標準解讀
《GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法》這一標準提供了禽流感病毒檢測的詳細操作流程和要求,利用實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術進行高靈敏度和特異性的檢測。然而,您未提供另一個標準或版本以進行直接比較,因此無法直接指出相對于某一特定標準的具體變更內容。但可以一般性地討論此類標準更新時可能包含的變動方向:
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技術改進:新版本的標準可能會采納最新的科研進展,比如更高效的引物設計、優(yōu)化的反轉錄與擴增條件,以及更敏感的熒光標記技術,以提高檢測的準確性和效率。
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檢測范圍擴展:隨著禽流感病毒亞型的不斷發(fā)現(xiàn),新標準可能會擴大病毒譜的覆蓋范圍,包括新增的病毒株或亞型的特異性檢測方法。
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樣本處理:更新的標準可能會對樣本采集、保存、運輸及前處理步驟提出新的指導原則,以減少污染風險并保持樣本的核酸完整性。
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質量控制:為了確保檢測結果的可靠性,新標準可能會加強內部和外部質量控制措施,如增加陽性質控品、陰性質控品的使用規(guī)定,以及對實驗環(huán)境和儀器校準的要求。
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結果判讀與報告:可能會有更加明確的結果分析和報告格式指南,包括閾值設置、陽性/陰性判定標準及報告模板的更新,以統(tǒng)一檢測報告的規(guī)范性。
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生物安全與廢棄物處理:鑒于生物安全的重要性,新版標準可能會加強對實驗室操作中的生物安全指導,以及樣本和廢棄物處理的詳細規(guī)定。
由于缺乏具體的對比對象,以上僅為基于標準更新通??紤]因素的一般性討論,并非直接針對某次具體變更的解讀。如果您需要了解該標準與某一特定后續(xù)版本或相關標準之間的具體差異,請?zhí)峁┫鄳臉藴拭Q或版本號以便進行更詳細的比較。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2004-02-14 頒布
- 2004-02-15 實施
文檔簡介
ICS11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T19438.1—2004禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法Methodofthereal-timeRT-PCRforthedetectionofayianinfluenzavirus2004-02-14發(fā)布2004-02-15實施中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布中國國家標準化管理委員會
中華人民共和國國家標準禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法GB/T19438.1-2004中中國標準出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復興門外三里河北街16號郵政編碼:100045電話:63787337.637874472004年2月第一版2004年11月電子版制作書號:155066·1-20518如有排版錯誤本本社負責解決版權專有侵權必究舉報電話:010)68533533
GB/T19438.1一2004前GB/T19438-2004《禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》分為以下四個部分:-GB/T19438.1一2004《禽流感病毒通用熒光RTPCR檢測方法》;-GB/T19438.2—2004《H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》;B/T19438.3—2004H7亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》;-GB/T19438.4—2004《H9亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》本部分的附錄A、附錄C是規(guī)范性附錄,附錄B是資料性附錄。本部分由中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局提出。本部分起草單位:中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局、深圳市匹基生物工程股份有限公司本部分主要起草人:賴平安、張鶴曉、谷強、王甲正、周琦、楊偉、賴少梅。
GB/T19438.1一2004禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法1范圍本部分規(guī)定了禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測的操作方法本部分適用于活禽及其產(chǎn)品中禽流感病毒的檢測2縮略語下列縮略語適用于本部分21英光RT-PCR熒光反轉錄-集合酶鏈反應。2.2C值每個反應管內的熒光信號達到設定的閩值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)2-3RNA24DEPC焦碳酸乙二酯、2.5PBS磷酸鹽緩沖鹽水(配方見附錄A)2.6T0g酶T4gDNA聚合酶原理禽流感病毒各亞型均屬A型流感病毒,根據(jù)A型流感病毒共有基因特定的序列,合成一對特異性引物和一條特異性的熒光雙標記探針。該探針與禽流感病毒特有的共同基因特異性結合,結合部位位于引物結合區(qū)域內。探針的5°端和3端分別標記不同的熒光素,如5°端標記FAM熒光素,它發(fā)出的熒光能夠被檢測儀器接收,稱為報告熒光基團(用R表示)3"端一般標記TAMRA熒光素,它在近距離內能吸收5°端報告熒光基團發(fā)出的熒光信號,稱為浮滅熒光基團(用Q表示)。當PCR反應在退火階段時,一對引物和一條探針同時與目的基因片段結合.此時探針上R基團發(fā)出的熒光信號被Q基團所吸收,儀器檢測不到R所發(fā)出的熒光信號:當PCR反應進行到延伸階段時T49酶在引物的引導下,以四種核苷酸為底物,根據(jù)堿基配對的原則,沿著模板鏈合成新鏈;當鏈的延伸進行到探針結合部位時,受到探針的阻礙而無法
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