標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 35900.2-2018 動物流感檢測 第2部分：H3亞型流感病毒核酸熒光RT-PCR檢測方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn)，主要針對動物中H3亞型流感病毒的核酸檢測提供了一種基于實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）的技術(shù)方案。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了從樣本采集、處理到最終結(jié)果分析的全過程，旨在為相關(guān)實驗室提供一套標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。

在樣品準(zhǔn)備階段，標(biāo)準(zhǔn)明確了不同類型樣本（如咽拭子、鼻腔分泌物等）的收集方法及其保存條件，強(qiáng)調(diào)了正確采樣對于后續(xù)實驗成功的重要性。此外，還介紹了如何使用特定試劑盒對樣品進(jìn)行RNA提取的過程，并指出了操作過程中需要注意的關(guān)鍵點。

關(guān)于RT-PCR擴(kuò)增反應(yīng)部分，《GB/T 35900.2-2018》給出了詳細(xì)的反應(yīng)體系組成及循環(huán)參數(shù)設(shè)置指南。它推薦使用特異性引物和探針來識別H3亞型流感病毒特有的基因序列，通過熒光信號的變化來監(jiān)測目標(biāo)DNA片段隨溫度循環(huán)而發(fā)生的擴(kuò)增情況。這部分內(nèi)容還包括了對照實驗的設(shè)計原則，比如陽性對照、陰性對照以及內(nèi)參的選擇與應(yīng)用，這些都是保證實驗可靠性的基礎(chǔ)。

最后，在結(jié)果分析環(huán)節(jié)，本標(biāo)準(zhǔn)定義了Ct值的概念，并根據(jù)Ct值大小判斷樣品是否含有H3亞型流感病毒。同時，也提到了數(shù)據(jù)記錄的要求，包括原始數(shù)據(jù)的保存形式以及報告編寫時應(yīng)包含的信息項目，幫助實驗人員系統(tǒng)地整理并呈現(xiàn)研究成果。

該文件不僅適用于科研機(jī)構(gòu)開展動物流感相關(guān)的研究工作，也為獸醫(yī)臨床診斷提供了技術(shù)支持。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2018-02-06 頒布
  • 2018-09-01 實施
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GB/T 35900.2-2018動物流感檢測第2部分：H3亞型流感病毒核酸熒光RT-PCR檢測方法_第1頁
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T359002—2018

.

動物流感檢測第2部分H3亞型流感

:

病毒核酸熒光RT-PCR檢測方法

Animalinfluenzadetection—Part2Methodofreal-timeRT-PCRfor

:

thedetectionofH3subtypeinfluenzavirus

2018-02-06發(fā)布2018-09-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

動物流感檢測第2部分H3亞型流感

:

病毒核酸熒光RT-PCR檢測方法

GB/T35900.2—2018

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20182

*

書號

:155066·1-59534

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T359002—2018

.

前言

動物流感檢測目前分為個部分

GB/T35900《》3:

第部分亞型流感病毒核酸熒光檢測方法

———1:H1RT-PCR;

第部分亞型流感病毒核酸熒光檢測方法

———2:H3RT-PCR;

第部分和亞型流感病毒核酸雙重?zé)晒鈾z測方法

———3:H1H3RT-PCR。

本部分為的第部分

GB/T359002。

本部分按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本部分由全國動物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本部分起草單位中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局

:。

本部分主要起草人劉環(huán)喬彩霞蒲靜張偉高志強(qiáng)谷強(qiáng)張鶴曉張利峰韓晶

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T359002—2018

.

引言

本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)提請注意聲明符合本文件時可能涉及到本文件與檢測和亞型

,,4.1.8“H1H3

流感病毒的核苷酸序列和試劑盒相關(guān)的專利的使用

”。

本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)對于該專利的真實性有效性和范圍無任何立場

、。

該專利持有人已向本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)保證他愿意向任何申請人在合理且無歧視的條款和條件下

,,

就專利授權(quán)許可進(jìn)行談判該專利持有人的聲明已在本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)備案相關(guān)信息可以通過以下

。。

聯(lián)系方式獲得

:

專利持有人中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局

:。

地址北京市朝陽區(qū)甜水園街號

:6。

請注意除上述專利外本文件的某些內(nèi)容仍可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專

,。

利的責(zé)任

。

Ⅱ

GB/T359002—2018

.

動物流感檢測第2部分H3亞型流感

:

病毒核酸熒光RT-PCR檢測方法

1范圍

的本部分規(guī)定了亞型流感病毒核酸的熒光操作方法

GB/T35900H3RT-PCR。

本部分適用于禽豬和馬及其產(chǎn)品中亞型流感病毒核酸的檢測

、H3。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

禽流感病毒通用熒光檢測方法

GB/T19438.1—2004RT-PCR

實驗室生物安全通用要求

GB19489

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

熒光實時熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)

RT-PCR(real-timereversetranscriptpolymerasechainre-

action)

Ct或Cp值每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號量達(dá)到設(shè)定的閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

()(cyclethreshold,or

crossingpoint)

互補(bǔ)

cRNARNA(complementRNA)

焦碳酸二乙酯

DEPC(diethylpyrocarbonate)

羧基熒光素

FAM(carboxyfluorescein)

小溝結(jié)合物

MGB(minorgroovebinder)

磷酸鹽緩沖液

PBS(phosphatebuffersaline)

核糖核酸

RNA(ribonucleicacid)

4試

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