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文檔簡介

MolecularBiology嘎嘎嘎?。?!peptidechainsynthesisinEukaryotes

真核生物肽鏈的合成Author:沈海聰

peptidechainsynthesisinEukaryotes

TheprocessofpeptidechainsynthesisinEukaryotesissimilartothatinPhykayotes. Thelargestdifferencesaretheformationoftranslationinitiationcomplexaswellasthevarietyandnumberofproteinfactorssupposedtobeused(一)真核生物蛋白質(zhì)的合成起始1、primaryelementsneeded:mRNA:單順反子、m7Gppp和poly(A)核糖體:40S小亞基+60S大亞基=80S“活化”的起始tRNA:Met-tRNAiMet翻譯起始因子(Initiationfactor,IF):種類多其他:GTP、Mg2+

Attention:真核生物中與Met結(jié)合的兩種tRNAMet-tRNAimet:具有起始功能,結(jié)合甲硫氨酸并就位于起始密碼子AUG處,參與形成翻譯的起始復(fù)合物Met-tRNAmet:參與肽鏈延長,它與甲硫氨酸結(jié)合,必要時(shí)進(jìn)入核糖體,為延長中的肽鏈添加甲硫氨酸起始因子的種類和功能2、真核生物翻譯起始復(fù)合物形成過程核糖體大、小亞基分離;起始Met-tRNAiMet(即甲硫氨酰tRNA)與小亞基結(jié)合;mRNA與核糖體小亞基結(jié)合;小亞基沿mRNA鏈向3′的方向掃描,定位起始密碼子AUG;核糖體大亞基結(jié)合。40S核糖體小亞基與起始因子eIF-3相結(jié)合,使得核糖體大小亞基分離;eIF-1進(jìn)入A位;在eIF-5-GTP和eIF-2-GTP的幫助下,起始Met-tRNAiMet與40S小亞基相結(jié)合,形成43S前起始復(fù)合物;eIF-4Fcomplex結(jié)合在mRNA的5′-UTR;其中eIF-4E與“帽子”結(jié)構(gòu)結(jié)合,eIF-4G可與eIF-4E及PBP(polyAbindingprotein)結(jié)合,eIF-4A有解旋酶活性;mRNA閉環(huán)翻譯模型PAB,polyAbindingproteineIF-4B與eIF-4F結(jié)合,激活eIF-4A解旋酶活性,去除5′-UT二級結(jié)構(gòu);43S前起始復(fù)合物與mRNA結(jié)合;eIF-4FcomplexeIF-4B43S前起始復(fù)合物沿mRNA向3′端掃描移動并識別起始密碼子AUG;AUGeIF2水解ATP,使eIF3和它自己離開復(fù)合物;大小亞基結(jié)合;eIF5B水解ATP,釋放其他起始因子,形成80S翻譯起始復(fù)合體。3、真、原核生物翻譯起始的區(qū)別真核生物:40S小亞基首先與Met-tRNAiMet相結(jié)合,再與模板mRNA結(jié)合,最后與60S大亞基結(jié)合生成80S起始復(fù)合物。原核生物:30S小亞基首先與mRNA模板相結(jié)合,再與fMet-tRNAfMet(N-甲酰甲硫氨酰-tRNA)結(jié)合,最后與50S大亞基結(jié)合,形成70S起始復(fù)合物。(二)肽鏈的延伸真核生物肽鏈合成的延長過程與原核基本相似,都包含進(jìn)位、轉(zhuǎn)位和移位等三個(gè)步驟。整個(gè)延伸過程除延伸因子種類不同外,真核細(xì)胞核糖體沒有E位,轉(zhuǎn)位時(shí)空載tRNA直接從P位脫落。真核生物延伸因子:EF-1和EF-2原核生物延伸因子:EF-T(EF-Tu,EF-Ts)、EF-GEF-1:含α,β和γ等3個(gè)亞基,α和β(EF-1A)的功能與EF-Tu相似,γ(EF-1B)的功能與EF-Ts相似。即與EF-T相似EF-2:功能與原核生物EF-G相似(三)肽鏈的終止真核生物肽鏈合成的終止過程除釋放因子不同外,其他與原核基本一致。真核生物釋放因子:eRF原核生物釋放因子:RF1、RF2、RF3eRF:一方面可識別UAA、UGA和UAG等所有終止密碼子,另一方面可催化延伸復(fù)合物解體。AP40S

5’mRNAFreetRNAPolypeptideReleasefactorRibosomalSubunitseRFGTPANIMATION多聚核糖體(polyribosomes)在多肽合成過程中,同一條mRNA分子能夠同多個(gè)核糖體結(jié)合,同時(shí)合成若干條多肽鏈,結(jié)合在同一條mRNA上的核糖體就稱為多聚核糖體。----使蛋白質(zhì)合成高速、高效進(jìn)行。電鏡下的觀察到的多肽合成過程在多肽合成過程中,當(dāng)?shù)谝粋€(gè)核糖體離開起始密碼子后

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