高中生物人教版生物技術(shù)實(shí)踐專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 高質(zhì)作品

課時(shí)訓(xùn)練14血紅蛋白的提取和分離基礎(chǔ)夯實(shí)1.下列關(guān)于凝膠色譜柱的操作,正確的是()A.將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴B.將橡皮塞下部用刀切出凹穴C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D.將尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞下部一樣大小的圓片答案：A2.使用SDS—聚丙烯酰胺電泳的過(guò)程中,不同蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于()A.電荷的多少B.分子的大小C.肽鏈的多少 D.分子形狀的差異答案：B3.在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A.防止血紅蛋白被氧氣氧化B.血紅蛋白是一種堿性物質(zhì),需磷酸中和C.磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過(guò)程D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)答案：D4.蛋白質(zhì)的提取和分離分為哪幾步?()A.樣品處理、凝膠色譜操作、SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化C.樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定D.樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定答案：C5.下列關(guān)于DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)和血紅蛋白的提取實(shí)驗(yàn),敘述正確的是()(導(dǎo)學(xué)號(hào)52260066)A.前者選擇雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料較好,后者選擇哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料較好B.樣品預(yù)處理時(shí),前者靜置1天處理除去上清液;后者需要加入清水,反復(fù)低速短時(shí)間離心洗滌,至上清液無(wú)黃色C.在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中,往2mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時(shí),應(yīng)該緩慢加入,直到出現(xiàn)黏稠物即止D.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽等答案：A6.下列關(guān)于凝膠色譜柱的裝填,除哪項(xiàng)外均為正確解釋?()A.交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG-75)“G”表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值B.色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡,必須重裝C.用300mL物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12hD.凝膠用自來(lái)水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液答案：D7.下列各項(xiàng)中,一般不影響在凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是()A.層洗柱高 B.層洗柱的直徑C.緩沖溶液 D.樣品的分布答案：B8.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,其分子大小、電荷的性質(zhì)和電荷量情況如下圖所示,下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是()A.若將樣品以2000r/min的速度離心10min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動(dòng)速度最快C.將樣品裝入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi)D.若用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子丙形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)答案：C9.下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作,不正確的是()A.是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開(kāi)的一種方法B.在洗脫過(guò)程中,大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出,而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,以致最后流出C.凝膠內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔隙大小與被分離的物質(zhì)分子的大小無(wú)相應(yīng)關(guān)系D.一般情況下,凝膠對(duì)要分離的物質(zhì)沒(méi)有吸附作用,因此所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來(lái)答案：C10.在裝填色譜柱時(shí),不得有氣泡存在的原因是()A.氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,影響分離效果B.氣泡阻礙蛋白質(zhì)的運(yùn)動(dòng)C.氣泡能與蛋白質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)D.氣泡會(huì)在裝填凝膠的時(shí)候使凝膠不緊密答案：A能力提升11.下面說(shuō)法不正確的是()A.在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液pH的影響,維持pH基本不變B.緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成C.電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程D.透析袋能使大分子自由進(jìn)出,而將小分子保留在袋內(nèi)答案：D12.下列關(guān)于樣品的加入和洗脫的操作,不正確的是()A.加樣前,打開(kāi)色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面的下面B.用吸管小心地將1mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面C.加樣后,打開(kāi)下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)D.等樣品完全進(jìn)入凝膠層后,關(guān)閉下端出口答案：A13.血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分,負(fù)責(zé)血液中O2和部分CO2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問(wèn)題。(1)將實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整:A為,B為。凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)而分離蛋白質(zhì)。

(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除,洗滌次數(shù)過(guò)少,無(wú)法除去;離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使一同沉淀,達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是。釋放血紅蛋白的過(guò)程中起作用的是。

(3)在洗脫過(guò)程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為的目的是

。

如果紅色區(qū)帶,說(shuō)明色譜柱制作成功。

解析：本題考查血紅蛋白提取和分離的實(shí)驗(yàn)步驟和基本操作。答案：(1)血紅蛋白的釋放樣品的加入和洗脫蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小(2)雜蛋白(血漿蛋白)血漿蛋白白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞離心后的上清液中沒(méi)有黃色蒸餾水和甲苯(3)準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境,保持體外的pH和體內(nèi)的一致均勻一致地移動(dòng)14.下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(導(dǎo)學(xué)號(hào)52260067)(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有功能。

(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是;乙裝置中,C溶液的作用是。

(3)甲裝置用于,目的是。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫,是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。

(4)用乙裝置分離血紅蛋白時(shí),待時(shí),用試管收集流出液,每5mL收集一管,連續(xù)收集。

解析：A表示磷酸緩沖液,B表示血紅蛋白溶液,C表示緩沖液。甲裝置可對(duì)血紅蛋白粗分離,血紅蛋白留在透析袋中,而小分子物質(zhì)進(jìn)入緩沖液。乙裝置中的緩沖液(C)可對(duì)色譜柱中的血紅蛋白進(jìn)行洗脫。答案：(1)運(yùn)輸(2)磷酸緩沖液洗脫血紅蛋白(3)透析(粗分離)去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)凝膠色譜法相對(duì)分子質(zhì)量的大小(4)紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端15.下面是某研究小組開(kāi)展的“豬血漿某白蛋白的提取及相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定”研究,請(qǐng)協(xié)助完成有關(guān)問(wèn)題。材料儀器:新鮮豬血、低速冷凍離心機(jī)、透析袋、電泳儀等。化學(xué)試劑:pH為的緩沖液、檸檬酸鈉、奈氏試劑(與NH4+反應(yīng)出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀)、飽和(NH4)2SO實(shí)驗(yàn)步驟:(1)樣品獲取:向新鮮豬血中加入,靜置一段時(shí)間后取上層血漿。

(2)鹽析法粗提蛋白質(zhì)。①向血漿中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的濃度達(dá)到50%,充分混合后靜置、離心,取沉淀物。②向沉淀物中加入適量生理鹽水使之溶解,再向其中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的濃度達(dá)到33%,充分混合后靜置、離心,取沉淀物。③重復(fù)步驟①②2~3次,最后用生理鹽水將沉淀溶解即得粗提品。鹽析粗提取“血漿某白蛋白”的主要原理是,重復(fù)步驟①②的主要目的是。

(3)透析除鹽:將粗提品裝入透析袋,以pH為的緩沖液做透析液,每隔4h更換一次透析液,每次更換前利用奈氏試劑檢測(cè)透析液中NH4+的量。利用緩沖液做透析液的目的是。檢測(cè)中,若觀察到透析液時(shí)(4)凝膠色譜法分離:透析后的樣品經(jīng)凝膠柱洗脫,獲得純凈血漿某白蛋白樣品。(5)相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定:化學(xué)物質(zhì)SDS能使蛋白質(zhì)變性,解聚成單條肽鏈。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中加入一定量的SDS,使電泳遷移率完全取決于肽鏈的分子大小。右圖為本實(shí)驗(yàn)中用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血漿某白蛋白的結(jié)果。根據(jù)電泳結(jié)果,某同學(xué)得出“提取的血漿某白蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論,這種說(shuō)法可靠嗎?理由是

。

解析：(1)為防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c。(2)利用血漿某白蛋白在一定濃度(NH4)2SO4溶液中的溶解度低的特性去除雜蛋白。(3)過(guò)酸、過(guò)堿、溫度過(guò)高都會(huì)使蛋白質(zhì)變性。(5)電泳的原理是利用待分離樣品中