七白膏對(duì)中波紫外線誘導(dǎo)豚鼠色素沉著模型的影響研究

七白膏對(duì)中波紫外線誘導(dǎo)豚鼠色素沉著模型的影響研究任金平;王平;王媚;倪亞杰【摘要】ObjectiveToobserveinfluenceofsevenwhitecreamonguineapigspigmentationmodelsinducedbyultravioletB(UVB).MethodsNB-UVBinducedpigmentationanimalmodels.Afterestablishingmodels,theareasofpigmentationweredividedintofourgroups:traditionalChineseherbsevenwhitecreamgroup,2%hydroquinonegroup,largeheadatractylodesrhizomegroupandsinglematrixgroup,andthencoatedthemoncorrespondinglesions.Aftertreamtmentforfourweeks,theefficacyofthetesteddrugwasevaluatedcomprehensivelybysuchmeasuresasmelaninindex,melanocyte,melaninaswellasthehistopathologyofskin.ResultsItshowedthatthetesteddrugcouldgreatlydecreasethelevelofmelaninindex,restraintheactivityofmelanocyte,reducethegenerationofmelanin,andrelievepigmentationcausedbyUVB.ConclusionSevenwhitecreamhasobvioustreatmentfunctiontoNB-UVB-inducedpigmentation,anditpossiblemechanismsareinhibitingtheproliferationofmelanocytesanddecreasingmelaningeneration.(ultravioletB,UVB)誘導(dǎo)的色素沉著豚鼠模型的影響.方法紫外線光療儀誘導(dǎo)建立色素沉著豚鼠模型.建模成功后,將豚鼠背部色素沉著區(qū)域分為七白膏組、2％氫醌乳膏組、白術(shù)單體組和單基質(zhì)乳44膚進(jìn)行黑色素指數(shù)、黑素顆粒、黑素細(xì)胞以及皮膚組織病理學(xué)檢查觀察藥物的療效和安全性.結(jié)果外用七白膏可顯著降低皮膚黑色素指數(shù)水平,抑制黑素細(xì)胞活性,減UVBUVB誘導(dǎo)的豚鼠皮【期刊名稱】《中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志》【年(卷),期】2013(012)001【總頁數(shù)】4頁(P9-12)【關(guān)鍵詞】七白膏;中波紫外線;色素沉著;豚鼠【作者】任金平;王平;王媚;倪?杰【作者單位】浙江中醫(yī)藥大學(xué),杭州310053【正文語種】中文【中圖分類】R758.5+4皮膚色素沉著臨床十分普遍，嚴(yán)重者損容，給患者帶來很大的心理負(fù)擔(dān)，影響患者生活質(zhì)量。日光中的中波紫外線被認(rèn)為是引起皮膚色素沉著的主要原因。由于色素沉著的發(fā)病機(jī)制至今仍未完全闡明，盡管臨床上治療方法層出不群，但一直缺乏起效較快、有效率高、不良反應(yīng)小、復(fù)發(fā)率低的治療方法。近年來中藥對(duì)皮膚色素沉著的改善作用引起廣泛關(guān)注，臨床上外用中藥美白制劑治療黃褐斑等皮膚色素沉著有效，七白膏就是其中具有代表性的的一個(gè)。本研究選擇七白膏，應(yīng)用于中波紫外來客觀評(píng)價(jià)藥物的治療作用及可能的作用機(jī)制。材料與方法材料動(dòng)物采用普通級(jí)健康雄性棕黃色豚鼠1010240～260g，4藥物中藥七白膏由白術(shù)、白芷、白芨、白蘞、白附子、白茯苓、細(xì)辛外加雞子白組成[1]，各味中藥均購自江蘇江陰天江藥業(yè)有限公司，委托專業(yè)藥師進(jìn)行質(zhì)量鑒定，經(jīng)杭州市第三人民醫(yī)院制劑室制成乳膏制劑；2%氫醌乳膏購自廣東人H2004008820110503；白術(shù)單體乳膏和單基質(zhì)乳膏由杭州市第三人民醫(yī)院制劑室制作。儀器SS-04B（上海希格瑪高技術(shù)有限公司）；MPA9CK）；皮膚共聚焦激光掃描顯微鏡(confocallaserscanningmicroscopy，CLSMVIVASCOPE1500nm16.0mW；黑素染色試劑盒（MST-8015）購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。方法色素沉著模型制作使用SS-04B療儀正對(duì)豚鼠皮膚距皮膚15cm左右，根據(jù)文獻(xiàn)[2]每次照射能量為500mJ/cm2，隔日1次，共3次。每次照射后豚鼠皮膚可出現(xiàn)輕度發(fā)紅，但無腫脹，無水皰、血皰。4予七白膏藥膏、2%氫醌乳膏、白術(shù)單體和單基質(zhì)乳膏外涂，2/d431黑色素指數(shù)測(cè)定應(yīng)用MPA94周后分別測(cè)定豚鼠背部各區(qū)域皮膚黑色素指數(shù)變化?；铙w下黑色素及黑素細(xì)胞觀察應(yīng)用CLSM4組織病理觀察豚鼠皮膚常規(guī)石蠟切片，F(xiàn)eSO45統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，各組間采用tP<0.05SPSS17.0結(jié)果皮膚顏色變化SS-04B（1500mJ/cm2）豚鼠背1d，3d5～7d1驗(yàn)組用藥過程中未見明顯紅斑、脫屑等不良刺激，用藥 4周后色素沉著顯著減退2%氫醌組，用藥4～6d皮膚出現(xiàn)發(fā)紅、脫屑，4周后色素沉著明顯減退；白術(shù)單體組用藥過程中未見發(fā)紅、脫屑，用藥4周后色素減退不明顯；單基質(zhì)組4周后未見明顯色素減退。黑色素指數(shù)比較31數(shù)較照射前顯著升高（P<0.01），1。1照光前后豚鼠皮膚黑色素指數(shù)比較（±s）注：與照光前比較，*P<0.01組別n黑色素指數(shù)照光前40170.00±60.36照光后40352.50±91.35*4前無明顯變化（P>0.05）；44（P<0.01），七白膏組連用4周后，黑色素指數(shù)較用藥前顯著下降（P<0.01）。白術(shù)單體組與單基質(zhì)乳膏組相比黑色素指數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；2%氫醌組與單基質(zhì)乳膏組相比黑色素指數(shù)明顯下降（P<0.01），較白術(shù)單體組明顯下降（P<0.01）；七白膏組與單基質(zhì)乳膏組相比黑色素指數(shù)顯著下降（P<0.01），與白術(shù)單體組相比明顯下降（P<0.01）但與2%氫醌組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。表2藥物干預(yù)前后各組皮膚黑色素指數(shù)比較（±s）注：*P<0.01；△P>0.05。組別n藥物干預(yù)前藥物干預(yù)后單基質(zhì)乳膏組10白術(shù)單體乳膏組10353.30±101.62322.60±85.63△344.0086.97323.20±85.06△2%氫醌乳膏組1010354.7087.41208.90±66.54*358.00±101.34203.20±63.43*CLSM42%氫醌組與七白膏組樹枝狀黑素細(xì)胞數(shù)量及色1。1CLSM③2%氫醌：黑色素顆粒明顯減少，殘留少量樹枝狀黑素細(xì)胞；④七白膏：黑色素顆粒顯著減少，局部可見數(shù)量不定樹枝狀黑素細(xì)胞；⑤白術(shù)單體乳膏：見較多折光明亮的黑素顆粒和黑素細(xì)胞；⑥單基質(zhì)乳膏：可見大量折光明亮的黑色素顆粒和黑素細(xì)胞。444少；七白膏組外用4周后黑素顆粒較單基質(zhì)乳膏組明顯減少。見圖2。組織切片中黑素顆粒計(jì)數(shù)結(jié)果見表4。圖2照光后及用藥4周后各組皮損組織病理像（FeSO4染色×100）①照光前豚鼠表皮基底層幾乎看不到黑素顆粒；②照光后：基底層可見大量黑素顆呈粒帶狀分布,棘層黑素顆粒帽狀分布；③單基質(zhì)乳膏組：基底層可見較多黑素顆粒；④白術(shù)單體組：基底層仍可見較多的黑素顆粒；⑤2%氫醌組：基底層黑素顆粒明顯減少；⑥七白膏組：基底層黑素顆粒顯著減少。表4組織切片中黑素顆粒計(jì)數(shù)分析注：與照光前比較△P<0.01；與照光后比較*P>0.05，**P<0.01。組別n黑素顆粒計(jì)數(shù)（個(gè)）照光前51.42±0.5253.82±1.49△單純基質(zhì)組53.76±1.42*白術(shù)單體組53.71±1.35*2%氫醌組52.18±0.85**七白膏組52.07±0.79**討論皮膚色素沉著是皮膚科常見的一類疾病，易診難治，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量和心理健康。日光中的中波紫外線輻射越來越受到關(guān)注。近年來UVB照射豚鼠構(gòu)建色素沉著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型已被成功應(yīng)用[3]。根據(jù)文獻(xiàn)資料[2]，豚鼠UVB的最小紅斑量為200～300mJ/cm2，采用局部雙倍最小紅斑量的紫外線劑量（500mJ/cm2）分次間歇照射棕黃色豚鼠的方法,既減少紅斑水皰的發(fā)生,又可形成穩(wěn)定均勻的色素沉著,便于實(shí)驗(yàn)中觀察和數(shù)據(jù)記錄。本研究選擇單次500mJ/cm2，總劑量1500mJ/cm2的方法所形成的色素沉著均勻、穩(wěn)定。皮膚色素沉著的治療一直是困擾醫(yī)生和患者的一個(gè)難題，盡管治療方法很多，但缺外用可引起局部皮膚紅斑、脫屑瘙癢和刺痛等不良刺激，刺激性與濃度及接觸時(shí)間有關(guān)[4]。研究表明黑素細(xì)胞過度增殖和黑素合成進(jìn)行性增多是導(dǎo)致色素沉著發(fā)生或加重的重要因素[5]，抑制黑素細(xì)胞增殖和黑素合成可減少皮膚色素沉著的發(fā)生和發(fā)展。理想的皮膚脫色劑是能直接或間接抑制黑素細(xì)胞增殖和黑素合成，脫色迅速且無明顯不良刺激、不易復(fù)發(fā)的制劑。近年來隨著祖國醫(yī)藥的現(xiàn)代化開發(fā)應(yīng)用，一大批經(jīng)方顯現(xiàn)出其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，七白膏就是其中具有代表性的一個(gè)方劑，中藥七[1細(xì)辛外加雞子白組成，張建華等[6]1010氫醌的紅斑、脫屑等不良刺激。得深入研究并推廣應(yīng)用于臨床?！鞠嚓P(guān)文獻(xiàn)】［1］王懷隱.太平圣惠方[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1982:1200-1235.［2］TobiishiM,HaratakeA,KaminagaH,etal.PigmentationinintrinsicallyagedskinofA1guineapigs[J].PigmentCellRes,2004,17:651-658.［3］MaedaK,NaganumaM.Topicaltrans-4-aminomethylcyclohexanecarboxylicacidpreventultravioletradiation-inducedpigmentation[J].JPhotochemPhotobiolB,1998,47:136-141.［4］MauricioT,KarmonY,KhaiatA.Arandomizedandplacebocontrolledstudytocomparetheskin-lighteningefficacyandsafetyofligninperoxidasecreamvs.2%hydroquinonecream[J].JCosmet