微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)

微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)薛慶賀2016.05.25微生物特性潔凈區(qū)清潔消毒潔凈區(qū)環(huán)境檢測(cè)微生物檢測(cè)2006年安徽華源生物藥業(yè)有限公司“欣弗事件”2008年黑龍江完達(dá)山制藥廠“刺五加事件”咖啡檢出宗曲霉毒素A飲用水和肉制品微生物超標(biāo)1.1、微生物定義

微生物是廣泛存在于自然界形體微小、數(shù)量繁多、肉眼看不見需借助顯微鏡放大數(shù)百倍、上千倍甚至數(shù)萬倍能觀察到的最低等微小生物統(tǒng)稱。1.2、微生物分類

細(xì)菌、病毒、真菌、放線菌、立克次體，支原體，衣原體，螺旋體。微生物微生物微生物微生物微生物HM-SMP-QA-023《潔凈室標(biāo)準(zhǔn)管理程序》菌落：微生物培養(yǎng)后，由一個(gè)或幾個(gè)微生物繁殖而形成的微生物集落，簡(jiǎn)稱CFU。細(xì)菌按照其基本形態(tài)：球菌，桿菌，螺旋菌。細(xì)菌結(jié)構(gòu)革蘭氏染色

革蘭氏染色細(xì)菌的不同顯色反應(yīng)是由于細(xì)胞壁對(duì)乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要有肽聚糖層的厚度和結(jié)構(gòu)決定的。經(jīng)結(jié)晶紫染色的細(xì)胞用碘液處理后形成不容性復(fù)合物，乙醇能使它溶解，但在革蘭氏陽性細(xì)胞中，乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水，導(dǎo)致孔徑變小，由于復(fù)合物分子太大，不能通過細(xì)胞壁故保持紫色。在革蘭氏陰性細(xì)胞中，乙醇處理破壞了細(xì)胞壁外膜，損傷肽聚糖層，于是被乙醇溶解的復(fù)合物從細(xì)胞中滲漏出來，當(dāng)用染色液復(fù)染時(shí)，顯現(xiàn)紅色。革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外膜的基本成分是脂多糖（LipopolysaccharideLPS）,它有類脂A，核心多糖，O-特異多糖組成。LPS是內(nèi)毒素物質(zhì)的基礎(chǔ)。內(nèi)毒素特點(diǎn)：1.耐熱性強(qiáng)（150℃，數(shù)小時(shí)也不會(huì)裂解）2.可過濾性（能被活性炭，硅藻土濾器吸附）3.不揮發(fā)性（注射用水制備中蒸餾）細(xì)胞膜：對(duì)物質(zhì)選擇和吸收細(xì)胞質(zhì)：細(xì)菌細(xì)胞的基礎(chǔ)物質(zhì)擬核、核糖體……特殊結(jié)構(gòu)：鞭毛，莢膜，芽孢。芽孢：有些細(xì)菌生長到一定時(shí)期時(shí)，繁殖速度下降，菌體的細(xì)胞原生質(zhì)濃縮，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形、橢圓形或圓柱形的孢子，對(duì)不良環(huán)境具有較強(qiáng)抗性的休眠體，稱為芽孢。能否形成孢子受其遺傳因素的制約，也需要一定的環(huán)境條件，多數(shù)是在營養(yǎng)缺乏，溫度較高，或代謝產(chǎn)物積累等不良條件下形成。真菌一般比細(xì)菌大幾倍或幾十倍，分為單細(xì)胞真菌（酵母菌）和多細(xì)胞真菌（霉菌）。溫暖和潮濕的環(huán)境霉菌容易滋生，需特別注意：潔凈區(qū)洗衣機(jī)，水池等。1.空氣污染：空氣是微生物污染的攜帶者，微生物通常依附于空氣中的非活性粒子，如塵埃，皮膚，水滴，侵襲產(chǎn)品，而成為重要污染源。2.水污染：微生物不能在純水中生長，但是所有的各類水，不管怎樣處理，總會(huì)含有一定量的有機(jī)物和鹽類。可溶性物質(zhì)被微生物利用，作為它們生長的源泉。3.原材料污染：非無菌原料微生物：

需氧菌：＜1000cfu/g

霉菌和酵母菌：＜100cfu/g

控制菌：*。4.人員污染：4.1潔凈區(qū)人員更衣規(guī)范E:\高清無菌更衣.avi高清無菌更衣.aviGMP第三十四條：任何進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)的人員均應(yīng)當(dāng)按照規(guī)定更衣。工作服的選材、式樣及穿戴方式應(yīng)當(dāng)于所從事的工作和空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng)。D級(jí)潔凈區(qū)：應(yīng)當(dāng)將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋。應(yīng)當(dāng)穿合適的工作服和鞋子或鞋套。應(yīng)當(dāng)采取適當(dāng)措施，以避免帶入潔凈區(qū)外的污染物。C級(jí)潔凈區(qū)：應(yīng)當(dāng)將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋，應(yīng)當(dāng)戴口罩。應(yīng)當(dāng)穿手腕處可收緊的連體服或衣褲分開的工作服，并穿適當(dāng)?shù)男踊蛐?。工作服?yīng)當(dāng)不脫落纖維或微粒。A/B級(jí)潔凈區(qū)：應(yīng)當(dāng)用頭罩將所有頭發(fā)以及胡須等相關(guān)部位全部遮蓋，頭罩應(yīng)當(dāng)塞進(jìn)衣領(lǐng)內(nèi)，應(yīng)當(dāng)戴口罩以防散發(fā)飛沫，必要時(shí)戴防護(hù)目鏡。應(yīng)當(dāng)穿經(jīng)滅菌且無顆粒物散發(fā)的橡膠或塑料手套，穿經(jīng)滅菌或消毒的鞋套，褲腿應(yīng)當(dāng)塞進(jìn)腳套內(nèi)，袖口應(yīng)當(dāng)塞進(jìn)手套內(nèi)。工作服應(yīng)為滅菌的連體工作服，不脫落纖維或微粒，并能滯留身體散發(fā)的微粒。潔凈服使用及管理：清洗過的衣服，在使用過程中的一般原則為按照清洗日期，先洗先用；新的潔凈服應(yīng)按照尺碼及編號(hào)進(jìn)行分類，袖口，腳口，發(fā)現(xiàn)破洞，碳纖維勾出必須報(bào)廢。4.1人員行為人是潔凈室最大的污染源，有其帶來的污染占潔凈室污染的90%左右。

根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道：一般男性每人每分鐘像周圍排放1000個(gè)以上的含菌粒子，女性為750個(gè)以上；穿衣服時(shí)，每人靜態(tài)時(shí)的發(fā)菌量為10-300個(gè)/min，行走時(shí)發(fā)菌量為900-2500個(gè)/min，咳嗽一次發(fā)菌量為70-700個(gè)/min,噴嚏一次發(fā)菌量為400-600個(gè)/min.

人體部位細(xì)菌數(shù)量手部100-1000/cm^2前額1000-100000/cm^2頭皮10×10^5/cm^2腋窩10×10^6/g鼻腔分泌物10×10^6/g唾液10×10^8/g糞便71×10^9/g

301.頭發(fā)和皮膚每分鐘人類皮膚要散發(fā)10000個(gè)微生物，一粒糖可以裝載4億個(gè)微生物，可以設(shè)想人的衣服，頭發(fā)及雙手可以容納多少微生物？2.水滴

既有塵粒污染，也有微生物污染。3.衣著棉絨，纖維和微粒及鞋子引入。4.化妝品和首飾發(fā)膠，眼影膏，粉底等是極大的微生物污染源，耳環(huán)，戒指，項(xiàng)鏈?zhǔn)宙渹鞑ノ⑸镂廴尽?.未按照SOP執(zhí)行所引起的污染315.設(shè)施污染

設(shè)施很少是微生物固有的來源。設(shè)施設(shè)計(jì)缺陷，結(jié)構(gòu)材料不良，不正確的操作能夠?qū)ξ廴舅皆斐擅黠@的影響。一些設(shè)備很難清洗，微生物會(huì)在污染物容易聚集的地方生存并繁殖。32二.潔凈區(qū)清潔和消毒消毒劑按照殺滅微生物水平（國內(nèi)）

低效消毒劑（可殺滅細(xì)菌繁殖體和親脂性病毒，對(duì)真菌有一定的作用）中效消毒劑（可殺滅細(xì)菌芽孢以外的微生物）

高效消毒劑（可殺滅一切微生物，包括細(xì)菌芽孢）滅菌劑和消毒劑（國外）

滅菌劑：可殺滅一切微生物，等同于高效消毒劑。

消毒劑：除滅菌劑外的消毒產(chǎn)品。（通用消毒劑，醫(yī)院消毒劑，有限作用消毒劑）33二.潔凈區(qū)清潔和消毒低效消毒劑（雙胍類和季銨鹽類消毒劑）陽離子表面活性劑，具有殺菌和去污作用，非關(guān)鍵物品清潔和消毒，將其溶于乙醇中，可增強(qiáng)殺菌效果，可用于皮膚消毒。改變細(xì)胞膜的通透性，將他們與其他消毒劑復(fù)配，提高殺菌效果和殺菌速度。34二.潔凈區(qū)清潔和消毒中效消毒劑（酚類和醇類消毒劑）75%乙醇和70%異丙醇。凝固蛋白質(zhì)，導(dǎo)致病原體死亡；復(fù)合醇類消毒劑，多用于手部消毒。酚類消毒劑苯酚，甲酚，鹵化酚及酚的衍生物。甲酚皂溶液，又稱來蘇爾，其主要成分為甲基苯酚，國外制藥行業(yè)應(yīng)用比較廣泛的為苯酚的衍生物，主要成分對(duì)叔戊基苯酚和鄰笨基苯酚。以這兩種苯酚衍生物為消毒劑的產(chǎn)品，在酸性和堿性條件下輪換，確實(shí)有防止有微生物耐藥性產(chǎn)生的效果。35二.潔凈區(qū)清潔和消毒高效消毒劑（過氧化物消毒劑和臭氧）主要是極強(qiáng)的氧化能力，過氧化氫，過氧乙酸，二氧化氯和臭氧等。消毒后在物體表面不殘留毒性，但是一般這類物質(zhì)不穩(wěn)定，特殊處理或添加其他成分來保證其穩(wěn)定性。36作用時(shí)間二.潔凈區(qū)清潔和消毒第一：清潔表面清潔是非常重要的，它能夠通過去除污垢（有機(jī)物）的方式以避免消毒劑失效。第二：消毒將消毒劑作用于目標(biāo)表面，（一、拖洗法和擦拭法；二、噴灑和噴霧法）第三：清除殘留清楚殘留在實(shí)際運(yùn)用中容易被忽視，但是這一步驟對(duì)于保證消毒效果和避免再次污染很關(guān)鍵。37三、環(huán)境監(jiān)測(cè)..\潔凈室標(biāo)準(zhǔn)管理程序HM-SMP-QA-023-03(1).doc38四、微生