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中樞神經(jīng)系統(tǒng)的動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè)方法,動(dòng)物學(xué)論文內(nèi)容摘要:動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè)方式方法是利用動(dòng)物覓食、求生、逃避傷害以及喜暗等本能行為和藹慈善于學(xué)習(xí)的特性來(lái)觀察動(dòng)物的情緒和學(xué)習(xí)記憶,進(jìn)而反映動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能變化的實(shí)驗(yàn)方式方法。本文將從實(shí)驗(yàn)原理、儀器組成、測(cè)試方式方法以及評(píng)價(jià)指標(biāo)等方面對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè)方式方法進(jìn)行扼要綜述。本文關(guān)鍵詞語(yǔ):動(dòng)物行為學(xué),中樞神經(jīng)系統(tǒng)動(dòng)物行為學(xué)研究?jī)?nèi)容包括動(dòng)物領(lǐng)域行為、溝通行為、覓食行為、繁衍行為以及學(xué)習(xí)行為等,動(dòng)物通過(guò)先天本能和后天學(xué)習(xí)來(lái)適應(yīng)環(huán)境變化。利用上述特性設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察動(dòng)物的情緒變化、認(rèn)知功能改變及其影響因素,有助于了解中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用機(jī)制和功能變化,并且動(dòng)物行為學(xué)與神經(jīng)科學(xué)和心理學(xué)等生命科學(xué)的多個(gè)分支學(xué)科互相穿插浸透,從不同角度系統(tǒng)闡釋動(dòng)物行為的產(chǎn)生原因及其機(jī)制。本文針對(duì)常用的幾種中樞神經(jīng)系統(tǒng)動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè)方式方法作一扼要綜述。1迷宮檢測(cè)方式方法1.1Morris水迷宮Morris水迷宮是首選的研究動(dòng)物空間學(xué)習(xí)與記憶能力的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、心理學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和毒理學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域的研究。其原理是利用嚙齒類動(dòng)物天性怕水而又擅長(zhǎng)游泳的特性,連續(xù)訓(xùn)練多日后,使其學(xué)會(huì)找到水池內(nèi)位于水下的逃逸平臺(tái),進(jìn)而進(jìn)行相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能研究。Morris水迷宮由一個(gè)圓形水池(直徑120cm,高度50cm)和一個(gè)逃逸平臺(tái)(直徑10cm,高度22cm)組成。水池分為四個(gè)象限,位于水面上方的四個(gè)象限中間區(qū)域桶壁上分別貼有正方形、圓形、三角形和菱形作為參照?qǐng)D案,任選華而不實(shí)一個(gè)象限正中放置逃逸平臺(tái),水位控制在逃逸平臺(tái)上方1-2cm處,水內(nèi)撒入奶粉或墨汁混勻直至動(dòng)物看不到逃逸平臺(tái)為止,實(shí)驗(yàn)期間水溫均保持在242℃[1],保持參考圖案位置、順序及室內(nèi)光線強(qiáng)度等不變。實(shí)驗(yàn)開(kāi)場(chǎng)前用苦味酸標(biāo)記動(dòng)物頭部,選擇冷暖色調(diào)分析或灰度值分析以便系統(tǒng)跟蹤其運(yùn)動(dòng)軌跡。實(shí)驗(yàn)正式開(kāi)場(chǎng)后,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)遠(yuǎn)離水池,使動(dòng)物看不見(jiàn)實(shí)驗(yàn)者,以防止動(dòng)物將實(shí)驗(yàn)者視為參考物。圖像采集由水面正上方的數(shù)字?jǐn)z像頭全自動(dòng)跟蹤記錄,實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析由系統(tǒng)自動(dòng)統(tǒng)計(jì)處理完成。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)由定位航行實(shí)驗(yàn)(也稱為隱藏平臺(tái)實(shí)驗(yàn))和空間探尋求索實(shí)驗(yàn)兩部分組成。在正式實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練一天,把動(dòng)物面朝池壁放入水中,待其自由游泳2min后取出,擦干水分收入籠中。定位航行實(shí)驗(yàn)于天天上午進(jìn)行,持續(xù)6d。每只動(dòng)物測(cè)試4次,單次測(cè)試時(shí)間為1-2min。動(dòng)物第一次入水象限為逃逸平臺(tái)所在象限的對(duì)面象限,其他3次由不同象限隨機(jī)入水(除逃逸平臺(tái)所在象限外),入水點(diǎn)在每個(gè)象限池壁1/2中點(diǎn)處。動(dòng)物入水后開(kāi)場(chǎng)計(jì)時(shí),從入水到找到逃逸平臺(tái)的時(shí)間即為逃避潛伏期,動(dòng)物找到逃逸平臺(tái)后允許其在平臺(tái)上停留10-20s,未在規(guī)定的1-2min之內(nèi)找到逃逸平臺(tái)的動(dòng)物,逃避潛伏期記為2min,實(shí)驗(yàn)人員幫助動(dòng)物找到平臺(tái),并使其停留10-20s,若動(dòng)物在平臺(tái)停留階段掉落水中則重新計(jì)時(shí)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將動(dòng)物從平臺(tái)取下,休息30s后進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn)。取2-4次測(cè)試成績(jī)的平均值作為天天每只動(dòng)物的測(cè)試成績(jī)[2,3]。主要的評(píng)價(jià)指標(biāo)包括逃避潛伏期、游泳軌跡、游泳速度、總運(yùn)動(dòng)距離以及搜索策略,用以評(píng)價(jià)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力[4]。空間探尋求索實(shí)驗(yàn)用于測(cè)定動(dòng)物的空間記憶能力,定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)束后24-48h內(nèi),撤去逃逸平臺(tái),開(kāi)場(chǎng)空間探尋求索實(shí)驗(yàn),動(dòng)物的入水點(diǎn)在原平臺(tái)象限的對(duì)面象限[5]。動(dòng)物在水池內(nèi)自由游泳1-2min,記錄動(dòng)物在目的象限(原平臺(tái)所在象限)的滯留時(shí)間以及進(jìn)入這個(gè)象限的次數(shù)。選擇動(dòng)物原平臺(tái)象限滯留時(shí)間百分比、經(jīng)過(guò)平臺(tái)次數(shù)、第一次經(jīng)過(guò)平臺(tái)時(shí)間、有效區(qū)域運(yùn)動(dòng)時(shí)間及進(jìn)入次數(shù)、游泳總路程以及游泳平均速度等作為評(píng)價(jià)指標(biāo),用來(lái)評(píng)價(jià)動(dòng)物空間記憶能力的保持情況[4]。除此之外,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要改良實(shí)驗(yàn)方案,例如間歇出現(xiàn)平臺(tái)或放置雙平臺(tái),能夠提高對(duì)動(dòng)物空間學(xué)習(xí)和記憶能力測(cè)量的敏感性。1.2八臂迷宮八臂迷宮的實(shí)驗(yàn)原理是在動(dòng)物饑餓狀態(tài)下,連續(xù)訓(xùn)練多日,其可憑記憶快速選擇出正確放置食物的臂進(jìn)而獲得食物,廣泛用于檢測(cè)給藥或研究動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶功能的變化情況。八臂迷宮的實(shí)驗(yàn)裝置由平臺(tái)和八條放射狀臂(長(zhǎng)425mm寬100mm高225mm)組成[6],每條臂末端有喂食槽(直徑25mm,深度18mm)。正式實(shí)驗(yàn)前兩天進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練,放置若干食物在平臺(tái)區(qū)及各臂,在八臂迷宮平臺(tái)區(qū)同時(shí)放入3-4只動(dòng)物,允許它們自由活動(dòng)和攝食,時(shí)間為10min,天天上下午各一次,持續(xù)2d,以適應(yīng)迷宮內(nèi)部環(huán)境。動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)開(kāi)場(chǎng)前24h禁食,之后每日限制性給食,自由攝水,使其體重在實(shí)驗(yàn)期間保持在原體重的85%左右。實(shí)驗(yàn)共歷時(shí)6d,天天上午進(jìn)行測(cè)試,每只動(dòng)物測(cè)試一次,單次測(cè)試時(shí)間為10min,在八條臂中隨機(jī)選取四條臂作為投食臂,在喂食槽內(nèi)放置食物且實(shí)驗(yàn)期間投食臂位置均保持不變,實(shí)驗(yàn)期間室內(nèi)光線強(qiáng)度以及參考物也均保持不變。實(shí)驗(yàn)者將動(dòng)物放置于平臺(tái)區(qū),用透明罩罩住動(dòng)物,10s后將透明罩取走,動(dòng)物任意選擇方向,同時(shí)開(kāi)場(chǎng)計(jì)時(shí)直至動(dòng)物吃完四條臂內(nèi)的食物或10min后將動(dòng)物取出,動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中再次進(jìn)入已經(jīng)吃過(guò)食物的臂的次數(shù)為工作記憶錯(cuò)誤,進(jìn)入未放置食物的臂的次數(shù)為參考記憶錯(cuò)誤[7]。實(shí)驗(yàn)利用迷宮區(qū)上方的數(shù)字?jǐn)z像頭全自動(dòng)跟蹤記錄,可選取潛伏期、工作記憶錯(cuò)誤、參考記憶錯(cuò)誤、總?cè)氡鄞螖?shù)、正確率以及軌跡圖等作為學(xué)習(xí)記憶的評(píng)價(jià)指標(biāo)。1.3高架十字迷宮高架十字迷宮是利用動(dòng)物對(duì)陌生環(huán)境的探尋求索欲和對(duì)高懸開(kāi)臂的恐懼構(gòu)成探尋求索和回避的矛盾沖突行為,用來(lái)評(píng)價(jià)嚙齒類動(dòng)物焦慮狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)方式方法。當(dāng)動(dòng)物從位置較高的開(kāi)臂俯視時(shí),會(huì)產(chǎn)生恐懼不安的心理,另外,嚙齒類動(dòng)物的嗜暗性使其傾向于在黑暗的閉臂中活動(dòng),但對(duì)新奇陌生環(huán)境的好奇又促使其在開(kāi)臂中活動(dòng),這就產(chǎn)生了矛盾沖突行為,進(jìn)而導(dǎo)致了動(dòng)物的焦慮[8],比擬動(dòng)物在開(kāi)臂和閉臂內(nèi)的滯留時(shí)間和路程能夠評(píng)價(jià)動(dòng)物的焦慮行為[9]。高架十字迷宮由開(kāi)放和封閉的兩條十字形穿插臂組成,距離地面有一定的高度。開(kāi)臂和閉臂的長(zhǎng)度均為50cm,寬度均為10cm。穿插部分也稱為區(qū),為長(zhǎng)10cm寬10cm的中平臺(tái)區(qū)。為避免應(yīng)激對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響,動(dòng)物應(yīng)提早適應(yīng)周圍環(huán)境3h左右,以緩解其緊張情緒。實(shí)驗(yàn)開(kāi)場(chǎng)后,將動(dòng)物面朝開(kāi)臂放于迷宮區(qū),實(shí)驗(yàn)者迅速遠(yuǎn)離迷宮裝置,利用視頻記錄系統(tǒng)記錄動(dòng)物的活動(dòng),時(shí)間為5min,每只動(dòng)物只檢測(cè)一次。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,迷宮裝置需用75%乙醇擦拭,以消除殘留的動(dòng)物氣味,以免影響其他動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果[10]。圖像采集由數(shù)字?jǐn)z像頭全自動(dòng)跟蹤記錄,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果分析由系統(tǒng)自動(dòng)統(tǒng)計(jì)處理完成。選取動(dòng)物進(jìn)入開(kāi)臂和閉臂次數(shù)、兩臂運(yùn)動(dòng)距離、總?cè)氡鄞螖?shù)以及滯留時(shí)間等作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。1.4開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)與高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)原理相類似,開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)是利用動(dòng)物在開(kāi)放敞箱內(nèi)傾向于呆在角落或靠邊行走,但喜歡探尋求索新奇環(huán)境的天性使其傾向于在區(qū)活動(dòng),因而導(dǎo)致矛盾沖突行為的產(chǎn)生。開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)可用以檢測(cè)動(dòng)物的焦慮程度和自主活動(dòng)能力[11],評(píng)價(jià)藥物抗焦慮和致焦慮作用,廣泛應(yīng)用于藥理學(xué)、生理學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)等研究領(lǐng)域。開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)裝置是大小為長(zhǎng)60cm寬60cm高60cm的頂部開(kāi)口的箱體,內(nèi)面箱底均分為25個(gè)方格,位于箱壁一圈的方格稱為外周格,內(nèi)部方格稱為格。在箱體一側(cè)面外設(shè)有反光鏡,用以記錄動(dòng)物的站立次數(shù)。實(shí)驗(yàn)時(shí),將動(dòng)物放在實(shí)驗(yàn)裝置區(qū),利用自動(dòng)視頻監(jiān)控系統(tǒng)記錄5-15min內(nèi)動(dòng)物的自主活動(dòng)情況,動(dòng)物完成實(shí)驗(yàn)后用75%乙醇擦拭實(shí)驗(yàn)裝置,去除氣味,以免對(duì)其他動(dòng)物造成影響[12]。開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)包括穿越格子數(shù)、格運(yùn)動(dòng)距離、停留時(shí)間、站立次數(shù)、梳理毛發(fā)次數(shù)以及糞便顆粒數(shù)等。動(dòng)物的穿越格子數(shù)和站立次數(shù)能夠反映其自主活動(dòng)能力,動(dòng)物的格運(yùn)動(dòng)距離、停留時(shí)間、梳理毛發(fā)次數(shù)以及糞便顆粒數(shù)等能夠反映其焦慮情緒[13]。1.5T型迷宮T型迷宮廣泛應(yīng)用于研究不同腦區(qū)對(duì)工作記憶、條件辨別學(xué)習(xí)以及交替行為等的影響,與藥物研制或毒理學(xué)研究密切相關(guān)。與八臂迷宮實(shí)驗(yàn)原理類似,T型迷宮利用食物誘導(dǎo),進(jìn)而對(duì)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶及空間定位能力進(jìn)行分析。T型迷宮由兩條目的臂(長(zhǎng)46cm寬10cm高10cm)和一條垂直于兩條目的臂的起始臂(長(zhǎng)71cm寬10cm高10cm)組成,目的臂末端設(shè)有食物槽,起始臂末端有個(gè)起始箱,起始箱和起始臂之間由一隔板相隔離。實(shí)驗(yàn)前限制動(dòng)物飲食以使其體重保持在原體重的85%左右。實(shí)驗(yàn)適應(yīng)階段讓動(dòng)物熟悉迷宮并學(xué)會(huì)跑到左右目的臂盡頭來(lái)獲取食物,允許每只動(dòng)物在迷宮中滯留20-30min。實(shí)驗(yàn)正式開(kāi)場(chǎng)后,每只動(dòng)物進(jìn)行10回實(shí)驗(yàn),每回包括強(qiáng)迫次和選擇次各一次,時(shí)間間隔60s。強(qiáng)迫次為隨機(jī)選取左右方向各五次,按選好的方向?qū)⒏舭宸旁诜悄康姆较騻?cè),阻止動(dòng)物進(jìn)入非目的方向臂,在食物槽內(nèi)放置一粒食物,待動(dòng)物進(jìn)入目的臂吃完食物后將其放回籠內(nèi)。30s后開(kāi)場(chǎng)選擇次實(shí)驗(yàn),將隔板移開(kāi),兩條臂均開(kāi)放,將鼠放至起始臂,動(dòng)物將四肢置于目的臂內(nèi)定為一次選擇,觀察記錄動(dòng)物所選擇的臂,如選擇方向與強(qiáng)迫次方向一樣,則給一粒食物作為獎(jiǎng)勵(lì),若不同則無(wú)獎(jiǎng)勵(lì),并讓其在該臂滯留10s,記為一次工作記憶錯(cuò)誤[14]。圖像采集由數(shù)字?jǐn)z像頭全自動(dòng)跟蹤記錄,實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析由系統(tǒng)自動(dòng)統(tǒng)計(jì)處理完成。T型迷宮主要評(píng)價(jià)指標(biāo)是動(dòng)物工作記憶錯(cuò)誤次數(shù)和完成實(shí)驗(yàn)所需的時(shí)間。1.6Y型迷宮Y型迷宮主要用于測(cè)試動(dòng)物空間識(shí)別型學(xué)習(xí)記憶和逃避條件反射能力[15],在研究老年癡呆發(fā)病機(jī)理和藥物研發(fā)方面有著廣泛的應(yīng)用,實(shí)驗(yàn)原理是嚙齒類動(dòng)物天性喜歡陰暗的角落,給予電刺激促使其遠(yuǎn)離陰暗區(qū),逃往有燈光照射的安全區(qū)。實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物利用本身所處空間位置與外界參考物進(jìn)而獲得識(shí)別方位的能力[16]。訓(xùn)練后,當(dāng)燈亮起時(shí),動(dòng)物將逃往安全區(qū)進(jìn)而躲避電擊。Y型迷宮是一個(gè)長(zhǎng)50cm寬10cm高30cm的三等臂相接裝置,臂間夾角均為120?[17],底部為可通電金屬棒,每臂末端有信號(hào)燈,燈亮?xí)r表示該臂未通電為安全區(qū)域,另外兩臂為通電狀態(tài),電壓一般控制在50-70V之間,選取能使動(dòng)物逃避而又未導(dǎo)致應(yīng)激狀態(tài)的電壓值,淘汰對(duì)電刺激過(guò)于敏感和不敏感的動(dòng)物[18]。每只動(dòng)物在裝置內(nèi)適應(yīng)3min后正式開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn),電擊延時(shí)為5s,隨機(jī)變換安全區(qū)域,動(dòng)物立即逃到安全區(qū)為正確反響,下次測(cè)試起步區(qū)為上一次安全區(qū)所在臂,連續(xù)20次實(shí)驗(yàn)中至少18次正確即為學(xué)會(huì)。運(yùn)用同樣方式方法,在學(xué)會(huì)24h后再次進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以測(cè)試動(dòng)物記憶的保持情況。每只動(dòng)物完成一次實(shí)驗(yàn)后用75%乙醇擦拭實(shí)驗(yàn)裝置,去除氣味以免對(duì)其他動(dòng)物造成影響。視頻分析系統(tǒng)可實(shí)時(shí)錄像并自動(dòng)統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)主要評(píng)價(jià)指標(biāo)為動(dòng)物學(xué)會(huì)所需訓(xùn)練天數(shù)和次數(shù),以及正確反響次數(shù)比率[19]。動(dòng)物學(xué)會(huì)所需訓(xùn)練天數(shù)及次數(shù)越少,證明動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力越強(qiáng),學(xué)會(huì)24h后再次測(cè)試時(shí),正確反響次數(shù)比率越高講明動(dòng)物記憶保持能力越強(qiáng)。1.7Barnes迷宮Barnes迷宮主要用于檢測(cè)動(dòng)物對(duì)目的的空間記憶能力,廣泛應(yīng)用于與應(yīng)激相關(guān)的記憶研究以及基因敲除小鼠的行為表型研究中。與高架十字迷宮和八臂迷宮相類似,Barnes迷宮同樣是利用嚙齒類動(dòng)物喜歡黑暗角落且探尋求索欲強(qiáng)的特性設(shè)計(jì)而成。Barnes迷宮實(shí)驗(yàn)裝置是一個(gè)可旋轉(zhuǎn)的圓形平臺(tái)(直徑122cm,高度140cm),其周邊有18個(gè)或40個(gè)等距離小圓洞,小圓洞直徑為10cm或5cm,選擇一個(gè)洞作為目的洞,在其底部放置一暗箱供動(dòng)物隱藏[20]。實(shí)驗(yàn)前一天進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練,將單只動(dòng)物由目的洞放至暗箱,停留4min,使其熟悉實(shí)驗(yàn)裝置。實(shí)驗(yàn)開(kāi)場(chǎng)時(shí),先將動(dòng)物放至圓形平臺(tái)處,用透明罩罩住動(dòng)物5s,打開(kāi)透明罩使其自由選擇方向,并開(kāi)場(chǎng)計(jì)時(shí),動(dòng)物四肢均位于暗箱內(nèi)時(shí),允許其在暗箱內(nèi)停留30-120s,記為一次正確選擇,如在4min內(nèi)未找到暗箱,實(shí)驗(yàn)者將其放入暗箱并停留30-120s,實(shí)驗(yàn)歷時(shí)5-6d[21]。為防止動(dòng)物氣味追蹤找到暗箱,每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用75%乙醇擦拭平臺(tái)并隨機(jī)旋轉(zhuǎn)迷宮(暗箱所處空間位置始終保持不變),以免氣味對(duì)其他動(dòng)物造成影響。圖像采集由數(shù)字?jǐn)z像頭全自動(dòng)跟蹤記錄,實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析由系統(tǒng)自動(dòng)統(tǒng)計(jì)處理完成。Barnes迷宮利用動(dòng)物找到目的洞的潛伏期、進(jìn)入錯(cuò)誤洞口次數(shù)以及總探尋求索次數(shù)和軌跡圖等作為主要的評(píng)價(jià)指標(biāo),來(lái)反映動(dòng)物的空間記憶能力。2穿梭箱穿梭箱是常用來(lái)評(píng)價(jià)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶和行為改變的一種實(shí)驗(yàn)方式方法。通過(guò)聲音(光)和電擊刺沖動(dòng)物,使其學(xué)會(huì)逃避,構(gòu)成條件反射,進(jìn)而評(píng)估動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的改變[22]。實(shí)驗(yàn)裝置為一長(zhǎng)50cm寬16cm高18cm的箱子,箱底部為可通電金屬柵,箱底部分有一隔板將箱子分成左右兩部分。實(shí)驗(yàn)開(kāi)場(chǎng)前一天的適應(yīng)性訓(xùn)練時(shí)間為10min,允許動(dòng)物在箱內(nèi)自由活動(dòng)。正式開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),動(dòng)物在箱內(nèi)適應(yīng)5min后,被放置于電擊區(qū),10s蜂鳴音后給予10s電刺激(電流強(qiáng)度30V,50HZ),如蜂鳴音響起時(shí),動(dòng)物逃往安全區(qū),記為主動(dòng)回避反響,被電擊10s內(nèi)未移動(dòng)位置或逃往安全區(qū),記為被動(dòng)回避反響。實(shí)驗(yàn)共歷時(shí)10d,天天訓(xùn)練30-50次[23]。通過(guò)計(jì)算機(jī)視頻控制系統(tǒng)和自動(dòng)分析軟件處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可選取主動(dòng)回避反響次數(shù)及時(shí)間、被動(dòng)回避反響次數(shù)以及主動(dòng)回避率等作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。3跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)將嚙齒類動(dòng)物置于跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)反響箱內(nèi),由于天性使其更偏愛(ài)探尋求索箱體邊緣海外角落位置。與穿梭箱實(shí)驗(yàn)原理類似,跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)是以電擊為刺激促使動(dòng)物被動(dòng)回避進(jìn)而建立條件反射的一種行為學(xué)檢測(cè)方式方法,主要用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物干涉效果的評(píng)價(jià)。跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)裝置由方形反響箱和位于華而不實(shí)心的高站臺(tái)組成,箱底部安有銅柵能夠通電。在反響箱內(nèi)動(dòng)物會(huì)為了逃避電擊而主動(dòng)跳上站臺(tái),若動(dòng)物跳下站臺(tái)將會(huì)再次遭到電擊,促使其再次跳回站臺(tái)。動(dòng)物在正式實(shí)驗(yàn)開(kāi)場(chǎng)前進(jìn)入反響箱內(nèi)適應(yīng)3-5min。實(shí)驗(yàn)時(shí),動(dòng)物遭到穩(wěn)定電壓電擊后[24],立即跳至平臺(tái)上,實(shí)驗(yàn)時(shí)間為5min,若動(dòng)物在5min內(nèi)沒(méi)有能跳上平臺(tái)則淘汰該動(dòng)物。24h后再次測(cè)試,實(shí)驗(yàn)時(shí)間3-5min。圖像采集由數(shù)字?jǐn)z像頭全自動(dòng)跟蹤記錄,實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析由系統(tǒng)自動(dòng)統(tǒng)計(jì)處理完成。選擇錯(cuò)誤跳下平臺(tái)次數(shù)作為動(dòng)物的學(xué)習(xí)評(píng)價(jià)指標(biāo),選取動(dòng)物24h后再測(cè)試實(shí)驗(yàn)中第一次跳下平臺(tái)的時(shí)間和次數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)動(dòng)物記憶的保持能力。行為學(xué)檢測(cè)方式方法能夠直接準(zhǔn)確地反映出動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的變化情況,然而實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬、性別、實(shí)驗(yàn)間隔、糞便、氣味以及實(shí)驗(yàn)時(shí)間段等均可能會(huì)影響動(dòng)物的行為方式,進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因而,怎樣根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇恰當(dāng)?shù)膭?dòng)物行為學(xué)檢測(cè)方式方法就顯得尤為重要。以下為參考文獻(xiàn)[1]SunZZ,ChenZB,JiangH,etal.AlterationofAmetabolismrelatedmolecul
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