標(biāo)準(zhǔn)解讀
GB/T 19495.4-2004 是一項(xiàng)中國國家標(biāo)準(zhǔn),全稱為《轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 第4部分:核酸定性PCR檢測方法》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中特定核酸序列進(jìn)行定性檢測的方法和要求,旨在確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,適用于轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分的定性檢測。
標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容概覽:
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范圍:明確了該標(biāo)準(zhǔn)適用于哪些類型的樣本,即轉(zhuǎn)基因植物及其制品中轉(zhuǎn)基因DNA的定性檢測。
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規(guī)范性引用文件:列出了實(shí)施該標(biāo)準(zhǔn)時(shí)需要參考的其他相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn),這些文件對于理解和執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)至關(guān)重要。
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術(shù)語和定義:解釋了在標(biāo)準(zhǔn)中使用的一些關(guān)鍵術(shù)語,如PCR(聚合酶鏈反應(yīng))、引物、模板DNA等,幫助讀者理解基本概念。
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試劑和材料:詳細(xì)描述了進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)所需的各種試劑、耗材的質(zhì)量要求及來源,包括DNA提取試劑、PCR緩沖液、引物、DNA聚合酶等。
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儀器設(shè)備:列舉了執(zhí)行PCR檢測所必需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,如PCR擴(kuò)增儀、離心機(jī)、電泳設(shè)備等,并對其性能要求進(jìn)行了說明。
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樣品制備:提供了從樣品采集到DNA提取的具體操作步驟,確保從復(fù)雜樣本中有效提取出目標(biāo)DNA,為后續(xù)PCR檢測做準(zhǔn)備。
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PCR反應(yīng)體系與條件:詳細(xì)規(guī)定了PCR反應(yīng)的組成成分比例、反應(yīng)體積、循環(huán)參數(shù)(如退火溫度、延伸時(shí)間等),以確保PCR反應(yīng)的高效與特異性。
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結(jié)果判定:說明了如何通過凝膠電泳等方法觀察并判定PCR產(chǎn)物,從而判斷樣品中是否存在目標(biāo)轉(zhuǎn)基因序列。
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精密度和準(zhǔn)確度:通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)闡述了該檢測方法的重復(fù)性、再現(xiàn)性以及與其他驗(yàn)證方法的一致性,確保檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。
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試驗(yàn)報(bào)告:規(guī)定了檢測報(bào)告應(yīng)包含的信息,如樣品信息、檢測方法、實(shí)驗(yàn)條件、結(jié)果分析及結(jié)論等,以便于結(jié)果的記錄和交流。
實(shí)施意義:
該標(biāo)準(zhǔn)為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的質(zhì)量控制、市場監(jiān)管及消費(fèi)者信息透明化提供了科學(xué)依據(jù)和技術(shù)手段,有助于保障食品安全、促進(jìn)生物技術(shù)健康發(fā)展,并滿足國際貿(mào)易中對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測的標(biāo)準(zhǔn)化需求。通過統(tǒng)一的檢測流程和評判標(biāo)準(zhǔn),可以有效提升檢測效率和結(jié)果的可比性。
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- 被代替
- 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替,建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 19495.4-2018
- 2004-04-13 頒布
- 2004-04-13 實(shí)施
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GB/T 19495.4-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法-免費(fèi)下載試讀頁文檔簡介
ICS67.050B04中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T:19495.4-一2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法Detectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts-QualitativePCRmethodsbasedonnucleicacid2004-04-13發(fā)布2004-04-13實(shí)施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T19495.4-2004三次前言范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語和定義4防污染措施5抽樣和制樣6原理試劑8儀器設(shè)備檢測步驃10結(jié)果判定·結(jié)果表述·12測試報(bào)告·附錄A(規(guī)范性附錄)物種特異性檢測方法附錄B(規(guī)范性附錄)篩選檢測方法·22附錄C(規(guī)范性附錄)結(jié)構(gòu)基因特異性檢測方法32附錄D(規(guī)范性附錄)品系特異性檢測方法45參考文獻(xiàn)52
GB/T19495.4—2004GB/T19495《轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測》為系列標(biāo)準(zhǔn):GB/T19495.1—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測通用要求和定義:GB/T19495.2—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求:GB/T19495.3—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸提取純化方法;-GB/T19495.4—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法;GB/T19495.5—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定量PCR檢測方法;-GB/T19495.6—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測基因芯片檢測方法;GB/T19495.7—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測抽樣和制樣方法;-GB/T19495.8—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測蛋白質(zhì)檢測方法本部分附錄A、附錄B、附錄C、附錄D為規(guī)范性附錄,本部分由國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會提出并歸口。中華人民共和國上海出入境檢驗(yàn)檢疫局和中華人民共和國天津出入境檢驗(yàn)檢疫局負(fù)責(zé)起草,國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局動(dòng)植物檢疫實(shí)驗(yàn)所、中華人民共和國廣州出人境檢驗(yàn)檢疫局、中華人民共和國遼寧出人境檢驗(yàn)檢疫局、中華人民共和國江蘇出人境檢驗(yàn)檢疫局、上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院參加起草。本部分起草人:潘良文、鄭文杰、沈禹飛、劉炬、張舒亞、朱水芳、草文、曹際娟、張大兵、祝長青、蔣原、潘愛虎、張明。本部分系首次發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T19495.4—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法1范圍GB/T19495的本部分規(guī)定了轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測的核酸定性PCR方法。本部分適用于種子、飼料、食品和環(huán)境樣品中轉(zhuǎn)基因成分的定性PCR檢測2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過GB/T19495的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分,然而,鼓勵(lì)根據(jù)本部分達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本部介。GB/T19495.1—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測通用要求和定義GB/T19495.2—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求GB/T19495.3-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸提取純化方法GB/T19495.5—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定量PCR檢測方法GB/T19495.7—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測油樣和制樣方法語和定義見GB/T19495.1確立的術(shù)語和定義適用于本部分防污染措施按照GB/T19495.2-2004的規(guī)定執(zhí)行5抽樣和制樣按照GB/T19495.7-2004規(guī)定的方法執(zhí)行。原理6.1一般原理定性分析包括對測試樣品目標(biāo)核酸序列的篩選檢測和(或)特異性檢測在設(shè)置合適的對照和在檢測下限的情況下,定性檢測結(jié)果要清楚判斷樣品是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,本檢測方法包括:目標(biāo)序列的擴(kuò)增和檢測;擴(kuò)增片段特異性的確證。6.2PCR擴(kuò)增目標(biāo)序列的擴(kuò)增是在反應(yīng)緩沖液中,脫氧核糖核酸三磷酸、寡核苷酸引物在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行的催化反應(yīng)。在反應(yīng)混合體系中不應(yīng)存在DNA聚合酶的抑制劑。DNA擴(kuò)增是一個(gè)循環(huán)的過程通過加熱使雙螺旋DNA變性成為單鏈核酸;在合適的溫度下引物和目標(biāo)序列發(fā)生退火反應(yīng);在合適的溫
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