課本實驗簡析

課本實驗簡析研討、交流合作、共贏實驗一檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質實驗材料1．做可溶性還原性糖鑒定實驗，應選含還原糖多，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因為組織的顏色較淺，易于觀察。）2．做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實驗前一般要浸泡3～4小時（也可用蓖麻種子）。50﹪的酒精作用是洗去浮色.需要顯微鏡.(若用待測組織樣液,試管中鑒定,無需顯微鏡.)3．做蛋白質的鑒定實驗，可用富含蛋白質的黃豆或稀釋的雞蛋清。比較項目斐林試劑雙縮脲試劑組成溶液的濃度NaOH：0.1g/mlCuSO4：0.05g/mlNaOH：0.1g/mlCuSO4：0.01g/ml使用原理新配制的Cu（OH）2堿性環(huán)境下的Cu2+使用方法先把NaOH和CuSO4等量混合，后立即使用，要加熱先加入NaOH，后滴加CuSO4，CuSO4不能過量鑒定對象還原性糖蛋白質顏色反應磚紅色沉淀紫色實驗二用顯微鏡觀察多種多樣的

細胞（1）為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察？答：如果直接用高倍鏡觀察，往往由于觀察的對象不在視野范圍內而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。（2）用轉換器轉過高倍鏡后，轉動粗準焦螺旋行不行？答:不行。用高倍鏡觀察，只需微調即可。轉動粗準焦螺旋，容易壓壞玻片。（3）低倍鏡如何轉換成高倍鏡?順序：移裝片→轉轉換器換高倍鏡→調反光鏡或光圈→調細準焦螺旋注：換高倍物鏡時只能移動轉換器，換鏡后，只準調節(jié)細準焦和反光鏡（或光圈）。實驗三：通過模擬實驗探究膜的

透性漏斗管內的液面為什么會升高？平衡時有沒有水分子的運動?平衡時哪一部分的濃度高?答：由于單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數量多于從長頸漏斗滲出的水分子數量，使得管內液面升高;有;漏斗內.2．如果用一層紗布代替玻璃紙，漏斗管內的液面還會升高嗎？答：用紗布替代玻璃紙時，因紗布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不會升高。3．如果燒杯中不是清水，而是同樣濃度的蔗糖溶液，結果會怎樣？答：半透膜兩側溶液的濃度相等時，單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數量等于滲出的水分子數量，液面也不會升高。實驗四:觀察植物細胞的質壁分離和復原實驗材料：紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色，易于觀察。也可用水綿代替。理論上成熟植物細胞都可以,液泡無色的可染色或適當調暗視野。若用洋蔥鱗片葉的內表皮，則可用胭脂紅染色。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質壁分離劑對細胞無毒害作用。實驗四:觀察植物細胞的質壁分離和復原1.如果將表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？答：表皮細胞維持原狀，因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2．當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發(fā)生質壁分離？為什么？答：不會。因為紅細胞不具細胞壁。只有活的/成熟的植物細胞可發(fā)生.3.如何操作使蓋玻片下的細胞浸沒在0.3g/ml的蔗糖溶液中?答：在蓋玻片的一側滴0.3g/ml的蔗糖溶液,另一側用吸水紙吸引,重復幾次.4.本實驗要不要用顯微鏡?要用到高倍鏡嗎?答：要用顯微鏡,但只需要低倍鏡即可.實驗四:觀察植物細胞的質壁分離和復原5.如果用蔗糖的質量濃度為0.5ｇ/mL的溶液再做此實驗，細胞發(fā)生質壁分離后，為什么不再復原？答：細胞過度失水而死亡，原生質層失去彈性6.如果以水綿作為實驗材料進行實驗，又會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？你有何依據？答：水綿是水生植物，細胞液濃度更低，細胞質壁分離現(xiàn)象更明顯。7.如果用0.18mol/L的KNO3溶液做此實驗，會觀察到什么現(xiàn)象？產生這一現(xiàn)象的生理基礎是什么？答：會發(fā)生質壁自動復原現(xiàn)象。K離子和NO3離子通過主動運輸進入細胞，細胞液濃度升高，細胞吸水，質壁復原。實驗五探究影響酶活性的因素1.該實驗最后結果的檢測用碘液,能否用斐林試劑?為什么?答:不能用,因為斐林試劑的使用需要水浴加熱,而本實驗是探究溫度對酶活性的影響.2.若用淀粉酶,蔗糖酶和淀粉來驗證酶的專一性,用什么檢測試劑?答:用斐林試劑.不能用碘液的原因是它只能檢測淀粉是否被水解,不能檢測蔗糖是否被水解.3.為什么不能只用不同溫度處理淀粉或酶溶液答：防止混合時，由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化，反應溫度不是操作者所要控制的溫度，影響實驗結果。實驗六:葉綠體色素的提取和分離

1．濾紙條上的濾液細線，為什么不能觸及層析液？答：濾紙條上的濾液細線如觸及層析液，濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中，實驗會失敗。2．提取和分離葉綠體色素的關鍵是什么？答：提取葉綠體色素的關鍵是：①葉片要新鮮、濃綠；②研磨要迅速、充分；③濾液收集后，要及時用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關鍵是：一是濾液細線要細且直，而且要重復劃幾次；二是層析液不能沒及濾液線。3.實驗結果怎樣?答:如圖色素帶的寬度代表色素的含量;

色素帶的擴散距離代表色素的溶解度,

溶解度最大的是胡蘿卜素,最小的是葉綠素b.胡蘿卜素（橙黃色）葉黃素（黃色）葉綠素a（藍綠色）葉綠素b（黃綠色）實驗六:葉綠體色素的提取和分離4.若色素帶出現(xiàn)異常情況分析原因：(1)色淺原因：提取過程：①老葉，色素少②未加SiO2，研磨不充分③無水乙醇加入過多④用濾紙過濾⑤放置時間過長⑥未及時用棉塞將試管口塞緊或未避光保存

分離過程：①未重復畫濾液細線，積累色素過少②層析液觸及濾液線③未加培養(yǎng)皿蓋（2）色素帶重疊原因：濾液線畫得過粗、濾液細線畫得過高、濾紙不干燥、濾紙下端未剪去兩角（3）色素帶殘缺不全原因：葉片枯黃、層析液波及濾液線、未加CaCO3。實驗七:探究酵母菌的呼吸方式需要注意的幾個問題1）各裝置的連通管盡量不漏氣2）檢測酒精生成時，配藥后要馬上檢測3）由于裝置簡單，不可能形成完全的有氧或無氧條件，因此不排除裝置1中有酒精生成。檢測酒精生成，裝置1可能出現(xiàn)少許的灰綠色4）最好設置對照裝置：同裝置1或裝置2，但要將酵母液換成葡萄糖液。5)裝置1間歇性通氣目的是什么?答:為了保證NaOH能充分吸收無菌空氣中的CO2,又能保證酵母菌充分進行有氧呼吸6)裝置2錐形瓶先封口放置一段時間再連通澄清石灰水,為什么?答:讓酵母菌充分消耗掉瓶中的O2,排除酵母菌因有氧呼吸產生的CO2的干擾實驗八觀察細胞的有絲分裂（1）為什么洋蔥根尖培養(yǎng)至5cm，但制作裝片時僅切取2～3mm的根尖？（2）為什么取材時間通常選擇上午10時至下午2時？試分析影響細胞分裂的可能生態(tài)因素。（3）為什么要用鹽酸對根尖進行解離？解離時間不足會怎樣影響實驗觀察？（4）解離后為什么要用清水進行漂洗？不漂洗或漂洗時間不足會怎樣影響實驗觀察？（5）為什么要用龍膽紫溶液（或醋酸洋紅液）進行染色？主要染色結構是什么？（6）制裝片時為什么要把根尖弄碎和壓片？（7）視野中哪個時期的細胞數目最多？為什么？（8）視野中觀察到的是活細胞還是死細胞？實驗九觀察細胞的減數分裂觀察減數分裂的材料最好是雄性個體的精母細胞。不可用哺乳動物的卵巢觀察的原因是：一是細胞少，二是看不全完整的分裂時期。實驗十調查常見的人類遺傳病調查時，最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病，如紅綠色盲、白化病、高度近視（600度以上）等。調查發(fā)病率應在足夠大的群體中隨機調查

調查遺傳方式應在患者家系中逐個調查實驗十一探究植物生長調節(jié)劑對扦插枝條生根的作用設置生長素類似物的濃度梯度：用容量瓶將母液分別配成0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、3、4、5mg/mL的溶液，分別放入小磨口瓶，及時貼上相應標簽。再設置一個蒸餾水的空白對照組.選擇插條：以1年生苗木為最好（1年或2年生枝條形成層細胞分裂能力強、發(fā)育快、易成活）。處理插條：枝條的形態(tài)學上端為平面，下端要削成斜面，這樣在扦插后可增加吸收水分的面積，促進成活。每一枝條留3-4個芽（不可太多），所選枝條的芽數盡量一樣多。誤差分析：（1）不生根：生長素濃度過高、枝條倒插、枝條上沒有芽（2）都能生出不定根：芽過多，產生的生長素就多。實驗十二:探究培養(yǎng)液中酵母種群數量的變化1.怎樣進行酵母菌的計數?答:1)方法:抽樣檢測.2)加樣品:先將蓋玻片血球計數板的計數室上，然后用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；3)計數:稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數室底部后，將計數板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數室所在位置后，再轉換高倍鏡觀察、計數并記錄。

4)公式:實驗十二:探究培養(yǎng)液中酵母種群數量的變化2.從試管中吸出培養(yǎng)液計數之前,應怎么做?為什么?答:要將試管輕輕震蕩幾次,目的是使培養(yǎng)液中酵母分布均勻,減少誤差。若未曾搖勻，吸管在上部取樣，則數據偏小，在下部取樣，則數據偏大。

3.本實驗要不要設置對照?為使實驗結果更準確,該怎么辦?答:不需設對照,自身前后形成對照.需要做重復實驗.4.記錄結果時,要不要計數起始數目?每天計數時間一樣嗎?答:要計數起始數目.每天計數時間要固定.5.如果一個方格內酵母菌過多,怎么辦?計數時,應數一個小方格內的哪些酵母菌?答:應適當稀釋。計數小方格內和左、上邊及其頂角的酵母菌.實驗十三果酒、果醋和腐乳的制作

果酒、果醋和腐乳的制作過程中有哪些措施能防止雜菌污染?果酒果醋發(fā)酵----------裝置要清洗、用70﹪的酒精消毒或用洗潔精洗滌;葡萄要先沖洗后去枝梗;簡易裝置果酒發(fā)酵時只每隔12h擰松而非擰開一次,果醋發(fā)酵時打開瓶塞要蓋上一層紗布,另一裝置排氣管要長而彎曲(若較短,則需要用夾子夾住,然后定期排氣),而充氣管要用夾子夾住,果醋發(fā)酵時通入無菌空氣;果酒發(fā)酵時,在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中酵母菌可以生長;

腐乳制作--------玻璃瓶洗凈后用沸水消毒;裝瓶時要迅速小心,封瓶時,最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染;加鹽、酒精和香辛料都有防腐殺菌作用;加鹽時要逐層加鹽,隨層數的加高而增加鹽量,接近瓶口表面要鋪厚一些.實驗十三果酒、果醋和腐乳的制作果酒選用的微生物主要來源于何處？沖洗的要求是什么？答:酵母菌來自葡萄皮;不能反復沖洗，沖洗后再去枝梗，防止污染。充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用？答:充氣口-------果醋發(fā)酵時通入空氣排氣口--------排出CO2

出料口--------用于取樣檢測如何檢驗酒精的產生？試設計實驗。答:兩支試管1號2號,1號加2ml發(fā)酵液,2號加2ml白酒(對照),然后1號2號均滴入3滴硫酸,混勻后再滴加重鉻酸鉀3滴,觀察顏色變化.

果酒、果醋和腐乳的制作所涉及的酶從分布看有什么不同?答:果酒、果醋發(fā)酵相關的酶是胞內酶,而腐乳制作涉及的是蛋白酶脂肪酶等以大分子為底物的酶,故為胞外酶.實驗十四:酵母細胞的固定化固定化酵母細胞,酵母細胞活化用蒸餾水還是清水?答:蒸餾水,可排除雜菌和其他雜質的污染.實驗的關鍵步驟是什么?要注意什么?答:關鍵步驟是配制海藻酸鈉溶液.注意點：

(1)要邊加熱邊攪拌,用小火或間斷加熱,最后定容到10ml.(2)濃度不能過高或過低,過高-----不易形成凝膠珠,過低------形成的凝膠珠包埋的酵母細胞少,凝膠珠顏色過淺，影響實驗結果.(3)要等冷卻至室溫才可加入活化的酵母菌.

實驗十四:酵母細胞的固定化CaCl2的作用是什么？答:CaCl2溶液中形成穩(wěn)定的凝膠珠,凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min,是為了形成穩(wěn)定的結構.固定化酵母細胞時,應注意哪些?答:要以恒定的速度緩慢的將注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中.固定好的凝膠珠可以直接使用嗎?答:不可以,要用蒸餾水沖洗2-3次.為什么選擇配制10%的葡萄糖溶液，若濃度較高對實驗有什么影響？答:10%是比較合適的,若過高,會使酵母細胞失水過多而死亡.實驗十五DNA的粗提取與鑒定提取DNA可利用DNA的哪些特性?答:DNA在NaCl溶液中的溶解性,DNA不溶于95﹪的冷酒精;DNA對蛋白酶、高溫(60-75℃)和洗滌劑(破壞細胞膜)的耐受性.提取DNA可用哪些材料?答:理論上含提取DNA的材料均可,動物植物微生物均可,但哺乳動物成熟紅細胞不行,而雞的紅細胞比較理想,注意加檸檬酸鈉.實驗步驟怎樣?答:選材→破碎細胞，釋放DNA(雞血用蒸餾水+攪拌+過濾；洋蔥用洗滌劑(瓦解細胞膜)和食鹽(溶解DNA)+研磨+攪拌+過濾)→溶解DNA(用2mol/L的NaCl溶液)→析出DNA(加蒸餾水稀釋至0.14mol/L)→再溶解(2mol/L的NaCl溶液)和提純(95﹪的冷酒精)實驗十五DNA的粗提取與鑒定實驗過程中的攪拌要注意什么?過濾要注意什么?答:攪拌------沿一個方向,第一次快速,其余的都是輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂.過濾------用紗布,不能用濾紙.鑒定DNA時怎么設置對照?答:取1號2號兩支試管,均加入2mol/L的NaCl溶液5ml,1號加DNA,2號不加,然后都加入4ml的二苯胺試劑,并沸水浴5min,觀察比較結果是否變藍.從細胞中提取DNA與提取蛋白質相比,哪個更容易?為什么?答:提取DNA更容易,因為DNA相對較穩(wěn)定,而蛋白質對溫度、PH、、鹽度等較敏感,易失活,且空間結構多種多樣,理化性質各不相同,使提取蛋白質沒有一種統(tǒng)一的方法,特定的蛋白質提取需特定的方法.實驗十六:血紅蛋白的提取與分離分離蛋白質的依據有哪些?答:分子的形狀和大小,所帶電荷的性質和多少,溶解度,吸附性質和對其他分子的親和力等.電泳的依據什么?答:電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產生不同的遷移速度.

電泳帶只代表樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子本身的大小，不代表蛋白質的肽鏈條數。透析的原理是什么?答:利用透析袋的半透性,讓小分子雜質進入外面的緩沖液中,而大分子的蛋白質留在透析袋內.注意只能出去小分子雜質,大分子如DNA通過透析無法除掉,可以依靠電泳等其他方法.提高透析效果的措施有哪些？答：增大透析液（緩沖液，維持pH的相對穩(wěn)定）的量、更換緩沖液。消毒與滅菌消毒：指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。滅菌：指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有微生物，包括芽孢和孢子。滅菌與消毒技術是微生物有關工作中最普通也是最重要的技術。微生物培養(yǎng)技術消毒的方法：1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化學藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線或化學藥物消毒滅菌的方法：1、灼燒滅菌2、干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸汽滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟如何倒平板？1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？問題討論

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法

平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作,將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面.