醫(yī)學(xué)微生物學(xué)螺旋體課件

第21章螺旋體

(spirochete)一類細(xì)長、柔軟、彎曲呈螺旋狀、運(yùn)動活潑的原核細(xì)胞型微生物介于細(xì)菌與原蟲之間，其基本特征同細(xì)菌p198

名稱螺旋數(shù)螺旋特點(diǎn)舉例致病螺旋體的螺旋特點(diǎn)

密螺旋體

8~14

細(xì)密，規(guī)則；兩端尖直疏螺旋體3~10

不規(guī)則蒼白密螺旋體蒼白亞種鉤端螺旋體數(shù)十個規(guī)則，更細(xì)密；

一端/兩端呈鉤狀問號狀鉤端螺旋體回歸熱疏螺旋體伯氏疏螺旋體第一節(jié)鉤端螺旋體屬

Leptospira

問號狀鉤端螺旋體(L.interrogans)

——鉤端螺旋體病

雙曲鉤端螺旋體(L.biflexa)螺旋體目鉤端螺旋體科鉤端螺旋體屬螺旋體基本結(jié)構(gòu)外膜、內(nèi)鞭毛、細(xì)胞壁、肽聚糖、細(xì)胞膜（內(nèi)膜）、原生質(zhì)柱體（細(xì)胞質(zhì)、原始核質(zhì)）營養(yǎng)要求復(fù)雜，常用含10％兔血清的柯索夫（Korthof）培養(yǎng)基需氧或微需氧，適宜生長溫度為28~30℃，pH7.2~7.6，生長緩慢（8h一代），1～2周后

液體培養(yǎng)基：半透明云霧狀固體培養(yǎng)基：透明，不規(guī)則的扁平菌落2.培養(yǎng)特性屬特異性抗原:糖蛋白或脂蛋白群特異性抗原:菌體內(nèi)部，類脂多糖復(fù)合物型特異性抗原:表面抗原，多糖蛋白復(fù)合物應(yīng)用顯微鏡凝集試驗(yàn)（microscopicagglutinationtest，MAT）和凝集素吸收試驗(yàn)(agglutinationabsorptiontest，AAT)來分血清群和血清型。我國至少發(fā)現(xiàn)有問號狀螺旋體參考株有19血清群75血清型3.抗原與分類致病性致病物質(zhì)---類似細(xì)菌內(nèi)毒素與外毒素內(nèi)毒素樣物質(zhì)(ELS)：毒性低，引起發(fā)熱，炎癥與組織壞死黏附素：溶血毒素：鞘磷脂酶C，引起紅細(xì)胞破壞膠原酶：傳播方式鼠、豬（儲存宿主）——傳染源腎臟繁殖（隱性感染）尿排菌污染水源、土壤人的皮膚、黏膜、消化道、垂直接觸而感染所致疾病——鉤端螺旋體病（鉤體?。┤诵蠊不紓魅静≈虏⌒糟^體穿透侵入皮膚粘膜，在局部繁殖后入血，引起鉤體血癥，產(chǎn)生致病物質(zhì)，損傷全身毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及肝、腎、肺心及中樞神經(jīng)，引起鉤端螺旋體病，出現(xiàn)休克、DIC、黃疸、出血、心腎功能不全、腦膜炎等。臨床上根據(jù)臟器損傷的不同可分為流感傷寒型、肺出血型、黃疸出血型、腎衰竭型等微生物學(xué)檢查法1.病原體檢測標(biāo)本:發(fā)病一周內(nèi)取血液;第二周后取尿液;有腦膜刺激者取腦脊液直接鏡檢：暗視野或鍍銀染色分離培養(yǎng)與鑒定:Korthof培養(yǎng)基培養(yǎng)，MAT和AAT動物接種：幼齡豚鼠或金地鼠腹腔分子生物學(xué)方法：PCR

2.血清學(xué)檢測病初和發(fā)病后2~3周各采血清一次方法:顯微鏡凝集試驗(yàn)(MAT)間接凝集試驗(yàn)防治原則非特異性預(yù)防：防鼠、滅鼠，加強(qiáng)對帶菌家畜的管理，保護(hù)水源特異性預(yù)防：接種多價鉤端螺旋體死疫苗（包含當(dāng)?shù)亓餍兄辏┲委?首選青霉素，注意赫氏反應(yīng)。梅毒螺旋體

（Treponemapallidum，TP)螺旋體細(xì)長，形似細(xì)密的彈簧，螺旋彎曲而規(guī)則，8~14個，兩端尖直，運(yùn)動活潑G-，因其透明，不易著色，故又稱蒼白螺旋體Fontana鍍銀染色法→染成棕褐色

生物學(xué)性狀

形態(tài)與染色目前在人工培養(yǎng)基上尚不能培養(yǎng)。接種兔睪丸或眼前房，兔睪丸活體，家兔上皮細(xì)胞培養(yǎng)，但生長緩慢，約30h分裂一次。兩種菌株：用作梅毒血清學(xué)的診斷抗原

Nichols株(Nicholsstrain):

有毒力，在家兔睪丸或眼前房內(nèi)接種可獲得

Reiter株(Reiterstrain):

失去致病力，轉(zhuǎn)種于含有多種氨基酸的兔睪丸碎片，培養(yǎng)特性抵抗力－極弱對溫度和干燥特別敏感在血液中4oC經(jīng)3d死亡對常用化學(xué)消毒劑亦敏感，1%~2%石炭酸內(nèi)數(shù)分鐘就死亡對青霉素、四環(huán)素、紅霉素或砷劑均敏感先天梅毒（胎傳梅毒）梅毒孕婦通過胎盤傳給胎兒，引起胎兒的全身性感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎出生后為梅毒兒，呈現(xiàn)馬鞍鼻、鋸齒形牙、間質(zhì)性角膜炎、先天性耳聾等特殊體征后天梅毒（獲得性梅毒）分三期

I期梅毒：多見外生殖器，出現(xiàn)無痛性、直徑約1cm的硬性下疳，含有大量梅毒螺旋體。4～8周后，下疳自然愈合。經(jīng)2～3個月無癥狀潛伏期后進(jìn)入第II

期特點(diǎn)：傳染性極強(qiáng)，破壞性小II期梅毒全身皮膚黏膜出現(xiàn)梅毒疹，周身淋巴結(jié)腫大。梅毒疹、淋巴結(jié)腫大內(nèi)有大量梅毒螺旋體。不經(jīng)治療一般在1～3個月后癥狀自然消退而痊愈，但常復(fù)發(fā)。經(jīng)2～4年，又可被激活進(jìn)入第Ⅲ期。特點(diǎn)：感染性強(qiáng)，破壞性小。免疫性屬有菌免疫，傳染性免疫；細(xì)胞免疫為主，體液免疫為輔；梅毒患者的血清中出現(xiàn)兩種抗體：1.抗螺旋體抗體：

2.心脂質(zhì)抗體：又稱反應(yīng)素（reagin）

能與生物組織中的類脂抗原（如牛心?。┌l(fā)生非特異性結(jié)合反應(yīng)，可利用其進(jìn)行血清學(xué)診斷。微生物學(xué)檢查法1.標(biāo)本Ⅰ期梅毒---硬下疳滲出液Ⅱ期梅毒---梅毒疹滲出液或局部淋巴結(jié)抽出液血清2.顯微鏡檢查：暗視野、鍍銀染色、熒光染色3.血清學(xué)診斷

防治原則加強(qiáng)性衛(wèi)生教育和嚴(yán)格社會管理尚無疫苗預(yù)防治療用青霉素等藥物，以血清中抗體轉(zhuǎn)陰為治愈指標(biāo)第三節(jié)疏螺旋體屬（Borrelia）伯氏疏螺旋體(B.burgdorferi)回歸熱疏螺旋體（B.recurrentis)對人致病的有：伯氏疏螺旋體(B.burgdorferi)萊姆?。↙yme）的病原體（一）形態(tài)染色

螺旋稀疏兩端稍尖，3~8個螺旋，運(yùn)動活潑，運(yùn)動活躍。Giemsa或Wright染色均佳一、生物學(xué)性狀Wright染色（二）培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高微需氧，5％～10％CO2促進(jìn)生長，可用BSK培養(yǎng)基培養(yǎng)。生長緩慢，12～18h繁殖一代。培養(yǎng)2～3周，長出細(xì)小而邊緣整齊的小菌落。（三）抗原：外膜表面蛋白（outersurfaceprotein，Osp），具有高度免疫原性，種特異性所致疾病：萊姆病

自然疫源性傳染病儲存宿主：野生和馴養(yǎng)的哺乳動物傳播媒介：硬蜱，我國北方林區(qū)主要是全溝硬蜱叮咬部位可出現(xiàn)一個或數(shù)個慢性移行性紅斑(ECM)，伴有乏力、頭痛、發(fā)熱、頸硬及關(guān)節(jié)炎等。晚期主要表現(xiàn)為慢性關(guān)節(jié)炎、慢性神經(jīng)系統(tǒng)或皮膚異常硬蜱硬蜱慢性移行性紅斑(ECM)以血清學(xué)試驗(yàn)和分子生物學(xué)方法來檢測1）血清學(xué)試驗(yàn)：取血清，ELISA和IFA2）分子生物學(xué)：取皮損、血液等，PCR三、微生物學(xué)檢查法預(yù)防：1）疫區(qū)人員加強(qiáng)個人防護(hù)，避免硬蜱的叮咬。2）滅活疫苗于1992年獲準(zhǔn)在美國家犬中使用。人用重組蛋白疫苗（OspA、OspC）正在臨床試驗(yàn)中治療：1）早期萊姆病可口服四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、羥氨芐青霉素及紅霉素等。2）晚期萊姆病由于多種深部組織損害，故一般用青霉素聯(lián)合頭孢三嗪等靜脈滴注。四、防治原則引起人類回歸熱的病原體。根據(jù)回歸熱傳播媒介不同，分為兩類：1）虱傳回歸熱，或稱流行性回歸熱，其病原體為回歸熱疏螺旋體；

2）蜱傳回歸熱，又稱地方性回歸熱，其病原體多至15種，如赫姆疏螺旋體。我國流行的回歸熱主要是虱傳型。二、回歸熱疏螺旋體

致病性致病過程：經(jīng)3~10天潛伏期，病人突發(fā)高熱，持續(xù)3天退熱；由于螺旋體外膜蛋白易變異，約一周后有出現(xiàn)高熱，如此反復(fù)發(fā)作3～10次左右。

微生物檢查1）取發(fā)熱期外周血1滴，加蓋玻片用暗視野顯微鏡觀察，可見運(yùn)動活潑螺旋體。2）取發(fā)熱期外周血1滴，直接涂片后進(jìn)行Giemsa或Wright染色，光鏡下見為紅細(xì)胞直徑的2～4倍，螺旋稀疏不規(guī)則，呈波狀的螺旋體Wright染色致病螺旋體的分類屬和代表菌引起人類疾病傳播方式或媒介密螺旋體屬（Treponema）

蒼白密螺旋體蒼白亞種梅毒性傳播

蒼白密螺旋體地方亞種地方性梅毒黏膜損傷蒼白密螺旋體極細(xì)亞種雅司病皮膚損傷品他密螺旋體品他病皮膚損傷疏螺旋體屬（Borrelia）

伯氏疏螺旋體萊姆病硬蜱

回歸熱疏螺旋體流行性回歸熱體虱杜通疏螺旋體地方性回歸熱軟蜱奮森疏螺旋體咽峽炎、牙齦炎條件致病鉤端螺旋體屬（Leptospira）

問號狀鉤端螺旋體鉤端螺旋體病接觸疫水

分3個科13個屬思考題1.能引起人致病的螺旋體有哪些屬及代表種？2.簡述鉤端螺旋體的生物學(xué)性狀（形態(tài)染色、培養(yǎng)、抗原分類）及致病性。3.簡述梅毒螺旋體的致病性、免疫性及微生物檢查法。

4.名詞解釋：螺旋體（spirochete）病例分析男性患者，26歲