實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制第一頁，共二十九頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是實(shí)驗(yàn)中的試劑，沒有標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物將不可能得到正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。質(zhì)量控制包括遺傳、微生物、環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)等四個(gè)方面。概述第二頁，共二十九頁，2022年，8月28日遺傳學(xué)控制不同品種品系動(dòng)物反應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分：近交系、突變系、系統(tǒng)雜交系、封閉群等。第三頁，共二十九頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被稱為“活的試劑”。遺傳背景清楚，微生物控制、環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、飼養(yǎng)等符合規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物第四頁，共二十九頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分類同基因型動(dòng)物：近交系動(dòng)物近交同類系動(dòng)物突變同類系動(dòng)物重組同類系動(dòng)物雜交F1代動(dòng)物不同基因型動(dòng)物：封閉群第五頁，共二十九頁，2022年，8月28日（一）近交系動(dòng)物近交系動(dòng)物的歷史近交系動(dòng)物的定義經(jīng)至少20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系內(nèi)所有個(gè)體都可以追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對(duì)共同祖先，該品系稱近交系。經(jīng)連續(xù)20代以上親代與子代交配與全同胞兄妹交配有同等效果。近交系動(dòng)物的命名

一般以大寫英文字母命名，亦可以用大寫英文字母加阿拉伯?dāng)?shù)字命名，符號(hào)應(yīng)盡量簡(jiǎn)短。例：A系、TA1系。第六頁，共二十九頁，2022年，8月28日（1）亞系亞系的形成近交系的亞系分化是指一個(gè)近交系內(nèi)各個(gè)分支的動(dòng)物之間，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)或十分可能存在遺傳差異。a.F20-40b.分開繁殖100代以上c.

遺傳差異第七頁，共二十九頁，2022年，8月28日（2）亞系的命名在原品系的名稱后加一道斜線后表明亞系的符號(hào)。1.數(shù)字名稱例：DBA/1，DBA/22.培育或產(chǎn)生亞系的單位或人的縮寫英文名稱第一個(gè)字母大寫，隨后字母小寫。例：CBA/J3.當(dāng)一個(gè)保持者保持的一個(gè)近交系具有兩個(gè)以上的亞系時(shí)，可用在數(shù)字后再加保持者的縮寫英文名稱來表示亞系。例：C57BL/6J，C57BL/10J亞系命名方法例外情況一些建立及命名較早，且人們所知的近交系，亞系名稱可用小寫英文字母表示。例：BALB/c第八頁，共二十九頁，2022年，8月28日（3）支系支系的形成：一個(gè)近交系或亞系內(nèi)部由于存在各種差異而出現(xiàn)的支系。包括環(huán)境、母方、細(xì)胞質(zhì)、可能（極?。┻z傳上差異等。支系的命名1.經(jīng)人為技術(shù)處置形成的支系，應(yīng)在原品系名稱后附加一個(gè)小寫英文字母標(biāo)明處理方式。具體符號(hào)：子移植e;巢移植o;奶母代乳f;人工喂養(yǎng)h;人工喂養(yǎng)+奶母代乳fh

例：C3HfC57BL/6或C3HfB，表示由C57BL/6品系代乳的C3H近交系2.由引種形成的支系，在原品系或亞系名稱后加一斜線，然后標(biāo)明引入單位的英文縮寫名稱。例：NC/S3.用代乳等人為技術(shù)處置的目的之一是去除或植入垂直感染的病毒。當(dāng)去除或植入的病毒十分明確時(shí)，用下面方法表示。在品系名稱后加一橫線，以大寫英文字母標(biāo)明病毒的名稱，最后加上一個(gè)“+”或“-”的符號(hào)分別表示植入或去除。例：C3H/HeN－MTV+第九頁，共二十九頁，2022年，8月28日（4）近交系動(dòng)物的特性a、同和性在一個(gè)近交系內(nèi)所有動(dòng)物的所有基因位點(diǎn)都是純合子，個(gè)體之間、祖代個(gè)體與后代個(gè)體之間都是純合子。b、同基因性一個(gè)近交系中所有個(gè)體在遺傳上是同源的，所有個(gè)體都可追溯到一對(duì)共同祖先。個(gè)體之間可進(jìn)行器官移植、皮膚移植、腫瘤移植。c、一致性近交系動(dòng)物任何可遺傳的體征都是一致的，如血型、組織型、形態(tài)上的特征、行為的類型。如個(gè)體間出現(xiàn)差異，是環(huán)境不均一造成的。d、長(zhǎng)期的遺傳穩(wěn)定性近交系動(dòng)物在遺傳上是穩(wěn)定的。遺傳變異或基因突變的機(jī)率極低，并及時(shí)清楚遺傳變異的動(dòng)物。第十頁，共二十九頁，2022年，8月28日e、可分辨性近交系動(dòng)物在遺傳上已有分型，可根據(jù)這些位點(diǎn)的分型很快地將兩個(gè)外貌相似的近交系分辨出來。f、個(gè)體性從整個(gè)近交系動(dòng)物來看，每個(gè)品系在遺傳上都是獨(dú)立的，在某些情況下，品系間的差別顯示在量上，而不在質(zhì)上。便于篩選。g、

分布的廣泛性大部分近交系動(dòng)物分布在世界各地，不同地區(qū)、不同國(guó)家的科學(xué)家有可能去重復(fù)或驗(yàn)證已取得的理論和數(shù)據(jù)。h、背景資料和數(shù)據(jù)較為完善近交系動(dòng)物在培養(yǎng)和保存過程中都有詳細(xì)的記錄。對(duì)于設(shè)計(jì)新的實(shí)驗(yàn)和解釋所得結(jié)果提供了便利條件。（4）近交系動(dòng)物的特性第十一頁，共二十九頁，2022年，8月28日（二）近交同類系動(dòng)物（同源導(dǎo)入近交系、

同源導(dǎo)入系）

定義：通過雜交—互交或回交等方式將一個(gè)基因?qū)氲浇幌抵?，由此形成的一個(gè)新的近交系，與原來的近交系只是在一個(gè)很小的染色體片段上的基因不同。命名：在接受導(dǎo)入基因的近交系和提供基因的近交系的復(fù)合符號(hào)（名稱）中間用英文句號(hào)分開，后面加一橫標(biāo)，導(dǎo)入基因的符號(hào)。例：B6?AKR—H-2k第十二頁，共二十九頁，2022年，8月28日（三）突變同類系動(dòng)物（同源突變近交系、

同源突變系）

定義：兩個(gè)近交系，除了在一個(gè)指明位點(diǎn)等位基因不同外，其他遺傳基因全部相同。命名：

1.在發(fā)生突變的近交系名稱后加突變符號(hào)。例：129—dy/dy。

2.當(dāng)突變基因必須以雜合子形式保持時(shí)，用“+”號(hào)代表野生型基因。例：129—+/dy

第十三頁，共二十九頁，2022年，8月28日（四）重組近交系

定義：將兩個(gè)無關(guān)的近交系動(dòng)物進(jìn)行交配產(chǎn)生F2代后，經(jīng)過連續(xù)20代以上的全同胞兄妹交配而育成的近交系，稱為重組近交系。命名：用“x”號(hào)將兩個(gè)親代近交系動(dòng)物的縮寫符號(hào)連在一起后，按順序冠以ABC…字母，或加上一波折號(hào)，標(biāo)上阿拉伯?dāng)?shù)字。如：CXBDCXB-1（BALB/c×C57BL/6）第十四頁，共二十九頁，2022年，8月28日重組近交系第一近交系第二近交系

AAbb×aaBB

F1代AaBb×AaBbF2代AABBAABbAAbbAaBBAaBbAabbaaBBaaBbaabb

（連續(xù)20代以上的全同胞兄妹交配）第十五頁，共二十九頁，2022年，8月28日

（五）雜交F1代動(dòng)物定義：由兩個(gè)無關(guān)的近交系雜交而繁殖的第一代動(dòng)物。主要特性：

1、基因型相同；

2、表現(xiàn)型一致，變異低；

3、有雜種優(yōu)勢(shì)，生活力和抗病力強(qiáng)；

4、試驗(yàn)反應(yīng)均一；

5、具有雙系雙親的特性，要通過不同雜交組合的對(duì)比觀察，從中篩選出最理想的雜交組合。命名：兩個(gè)親代近交系的名稱中間加大寫英文字母X，雌性近交系在前，雄性近交系在后，再在后寫上F1符號(hào)。親代雌性品系×親代雄性品系F1。如：C57BL/6×DBA/2F1第十六頁，共二十九頁，2022年，8月28日F1代動(dòng)物AAbbcc（♀）×aaBBCC（♂）近交系近交系

F1代AaBbCc

F2代AaBbCcAABbCcaaBbCcAabbCcAaBBCcAAbbCcAABBCcaabbCcaaBBCc……第十七頁，共二十九頁，2022年，8月28日（六）近交系的應(yīng)用

近交系動(dòng)物個(gè)體之間極為一致，對(duì)實(shí)驗(yàn)反應(yīng)一致，在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組都只需較少量的動(dòng)物。在某些涉及組織或腫瘤移植的實(shí)驗(yàn)中，個(gè)體之間組織相容性一致與否是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。有些近交系腫瘤發(fā)病率，先天性異常是醫(yī)學(xué)研究的模型。多個(gè)近交系同時(shí)使用，可使研究者分析不同遺傳組成對(duì)某項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的影響，或觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否具有普遍意義。第十八頁，共二十九頁，2022年，8月28日（七）封閉群動(dòng)物定義：以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群，在不從其外部引入新的個(gè)體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為封閉群動(dòng)物，又稱近交系動(dòng)物。命名：封閉群由2-4個(gè)大寫英文字母命名，種群名稱前標(biāo)明保持者的英文縮寫命名，第一個(gè)字母需大寫，后面的字母小寫，一般不超過4個(gè)字母。保持者與種群名稱之間用冒號(hào)分開（這是近交系動(dòng)物命名中最顯著的區(qū)別）。如：N：NIH-nu/nuLAC：LACA例外：wistar大鼠ddy小鼠封閉群動(dòng)物繁殖方法條件：1、隔離2、選擇3、有效群體大小方法：1、隨機(jī)交配方法2、循環(huán)交配方法第十九頁，共二十九頁，2022年，8月28日封閉群動(dòng)物的應(yīng)用

封閉群動(dòng)物的遺傳組成具有很高的雜合性在遺傳學(xué)中可作為現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)群體。封閉群原種具有類似于人類群體遺傳異質(zhì)性的遺傳組成，因此，在人類遺傳研究、藥物篩選和毒性試驗(yàn)等方面起著不可替代的作用。封閉群動(dòng)物具有較強(qiáng)的繁殖力和生活力。生產(chǎn)容易、成本低廣泛應(yīng)用于預(yù)試驗(yàn)、一般性實(shí)驗(yàn)。第二十頁，共二十九頁，2022年，8月28日同基因型動(dòng)物與不同基因動(dòng)物之間的比較特性

近交系

F1代

封閉群

F2代或雜種

同基因型

高

高

不高

低純合性

高低

低

低長(zhǎng)期遺傳穩(wěn)定性

高高低低可檢定的客觀指標(biāo)

高高中等低表型一致性

高較高

中等低獨(dú)特性高較高

中等低國(guó)際分布

很廣

很廣

有限極有限背景資料多

中等中等少第二十一頁，共二十九頁，2022年，8月28日營(yíng)養(yǎng)與飼料對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必需有合理的營(yíng)養(yǎng)和飼料供給。合理營(yíng)養(yǎng)是指要滿足該種動(dòng)物對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)素需要，并略有富裕。動(dòng)物的食欲不同，對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不同。同一種動(dòng)物，不同品系對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不同。同一品系動(dòng)物，在不同生長(zhǎng)期，對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求不同。要做到飼料的原料組成和營(yíng)養(yǎng)成份的比例穩(wěn)定、統(tǒng)一，這是使研究結(jié)果獲得比較一致的重要保證。第二十二頁，共二十九頁，2022年，8月28日飼料中營(yíng)養(yǎng)成份對(duì)動(dòng)物的影響飼料中營(yíng)養(yǎng)成份包括：蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、無機(jī)鹽、維生素、水。蛋白質(zhì)脂肪碳水化合物：1.無氮浸出物、淀粉、糖;2.粗纖維注：狗、貓不能利用生淀粉無機(jī)鹽（礦物質(zhì)、微量元素）維生素豚鼠和猴在體內(nèi)不能合成維生素C；無菌動(dòng)物因腸道無正常菌絲，需補(bǔ)充各種維生素及脂肪。水動(dòng)物體內(nèi)損失20%的水分時(shí)，動(dòng)物死亡。

第二十三頁，共二十九頁，2022年，8月28日各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)和飼料

大鼠和小鼠的飼料蛋白質(zhì)20%以上特別補(bǔ)充V.A、V.E大鼠和小鼠每日耗料量和飲水量小鼠每日耗料量：占小鼠體重1/4每日飲水量：占小鼠體重1/4大鼠每日耗料量：占小鼠體重1/10

每日飲水量：占小鼠體重1/10第二十四頁，共二十九頁，2022年，8月28日豚鼠和兔子的飼料

蛋白質(zhì)20%粗纖維10～20%特別補(bǔ)充V.C或青飼料耗料量：成年兔子（體重2～3kg）每日耗料150克，約占體重1/15

成年豚鼠（體重約600g）每日耗料：精料30g（約占體重1/15）、青飼料若干第二十五頁，共二十九頁，2022年，8月28日微生物控制普通動(dòng)物清潔動(dòng)物無特異病原體動(dòng)物（SPF）無菌動(dòng)物悉生動(dòng)物第二十六頁，共二十九頁，2022年，8月28日各種級(jí)別動(dòng)物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響的比較類別無菌動(dòng)物SPF動(dòng)物清潔動(dòng)物普通動(dòng)物傳染病寄生蟲實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用動(dòng)物數(shù)統(tǒng)計(jì)價(jià)值長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)死亡率長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)成活率實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論價(jià)值無無少高明確可能好很低約100%可能很高無無少高明確可能好低約90%可能高無無較少較高基本明確