離體腸段平滑肌生理

離體腸段平滑肌生理第一頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日觀察哺乳動(dòng)物胃腸平滑肌的一般生理特性。學(xué)習(xí)哺乳類動(dòng)物離體器官灌流的一種方法。實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡诙?yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理哺乳動(dòng)物消化管平滑肌具有肌組織共有的特性，如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但是消化道平滑肌肉有其特點(diǎn)，即興奮性較低，收縮緩慢，富有伸展性，具有緊張性、自動(dòng)節(jié)律性，對(duì)化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等。將離體組織器官至于模擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中，可以在一定時(shí)間內(nèi)保持其功能。本實(shí)驗(yàn)以臺(tái)氏液作灌流液，在體外觀察及記錄家兔離體腸段的一般生理特性。第三頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常用的生理溶液有生理鹽水、任氏液(Rinne)、樂(lè)氏液(Locke)及臺(tái)氏液(Tyrode)。這些生理溶液是為了在進(jìn)行離體器官或組織實(shí)驗(yàn)時(shí)，使標(biāo)本盡可能處于近似在體內(nèi)的環(huán)境中，以保證其正常的功能活動(dòng)。而用于灌流組織的液體，其電解質(zhì)成分、晶體滲透壓、pH、緩沖能力、溫度及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)與組織液相近。第四頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔器械、藥品：電熱恒溫水浴鍋、浴槽、張力換能器、生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、注射器、培養(yǎng)皿、溫度計(jì)、燒杯、螺絲夾、臺(tái)氏液、0.01%去甲腎上腺素、0.01%乙酰膽堿、阿托品。第五頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日方法和步驟1、標(biāo)本制備流程

擊昏家兔：用木槌猛擊兔頭枕部，使其昏迷。立即剖開(kāi)腹腔，找出胃幽門與十二指腸交界處，快速取長(zhǎng)20~30cm的腸管，先將與該腸管相連的腸系膜沿腸緣剪去，置于供氧臺(tái)氏液中輕輕漂洗，把腸內(nèi)容物基本洗凈。將腸管分成數(shù)段，每段長(zhǎng)2-3cm，兩端各系一條線，保存于供氧的38℃左右的臺(tái)氏液中。第六頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日2、儀器安裝與調(diào)試實(shí)驗(yàn)安裝恒溫水浴鍋控制加熱，恒溫工作點(diǎn)定在38℃。將充滿氧氣的道氏袋與通氣鉤相連接，將腸段一端系在通氣管鉤上，另一端與張力換能器相連。控制通氣量，使氧氣從通氣管前端呈單個(gè)而不是成串逸出。儀器調(diào)試：選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”中的“消化實(shí)驗(yàn)”選中“消化道平滑肌生理特性”。第七頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第八頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日3、觀察項(xiàng)目(附部分參考實(shí)驗(yàn)結(jié)果）待標(biāo)本穩(wěn)定后，記錄小腸平滑肌收縮的對(duì)照曲線。停止供氣1min，記錄曲線變化。出現(xiàn)明顯變化后立即供氣。第九頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日將藥液管中的臺(tái)氏液全部換成25度的臺(tái)氏液，觀察變化。再更換38度臺(tái)氏液，觀察有何反應(yīng)。第十一頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十二頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日同法將藥液管中的臺(tái)氏液全部換成45度的臺(tái)氏液，觀察變化。再更換38度臺(tái)氏液，觀察有何反應(yīng)。第十三頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十四頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日4）記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后，加入2滴腎上腺素(1：10

000)，觀察并記錄曲線變化。第十五頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十六頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日5）記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后加入1—2滴乙酰膽堿(1：100000)，觀察并記錄曲線變化。

第十七頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十八頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日6）記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后加入3滴阿脫品后立即加入與前面同樣劑量的乙酰膽堿，記錄并觀察曲線變化。第十九頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，臺(tái)氏液應(yīng)保持38℃，浴槽內(nèi)液面高度應(yīng)保持恒定。通氣管的氣泡逸出速度不可太快，以單個(gè)氣泡陸續(xù)出現(xiàn)為宜。否則會(huì)影響腸段運(yùn)動(dòng)的曲線記錄。每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)效果明顯后，立即更換新鮮臺(tái)氏液，一般應(yīng)沖洗2－3次，待腸段恢復(fù)正?；顒?dòng)后再進(jìn)行下一項(xiàng)目。放大器零點(diǎn)調(diào)好后不要再移動(dòng)旋鈕，以免影響基線。第二十頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日結(jié)論消化道平滑肌具有自律性，但其收縮緩慢，節(jié)律性不規(guī)則。消化道平滑肌具有一定的緊張性。消化道平滑肌的活動(dòng)易受溫度、pH值及其它化學(xué)因素、藥物因素的影響。第二十一頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)討論（參考）正常情況下，我們觀察到離體小腸平滑肌在臺(tái)氏液中可以自動(dòng)地、緩慢地收縮，但其節(jié)律性很不規(guī)則。小腸平滑肌自律性產(chǎn)生的離子基礎(chǔ)尚未完全清楚。目前認(rèn)為，它的產(chǎn)生可能與細(xì)胞膜上生電性鈉泵的活動(dòng)具有波動(dòng)性有關(guān)，當(dāng)鈉泵的活動(dòng)暫時(shí)受抑制時(shí)，膜便發(fā)生去極化；當(dāng)鈉泵活動(dòng)恢復(fù)時(shí)，膜的極化加強(qiáng)，膜電位便又回到原來(lái)的水平。

第二十二頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日在浴槽中加入0.01%乙酰膽堿（Ach）2滴（約0.2ml）后，可見(jiàn)離體腸管活動(dòng)增強(qiáng)，描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變快，幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)理，目前認(rèn)為與消化道平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生動(dòng)作電位的離子基礎(chǔ)是Ca2+的內(nèi)流有關(guān)。乙酰膽堿可與肌膜上的M受體結(jié)合，使得兩類通道開(kāi)放：一類為電位敏感性Ca2+專用通道，另一類為特異性受體活化Ca2+專用通道。前一類通道對(duì)Ach敏感，小劑量Ach即引起開(kāi)放；后一類通道對(duì)Ach相對(duì)不敏感，只有大劑量Ach才會(huì)引起開(kāi)放。這兩類通道開(kāi)放都使得肌漿中Ca2+增高，進(jìn)而激活肌纖蛋白—肌凝蛋白—ATP系統(tǒng)，使平滑肌收縮，肌張力增加。第二十三頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日在浴槽中加入0.01%腎上腺素2滴（約0.2ml）后，可見(jiàn)離體腸管活動(dòng)減弱，描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變慢，幅度減小以及基線下移。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)理，目前認(rèn)為與腸肌細(xì)胞膜上存在α和β兩種受體，α受體又分為α抑制型受體和α興奮型受體有關(guān)。腎上腺素作用于α抑制型受體，引起腸肌膜上一種特異性受體活化，使K+外流增多，細(xì)胞膜發(fā)生超極化，腸肌興奮性降低，肌張力下降。同時(shí)，腎上腺素還作用于β受體，①它的激活引起腸肌細(xì)胞膜中的cAMP合成增多，cAMP激活腸肌膜及肌漿網(wǎng)上Ca2+泵活動(dòng)，使肌漿中Ca2+濃度降低，亦使肌張力降低；②β受體激活后還促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超極化，促進(jìn)了腸肌肌張力的減低。第二十四頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日浸浴小腸腸管的臺(tái)氏液溫度以38℃~40℃為宜，低于或高于這個(gè)溫度，都會(huì)影響結(jié)果。因?yàn)槟c管平滑肌對(duì)溫度改變極為敏感，當(dāng)溫度降到30℃以下時(shí)，由于代謝水平的降低，興奮性減弱，可出現(xiàn)收縮曲線基線下移，頻率變慢，收縮幅度變小。有時(shí)可能會(huì)見(jiàn)到基線先上移后下降的現(xiàn)象。這是