選修3課件：222《動物細胞融合與單克隆抗體》

專題2細胞工程2.2.2動物細胞融合和單克隆抗體掌握動物細胞融合與植物體細胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。2.簡述動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程。3.了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用，并說出其應(yīng)用實例。

通過復(fù)習(xí)植物體細胞雜交導(dǎo)入新課；首先直接闡明動物細胞融合的概念，再提出動物細胞融合的原理和誘導(dǎo)因素是什么？進入相關(guān)知識點的學(xué)習(xí)；接著由出動物細胞融合的意義引出單克隆抗體的制備，通過讓學(xué)生閱讀資料，找出單克隆抗體的概念，再通觀看視頻讓學(xué)生對單克隆抗體的制備過程有一個初步的印象，然后結(jié)合教材上的圖片，對該過程進行歸納和整理；接著講述單克隆抗體的有點和應(yīng)用；最后通過課堂總結(jié)及課堂檢測，完善內(nèi)化課堂知識。通過視頻展示單克隆抗體的制備過程，并結(jié)合形象的圖片對單克隆抗體的制備過程進行分解和整理，加深學(xué)生對兩次篩選的目的以及單克隆抗體和雜交瘤細胞的特點進行區(qū)分，以此來突破單克隆抗體的制備這一重點和難點。雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生出細胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細胞的融合植物組織培養(yǎng)植物細胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)融合完成的標(biāo)志植物細胞B一、動物細胞融合1.概念：動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。2.原理：細胞膜的流動性

細胞融合是正常的生命活動兩個細胞正在融合

受精作用

動物細胞融合過程示意圖不同DNA的兩個細胞

滅活的病毒有絲分裂兩個完整的雜交細胞3.誘導(dǎo)方法：物理法：化學(xué)法：生物法：滅活的病毒電激等聚乙二醇（PEG)

滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細菌失去感染能力，但并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。4.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。5.應(yīng)用：最重要的用途是制備單克隆抗體主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株主要用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性細胞融合的原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較讀下面一段資料，找出單克隆抗體的概念。

人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細胞可以產(chǎn)生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每個B細胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B細胞進行無性繁殖，即克隆。用單個效應(yīng)B細胞進行克隆，得到的細胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。提示1：對B細胞進行細胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細胞是可以無限增殖的？如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？請嘗試設(shè)計一個方案。提示3：有什么方法能使一個細胞同時具備產(chǎn)生抗體的能力和無限增殖能力呢？一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細胞能無限增殖雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計方案：動物細胞融合技術(shù)單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖的細胞1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實驗單克隆抗體的制備過程雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體二、單克隆抗體的制備1.單克隆抗體的制備過程3.為何要進行兩次篩選？4.如何進行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個雜交瘤細胞。第1次篩選得到雜交瘤細胞（多種）。第2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞群。1.本過程利用了哪些原理？免疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理2.為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。2.單克隆抗體的優(yōu)點：3.單克隆抗體的應(yīng)用特異性強，靈敏度高，可大量制備（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用

具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速（2）用于治療疾病和運載藥物“生物導(dǎo)彈”＝單克隆抗體＋藥物單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭主要用于治療癌癥治療，單克隆抗體作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細胞。兩個“過程”動物細胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導(dǎo)細胞融合的新方法－－滅活病毒一個新細胞－－雜交瘤細胞一個優(yōu)勢－－單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢重點1.動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）

A．動物細胞融合

B．胚胎移植

C．動物細胞培養(yǎng)D．核移植Ｃ２．在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）A．結(jié)果是相同的 B．雜種細胞的形成過程基本相同C．操作過程中酶的作用相同D．誘導(dǎo)融合的手段相同Ｂ３.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（）①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③CB體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的細胞群注射到小鼠腹腔AC

4.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌單克隆抗體的實驗方案：（2）該方案能達到預(yù)期效果嗎？為什么？（4）圖中B為

過程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細胞繼承

的遺傳特性，既能

，又能