其E2與B帶）發(fā)生明顯的紅移。強(qiáng)度增強(qiáng)。2.苯環(huán)增多，三個(gè)吸收帶紅移，強(qiáng)度增強(qiáng)。3.雜環(huán)化合物，與相應(yīng)的碳環(huán)相似。苯的多取代物最大波長(zhǎng)計(jì)算：見－Scott規(guī)則(p92表3.3.3)§4儀器

儀器分類單光束雙光束雙波長(zhǎng)單光束陣列式光電二級(jí)管檢測(cè)儀器展示

紫外-可見分光光度計(jì)一、基本組成

generalprocess光源單色器樣品室檢測(cè)器顯示1.光源

在整個(gè)紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長(zhǎng)的使用壽命。

可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長(zhǎng)范圍在350～2200nm。

紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射185～400nm的連續(xù)光譜。光源氫燈或氘燈——紫外光源200~360nm鎢燈或鹵鎢燈——可見光源350~2200nm

2.單色器

將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任波長(zhǎng)單色光的光學(xué)系統(tǒng)。①入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；②準(zhǔn)光裝置：透鏡或反射鏡使入射光成為平行光束；③色散元件：將復(fù)合光分解成單色光；棱鏡或光柵；

④聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；⑤出射狹縫。3.樣品室

樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。4.檢測(cè)器

利用光電效應(yīng)將透過(guò)吸收池的光信號(hào)變成可測(cè)的電信號(hào)，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。5.結(jié)果顯示記錄系統(tǒng)

檢流計(jì)、數(shù)字顯示、微機(jī)進(jìn)行儀器自動(dòng)控制和結(jié)果處理二、分光光度計(jì)的類型

typesofspectrometer

1.單光束

簡(jiǎn)單，價(jià)廉，適于在給定波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測(cè)器具有很高的穩(wěn)定性。2.雙光束

自動(dòng)記錄，快速全波段掃描?？上庠床环€(wěn)定、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價(jià)格較高。光路圖(一)光路圖(一)光路圖(二)光路圖(二)光路圖(二)光路圖(二)光路圖(三)光路圖(三)§5應(yīng)用

定性分析

結(jié)構(gòu)分析

定量分析

測(cè)定化學(xué)物理參數(shù)

§5.1

定性、定量分析

qualitativeandquantitativeanalysis1.定性分析

max：化合物特性參數(shù)，可作為定性依據(jù)；有機(jī)化合物紫外吸收光譜：反映結(jié)構(gòu)中生色團(tuán)和助色團(tuán)的特性，不完全反映分子特性；(見p97表3.5.1)計(jì)算吸收峰波長(zhǎng)，確定共軛體系等甲苯與乙苯：譜圖基本相同；結(jié)構(gòu)確定的輔助工具；max，max都相同，可能是一個(gè)化合物；標(biāo)準(zhǔn)譜圖庫(kù)：46000種化合物紫外光譜的標(biāo)準(zhǔn)譜圖

?Thesadtlerstandardspectra,Ultraviolet?

純度檢查2.定量分析依據(jù)

依據(jù)：朗伯-比耳定律

吸光度：A=bc透光度：-lgT=bc靈敏度高：

max：104～105L·mol-1·

cm-1；（比紅外大）測(cè)量誤差與吸光度讀數(shù)有關(guān)：

A=0.434，(或者Ｔ＝36.8%時(shí))讀數(shù)相對(duì)誤差最??；圖譜的解析步驟(A)觀察譜圖(1)譜帶數(shù)目，λmax進(jìn)入可見光區(qū)的程度。(2)觀察重要譜帶的kmax

值。kmax>20000可能為簡(jiǎn)單、長(zhǎng)共軛結(jié)構(gòu)。kmax=10000～20000，可能是簡(jiǎn)單二烯烴、β-不飽和羰基化合物。kmax=10000左右，芳核上連發(fā)色基團(tuán)。kmax=10～100（λmax=270～350nm）可能是酮。

(B)找模型化合物的紫外光譜圖對(duì)照一般說(shuō)來(lái)，相似發(fā)色基團(tuán)結(jié)構(gòu)有相似的譜圖如Me(CH=CH)nMe、、芳香族化合物的紫外譜圖如下：共軛體系的紫外光譜k/mol-1·cn-1·Lk/mol-1·cn-1·L(C)確定化合物的結(jié)構(gòu)(1)找模型化合物的譜圖(2)查資料，找有關(guān)結(jié)構(gòu)的紫外光譜圖，標(biāo)準(zhǔn)譜圖。(3)借助其他結(jié)構(gòu)分析方法的結(jié)果，互相印證。如化學(xué)法、IR、NMR等。k/mol-1·cn-1·L§5.2

有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)輔助解析

structuredeterminationoforganiccompounds

1.可獲得的結(jié)構(gòu)信息（1）200-400nm無(wú)吸收峰。飽和化合物，單烯。（2）

270-350nm有吸收峰（ε=10-100）醛酮n→π*躍遷產(chǎn)生的R

帶。（3）

250-300nm有中等強(qiáng)度的吸收峰（ε=200-2000），芳環(huán)的特征吸收（具有精細(xì)解構(gòu)的B帶）。（4）

200-250nm有強(qiáng)吸收峰（ε104），表明含有一個(gè)共軛體系（K）帶。共軛二烯：K帶（230nm）；-不飽和醛酮：K帶230nm，R帶310-330nm260nm,300nm,330nm有強(qiáng)吸收峰，3,4,5個(gè)雙鍵的共軛體系。2.光譜解析注意事項(xiàng)(1)確認(rèn)max，并算出㏒ε，初步估計(jì)屬于何種吸收帶；(2)觀察主要吸收帶的范圍，判斷屬于何種共軛體系；(3)乙酰化位移B帶：262nm(ε302)274nm(ε2040)261nm(ε300)(4)pH值的影響加NaOH紅移→酚類化合物，烯醇。加HCl蘭移→苯胺類化合物。3.分子不飽和度的計(jì)算定義：

不飽和度是指分子結(jié)構(gòu)中達(dá)到飽和所缺一價(jià)元素的“對(duì)”數(shù)。如：乙烯變成飽和烷烴需要兩個(gè)氫原子，不飽和度為1。

計(jì)算：

若分子中僅含一，二，三，四價(jià)元素(H，O，N，C)，則可按下式進(jìn)行不飽和度的計(jì)算：

=1+n4+（n3–n1）/2n4，n3，n1

分別為分子中四價(jià)，三價(jià)，一價(jià)元素?cái)?shù)目。

作用：

由分子的不飽和度可以推斷分子中含有雙鍵，三鍵，環(huán)，芳環(huán)的數(shù)目，驗(yàn)證譜圖解析的正確性。例：C9H8O2=1+9

+（0–8）/2=64.解析示例

有一化合物C10H16由紅外光譜證明有雙鍵和異丙基存在，其紫外光譜

max=231nm（ε9000），此化合物加氫只能吸收2克分子H2，，確定其結(jié)構(gòu)。解：①計(jì)算不飽和度=3；兩個(gè)雙鍵；②max=231nm，③可能的結(jié)構(gòu)④計(jì)算max

max：232273268268max=非稠環(huán)二烯（a,b）+2×烷基取代+環(huán)外雙鍵=217+2×5+5=232（231）吸收波長(zhǎng)計(jì)算立體結(jié)構(gòu)和互變結(jié)構(gòu)的確定順式：λmax=280nm；εmax=10500反式：λmax=295.5nm；εmax=29000共平面產(chǎn)生最大共軛效應(yīng)，εmax大互變異構(gòu)：

酮式：λmax=204nm；無(wú)共軛

烯醇式：λmax=243nm取代苯吸收波長(zhǎng)計(jì)算同分異構(gòu)體的鑒別乙酰乙酸乙酯酮式：204nm烯醇式：245nm

順式與反式1，2－二苯乙烯

反式

295nm

27000

順式280nm10500例題

有一化合物C10H16,其UV的λmax=231nm。其IR光譜中在1645cm-1處有中強(qiáng)峰，1383和1370cm-1處有強(qiáng)峰。加氫反應(yīng)時(shí)吸收2molH2，試推測(cè)其結(jié)構(gòu)。解:(1)不飽和度U＝1+n4+1/2(n3-n1)=1十10十1/2(-16)＝3

這表示分子中可能有二個(gè)雙鏈一個(gè)飽和環(huán)；

(2)在IR光譜中1645cm-1處有中強(qiáng)峰，表示有雙鍵存在，加氫反應(yīng)能吸收2molH2，表示有二個(gè)雙鍵；

(3)UV的λmax＝23lnm，表示二個(gè)雙健是共軛雙鍵；(4)IR的1383和1370cm-1二個(gè)強(qiáng)峰，表示有異丙基存在。綜上分析，初步推斷該化合物為驗(yàn)證：

基值217nm

2個(gè)烷基2×5nm

一個(gè)環(huán)外雙鍵l×5nmλmax(計(jì)算值）＝232nm

(實(shí)測(cè)值231nm)計(jì)算值λmax與實(shí)測(cè)值極為接近，所以上述推斷正確。5結(jié)構(gòu)分析參考（1）二烯與多烯的最大吸收波長(zhǎng)

伍德沃德（Woodward）經(jīng)驗(yàn)規(guī)則，見p90表3.3.1．例1～例3（p90）（2）不飽和羰基化合物－*的最大吸收波長(zhǎng)（α、β、γ、δ）

伍德沃德（Woodward）經(jīng)驗(yàn)規(guī)則，見p91表3.3.2．P91的例1～例3．共軛雙鍵算羰基，環(huán)外不算雙鍵算羰基。（3）芳香化合物的紫外吸收波長(zhǎng)

斯科特（Scott）規(guī)則見p92表3.3.3.P92例1～例2．苯系化合物的主要紫外吸收帶見表3.3.4（p93）

思路：先考慮苯環(huán)，再考慮羰基，最后是多烯?！?.3定量分析

紫外-可見分光光度法在定量分析領(lǐng)域內(nèi)具有極為重要與廣泛的用途。通常使用下述三種方法：1、直接法（利用待測(cè)物質(zhì)A本身在某一波長(zhǎng)有吸收而進(jìn)行測(cè)定。）A+RAR待測(cè)物顯色劑配合物無(wú)吸收有吸收

A+B-RB+A-R

無(wú)吸收有吸收無(wú)吸收有吸收3、間接法2、顯色法§

5.3.1單組分的定量方法1.比較法這種方法是采用一已知濃度cs的待測(cè)化合物的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)量其吸光度As。然后測(cè)量待測(cè)未知液的吸光度Ax，根據(jù)光吸收定律計(jì)算求出待測(cè)未知液的濃度cx。所以，這種直接比較法有時(shí)又稱為計(jì)算法。As=εb

cs

Ax=εbcx2.標(biāo)準(zhǔn)(工作)曲線法：一般是先從掃描曲線上查得某被測(cè)物的最大吸收峰的位置數(shù)據(jù)（λmax），同時(shí)配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)有色溶液，測(cè)得一系列吸光度值，如下：

c1

c2

c3

c4

c5

A1

A2

A3

A4

A5作出標(biāo)準(zhǔn)(工作)曲線．測(cè)得試液吸光度值A(chǔ)x后，在圖上查找相應(yīng)的濃度出cx值?；蛘哂没貧w曲線法計(jì)算。標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線

3.標(biāo)準(zhǔn)加入法這種方法是先測(cè)量濃度為出cx的待測(cè)液的吸光度Ax，然后在此待測(cè)液中加入一濃度為c的標(biāo)準(zhǔn)溶液，再測(cè)量其吸光度Ax+△。根據(jù)朗伯比耳定律應(yīng)有：Ax=ε·b·cx(3-１)又根據(jù)吸光度的加合性應(yīng)有：Ax+△=Ax+A△(3-２)但A△=ε·b·c△

，代入(3-２)式，

Ax+△=Ax+ε·b·c△

Ax+△－Ax=ε·b·c△(3-３)將(3-5)和(3-7)兩式相除得：用加入法進(jìn)行定量分析時(shí)，亦可采用直線外推作圖法求出待測(cè)溶液的濃度cx。橫坐標(biāo)為濃度c，縱坐標(biāo)為吸光度A。將D、E兩點(diǎn)連線并延長(zhǎng)，在橫坐標(biāo)軸上的截距AB即對(duì)應(yīng)于待測(cè)液濃度cx。直線外推作圖法如圖4-14所示，若混合物中A和B兩組分的吸收曲線互不重疊，這時(shí)測(cè)定方法與單一組分的測(cè)定相同，即可以在波長(zhǎng)λ1、λ2分別測(cè)定組分A和組分B。§

5.3.2多組分同時(shí)測(cè)定1.兩組分同時(shí)測(cè)定(1)兩組分吸收曲線互不重疊(2)兩組分吸收曲線部分重疊如圖4-15所示，這時(shí)混合物A和B兩組分的吸收曲線已部分重疊。在這種情況下，如果采用單一組分測(cè)定的方法，分別在λ1和λ2測(cè)定A和B就會(huì)帶來(lái)很大誤差甚至不可能進(jìn)行測(cè)定。

但可利用吸光度的加合性同時(shí)測(cè)定組分A和組分B的含量。根據(jù)朗伯比耳定律應(yīng)有：又根據(jù)吸光度的加合性，則：其中cA和cB可用行列式或代數(shù)中消元解法求出：

2.多組分同時(shí)測(cè)定（聯(lián)立方程法）當(dāng)溶液中有N個(gè)組分同時(shí)存在時(shí)，僅當(dāng)各組分均遵循光吸收定律而且最大吸收峰相互不重疊時(shí)才能進(jìn)行多組分的同時(shí)測(cè)定。與二組分同時(shí)測(cè)定類似，我們可以寫出多組分混合液中求算各組分濃度的多元一次方程組。§

5.3.3、差示分光光度法1、差示法定義及分類

一般分光光度法測(cè)定選用試劑空白或溶劑空白作為參比，所謂差示法，就是用一已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液，與未知試樣溶液相比較，測(cè)量其吸光度，再?gòu)臏y(cè)得的吸光度求出未知液濃度的分析方法。該法的實(shí)質(zhì)是相當(dāng)于透光率標(biāo)尺的放大．差示分光光度法又分為3種情況：高吸收法、低吸收法和最精密法．高吸收法在測(cè)定高濃度溶液時(shí)使用．選用比待測(cè)溶液濃度稍低的已知濃度溶液作標(biāo)準(zhǔn)溶液，調(diào)節(jié)透光率為100％．

低吸收法在測(cè)定低濃度溶液時(shí)使用．選用比待測(cè)溶液濃度稍高的已知濃度溶液作標(biāo)準(zhǔn)溶液，調(diào)節(jié)透光率為0．

最精密法是同時(shí)用比待測(cè)溶液濃度稍高或稍低的兩份已知濃度溶液作標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別調(diào)節(jié)透光率為0或100％．下面簡(jiǎn)單推導(dǎo)差示分光光度法的基本關(guān)系式．2、差示法基本關(guān)系式設(shè)未知溶液的濃度為Cx，以溶劑為參比時(shí)，其透過(guò)率為Tx0,吸光度為Ax0.若選濃度為Cs的已知溶液作參比，調(diào)節(jié)透光率為100％。根據(jù)吸收定律,溶劑為參比時(shí)：Ax0=Ax-A0,Tx0=Ix/I0As0=As-A0,Ts0=Is/I0用已知濃度Cs的溶液作參比時(shí)：Ax=Ax0－As0=ε·b·（Cx－Cs）＝ε·b·△CAx=-log(Ix/Is),Tx=Ix/Is=Tx0/Ts0高吸收法§5.3.4雙波長(zhǎng)分光光度法在雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)中，通過(guò)兩個(gè)單色器分別將光源發(fā)出的光分成λ1和λ2兩束單色光，經(jīng)斬光器并束后交替通過(guò)同一吸收池．因此檢測(cè)的是試樣溶液對(duì)兩波長(zhǎng)的吸光度差，其原理為：若λ1和λ2兩波長(zhǎng)光通過(guò)吸收池后的透過(guò)光強(qiáng)分別為I1和I2，則有式中，As1和As2為背景吸收，與波長(zhǎng)關(guān)系不大,

I01和

I02表示λ1和λ2處的入射光強(qiáng)，一般I01＝

I02

，As1＝As2

．因此

ΔA=

A

λ2

–Aλ1=-lgI2/I1=(ελ2-ελ1)bc即，兩束光通過(guò)吸收池后的吸光度差與待測(cè)組分濃度成正比．雙波長(zhǎng)分光光度法有如下特點(diǎn)：（１）可用于懸濁液和懸浮液的測(cè)定，消除背景吸收．（２）無(wú)須分離，可用于吸收峰相互重疊的混合組分的同時(shí)測(cè)定．設(shè)有混合組分x和y，選擇λ1和λ2

，使ε2y=ε1y，即λ1和λ2是y的等吸收波長(zhǎng)，則從而消除了y的干擾.

下圖為在2,4,6-三氯苯酚存在下測(cè)定苯酚的例子。雜質(zhì)2,4,6-三氯苯酚在3個(gè)波長(zhǎng)下的吸光度相等，選擇λ2（270nm）為苯酚的測(cè)定波長(zhǎng)，第二個(gè)波長(zhǎng)可以選擇λ1(286nm)或λ‘1

(325nm)，2,4,6-三氯苯酚不干擾測(cè)定。(3)可用于測(cè)定高濃度溶液中的痕量組份。(4)可測(cè)定導(dǎo)數(shù)光譜?！?.3.5導(dǎo)數(shù)法

用吸