細(xì)胞生物學(xué)-02技術(shù)

第二章

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)第三節(jié) 細(xì)胞分離技術(shù)第一節(jié) 顯微技術(shù)第二節(jié) 生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)第四節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交光學(xué)顯微鏡：以可見光（或紫外線）為光源。電子顯微鏡：以電子束為光源。第一節(jié) 顯微技術(shù)1. 構(gòu)成： ①照明系統(tǒng) ②光學(xué)放大系統(tǒng) ③機(jī)械裝置2. 原理 經(jīng)物鏡形成倒立實(shí)像，經(jīng)目鏡放大成虛像。（一）普通光學(xué)顯微鏡第一節(jié) 顯微技術(shù)3. 分辨力：指分辨物體最小間隔的能力。

R=0.61λ/N.A．λ,入射光線波長；N.A．(鏡口率)＝ｎsinα/2，n,介質(zhì)折射率；α,鏡口角（樣品對物鏡鏡口的張角）（一）普通光學(xué)顯微鏡表一、幾種介質(zhì)的折射率（一）普通光學(xué)顯微鏡顯微鏡的幾個(gè)光學(xué)特點(diǎn)：sinα/2的最大值小于1；油鏡介質(zhì)為香柏油，鏡口率可接近1.5。普通光線的波長為400~700nm，光鏡分辨力約為0.2μm，人眼的分辨力為0.2mm，因此顯微鏡的最大有效倍數(shù)為1000X。（一）普通光學(xué)顯微鏡（二）熒光顯微鏡Fluorescencemicroscope特點(diǎn)：光源為短波光；有兩個(gè)特殊的濾光片；照明方式通常為落射式。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光（二）熒光顯微鏡Fluorescencemicroscope熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別：1.

光源紫外光，分辨力高于普通顯微鏡；2.

有兩個(gè)特殊的濾光片光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護(hù)人目（二）熒光顯微鏡FluorescencemicroscopeDNAinblueandMicrotubulesingreen用于觀察能激發(fā)出熒光的結(jié)構(gòu)。用途：免疫熒光觀察、基因定位、疾病診斷。（二）熒光顯微鏡（三）激光共聚焦掃描顯微境

用激光作光源，逐點(diǎn)、逐行、逐面快速掃描。能顯示細(xì)胞樣品的立體結(jié)構(gòu)。分辨力是普通光學(xué)顯微鏡的3倍。用途類似熒光顯微鏡，但能掃描不同層次，形成立體圖像。（三）激光共聚焦掃描顯微境

Laserconfocalscanningmicroscope,LCSMLCSMImageofaXenopusMelanophoremicrotubulecytoskeleton(green)andthenucleus(blue)（三）激光共聚焦掃描顯微境（四）暗視野顯微鏡聚光鏡中央有擋光片，照明光線不直接進(jìn)物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡，因而視野背景是黑的，物體邊緣是亮的?？捎^察4~200nm的微粒子，分辨率比普通顯微鏡高50倍。圖3株螺原體的菌落(上)和生長對數(shù)期菌體顯微形態(tài)(下)（四）暗視野顯微鏡這種顯微鏡最大的特點(diǎn)是可以觀察未經(jīng)染色的標(biāo)本和活細(xì)胞。把透過標(biāo)本的可見光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對比度，使各種結(jié)構(gòu)變得清晰可見。在構(gòu)造上，相差顯微鏡有不同于普通光學(xué)顯微鏡兩個(gè)特殊之處：環(huán)形光闌（annulardiaphragm）：位于光源與聚光器之間。相位板（annularphaseplate）：物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ。（五）相差顯微鏡相差顯微鏡實(shí)拍圖——血細(xì)胞相差顯微鏡實(shí)拍圖——酵母細(xì)胞（五）相差顯微鏡用途：觀察未經(jīng)染色的玻片標(biāo)本（五）相差顯微鏡（六）偏光顯微鏡polarizingmicroscope用于檢測具有雙折射性的物質(zhì)，如纖維絲、紡錘體、膠原、染色體等。光源前有偏振片（起偏器），使進(jìn)入顯微鏡的光線為偏振光，鏡筒中有檢偏器（與起偏器方向垂直的偏振片）。載物臺是可以旋轉(zhuǎn)。已染色頭發(fā)未染色頭發(fā)（六）偏光顯微鏡polarizingmicroscope（七）微分干涉差顯微鏡

Differentialinterferencecontrastmicroscope（DIC）1952年Nomarski發(fā)明，利用兩組平面偏振光的干涉，加強(qiáng)影像的明暗效果，能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影。標(biāo)本可略厚一點(diǎn)，折射率差別更大，故影像的立體感更強(qiáng)。

利用DIC觀察細(xì)胞與胚胎,細(xì)胞形態(tài)呈浮雕狀的三維圖像,細(xì)胞內(nèi)外各種結(jié)構(gòu)邊界清晰、細(xì)節(jié)明顯、對比度適當(dāng),尤其是其聚焦深度較狹窄,通過調(diào)節(jié)焦距可以獲得細(xì)胞不同層面的圖像,即對細(xì)胞進(jìn)行光學(xué)切片,可以準(zhǔn)確、生動地顯示如細(xì)胞與細(xì)胞核的邊界、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的細(xì)胞器顆粒、細(xì)胞核內(nèi)的核仁、染色質(zhì)顆粒等微細(xì)結(jié)構(gòu)（七）微分干涉差顯微鏡

Differentialinterferencecontrastmicroscope（DIC）微分干涉差顯微觀察用口吸管將卵子或胚胎移入玻璃培養(yǎng)板上,石蠟油覆蓋液滴,置于倒置DIC顯微鏡下觀察。調(diào)節(jié)起偏器、檢偏器、光圈和聚光器高度至恰當(dāng)位置,觀察圖像呈灰色調(diào)、圖像浮雕感和反差適中為度。采用數(shù)碼顯微攝影系統(tǒng)進(jìn)行攝影（七）微分干涉差顯微鏡

Differentialinterferencecontrastmicroscope

（DIC）（八）倒置顯微鏡inversemicroscope

物鏡與照明系統(tǒng)顛倒；用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞，通常具有相差或DIC物鏡，有的還具有熒光裝置。

（九）當(dāng)代顯微鏡的發(fā)展趨勢采用組合方式，集普通光鏡、相差、熒光、暗視野、DIC、攝影裝置于一體。自動化與電子化。二、電子顯微鏡（一）透射電子顯微鏡transmissionelectronmicroscope,TEM以電子束作光源，電磁場作透鏡。電子束波長與加速電壓(通常50~120KV)的平方根成反比。由電子照明系統(tǒng)、電磁透鏡成像系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)、電源系統(tǒng)等5部分構(gòu)成。分辨力0.2nm，放大倍數(shù)可達(dá)百萬倍。用于觀察超微結(jié)構(gòu)（小于0.2μm）。1. 原理表二、不同光線的波長透射電子顯微鏡2、制樣技術(shù)1）超薄切片用于電鏡觀察的標(biāo)本須制成厚度僅50nm的超薄切片，用超薄切片機(jī)制作。通常以鋨酸和戊二醛固定樣品，丙酮逐級脫水，環(huán)氧樹脂包埋，以熱膨脹或螺旋推進(jìn)的方式切片，重金屬（鈾、鉛）鹽染色。2）負(fù)染技術(shù)用重金屬鹽(如磷鎢酸)染色；吸去染料干燥后，樣品凹陷處鋪了一層重金屬鹽，而凸出地方?jīng)]有染料沉積，從而出現(xiàn)負(fù)染效果，分辨力可達(dá)1.5nm左右。NegativeStainedArchaebacteria3）冰凍蝕刻freeze-etching

冰凍蝕刻，亦稱冰凍斷裂。標(biāo)本置于-100?C的干冰或-196?C的液氮中，進(jìn)行冰凍。然后用冷刀驟然將標(biāo)本斷開，升溫后，冰在真空條件下迅即升華，暴露出斷面結(jié)構(gòu)，稱為蝕刻。蝕刻后，向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑，再以90度角噴涂一層碳，加強(qiáng)反差和強(qiáng)度。然后用次氯化鈉溶液消化樣品，把碳和鉑的膜剝下來，此膜即為復(fù)膜。復(fù)膜顯示出了標(biāo)本蝕刻刻面的形態(tài)，在電鏡下得到的影像即代表標(biāo)本中細(xì)胞斷裂面處的結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)面的深度蝕刻電鏡照片，示

Clathrin衣被枝管藻游孢子和盤狀體的的電鏡照片電鏡與光鏡的比較

顯微鏡分辨本領(lǐng)光源透鏡真空成像原理LM200nm100nm可見光（400-700）紫外光（200nm)玻璃透鏡不要求真空利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化TEM0.1nm電子束電磁透鏡要求真空利用樣品對電子的散射和透射形成明暗反差20世紀(jì)60年代問世，用來觀察標(biāo)本表面結(jié)構(gòu)。分辨力為6~10nm，由于人眼的分辨力（區(qū)別熒光屏上距離最近兩個(gè)光點(diǎn)的能力）為0.2mm，掃描電鏡的有效放大倍率為0.2mm/10nm=20000X。（二）掃描電子顯微鏡Scanningelectronmicroscope（SEM）人類紅細(xì)胞酵母人類精子（三）掃描隧道顯微鏡

scanningtunnelingmicroscope，STM原理：根據(jù)隧道效應(yīng)設(shè)計(jì)，當(dāng)原子尺度的針尖在不到一個(gè)納米的高度上掃描樣品時(shí)，此處電子云重疊，外加一電壓（2mV~2V），針尖與樣品之間形成隧道電流。電流強(qiáng)度與針尖和樣品間的距離有函數(shù)關(guān)系，將掃描過程中電流的變化轉(zhuǎn)換為圖像，即可顯示出原子水平的凹凸形態(tài)。分辨率：橫向?yàn)?.1~0.2nm，縱向可達(dá)0.001nm。用途：三態(tài)（固態(tài)、液態(tài)和氣態(tài)）物質(zhì)均可進(jìn)行觀察。圖色氨酸在石墨表面吸附的典型STM圖低覆蓋度下,高覆蓋度下,三、顯微操作技術(shù)

micromanipulationtechnique是在倒置顯微鏡下利用顯微操作器進(jìn)行細(xì)胞或早期胚胎操作的一種方法。包括細(xì)胞核移植、顯微注射、嵌合體技術(shù)、胚胎移植以及顯微切割等。細(xì)胞核移植技術(shù)已有幾十年的歷史1952年，Briggs和King等將不同階段的蛙胚細(xì)胞核注入去核的蛙卵，構(gòu)建核移植胚。Gordon（1962）證明原腸胚以后的細(xì)胞核移植能發(fā)育到成體。1997年，Wilmut等克隆了綿羊Dolly。顯微操作儀轉(zhuǎn)基因顯微操作過程第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)第一節(jié)顯微技術(shù)第二節(jié)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)第四節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交一、細(xì)胞化學(xué)技術(shù)第二節(jié)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)

組織化學(xué)或細(xì)胞化學(xué)染色是利用染色劑可同細(xì)胞的某種成分發(fā)生反應(yīng)而著色的原理，對某種成分進(jìn)行定性或定位研究的技術(shù)。（一）固定:

將細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和化學(xué)物質(zhì)雙重地保存下來

物理固定：血膜空氣快速干燥、冷凍干燥。化學(xué)固定：如甲醇、乙醇、丙酮、甲醛、戊二醛和鋨酸等試劑。顯示多糖常用乙醇固定，顯示酶類多用甲醛丙酮緩沖液固定。（二）顯示方法金屬沉淀法：利用金屬化合物在反應(yīng)過程中生成有色沉淀，借以辨認(rèn)所檢查的物質(zhì)或酶活性;如磷酸酶分解磷酸酯底物后，反應(yīng)產(chǎn)物最終生成CoS或PbS有色沉淀，而顯示出酶活性。聯(lián)苯胺反應(yīng)：過氧化酶分解H202。產(chǎn)生新生氧，后者再將無色聯(lián)苯胺氧化成聯(lián)苯胺藍(lán)，進(jìn)而變成棕色化合物。茚三酮反應(yīng)：顯示蛋白質(zhì)。Schiff反應(yīng)：DNA特異性的顯示方法

利用酸水解去除細(xì)胞中的RNA，僅保留DNA，并且除去DNA嘌呤脫氧核糖核酸的嘌呤，使脫氧核糖的醛基暴露，所暴露出的自由醛基與希夫試劑反應(yīng)呈紫紅色。多糖的顯示方法PAS（過碘酸希夫氏）反應(yīng)利用過碘酸的強(qiáng)氧化作用破壞糖分子的C—C鍵，使糖分子氧化產(chǎn)生雙醛基，自由的醛基與希夫試劑作用形成紫紅色產(chǎn)物。脂類物質(zhì)的顯示方法

對脂類物質(zhì)的染色應(yīng)用的是物理的擴(kuò)散原理。蘇丹類染料是脂溶性染劑，它溶于酒精但更易溶于脂肪，所以當(dāng)含有脂肪的標(biāo)本與蘇丹染料接觸時(shí)，它會脫離酒精而溶于脂類結(jié)構(gòu)中從而顯色。二、免疫細(xì)胞化學(xué)immunocytochemistry免疫細(xì)胞化學(xué)（immunocytochemistry）是根據(jù)免疫學(xué)原理，利用抗體同特定抗原專一結(jié)合，對抗原進(jìn)行定位測定的技術(shù)?？乖蠓肿踊蚺c大分子相結(jié)合的小分子；抗體，漿細(xì)胞分泌的γ球蛋白。如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物，再與組織中的抗原發(fā)生反應(yīng)，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。常用的標(biāo)記物有熒光素和酶。熒光素標(biāo)記的稱為免疫熒光法（immunofluorescenttechnique）常用的螢光素有異硫氰酸熒光素（fluoresceinisothiocyanate）、羅丹明（rhodamine）等。酶標(biāo)記的稱為酶標(biāo)免疫法（enzyme-labeledantibodymethod），常用的酶有辣根過氧化物酶（horseradishperoxidase），酶與底物發(fā)生反應(yīng)后形成不透明的沉積物，從而顯示出抗原存在的部位。

細(xì)胞內(nèi)對于蛋白質(zhì)分子的定位技術(shù)包括免疫熒光、免疫印跡以及免疫電鏡等，這些技術(shù)都是基于免疫學(xué)中抗原抗體特異性反應(yīng)的原理而設(shè)計(jì)的。將抗體分子上加上不同的可供識別的標(biāo)記，從而顯示出某種蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布和定位?？乖乖贵w特異性結(jié)合免疫熒光標(biāo)記免疫酶標(biāo)記三、放射自顯影術(shù)用于研究標(biāo)記化合物在機(jī)體、組織和細(xì)胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用機(jī)理、作用部位等等。原理：將放射性同位素標(biāo)記的化合物導(dǎo)入生物體內(nèi)，經(jīng)過一段時(shí)間后，制取切片，涂上鹵化銀乳膠，經(jīng)放射性曝光，使乳膠感光。然后經(jīng)過顯影、定影處理顯示還原的黑色銀顆粒，即可得知標(biāo)本中標(biāo)記物的準(zhǔn)確位置和數(shù)量一般用14C和3H標(biāo)記。常用3H胸腺嘧啶脫氧核苷

(3H-TDR)來顯示DNA，用(3H尿嘧啶核苷)3H-UDR顯示RNA；用3H氨基酸研究蛋白質(zhì)，用3H甘露糖、3H巖藻糖研究多糖。14C半衰期為5730年，3H為12.5年。第二節(jié)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)基本實(shí)驗(yàn)過程同位素標(biāo)記示蹤化合物→注入動物體內(nèi)→取下器官或組織→切片→涂乳膠膜→自顯影→顯影和定影→染色→觀察四、分子雜交技術(shù)

具有互補(bǔ)核苷酸序列的兩條單鏈核苷酸分子片段，在適當(dāng)條件下，通過氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA雜交的雙鏈分子。這種技術(shù)可用來測定單鏈分子核苷酸序列間是否具有互補(bǔ)關(guān)系。

用核酸探針確立特殊核苷酸序列在染色體上或在特殊類型細(xì)胞中的位置的方法稱為原位雜交技術(shù)(insituhybridization)。把凝膠電泳分離開的DNA片段，通過擴(kuò)散或電泳轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，做成一個(gè)凝膠的復(fù)制品，這個(gè)過程叫做印跡。將硝酸纖維素膜與帶有放射性標(biāo)記的探針雜交，通過放射自顯影就可以辨認(rèn)出與探針互補(bǔ)的特殊的核苷酸序列。利用標(biāo)記的DNA探針檢測某一特定的DNA序列的方法稱為Southernblot，檢測特定RNA序列的方法稱為Northernblot。

人類染色體端粒DNA的熒光原位雜交照片六、PCR技術(shù)PCR即：polymerasechainreaction。反應(yīng)體系：①樣品DNA；②引物（primer），約15-20個(gè)核苷酸；③4種dNTP；④TagDNA聚合酶，來自于嗜熱水生菌Thermusaquaticus，最適作用溫度75~80℃，短時(shí)間在95℃下不失活。⑤緩沖體系和Mg2+。反應(yīng)過程：①變性：約90-95℃；②復(fù)性：約60℃左右；③延伸：70-75℃；④重復(fù)“變性——復(fù)性——延伸”過程20-30次循環(huán)。第二節(jié)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)PCR原理第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)第一節(jié)顯微技術(shù)第二節(jié)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)第四節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交一、離心技術(shù)是分離細(xì)胞器及各種大分子基本手段。轉(zhuǎn)速為10~25kr/min的離心機(jī)稱為高速離心機(jī)。轉(zhuǎn)速>25kr/min，離心力>89Kｇ者稱為超速離心機(jī)。超速離心機(jī)的最高轉(zhuǎn)速可達(dá)100000r/min，離心力超過500Kg。第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)離心分離技術(shù)用途：于分離細(xì)胞器與生物大分子及其復(fù)合物差速離心：分離密度不同的細(xì)胞組分密度梯度離心：精細(xì)組分或生物大分子的分離（一）差速離心Differentialcentrifugation特點(diǎn)：介質(zhì)密度均一；速度由低向高，逐級離心。用途：分離大小相差懸殊的細(xì)胞和細(xì)胞器。沉降順序：核——線粒體——溶酶體與過氧化物酶體——內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體——核蛋白體。可將細(xì)胞器初步分離，常需進(jìn)一步通過密度梯離心再行分離純化。第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)Differentialcentrifugation第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)（二）密度梯度離心用介質(zhì)在離心管內(nèi)形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度，將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部，通過離心力場的作用使細(xì)胞和細(xì)胞成分分層、分離。類型：速度沉降、等密度沉降。常用介質(zhì)：氯化銫、蔗糖、多聚蔗糖。分離活細(xì)胞的介質(zhì)要求：1）能產(chǎn)生密度梯度，且密度高時(shí)，粘度不高；2）PH中性或易調(diào)為中性；3）濃度大時(shí)滲透壓不大；4）對細(xì)胞無毒。第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)1、速度沉降velocitysedimentation

用途：分離密度相近而大小不等的細(xì)胞或細(xì)胞器。特點(diǎn)：介質(zhì)密度較低，介質(zhì)的最大密度應(yīng)小于被分離生物顆粒的最小密度。原理：介質(zhì)密度梯度平緩，分離物按各自的沉降系數(shù)以不同的速度沉降而達(dá)到分離。第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)2 等密度沉降用途：分離密度不等的顆粒。特點(diǎn)：介質(zhì)密度高，陡度大，介質(zhì)最高密度大于被分離組分的最大密度。力場比速率沉降法大10~100倍，需要高速或超速離心。原理：樣品各成分在連續(xù)梯度的介質(zhì)中經(jīng)過一定時(shí)間的離心則沉降到與自身密度相等的介質(zhì)處，并停留在那里達(dá)到平衡，從而將不同密度的成分分離。第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)三、細(xì)胞電泳原理：在一定PH值下細(xì)胞表面帶有凈的正或負(fù)電荷，能在外加電場的作用下發(fā)生泳動。各種細(xì)胞或處于不同生理狀態(tài)的同種細(xì)胞荷電量有所不同，故在一定的電場中的泳動速度不同。用途：檢測細(xì)胞生理狀態(tài)、分離不同種類的細(xì)胞。第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)第三節(jié)細(xì)胞分離技術(shù)第一節(jié)顯微技術(shù)第二節(jié)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)第四節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交一、細(xì)胞培養(yǎng)的必要性高等生物是由多細(xì)胞構(gòu)成的整體，在整體條件下要研究單個(gè)細(xì)胞或某一群細(xì)胞在體內(nèi)（invivo）的功能活動是十分困難的。但是如果把活細(xì)胞拿到體外（invitro）培養(yǎng)進(jìn)行觀察和研究，則要方便得多。第四節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交（一）動物細(xì)胞培養(yǎng)群體培養(yǎng)（massculture）：將含有一定數(shù)量細(xì)胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細(xì)胞貼壁生長，匯合（confluence）后形成均勻的單細(xì)胞層；克隆培養(yǎng)（clonalculture）：培養(yǎng)高度稀釋的細(xì)胞懸液，細(xì)胞貼壁生長，每一個(gè)細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞集落，稱為克隆。第四節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交群體培養(yǎng)（左）和克隆培養(yǎng)（右）

第四節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交原代培養(yǎng)（primaryculture）：即：培養(yǎng)來自動物機(jī)體的細(xì)胞群。將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的容器中培養(yǎng)稱為傳代或傳代培養(yǎng)（passage），每代細(xì)胞分裂約3-6次。細(xì)胞系（cellline）：原代培養(yǎng)細(xì)胞成功傳代即為細(xì)胞系。細(xì)胞株（cellstrain）：從培養(yǎng)細(xì)胞中篩選出的具有特定性質(zhì)或標(biāo)志的細(xì)胞群。克?。╟lone）：亦稱無性系。指由同一個(gè)祖先細(xì)胞通過有絲分裂產(chǎn)生的遺傳性狀一致的細(xì)胞群。第四節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交表三、實(shí)驗(yàn)室中常用的幾種細(xì)胞系細(xì)胞系名稱細(xì)胞類型來源3T3成纖維細(xì)胞小鼠HeLa宮頸癌上皮細(xì)胞HenriettaLacks

BHK21成纖維細(xì)胞敘利亞倉鼠PtKl上皮細(xì)胞袋鼠L6成肌細(xì)胞大鼠PCI2嗜鉻細(xì)胞大鼠SP2漿細(xì)胞小鼠SP2／0骨髓瘤漿細(xì)胞小鼠CHO卵巢細(xì)胞中國地鼠HenriettaLacks,Americanblack,diedofca