微生物學(xué)檢驗(yàn)重點(diǎn)知識(shí)總結(jié)

..緒論1.微生物的定義與特點(diǎn);微生物的分類(lèi)。一、微生物的概念與特點(diǎn)1.微生物〔microorganism是一群個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,肉眼不能直接看見(jiàn),必須借助于光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍至數(shù)萬(wàn)倍才能觀(guān)察到的微小生物的總稱(chēng)。2.微生物的特點(diǎn)個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單比表面積大,吸收多,轉(zhuǎn)化快繁殖快,代謝強(qiáng)適應(yīng)強(qiáng),易變異種類(lèi)多,分布廣1.微生物類(lèi)型根據(jù)微生物大小、結(jié)構(gòu)和組成不同分為三類(lèi)型2.病原微生物的定義病原微生物：是指能引起動(dòng)物、植物或人類(lèi)產(chǎn)生疾病的微生物。3.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史。.微生物的發(fā)現(xiàn)與研究〔1列文虎克發(fā)明顯微鏡,最早觀(guān)察到微生物；微生物學(xué)研究的創(chuàng)始人：巴斯德、科赫、李斯特第一章細(xì)菌的基本性狀第一節(jié)細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)1.細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和功能,肽聚糖結(jié)構(gòu)及其化學(xué)組成；革蘭陽(yáng)性與革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要區(qū)別〔一細(xì)胞壁化學(xué)組成與結(jié)構(gòu),革蘭染色共有組分：肽聚糖特殊組分：G+菌、G-菌不同革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁特殊組分：磷壁酸革蘭陰性菌細(xì)胞壁特殊組分：外膜革蘭陰性菌細(xì)胞壁肽聚糖:聚糖骨架、四肽側(cè)鏈2.細(xì)胞壁的功能：〔1維持細(xì)菌固有形態(tài)和抵抗低滲作用?！?物質(zhì)交換作用?！?屏障作用。〔4免疫作用?！?致病作用?！?與細(xì)菌藥物敏感性有關(guān)。G+菌與G-菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)比較細(xì)菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與真核細(xì)胞基本相同,由磷脂和多種蛋白質(zhì)組成,但不含膽固醇。細(xì)菌細(xì)胞膜可形成一種特有的結(jié)構(gòu),稱(chēng)中介體。2.細(xì)菌莢膜、鞭毛和菌毛的功能。莢膜：功能：有抗吞噬和抵抗殺菌物質(zhì)的殺菌作用,增強(qiáng)細(xì)菌的侵襲力,構(gòu)成細(xì)菌致病力的重要因素之一。②具有免疫原性。③鑒別細(xì)菌和血清學(xué)分型鞭毛：功能：細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官菌毛普通菌毛：具有黏附性,與細(xì)菌致病性有關(guān)。性菌毛：與細(xì)菌的遺傳變異相關(guān)3.芽胞結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、意義、與消毒滅菌的關(guān)系；細(xì)菌L型的形態(tài)特征、檢驗(yàn)要點(diǎn)。芽胞：某些細(xì)菌〔主要為革蘭陽(yáng)性桿菌在一定條件下,細(xì)胞質(zhì)濃縮脫水而形成一個(gè)折光性很強(qiáng),具有多層膜狀結(jié)構(gòu)、通透性很低的圓形或卵圓形的小體。L型細(xì)菌：細(xì)胞壁缺陷的細(xì)菌。常發(fā)生在作用于細(xì)胞壁的抗菌藥物治療過(guò)程中。根據(jù)細(xì)胞壁缺陷程度分：原生質(zhì)體〔完全失去細(xì)胞壁,見(jiàn)于G+菌,僅在高滲環(huán)境中存活>原生質(zhì)球〔細(xì)胞壁部分缺損,見(jiàn)于G-菌,在高滲或非高滲環(huán)境中均能存活4.G+菌和G-菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的差異及其意義。第二節(jié)細(xì)菌的生理細(xì)菌的生長(zhǎng)條件,生長(zhǎng)周期及各期的特點(diǎn);IMViC試驗(yàn)的組成及機(jī)制;細(xì)菌分解及合成代謝產(chǎn)物的種類(lèi)及意義。細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖〔一細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件1.充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括：水、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子等。2.適宜的酸堿度多為pH7.2～7.6。3.合適的溫度多數(shù)病原菌為35℃～37℃。4.必要的氣體環(huán)境主要是O2和CO2。按細(xì)菌對(duì)O2的需要與否,將細(xì)菌分為：細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的規(guī)律細(xì)菌的繁殖方式：無(wú)性二分裂。細(xì)菌的繁殖速度：大多數(shù)細(xì)菌20～30分鐘即可分裂一次。2.細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型和營(yíng)養(yǎng)機(jī)制,自氧菌與異氧菌的概念。3.細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn)及其特點(diǎn)。〔一能量代謝細(xì)菌獲取能量的途徑——生物氧化。細(xì)菌能量代謝的主要類(lèi)型：〔二分解代謝檢測(cè)細(xì)菌糖分解產(chǎn)物的常用試驗(yàn)：糖發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、VP試驗(yàn)等。檢測(cè)細(xì)菌蛋白質(zhì)和氨基酸分解產(chǎn)物的常用試驗(yàn)：吲哚〔靛基質(zhì)試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)等。其他檢測(cè)細(xì)菌分解產(chǎn)物的常用試驗(yàn)：尿素分解試驗(yàn)、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)等。第三節(jié)細(xì)菌與環(huán)境1正常菌群的概念和生理功能；條件致病菌的概念2.正常菌群的生理功能；條件致病菌的概念3.消毒、滅菌、無(wú)菌、無(wú)菌操作等概念；高溫消毒滅菌法及其應(yīng)用。二、細(xì)菌的控制〔一基本概念：消毒殺死物體或介質(zhì)中病原微生物的方法。滅菌殺滅物體或介質(zhì)中所有微生物的方法。無(wú)菌無(wú)活菌存在的狀態(tài)。無(wú)菌操作防止微生物進(jìn)入機(jī)體或物體的操作技術(shù)。防腐防止或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。4.常用物理和化學(xué)消毒滅菌方法及其應(yīng)用；噬菌體與宿主的相互關(guān)系。第二章真菌的基本性狀真菌的概念真菌的分類(lèi)真菌孢子與細(xì)菌芽胞的區(qū)別第三章病毒的基本性狀病毒的大小病毒的結(jié)構(gòu)病毒的增殖

病毒的復(fù)制周期第四章微生物與感染細(xì)菌致病三大因素細(xì)菌內(nèi)外毒素的區(qū)別毒血癥、菌血癥、敗血癥、膿毒血癥的概念全身感染的類(lèi)型第二篇微生物檢驗(yàn)的基本技術(shù)第五章細(xì)菌的檢驗(yàn)技術(shù)第一節(jié)細(xì)菌形態(tài)檢驗(yàn)技術(shù)細(xì)菌染色的一般程序染色標(biāo)本檢查的一般程序革蘭氏染色法、抗酸染色法的原理、方法。2.革蘭染色法[方法]第二節(jié)細(xì)菌的接種與培養(yǎng)技術(shù)調(diào)配—溶化—調(diào)Ph—過(guò)濾澄清—分裝—滅菌—檢定—保存細(xì)菌在各種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)現(xiàn)象及觀(guān)察要點(diǎn)。培養(yǎng)基的概念培養(yǎng)基的分類(lèi)第三節(jié)細(xì)菌的生化鑒定技術(shù)糖<醇,苷>類(lèi)發(fā)酵試驗(yàn)、O/F試驗(yàn)、MR試驗(yàn)、VP試驗(yàn)的原理、操作、結(jié)果判定要點(diǎn)及其應(yīng)用；I試驗(yàn)、C試驗(yàn)、氧化酶、觸酶、血漿凝固酶氫氧化鉀拉絲試驗(yàn)及KIA和TSI的試驗(yàn)原理、操作要領(lǐng)、觀(guān)察結(jié)果要點(diǎn)及其應(yīng)用。一、碳水化合物的代謝試驗(yàn)糖〔醇、苷類(lèi)發(fā)酵試驗(yàn)原理：多糖→單糖→丙酮酸→酸性產(chǎn)物<或產(chǎn)氣>→pH↓→呈酸性變色<或出現(xiàn)氣泡2、O/F試驗(yàn)原理：根據(jù)細(xì)菌在分解葡萄糖的代謝過(guò)程中對(duì)氧分子需求的不同,將細(xì)菌分為氧化、發(fā)酵和產(chǎn)堿型三類(lèi)3、甲基紅試驗(yàn)原理：細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)生丙酮酸,進(jìn)一步分解生成大量混合酸,使培養(yǎng)pH下降至4.4以下,加入甲基紅后,呈現(xiàn)紅色反應(yīng)。為甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)性。4、V-P試驗(yàn)原理：細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇,在堿性環(huán)境中,乙酰甲基甲醇被氧化為二乙酰,二乙酰與胍基化合物結(jié)合,生成紅色化合物,是為V-P試驗(yàn)陽(yáng)性。5、β-半乳糖苷酶試驗(yàn)〔ONPG原理：有的細(xì)菌可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,能分解鄰硝基酚β-D半乳糖苷<ONPG>而生成黃色的鄰硝基苯酚,該試驗(yàn)也稱(chēng)為ONPG試驗(yàn)。6、七葉苷水解試驗(yàn)原理：某些細(xì)菌能分解七葉苷產(chǎn)生葡萄糖與七葉素,七葉素與培養(yǎng)基中的Fe2+結(jié)合后,形成黑色的化合物,使培養(yǎng)基變黑。二、蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝2、硫化氫試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生酶,分解含硫氨基酸生成硫化氫,硫化氫與培養(yǎng)基中的亞鐵鹽或鉛鹽結(jié)合生成黑色化合物。3、尿素酶試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生脲酶,水解尿素生成氨和二氧化碳,培養(yǎng)基呈堿性反應(yīng)4、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生苯丙氨酸脫氨酶,使苯丙氨酸脫氨形成苯丙酮酸,苯丙酮酸與三氯化鐵作用,形成綠色化合物三、碳源利用試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理：有的細(xì)菌能利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一的碳源,細(xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳酸鹽,使培養(yǎng)基呈堿性反應(yīng)四、酶類(lèi)試驗(yàn)1、氧化酶〔細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)原理：某些細(xì)菌具有氧化酶〔細(xì)胞色素氧化酶,能將二甲基對(duì)苯二胺或四甲基對(duì)苯二胺氧化生成紅色的醌類(lèi)化合物2、觸酶試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生的觸酶〔過(guò)氧化氫酶能催化過(guò)氧化氫放出初生態(tài)氧,繼而形成氧分子出現(xiàn)氣泡。3、凝固酶試驗(yàn)〔試管法原理：金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生凝固酶,使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白。4、凝固酶試驗(yàn)〔玻片法原理：金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生凝固酶,使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白5、硝酸鹽還原試驗(yàn)原理：某些細(xì)菌能還原培養(yǎng)基中的硝酸鹽為亞硝酸鹽,亞硝酸鹽與醋酸作用,生成亞硝酸,亞硝酸與試劑中的對(duì)氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸,再與α-萘胺結(jié)合,生成N-α-萘胺偶氮苯磺酸<紅色化合物第六章真菌檢驗(yàn)技術(shù)真菌感染性疾病的微生物學(xué)檢查原則第七章病毒檢驗(yàn)技術(shù)病毒標(biāo)本的采集和運(yùn)送注意事項(xiàng)；第八章細(xì)菌對(duì)抗菌藥物敏感試驗(yàn)藥物敏感試驗(yàn)的基本概念、常用方法抗菌藥物敏感試驗(yàn)方法紙片擴(kuò)散法稀釋法E-test法需氧菌及兼性厭氧菌的藥物敏感試驗(yàn)〔K-B法和稀釋法的原理、方法、結(jié)果判斷及正確發(fā)報(bào)告。第三篇常見(jiàn)微生物鑒定技術(shù)第十章需氧和兼性厭氧球菌葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌的主要形態(tài)特征、培養(yǎng)特性、分類(lèi)依據(jù)及分類(lèi)；病原性球菌標(biāo)本采集種類(lèi)、檢驗(yàn)鑒定程序、鑒定要點(diǎn)、檢驗(yàn)鑒定依據(jù)及報(bào)告要點(diǎn)。第十一章革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌第一節(jié)腸桿菌科概述腸桿菌科細(xì)菌：1.G-桿菌,多數(shù)有鞭毛、菌毛2.發(fā)酵葡萄糖,兼性厭氧3.氧化酶陰性4.還原硝酸鹽為亞硝酸鹽5.觸酶〔＋腸道選擇性培養(yǎng)基：麥康凱瓊脂、伊紅美藍(lán)瓊脂、SS瓊脂等腸桿菌科抗原：O抗原〔菌體抗原,K抗原〔莢膜抗原,H抗原〔鞭毛抗原等腸桿菌科鑒定依據(jù)：1.革蘭染色2.觸媒、氧化酶、硝酸鹽還原3.KIA、MIU、IMViC,其他生化反應(yīng)4.血清玻片凝集〔鑒定到種、型或血清型IMViC試驗(yàn)：吲哚〔I、甲基紅〔M、VP〔V、枸櫞酸鹽利用〔C四種試驗(yàn),常用于鑒定腸道桿菌。二、埃希菌屬形態(tài)染色：1.短桿菌2.革蘭染色陰性3.有鞭毛4.有菌毛培養(yǎng)特性：符合腸桿菌特點(diǎn)EMB——紫黑色有金屬光澤乳糖發(fā)酵菌落S-S——桃紅色乳糖發(fā)酵菌落生化反應(yīng)：IMViC〔++--大腸桿菌KIA：AA＋－血清型表示法：O：K：HETEC腸毒素：耐熱腸毒素〔ST不耐熱腸毒素〔LT,65oC30min被破壞引起腹瀉的大腸埃希菌：腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌ETEC腸致病性大腸埃希菌EPEC腸侵襲性大腸埃希菌EIEC腸出血性大腸埃希菌EHEC腸凝聚性大腸埃希菌EAECEIEC毒力測(cè)定試驗(yàn)：豚鼠眼結(jié)膜試驗(yàn)衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn)：每ml飲水中細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè),每1000ml水中大腸桿菌菌群數(shù)≤3個(gè),每100ml瓶裝汽水、果汁中,大腸桿菌菌群數(shù)≤5個(gè)。三、沙門(mén)菌屬對(duì)人類(lèi)有致病性：腸熱癥；食物中毒；敗血癥形態(tài)染色：G-桿菌；周身鞭毛培養(yǎng)和生化反應(yīng)：不分解乳糖分解葡萄糖；分解蛋白質(zhì),產(chǎn)生H2S傷寒沙門(mén)菌菌落特征〔EMB、MAC：無(wú)色透明菌落傷寒沙門(mén)菌菌落特征〔SS：無(wú)色透明或半透明,中心黑色菌落傷寒沙門(mén)菌KIA：KA－＋標(biāo)本采?。旱?-2W,血、骨髓；第2-3W,糞便、尿；全程取骨髓肥達(dá)反應(yīng):用已知傷寒沙門(mén)菌O、H和甲型副傷寒沙門(mén)菌和乙型副傷寒沙門(mén)菌H抗原與病人血清做定量凝集試驗(yàn),用以輔助診斷腸熱癥。TO≥1：80,TH≥1：160；PA、PB均≥1：80才有意義。動(dòng)態(tài)觀(guān)察：雙份血清抗體四倍升高有診斷意義四、志賀菌屬形態(tài)染色：符合腸桿菌特征,有菌毛,無(wú)鞭毛,無(wú)動(dòng)力是本菌與其它腸道致病菌主要區(qū)別點(diǎn)培養(yǎng)特性：腸道鑒別培養(yǎng)基上的無(wú)色透明、乳糖不發(fā)酵菌落抗原分類(lèi)：根據(jù)O抗原分4群,40余型,我國(guó)常見(jiàn)B群A群——痢疾志賀菌B群——福氏志賀菌C群——鮑氏志賀菌D群——宋氏志賀菌培養(yǎng)和生化反應(yīng)：不分解乳糖分解葡萄糖菌落特征〔EMB、MAC：無(wú)色透明菌落KIA：KA－－MIU：－－－外毒素：A群〔Ⅰ、Ⅱ型產(chǎn)生志賀毒素〔ST有3種生物活性1.腸毒素：類(lèi)似ETEC毒素、霍亂腸毒素作用——水樣瀉2.細(xì)胞毒性：對(duì)人肝細(xì)胞、腸黏膜細(xì)胞有毒性,引起變性壞死3.神經(jīng)毒性：損傷動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)〔麻痹、死亡快速診斷：熒光菌球試驗(yàn)；協(xié)同凝集試驗(yàn)六、變形桿菌屬形態(tài)染色：有周鞭毛培養(yǎng)特性：擴(kuò)散生長(zhǎng),有遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象。在培養(yǎng)基中〔含5％瓊脂加入0.1％石炭酸則形成單個(gè)菌落；腸道選擇性培養(yǎng)基上形成無(wú)色透明菌落變形桿菌KIA：KA++MIU：++/-+八、耶爾森菌屬歷史：三次世界性大流行,是我國(guó)重點(diǎn)監(jiān)控的自然疫源性傳染病。形態(tài)染色：G—球桿菌,兩極濃染培養(yǎng)特性：普通培養(yǎng)基,生長(zhǎng)緩慢,24-48h,R型"破草帽"狀菌落菌落特征〔EMB、MAC：無(wú)色透明菌落甲類(lèi)烈性傳染?。菏笠摺埠谒啦〕Ｒ?jiàn)臨床類(lèi)型：腺鼠疫、敗血型鼠疫、肺鼠疫標(biāo)本采集：臨床標(biāo)本〔淋巴結(jié)穿刺液、血液或痰標(biāo)本；非臨床標(biāo)本〔尸檢取病變組織,鼠標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格消毒體表,再進(jìn)行采集第二節(jié)弧菌科一群菌體短小、彎曲成弧形或直桿狀的革蘭陰性細(xì)菌；具有一端單一鞭毛、運(yùn)動(dòng)迅速；弧菌科細(xì)菌廣泛分布于自然界,以水中最為多見(jiàn)弧菌屬〔一霍亂弧菌霍亂弧菌的疫源地：印度恒河三角洲〔O1群,古典生物型；印尼蘇拉威西島〔O1群,埃托生物型；孟加拉灣〔O139群已發(fā)生七次世界性的霍亂大流行：均由霍亂弧菌的O1群引起,前六次為霍亂弧菌的古典生物型,第七次為埃爾托生物型形態(tài)：新從患者標(biāo)本中分離出的細(xì)菌革蘭染色陰性,弧形或逗點(diǎn)狀；在患者"米泔水"樣便中,可呈頭尾相接的"魚(yú)群"樣排列；菌體一端有鞭毛,懸滴觀(guān)察時(shí)呈"穿梭"樣運(yùn)動(dòng)培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求不高,故用Ph8.4-9.2堿性培養(yǎng)基；分離〔選擇能在無(wú)鹽培養(yǎng)基中生長(zhǎng)〔區(qū)別其它弧菌；在pH8.5的堿性胨水中經(jīng)35℃4~6h增菌后可在液體表面大量繁殖形成菌膜抵抗力：較弱；水源性傳播,水性爆發(fā)；怕酸,正常胃酸4min霍亂腸毒素〔CT：最強(qiáng)烈的致瀉毒素吐瀉期：劇烈吐瀉、米泔樣免疫力：病人愈后可獲得牢固免疫O1群霍亂弧菌的O抗原：由A、B、C三種抗原因子組成；通過(guò)不同組合可形成三個(gè)型別：由AB組成小川型、AC組成稻葉型、ABC組成彥島型常用的選擇性培養(yǎng)基：1.硫代硫酸鹽-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖<TCBS>瓊脂平板：霍亂弧菌發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸,菌落呈黃色2.4號(hào)瓊脂、慶大霉素瓊脂：生長(zhǎng)并將培養(yǎng)基中的碲離子還原成元素碲,形成灰褐色菌落中心3.能在無(wú)鹽培養(yǎng)基上生長(zhǎng)古典生物型和埃爾托生物型的區(qū)別試驗(yàn)：羊紅細(xì)胞溶血；雞紅細(xì)胞凝集；V-P試驗(yàn)；多粘菌素B敏感試驗(yàn)；Ⅳ組噬菌體裂解；Ⅴ組噬菌體裂解標(biāo)本采集和運(yùn)送：在發(fā)病早期,盡量在使用抗菌藥物之前采集標(biāo)本；取患者"米泔水"樣便,亦可采取嘔吐物或尸體腸內(nèi)容物,或采取肛門(mén)拭子；標(biāo)本應(yīng)避免接觸消毒液；采取的標(biāo)本最好就地接種堿性胨水增菌；不能及時(shí)接種者可用棉簽挑取標(biāo)本或?qū)⒏亻T(mén)拭子直接插入卡－布運(yùn)送培養(yǎng)基中動(dòng)力和制動(dòng)試驗(yàn)：直接取"米泔水"樣便,制成懸滴<或壓滴>標(biāo)本后,在暗視野或相差顯微鏡下直接觀(guān)察呈穿梭樣運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌；同法重新制備另一標(biāo)本涂片,在懸液中加入1滴不含防腐劑的霍亂多價(jià)診斷血清<效價(jià)≥1：64>,可見(jiàn)最初呈穿梭狀運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌停止運(yùn)動(dòng)并發(fā)生凝集,則為制動(dòng)試驗(yàn)陽(yáng)性快速診斷：將標(biāo)本接種于含有霍亂弧菌熒光抗體的堿性蛋白胨水中,經(jīng)37℃4～6h,如有霍亂弧菌,在熒光顯微鏡下可見(jiàn)發(fā)熒光的菌球。本法適用于做大量標(biāo)本的初篩SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)：以霍亂弧菌IgG型抗體與SPA陽(yáng)性葡萄球菌結(jié)合作為試劑,與米泔水樣便或增菌液作玻片凝集,立即出現(xiàn)明顯凝集者〔＋＋＋為陽(yáng)性粘絲試驗(yàn)：將0.5％去氧膽酸鈉水溶液于霍亂弧菌混勻制成濃厚菌液,1min內(nèi)懸液由混變清,并變得粘稠,以接種環(huán)挑取時(shí)可以拉出絲來(lái)〔二副溶血性弧菌具有嗜鹽性形態(tài)：革蘭陰性桿菌,有鞭毛〔極單毛培養(yǎng)特性：在無(wú)鹽培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),最適合生長(zhǎng)的氯化鈉濃度為3.5%,超過(guò)8%不能生長(zhǎng)TCBS瓊脂平板:蔗糖不發(fā)酵而呈藍(lán)綠色菌落第三節(jié)非發(fā)酵革蘭陰性桿菌非發(fā)酵革蘭陰性桿菌：一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無(wú)芽胞的革蘭陰性桿菌一、假單胞菌屬銅綠假單胞菌所致疾?。簵l件致病菌；醫(yī)院感染的重要病原菌；大面積燒傷創(chuàng)面感染的重要病原菌生物學(xué)特性：革蘭陰性,長(zhǎng)短不一,單鞭毛,氧化酶陽(yáng)性生長(zhǎng)溫度：25～42℃分離培養(yǎng)與鑒定：1.血平板上毛玻璃樣,金屬光澤,生姜味2.可產(chǎn)生多種色素：熒光素與綠膿素血瓊脂平板：透明溶血環(huán)O/F試驗(yàn)：氧化型第四節(jié)其他革蘭陰性苛氧菌一、嗜血桿菌屬流感嗜血桿菌所致疾病：原發(fā)化膿性感染及繼發(fā)性感染,包括腦膜炎、鼻咽炎、關(guān)節(jié)炎、心包炎、鼻竇炎及中耳炎等生物學(xué)特性：革蘭陰性短小球桿菌分離培養(yǎng)：需要X、V因子；營(yíng)養(yǎng)要求高,血瓊脂平板培養(yǎng)基,巧克力瓊脂培養(yǎng)基菌落特征：巧克力瓊脂培養(yǎng)基,小、無(wú)色透明菌落衛(wèi)星現(xiàn)象：當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌一起培養(yǎng)時(shí),靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血桿菌菌落較大,遠(yuǎn)離葡萄球菌菌落的流感嗜血桿菌菌落較小四、布魯菌屬傳染源：病獸,以羊、牛、豬多見(jiàn)傳播途徑：病獸的組織、尿、乳液等通過(guò)人體的皮膚、呼吸道、消化道進(jìn)入人體易感人群：發(fā)病以青壯年為主,從事獸醫(yī)、皮毛加工、屠宰的工人發(fā)病率較高臨床表現(xiàn)：長(zhǎng)期發(fā)熱、多汗；關(guān)節(jié)疼痛及全身乏力、疼痛微生物特性：革蘭陰性短小球桿菌培養(yǎng)特性：需氧菌,營(yíng)養(yǎng)要求較高；生長(zhǎng)緩慢〔5~7天第十二章革蘭陽(yáng)性需氧和兼性厭氧桿菌革蘭陽(yáng)性無(wú)芽胞桿菌白喉棒狀桿菌形態(tài)與染色:G+細(xì)長(zhǎng)微彎的桿菌；一端或兩端膨大呈棒狀；常排列呈V、L、X等文字形；異染顆粒——形態(tài)上的鑒別特征培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求高,呂氏血清斜面或雞蛋斜面亞碲酸鉀BAP：選擇鑒別培養(yǎng)基,黑色菌落——鑒別依據(jù)毒力試驗(yàn)：1.體外法：瓊脂平板毒力試驗(yàn)〔Elek平板毒力測(cè)定；SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)；對(duì)流電泳2.體內(nèi)法：用豚鼠作毒素-抗毒素中和試驗(yàn)第二節(jié)革蘭陽(yáng)性需氧芽胞桿菌屬炭疽芽胞桿菌臨床意義：炭疽是人獸共患的急性傳染病,皮膚炭疽、腸炭疽、肺炭疽等炭疽毒素：保護(hù)性抗原、致死因子、水腫因子傳染源：患病食草動(dòng)物及其制品或被污染物傳播途徑：1.接觸——皮膚炭疽2.食用——腸炭疽3.吸入——肺炭疽形態(tài)染色:致病菌中最大的G+桿菌；兩端平切、竹節(jié)狀；有毒株可有明顯莢膜芽胞：1.橢圓形,小于菌體,位于菌體中央2.多在有氧條件下形成,25～30℃,在培養(yǎng)基中、土壤內(nèi)、動(dòng)物尸體解剖后暴露在空氣中,都易形成芽胞3.在活體或完整未解剖尸體內(nèi)不形成芽胞,尸體嚴(yán)禁解剖培養(yǎng)特性：1.普通培養(yǎng)基上卷發(fā)狀菌落2.BAP：12～15h不溶血,18～24h輕微溶血3.肉湯：絮狀沉淀生長(zhǎng)4.明膠：37℃18～24h表面液化成漏斗狀,由于細(xì)菌沿穿刺線(xiàn)向四周擴(kuò)散形成倒松樹(shù)狀。5.NaHCO3BAP：有毒株--黏液型菌落,挑取時(shí)呈粘絲狀<鑒別要點(diǎn)>無(wú)毒株—粗糙型菌落抗原構(gòu)造：1.菌體多糖抗原：與毒力無(wú)關(guān),耐熱、耐腐敗,長(zhǎng)時(shí)間煮沸仍能與特異性抗體發(fā)生環(huán)狀沉淀反應(yīng)〔Ascoli熱沉淀反應(yīng),特異性不高,可作追溯性診斷2.莢膜多肽抗原：莢膜腫脹試驗(yàn),對(duì)本菌鑒定有意義標(biāo)本的采集與處理:死于敗血癥的動(dòng)物,嚴(yán)禁宰殺和解剖,可消毒皮膚后割取耳朵、舌尖采集少量血液串珠試驗(yàn):炭疽芽胞桿菌在每毫升含有0.05-0.5U青霉素的培養(yǎng)基中,可發(fā)生形態(tài)變異,形成大而均勻的圓球狀并相連如串珠狀第十三章分枝桿菌屬分枝桿菌是一類(lèi)細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲的桿菌,含有分枝菌酸,有分枝生長(zhǎng)的趨勢(shì)而得名。具有抗酸性,故又稱(chēng)抗酸桿菌。結(jié)核分枝桿菌所致疾?。和ㄟ^(guò)呼吸道、消化道和損傷的皮膚等多途徑感染機(jī)體,引起多種臟器的結(jié)核病,其中以肺結(jié)核為多見(jiàn)致病物質(zhì)：莢膜、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)等菌體成分免疫性：有菌免疫或稱(chēng)傳染性免疫,細(xì)胞免疫在抗感染免疫中起重要作用微生物特性：1.分枝狀,略帶彎曲的抗酸桿菌,抗酸性染色法染色后結(jié)核分枝桿菌呈紅色,背景呈藍(lán)色2.專(zhuān)性需氧,營(yíng)養(yǎng)要求較高,最適生長(zhǎng)溫度為35℃,生長(zhǎng)緩慢,2~5w才出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的如菜花樣粗糙型菌落。結(jié)核菌素試驗(yàn)：純蛋白衍生物<PPD>,注入皮內(nèi)后如受試者已感染結(jié)核,則結(jié)核菌素與致敏淋巴細(xì)胞特異性結(jié)合,形成遲發(fā)型超敏反應(yīng)性炎癥機(jī)體抗結(jié)核免疫特點(diǎn)：傳染、免疫、超敏反應(yīng)共存第十四章厭氧性細(xì)菌破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌的形態(tài)特征、培養(yǎng)特性；厭氧性細(xì)菌的檢驗(yàn)鑒定要點(diǎn)和報(bào)告方式。第十五章螺旋體、支原體、衣原體、立克次體第一節(jié)螺旋體螺旋體：是一種細(xì)長(zhǎng)、柔軟、螺旋狀、運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物鉤端螺旋體所致疾?。恒^端螺旋體病傳染源與儲(chǔ)存宿主:自然疫源性疾病,鼠類(lèi)和豬為主要儲(chǔ)存宿主傳播途徑：間接接觸傳播〔接觸被含菌尿液污染的水源、血液傳播、垂直傳播生物學(xué)特性：1.螺旋一端或兩端呈鉤狀2.有兩根周漿鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑3.G-,但不易著色,鍍銀染色成棕褐色梅毒螺旋體所致疾病：梅毒1.先天性：母體通過(guò)胎盤(pán)傳給胎兒2.獲得性：性傳播獲得性梅毒臨床分期：分為三期1.Ⅰ期〔初期梅毒：感染后3周左右局部出現(xiàn)無(wú)痛性硬下疳,感染性極強(qiáng)。2.Ⅱ期梅毒：發(fā)生于硬下疳出現(xiàn)后2~8周,全身皮膚、粘膜常有梅毒疹,全身淋巴結(jié)腫大3.Ⅲ期〔晚期梅毒：發(fā)生感染2年后,病變可波及全身組織和器官；基本損害為慢性肉芽腫；病損內(nèi)螺旋體少但破壞性大生物學(xué)特性：G-,但不易著色,鍍銀染色呈棕褐色；對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗生素敏感微生物學(xué)檢查：標(biāo)本：Ⅰ、Ⅱ期梅毒取下疳滲出液、梅毒疹滲液或淋巴結(jié)穿刺液；先天性梅毒取臍血第二節(jié)支原體支原體：是一類(lèi)沒(méi)有細(xì)胞壁,形態(tài)上呈多樣性,可通過(guò)細(xì)菌濾器,能在無(wú)生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的最小的原核細(xì)胞型微生物；因其生長(zhǎng)后能形成分枝長(zhǎng)絲,故命名為支原體；G-,但不易著色,Giemsa染色呈淡紫色；油煎蛋樣的菌落所致疾?。褐гw肺炎冷凝集實(shí)驗(yàn):肺炎支