放線菌霉菌的形態(tài)觀察

本文格式為Word版，下載可任意編輯——放線菌霉菌的形態(tài)觀察微生物學(xué)測(cè)驗(yàn)LabworkonMicrobiology,三峽大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)教學(xué)組,測(cè)驗(yàn)指導(dǎo)老師：涂璇,測(cè)驗(yàn)五放線菌、霉菌形態(tài)查看,一、測(cè)驗(yàn)?zāi)康亩?、測(cè)驗(yàn)原理三、測(cè)驗(yàn)器材四、測(cè)驗(yàn)步驟五、測(cè)驗(yàn)報(bào)告,一、測(cè)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)并掌管查看放線菌、霉菌形態(tài)的根本方法。

初步了解放線菌和四類常見(jiàn)霉菌的根本形態(tài)特征。,二、根本原理,放線菌（原核微生物）：

由不同長(zhǎng)短的纖細(xì)的菌絲所形成的單細(xì)胞菌絲體。菌絲體分為兩片面，即潛入培養(yǎng)基中的養(yǎng)分菌絲（或稱基內(nèi)菌絲）和生長(zhǎng)在培養(yǎng)基以上的氣生菌絲。有些氣生菌絲分化成孢子絲，呈螺旋形、波浪形或分枝狀等。孢子常呈圓形、橢圓形或桿狀。氣生菌絲及孢子的外形和顏色常作為分類的重要依據(jù)。,放線菌培養(yǎng)和查看方法,扦片法：在放線菌平板上扦上蓋玻片后培養(yǎng)，使放線菌菌絲沿著培養(yǎng)基外觀與蓋玻片的交接處生長(zhǎng)而附著在蓋玻片上。查看時(shí)直接取出蓋玻片置于載玻片上鏡檢。,鏡檢：用鑷子拔出蓋玻片，擦去后面培養(yǎng)物，將有菌的一面朝上置于載玻片上，直接鏡檢。

宜用略暗光線查看，低倍鏡—高倍鏡；

染色后查看效果更好。,玻璃紙法：將玻璃紙籠罩在平板外觀，接種放線菌、培養(yǎng)，放線菌在玻璃紙上形成菌苔。查看時(shí)取下玻璃紙固定在載玻片上鏡檢。

鏡檢：先在載玻片上滴一小滴水，取下玻璃紙，使菌面朝上，使玻璃紙平貼于載玻片上。,優(yōu)點(diǎn)：可查看到放線菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)下的特征，和不同生長(zhǎng)期的形態(tài)。,留神:整過(guò)程勿觸動(dòng)菌面培養(yǎng)物。,印片法：將要查看的放線菌的菌落或菌苔直接印在載玻片上，經(jīng)染色后查看。

用接種鏟或解剖刀將平板上的菌苔連同培養(yǎng)基一起切下，菌面朝上。另取一載玻片，微熱后，輕輕按壓菌苔，固定，染色后鏡檢。

主要用于查看孢子絲的形態(tài)，孢子的排列及其外形等，但形態(tài)特征可能有所變更。,霉菌（真核微生物）：

霉菌是一類可產(chǎn)生繁雜分枝菌絲的真核微生物的統(tǒng)稱。分枝菌絲分為基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長(zhǎng)到確定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比放線菌大得多。,霉菌培養(yǎng)和查看方法,載玻片法：將培養(yǎng)基薄層置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)，霉菌即在其間的有限空間內(nèi)沿蓋玻片橫向生長(zhǎng)。查看時(shí)直接將載玻片鏡檢。,玻璃紙法：與放線菌好像。

直接制片查看法：用解剖針挑取少量培養(yǎng)物置于預(yù)先滴加乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液中，制成霉菌制片鏡檢。

50％乙醇用于洗去孢子；

盡可能保持霉菌生長(zhǎng)狀態(tài)；

制止產(chǎn)生氣泡。

特點(diǎn)：細(xì)胞不變形；

不易枯燥，易保存；

防止孢子飛散；

鞏固反差。,霉菌菌絲較粗大，細(xì)胞易收縮變形，而且孢子很輕易飛散，制真菌標(biāo)本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液。

用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液制成的霉菌標(biāo)本的特點(diǎn)是：(a)細(xì)胞不變形；

(b)具有殺菌防腐作用，不易枯燥，能保持較長(zhǎng)時(shí)間；

(c)溶液本身呈藍(lán)色，有確定染色效果。,1、菌種放線菌劃線平板28℃7天后培養(yǎng)物，曲霉、根霉、青霉和毛霉劃線平板28℃4天后培養(yǎng)物。

2、儀器顯微鏡；

3、其他材料平皿，載玻片，解剖針，香柏油，二甲苯，擦鏡紙，吸水紙，染色缸等。,三、測(cè)驗(yàn)器材,四、操作步驟,查看放線菌氣生菌絲和基內(nèi)菌絲的識(shí)別取插片一片，直接在顯微鏡下舉行查看，留神分界面兩側(cè)菌絲形態(tài)的差異,鏈霉菌的基內(nèi)菌絲與氣生菌絲,,孢子絲分隔成孢子,放線菌和細(xì)菌的異同,查看黑根霉菌絲處境和子囊孢子處境（著重鑒別孢子囊、包囊梗、假根）：,查看毛霉菌絲和分生孢子著生處境：,逐級(jí)分枝,查看黑曲霉菌絲分隔處境和分生孢子著生處境（著重鑒別分生孢子梗、足細(xì)胞和分生孢子）：,分生孢子梗頂端膨大成圓形或橢圓形的頂囊，由頂囊向外輻射長(zhǎng)出一層或兩層小梗，最上層小梗呈瓶狀，在其頂端生成成串的分生孢子。,查看青霉菌絲和分生孢子著生處境：,五、測(cè)驗(yàn)報(bào)告,記錄所查看到的放線菌基內(nèi)菌絲和氣生菌絲的區(qū)別繪圖表示曲霉、根霉、青霉和毛霉的形態(tài)特征,斟酌題,在顯微鏡的高倍鏡或油