新藥開(kāi)發(fā)中藥物相互作用研究終詳解演示文稿

新藥開(kāi)發(fā)中藥物相互作用研究終詳解演示文稿第一頁(yè)，共四十七頁(yè)。（優(yōu)選）新藥開(kāi)發(fā)中藥物相互作用研究終第二頁(yè)，共四十七頁(yè)。目的：①判定試驗(yàn)性新藥與其他藥物之間是否存在潛在的相互作用：

②若存在，是否表明要采取劑量調(diào)整、額外的治療監(jiān)測(cè)、聯(lián)用禁忌或者其他降低危險(xiǎn)的措施。內(nèi)容：①鑒別其主要消除路徑；②藥物分布中酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的作用程度；③描述藥物-藥物相互作用的機(jī)制。第三頁(yè)，共四十七頁(yè)。第四頁(yè)，共四十七頁(yè)。一般策略第五頁(yè)，共四十七頁(yè)。體外研究

1.藥物代謝酶的鑒別

體外實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)重組P450酶肝微粒體肝細(xì)胞第六頁(yè)，共四十七頁(yè)。代謝酶介導(dǎo)的主要消除途徑可依據(jù)決策樹(shù)進(jìn)行確證和進(jìn)一步研究。但特定條件下代謝酶介導(dǎo)的次要消除途徑也需要進(jìn)一步研究，在一些特殊群體中，這些酶會(huì)產(chǎn)生重要影響

例如：①腎臟功能障礙的患者服用主要通過(guò)腎臟消除的藥物；②某酶的慢代謝型人服用由該酶代謝的藥物；③患者在同時(shí)服用介導(dǎo)次要消除途徑的代謝酶的強(qiáng)烈抑制劑。第七頁(yè)，共四十七頁(yè)。

在確定藥物是否會(huì)抑制某一特定CYP酶的體外試驗(yàn)中，可將藥物與該酶的探針底物共孵育

對(duì)于可逆性抑制劑，當(dāng)抑制劑在酶活性位點(diǎn)的濃度接近或超過(guò)Ki值時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生明顯的抑制作用。

[I]/Ki值預(yù)測(cè)體內(nèi)相互作用是否存在若[I]/Ki比值越大，相互作用的可能性越大。若[I]/Ki值大于0.1,則有可能存在相互作用，有必要作進(jìn)一步的體內(nèi)研究。

IC50：酶催化反應(yīng)被抑制達(dá)到50%最大抑制作用時(shí)抑制劑的濃度2.確認(rèn)受試藥物是否是代謝酶的抑制劑或誘導(dǎo)劑第八頁(yè)，共四十七頁(yè)。對(duì)于機(jī)制性抑制劑，由于其抑制作用具有時(shí)間依賴性，要在加入底物前，對(duì)抑制劑預(yù)孵育30min。若產(chǎn)物生成率既有時(shí)間依賴性又有濃度依賴性，則說(shuō)明該抑制劑為機(jī)制性抑制劑。若體外研究發(fā)現(xiàn)某抑制劑的抑制作用具有時(shí)間依賴性，則需要進(jìn)行進(jìn)一步的體內(nèi)研究。第九頁(yè)，共四十七頁(yè)。體外誘導(dǎo)試驗(yàn)的模型--原代肝細(xì)胞。在評(píng)價(jià)藥物是否能誘導(dǎo)某一P450酶時(shí)，需要陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。陽(yáng)性對(duì)照：使用有效的誘導(dǎo)劑（即濃度<500μmol/L時(shí)，能使催化活性增加2倍以上的誘導(dǎo)劑），可判斷來(lái)源于不同個(gè)體的肝細(xì)胞酶活性是否存在差異。

2.確認(rèn)受試藥物是否是代謝酶的抑制劑或誘導(dǎo)劑第十頁(yè)，共四十七頁(yè)。試驗(yàn)藥引起酶活性的改變與陽(yáng)性對(duì)照相比≥40%時(shí)，可視為酶誘導(dǎo)劑。

EC50值：產(chǎn)生50%最大誘導(dǎo)作用時(shí)的有效藥物濃度。其他一些體外鑒定酶誘導(dǎo)作用的實(shí)驗(yàn)方法，如：用Western免疫印跡法或免疫沉淀法來(lái)測(cè)定酶蛋白含量的變化，用RT-PCR在mRNA水平測(cè)定酶含量的變化，或者進(jìn)行受體基因試驗(yàn)。但是這些試驗(yàn)只能提供支持性的資料，并不一定能體現(xiàn)酶活性。實(shí)驗(yàn)方法%第十一頁(yè)，共四十七頁(yè)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)研究群體底物和作用藥物的選擇給藥途徑給藥劑量研究終點(diǎn)統(tǒng)計(jì)方面的考慮3.體內(nèi)研究第十二頁(yè)，共四十七頁(yè)。

3.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康?，可采用以下幾種設(shè)計(jì)方法：①隨機(jī)交叉法（如先服用S后服用S+I組和先服用S+I后服用S組）；②同種序貫交叉法（總是先服用S后服用S+I,或者相反）；③平行設(shè)計(jì)（一組服用S，另一組服用S+I）。第十三頁(yè)，共四十七頁(yè)。

①如果實(shí)驗(yàn)需要達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度而底物或作用藥物和（或）其代謝物的半衰期較長(zhǎng)，此時(shí)可以給予負(fù)荷劑量以迅速達(dá)到穩(wěn)態(tài)，也可以考慮特殊的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，比如選擇同種序貫交叉法或者平行設(shè)計(jì)法，而不是隨機(jī)交叉法；

②對(duì)于一個(gè)快速可逆的抑制劑，其服用時(shí)間應(yīng)該在測(cè)定當(dāng)天服用底物前或同時(shí)服用，這樣才能增加其敏感性。

③如果對(duì)聯(lián)合用藥方案中的兩種藥物彼此相互作用效應(yīng)進(jìn)行評(píng)估，可以在兩個(gè)獨(dú)立試驗(yàn)進(jìn)行，也可以在同一個(gè)試驗(yàn)中進(jìn)行，試驗(yàn)可設(shè)計(jì)為隨機(jī)三階段交叉、平行分組和同種序貫交叉。

設(shè)計(jì)方案時(shí)注意：第十四頁(yè)，共四十七頁(yè)。④當(dāng)涉及共同抑制或誘導(dǎo)時(shí)，給藥時(shí)間至關(guān)重要。例如，如果受試藥物為代謝酶和OATP（有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽）共有底物，以利福平作（OATP抑制劑）為酶的誘導(dǎo)劑時(shí)，受試藥物和利福平同時(shí)給藥可能會(huì)造成對(duì)誘導(dǎo)作用的低估，因此推薦底物受試藥物推遲給藥，但推遲的最佳時(shí)間需要試驗(yàn)確定。另外，在撤掉相互作用藥物之后，考察其對(duì)底物的影響作用也是很重要的。⑤為避免試驗(yàn)中不確定因素對(duì)結(jié)果的影響，必須嚴(yán)格控制飲食。⑥在涉及到代謝酶的遺傳藥理學(xué)（基因多態(tài)性）的不同基因亞型上的藥物相互作用可能有所不同，應(yīng)在適當(dāng)時(shí)機(jī)進(jìn)行針對(duì)性研究。第十五頁(yè)，共四十七頁(yè)。選擇健康受試者，研究結(jié)果可以推論到患者群體?；诎踩钥紤]，有時(shí)不能采用健康受試者進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)需要使用藥效學(xué)終點(diǎn)時(shí)，需要采用受試藥物擬用患者進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)實(shí)驗(yàn)涉及具有顯著基因多態(tài)性的P450酶（CYP2D6、2C9、2C19）時(shí)，要考慮藥物在不同代謝類型人群中可能存在的差異。

3.2實(shí)驗(yàn)群體第十六頁(yè)，共四十七頁(yè)。3.3底物和作用藥物的選擇①受試藥物作為CYP酶的底物

在研究受試藥物的代謝可能受到抑制或誘導(dǎo)（即作為底物）時(shí)，相互作用藥物應(yīng)首先選用所研究途徑的強(qiáng)抑制劑或誘導(dǎo)劑作為相互作用藥物。例如，若受試藥物被CYP3A代謝，則可選擇酮康唑和利福平分別作為抑制劑和誘導(dǎo)劑。如果試驗(yàn)結(jié)果是陰性，則可認(rèn)為對(duì)于這一代謝途徑不存在具有臨床重要性的藥物-藥物相互作用；若結(jié)果為陽(yáng)性，則需選用其他較弱的抑制劑或誘導(dǎo)劑進(jìn)一步研究。若受試藥物經(jīng)具有多態(tài)性的酶代謝，則受試藥物在慢代謝型人群和快代謝型人群中藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的對(duì)比可以替代這一代謝途徑的研究。第十七頁(yè)，共四十七頁(yè)。②受試藥物作為CYP酶的抑制劑或誘導(dǎo)劑

一般應(yīng)選用敏感底物，以觀察到受試藥物最大的影響作用。如①CYP3A：咪達(dá)唑侖；②CYP1A2：茶堿；③CYP2B6：安非他酮；④CYP2C8：瑞格列奈；⑤CYP2C9：華法林；⑥CYP2C19：奧美拉唑；⑦CYP2D6：地昔帕明。如果最初階段的研究表明受試藥物可以抑制或誘導(dǎo)敏感底物的代謝，可根據(jù)合并使用的可能性選取其他底物做進(jìn)一步研究；如果試驗(yàn)結(jié)果為陰性，則可推斷受試藥物對(duì)次敏感底物的代謝沒(méi)有影響。

3.3底物和作用藥物的選擇第十八頁(yè)，共四十七頁(yè)。受試藥物為CYP酶的抑制劑，可依據(jù)其對(duì)敏感底物代謝的抑制程度進(jìn)行分類。以CYP3A酶抑制劑為例：如果受試藥物使口服咪達(dá)唑侖或其他底物的AUC升高大于等于5倍，則屬?gòu)?qiáng)抑制劑；如果AUC升高在2～5倍間，則為中等強(qiáng)度抑制劑；如果AUC升高在1.25～2倍間,則為弱抑制劑。受試藥物既是某CYP酶的抑制劑又是其誘導(dǎo)劑（如利托那韋對(duì)于CYP3A），則需警告由該藥引起的相互作用具有不確定性。3.底物和作用藥物的選擇第十九頁(yè)，共四十七頁(yè)。在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中受試者同時(shí)服用多種CYP酶底物（即雞尾酒模式）考慮到下列因素：一種特定酶的底物對(duì)該酶具有較高的選擇性；底物之間沒(méi)有相互作用發(fā)生；受試者的數(shù)量達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。這種雞尾酒實(shí)驗(yàn)的陰性結(jié)果可以免除對(duì)其中某個(gè)具體酶的進(jìn)一步評(píng)價(jià)，然而陽(yáng)性結(jié)果則需要進(jìn)一步的體內(nèi)研究。③“雞尾酒”（cocktail）法第二十頁(yè)，共四十七頁(yè)。3.4給藥途徑

對(duì)于受試藥物，給藥途徑一般與擬臨床應(yīng)用的給藥方式一致。如果正開(kāi)發(fā)多種給藥途徑，則是否有必要針對(duì)所有途徑進(jìn)行研究應(yīng)取決于預(yù)期的相互作用機(jī)制以及相應(yīng)的原形藥物和代謝物濃度-時(shí)間曲線的相似性。第二十一頁(yè)，共四十七頁(yè)。3.5給藥劑量

對(duì)于底物和作用藥物來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)該盡可能將相互作用的結(jié)果最大化。

作用藥物（抑制劑或誘導(dǎo)劑）使用最大安全劑量和最短給藥間隔?？紤]到底物血藥濃度升高的安全性問(wèn)題而使用低于臨床常用劑量的給藥方案時(shí)，體內(nèi)藥物相互作用研究方案應(yīng)在結(jié)果報(bào)告中進(jìn)行討論。第二十二頁(yè)，共四十七頁(yè)。3.6研究終點(diǎn)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的變化通常被用來(lái)評(píng)估藥物-藥物相互作用的臨床重要性。調(diào)查結(jié)果的解釋取決于在普通人群或特定人群中，劑量/濃度和濃度/響應(yīng)關(guān)系的一個(gè)很好的理解。

在某些情況下，在藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)基礎(chǔ)上，依賴于藥效學(xué)終點(diǎn)可能是有效的，包括INR測(cè)量或QT間期的測(cè)量。第二十三頁(yè)，共四十七頁(yè)。

底物的暴露指標(biāo)（AUC、Cmax、達(dá)峰時(shí)間Tmax等）普遍應(yīng)用于相互作用研究，計(jì)算得藥動(dòng)學(xué)參數(shù)（清除率、分布容積和半衰期等）有助于理解試驗(yàn)結(jié)果。在某些情況下，抑制劑或誘導(dǎo)劑的這些指標(biāo)也可能有價(jià)值，尤其是在評(píng)估兩種試驗(yàn)藥物彼此之間可能的相互作用時(shí)。3.6研究終點(diǎn)第二十四頁(yè)，共四十七頁(yè)。在某些情況下，對(duì)于劑量、血藥濃度水平和效應(yīng)之間相互關(guān)系的理解可能造成某些藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)和/或參數(shù)更受關(guān)注。

例如：如果某種臨床結(jié)果（如使用擬交感神經(jīng)藥物造成的心動(dòng)過(guò)速）與峰濃度緊密相關(guān)，那么Cmax或其他早期暴露指標(biāo)更為適用；相反，如果臨床結(jié)果與吸收程度關(guān)系密切，則應(yīng)選擇AUC。

3.6研究終點(diǎn)第二十五頁(yè)，共四十七頁(yè)。采樣的頻率應(yīng)足以準(zhǔn)確測(cè)定原形藥物及其代謝物的相關(guān)指標(biāo)和/或參數(shù)。

對(duì)于底物，對(duì)其相關(guān)代謝產(chǎn)物進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)行為的研究非常重要。對(duì)于這些代謝產(chǎn)物的研究有助于區(qū)分抑制劑或誘導(dǎo)劑對(duì)不同CYP酶介導(dǎo)的代謝途徑的影響。3.6研究終點(diǎn)第二十六頁(yè)，共四十七頁(yè)。藥動(dòng)學(xué)終點(diǎn)指標(biāo)一般足以進(jìn)行代謝性藥物-藥物相互作用研究。不過(guò)，在受關(guān)注的底物研究終點(diǎn)的藥動(dòng)學(xué)/藥效學(xué)關(guān)系尚未建立，或者藥效學(xué)變化不僅僅由藥動(dòng)學(xué)相互作用導(dǎo)致（如奎寧丁和三環(huán)類抗抑郁藥的心血管累加效應(yīng)）時(shí)，藥效學(xué)指標(biāo)有時(shí)可以提供其他有價(jià)值的信息。3.6研究終點(diǎn)第二十七頁(yè)，共四十七頁(yè)。3.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方面的考慮

研究的結(jié)果應(yīng)以有相互作用藥物（S+I）和沒(méi)有相互作用藥物（S）情況下得到的藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)的幾何均數(shù)比值的90%置信區(qū)間進(jìn)行報(bào)告。置信區(qū)間是對(duì)（S+I）和（S）情況下系統(tǒng)暴露指標(biāo)比值的分布的估計(jì)，并表明相互作用強(qiáng)度的概率估計(jì)。相比之下，這些研究不適于進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，這是由于較小的、持續(xù)出現(xiàn)的暴露差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上可能具有顯著差異（p<0.05），但卻沒(méi)有臨床相關(guān)性。第二十八頁(yè)，共四十七頁(yè)。分析方法研究過(guò)程涉及到實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)或生物樣品中底物含量的測(cè)定，最常用的方法為L(zhǎng)C-MS/MS（尤其是在雞尾酒法中，要同時(shí)測(cè)定多個(gè)底物探針的含量），其次為HPLC。也可以用電化學(xué)方法進(jìn)行測(cè)定，如：將CYP3A4酶固定在玻碳電極上，在陽(yáng)離子聚合電解質(zhì)背景下以計(jì)時(shí)安培分析法測(cè)紅霉素（底物）濃度變化，以表征抑制劑的抑制作用。第二十九頁(yè)，共四十七頁(yè)。例1:體內(nèi)試驗(yàn)

EffectsofKetoconazoleandRifampicinonthePharmacokineticsofGemigliptin,aDipeptidylPeptidase-IVInhibitor:ACrossoverDrug–DrugInteractionStudyinHealthyMaleKoreanVolunteers酮康唑和利福平對(duì)吉格列?。ǘ幕拿?IV的抑制劑）藥動(dòng)學(xué)的影響：以韓國(guó)健康男性為受試者的交叉藥物-藥物相互作用研究NohYH,LimHS,JinSJ,etal.[J].Clinicaltherapeutics,2012,34(5):1182-1194.第三十頁(yè)，共四十七頁(yè)。第三十一頁(yè)，共四十七頁(yè)。目的：多次口服酮康唑或利福平對(duì)單次口服吉格列汀藥代動(dòng)力學(xué)，在韓國(guó)健康空腹男性中的影響。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：single-center,open-label,2-part,3-treatment,1-sequence,2-period,crossoverdrug–druginteractionstudy采用開(kāi)放標(biāo)簽，2個(gè)部分，3種處理方式，1序列，2周期交叉的研究方法。第三十二頁(yè)，共四十七頁(yè)。A、B兩部分各12名受試者第三十三頁(yè)，共四十七頁(yè)。分析方法：LC-MS/MS內(nèi)標(biāo)：13C4-吉格列汀、13C4-LC15-0516乙腈混合溶液（含2%甲酸）(20/10ng/mL)色譜柱：C8column(3μm,30*2.0mm)流動(dòng)相：二元梯度洗脫

A：乙腈：10-mM乙酸（10:90）（含0.1%甲酸）

B：乙腈：甲醇：10-mM醋酸銨（45:45:10）（含0.1%甲酸）檢測(cè)模式：陽(yáng)離子多反應(yīng)選擇監(jiān)測(cè)（MRM）吉格列?。?90.1([M＋H＋])→338.1m/zLC15-0516：506.28→175.1m/z第三十四頁(yè)，共四十七頁(yè)。結(jié)果與討論P(yáng)artA第三十五頁(yè)，共四十七頁(yè)。第三十六頁(yè)，共四十七頁(yè)。合用酮康唑后吉格列汀的Cmax和AUC分別增大到原來(lái)的2.40倍和2.36倍第三十七頁(yè)，共四十七頁(yè)。PartB第三十八頁(yè)，共四十七頁(yè)。第三十九頁(yè)，共四十七頁(yè)。合用利福平后吉格列汀的Cmax和AUC分別降低為原來(lái)的41%和20%。第四十頁(yè)，共四十七頁(yè)。值得注意的是，合用利福平之后代謝產(chǎn)物L(fēng)C15-0636的暴露量降低了36%，這可能與利福平影響了膜轉(zhuǎn)運(yùn)體有關(guān)。但這并不影響利福平誘導(dǎo)了吉格列汀代謝結(jié)論的得出，因?yàn)棰貺C15-0636的Cmax增大了；②吉格列汀的半衰期由21.86小時(shí)縮短到7.59小時(shí)。第四十一頁(yè)，共四十七頁(yè)。第四十二頁(yè)，共四十七頁(yè)。例2：體外實(shí)驗(yàn)

PotentinhibitionofcytochromeP4502B6bysibutramineinhumanli