檢驗標(biāo)本采集手冊

檢驗標(biāo)本采集手冊檢驗結(jié)果是臨床醫(yī)師在診療過程中所需要的重要信息，臨床醫(yī)師可以根據(jù)這些檢驗結(jié)果及病人的臨床情況來區(qū)分疾病的不同階段，觀察疾病的變化，判斷預(yù)后或觀察療效。高陽縣醫(yī)院檢驗科每年參加省臨床檢驗中心的室間質(zhì)評活動，并取得較好成績，離不開室內(nèi)質(zhì)控的嚴(yán)格把關(guān)；所以分析前階段樣本的質(zhì)量保證是直接關(guān)系到檢驗結(jié)果能否真實客觀地反應(yīng)患者當(dāng)前病情的一個重要環(huán)節(jié)。一、病人準(zhǔn)備病人狀態(tài)一般需在安靜狀態(tài)下采集標(biāo)本，如患者處于高度緊張的狀態(tài)時，可使血紅蛋白、白細(xì)胞增高。由于勞累或受冷等刺激、也可見白細(xì)胞的增高。運(yùn)動能影響許多項目的測定結(jié)果。活動的影響可分暫時和持續(xù)性兩類。暫時性影響如使血漿脂肪酸含量減少；丙氨酸、乳酸含量增高。持續(xù)性影響，如激烈運(yùn)動后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測定值升高，有些恢復(fù)較慢，^口ALT在停止運(yùn)動1h后測定，其值仍可偏高30%?50%。飲食多數(shù)試驗要求在采血前禁食8-12h，因為飲食中的不同成分可直接影響實驗結(jié)果。餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高，進(jìn)食高蛋白或高核酸食物，可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。進(jìn)食高脂肪食物后采集的血液樣本，其血清會出現(xiàn)渾濁，可影響許多檢驗測定的正確性。甚至喝含咖啡因的飲料，可引起淀粉酶(AMY)、AST谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹時間過長，會使GLU，蛋白質(zhì)降低，而膽紅素升高。高脂餐后2?4h采血，多數(shù)人ALP含量增高，主要來自腸源性同工酶，且與血型有密切關(guān)系，O型或B型兼為Le+分泌型者增高更為明顯。高蛋白質(zhì)餐使血漿尿素、血氨增加，但不影響肌酐含量。高比例不飽脂肪酸食物，可減低膽固醇含量；香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增加數(shù)倍。含咖啡因飲料，可使血漿游離脂肪酸增加，并使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。食物如含有動物血液，可引起糞隱血假陽性。飲酒后使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加，長期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細(xì)胞體積增加、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶亦較不飲酒的病人為高，甚至可以將這三項作為嗜酒者的篩選檢查。吸煙：癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達(dá)8%，而不吸煙者含量在1%以下。此外，兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高，血液學(xué)方面亦有變化，白細(xì)胞數(shù)增加、嗜酸粒細(xì)胞減少、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細(xì)胞體積偏高。吸煙組血漿硫氤酸鹽濃度明顯高于非吸煙組。藥物藥物對檢驗的影響非常復(fù)雜，在采樣檢查之前，以暫停各種藥物為宜，如某種藥物不可停用，則應(yīng)了解可能對檢驗結(jié)果產(chǎn)生的影響。慶大毒素、氨節(jié)青毒素可使谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性增高、咖啡因可使膽紅素增加、維生素C可使血糖、膽固醇、甘油三脂、尿酸嚴(yán)重降低。體位體位影響血液循環(huán)，由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變，則細(xì)胞成分和大分子物質(zhì)的改變較為明顯，例如由臥位改為站位，血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高；Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于體位的因素，在確立參考值時，應(yīng)考慮門診和住院病人可能存在的結(jié)果差異，故采集標(biāo)本時要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。時間病人準(zhǔn)備還應(yīng)考慮病人的生物鐘規(guī)律，特別是激素水平分析，如女性生殖激素與月經(jīng)周期密切相關(guān)；膽固醇則在經(jīng)前期最高，排卵時最低；纖維蛋白原在經(jīng)前期最高，血漿蛋白則在排卵時減少。生長激素于入睡后會出現(xiàn)短時高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高；血漿蛋白在夜間降低；血Ca往往在中午出現(xiàn)最低值。故采血時間應(yīng)在相同時間進(jìn)行。二、標(biāo)本采集標(biāo)本采集是直接關(guān)系檢驗結(jié)果的基本要素，如果標(biāo)本采集不當(dāng)，即使最好的儀器設(shè)備也難以彌補(bǔ)在采集標(biāo)本時引入的誤差和錯誤?，F(xiàn)將各種標(biāo)本的采集要點分述如下：血液標(biāo)本標(biāo)本采集注意事項及采集方法采血時間一般在上午七點前空腹進(jìn)行，盡可能在其他檢查和治療前進(jìn)行。采血時一般讓患者取坐位或臥位，一般選擇肘正中靜脈，讓前臂水平伸直，放在墊枕上，暴露穿刺部位。采靜脈血時止血帶結(jié)扎過久，可引起誤差。如以結(jié)扎1min的樣品結(jié)果為基數(shù)，則結(jié)扎3min,可使血漿總蛋白增加5%,膽固醇增加5%,鐵增加6%,膽紅素增加8%,乳酸則不能使用止血帶。血清標(biāo)本應(yīng)避免溶血。許多物質(zhì)紅細(xì)胞內(nèi)和血清中(血漿)的含量是不一樣的。如ALT紅細(xì)胞內(nèi)比血清高出數(shù)倍。血鉀、AST高出幾十倍，而HDH則高出百倍以上，一旦溶血，特別是嚴(yán)重溶血，造成血清(漿)中這些物質(zhì)的測定值增高，干擾測定結(jié)果。要特別注意采血不能在輸液的同側(cè)進(jìn)行，更應(yīng)杜絕在輸液管內(nèi)采血，因輸液成分會影響檢測結(jié)果(使相應(yīng)的結(jié)果偏高，如輸K+、Glu時，可使所測K+、Glu明顯增高)，或使血液稀釋結(jié)果偏低。血培養(yǎng)的標(biāo)本要采用無菌技術(shù)，防止污染。采血時間血培養(yǎng)的采集應(yīng)該在使用抗菌藥物之前進(jìn)行。對于間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰來臨之前0.5-1小時采集血液，或寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1小時進(jìn)行。米血瓶的消毒先用70%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s，用無菌紗布或無菌棉簽清除殘余酒精。采血部位的消毒酒精擦拭靜脈穿刺部位待30S以上，10%碘伏作用60S，從穿刺點向外劃圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達(dá)3cm以上。70%酒精脫碘：對碘過敏的患者用70%酒精消毒60S，待酒精揮發(fā)干燥后采血。消毒后不可再用手接觸穿刺點，用注射器無菌穿刺抽取10ml血液直接注入消毒后的血培養(yǎng)瓶，輕輕顛倒混勻，立即送檢，切勿冷藏。OGTT試驗采血方法試驗前3天，受試者每日食物中糖含量不低于150g,維持正常活動，影響試驗的藥物也應(yīng)該在3天前停用。試驗前應(yīng)空腹10-12小時，坐位采血視為0小時標(biāo)本，采血后5分鐘內(nèi)飲入250ml含75g無水葡萄糖的糖水，其中，妊娠婦女用量為100g，小孩按1.75g/Kg體重計算，總量不超過75g。從喝第一口糖水開始計時，每隔1小時采血一次，共3次，歷時3小時。整個試驗過程中不可吸煙、喝咖啡、喝茶或進(jìn)食。盡量減少運(yùn)動。標(biāo)本采集后，必須在試管或容器上帖上檢驗申請單號碼、住院病人應(yīng)有床號、姓名，且應(yīng)當(dāng)場核對無誤。采血順序血培養(yǎng)一一血凝管一一血常規(guī)管一一生化及其他管注：血常規(guī)管不要在第一管采血，本次采血只有血常規(guī)項目除外。血細(xì)胞分析：抽血2mL，輕微顛倒5次，短紫色管。淋巴細(xì)胞亞群檢測：抽血2mL，輕微顛倒5次，短紫色管。凝血分析：放置時間不宜超過半小時，及時搖勻，血液與抗凝劑比例為9:1，裝0.3ml抗凝劑，抽血至3ml，輕微顛倒5次，淺藍(lán)色管。生化標(biāo)本：一般應(yīng)空腹抽血3ml，抗凝管帶分離膠，綠色管。有分離膠和促凝劑的采血管需要顛倒混勻至少5-8次。免疫標(biāo)本：一般應(yīng)空腹抽血3ml，促凝管，黃色管或是紅色管。有分離膠和促凝劑的采血管需要顛倒混勻至少5-8次。必須指出的是，各種標(biāo)本都必須嚴(yán)格貼好標(biāo)簽。血液標(biāo)本的預(yù)處理分離血清及血漿凝血五項 3500轉(zhuǎn)15分鐘離心血生化 3500轉(zhuǎn)10分鐘離心乙肝五項 3500轉(zhuǎn)10分鐘離心丙肝梅毒艾滋3500轉(zhuǎn)10分鐘離心過敏原3500轉(zhuǎn)10分鐘離心自身抗體系列3500轉(zhuǎn)10分鐘離心尿液標(biāo)本根據(jù)采集時間可分為晨尿、隨機(jī)尿、計時尿(24h等)、餐后尿、尿滲透壓、尿培養(yǎng)等。對于女性患者，留取尿標(biāo)本時應(yīng)避免陰道分泌物污染尿液，應(yīng)避開月經(jīng)期一周。尿標(biāo)本的采集方法：晨尿為住院病人留尿的主要方法，可用尿常規(guī)檢驗。清晨起床、未進(jìn)早餐和做運(yùn)動之前排出的第一次尿液，尿液在膀胱中存留6-8小時，留取中段尿液，置于潔凈、防滲漏的黃色帽試管中，標(biāo)本量應(yīng)在10ml左右。隨機(jī)尿也可以作為患者做尿常規(guī)的留尿檢驗方法?；颊邿o需任何準(zhǔn)備，不受時間限制，隨時排出的尿液標(biāo)本，留取中段尿液，放于潔凈、防滲漏的黃色帽試管中，標(biāo)本量應(yīng)在10ml左右。餐后尿為收集進(jìn)餐后2h尿，主要用于了解葡萄糖代謝情況，用以篩查隱性糖尿病或輕癥糖尿病。計時尿應(yīng)于計時開始時排空尿液，然后于規(guī)定時間內(nèi)至截止時間留尿，計時尿多用于腎功能和有形成分排出率的評估。24小時尿留取方法：在開始采集標(biāo)本當(dāng)天(早晨7-8點)，患者排掉晨尿并棄去尿液，從此時開始計時并留取尿液，將24小時的尿液全部收集于同一容器內(nèi)，并且第一次收集尿液后就在此容器內(nèi)加入適量的防腐劑(每100ml尿中加入防腐劑0.5ml)。準(zhǔn)確測量尿量并記錄，并將全部尿液混勻后，從中取出10ml左右尿液放于潔凈、防滲漏的藍(lán)色帽試管中。尿滲透壓禁食禁水12小時后將尿排盡，繼續(xù)禁食禁水，第13小時留尿。(當(dāng)天18：00點吃完晚飯后，不喝水不吃東西，可正常小便，至第二天早晨6點必須解掉小便，仍不喝水不吃東西，至7點再解小便送檢)。留取中段尿液，放于潔凈、防滲漏的黃色帽試管中，標(biāo)本量應(yīng)在10ml左右。尿培養(yǎng)標(biāo)本留取應(yīng)在使用抗生素之前，避免消毒劑的污染。早晨起床后女性患者用肥皂水清洗會陰部，再用清水洗尿道口周圍，男性患者應(yīng)用肥皂水清洗外陰，再用清水洗尿道口，留取中段晨尿，直接排入潔凈的黃色蓋廣口無菌培養(yǎng)杯中，標(biāo)本量應(yīng)在半杯左右，不宜過少。腎損八項早起晨尿，留取中段尿，置于潔凈、防滲漏的藍(lán)色帽試管中，標(biāo)本量應(yīng)在10ml左右。標(biāo)本采集后，必須在試管或容器上帖上檢驗申請單號碼、住院病人應(yīng)有床號、姓名，且應(yīng)當(dāng)場核對無誤。尿液標(biāo)本的預(yù)處理尿常規(guī) 先進(jìn)行尿干化學(xué)檢測后，1500轉(zhuǎn)5分鐘離心，棄上清液，進(jìn)行鏡檢24h尿4500轉(zhuǎn)5分鐘離心腎損八項4500轉(zhuǎn)5分鐘離心尿滲透壓1500轉(zhuǎn)5分鐘離心糞便標(biāo)本標(biāo)本采集后，必須在試管或容器上帖上檢驗申請單號碼、住院病人應(yīng)有床號、姓名，且應(yīng)當(dāng)場核對無誤。標(biāo)本采集及時送檢如作原蟲阿米巴檢查應(yīng)保持一定的溫度，且立即送檢，立即檢查。如檢查蟯蟲則不必送檢糞樣，而應(yīng)于晨起時排便前用棉拭擦肛門周圍，可得蟲卵。常規(guī)檢查的便標(biāo)本應(yīng)該留取指頭大小(約5g)新鮮糞便即可，放入干燥、清潔、無吸水性、有蓋的容器中。標(biāo)本的選取應(yīng)選擇有價值的標(biāo)本，如含膿血、粘液或色澤異常的便標(biāo)本，糞便標(biāo)本應(yīng)不污染容器外表，潛血試驗時，應(yīng)囑咐患者收集標(biāo)本前三天開始禁食動物性食物。腦脊液、漿膜腔液、關(guān)節(jié)液均由臨床醫(yī)師穿刺采樣，檢驗科應(yīng)提供專用的各種試管或容器，及時送送檢。（五） 痰液標(biāo)本采集晨間第一口痰，多用于細(xì)胞學(xué)及微生物學(xué)檢查。采樣前應(yīng)先反復(fù)漱口，經(jīng)深呼吸數(shù)次后用力咳痰，直接留于無菌培養(yǎng)杯中，蓋好蓋子，避免混入唾液，鼻涕等。微生物培養(yǎng)取樣應(yīng)在抗生素等藥物治療開始之前，如已用藥，則應(yīng)選血液藥物濃度最低水平時采樣。（六） 陰道分泌物由婦產(chǎn)科醫(yī)師采樣后即時送檢，否則影響滴蟲動力，易于漏檢。（七） 其他標(biāo)本根據(jù)具體檢驗項目而定，臨床醫(yī)師在開申請單前，應(yīng)同檢驗科相關(guān)部門聯(lián)系并詢問詳細(xì)后，注明檢查要求，再采樣并及時送檢?？傊?，各種檢驗標(biāo)本的采集合適與否，直接關(guān)系檢驗質(zhì)量，應(yīng)予以重視。三、標(biāo)本保存和運(yùn)送標(biāo)本保存和運(yùn)送是檢驗質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一。由于采集的標(biāo)本受各種因素的影響，可能使檢驗結(jié)果受或大或小的誤差，因此必須正確掌握標(biāo)本保存和運(yùn)送。標(biāo)本采集后盡量立即送檢，如在室溫放置時間過長會造成血液成分的變化（如血糖及酶活性降低），也可造成溶血現(xiàn)象。標(biāo)本的運(yùn)送處理標(biāo)本時應(yīng)特別注意：把每一份標(biāo)本都看做是無法重新獲得、唯一的標(biāo)本，必須小心地采集、保存、運(yùn)送、檢測和報告。要視所有的標(biāo)本都有傳染性，對“高?！睒?biāo)本，如乙型肝炎、艾滋病患者的標(biāo)本等，要注明標(biāo)識。嚴(yán)禁直接用口吸取標(biāo)本，避免標(biāo)本與皮膚接觸或污染器皿的外部實驗臺。標(biāo)本的運(yùn)送可采用人工運(yùn)送、軌道傳送等方法，但無論何種運(yùn)送方式，都應(yīng)該注意以下幾點：1、 唯一標(biāo)識原則采集后的標(biāo)本都應(yīng)具唯一標(biāo)識，除編號之外，還包括患者姓名等最基本的信息。目前，解決唯一標(biāo)識最好的方式是應(yīng)用條形碼系統(tǒng)。2、 生物安全原則應(yīng)使用可以反復(fù)消毒的專用容器運(yùn)送。特殊標(biāo)本應(yīng)有特殊標(biāo)識字樣(如劇毒、烈性傳染等)的容器密封運(yùn)送。必要時，還應(yīng)使用可降溫的運(yùn)送容器。使用真空采血管，確保試管管蓋和橡皮塞套牢。3、 盡快運(yùn)送原則標(biāo)本盡快檢驗，符合檢驗質(zhì)量要求和臨床診治的需求。若標(biāo)本不能及時轉(zhuǎn)運(yùn)，或欲將標(biāo)本送到上級檢驗中心進(jìn)行分析時，應(yīng)將標(biāo)本裝入試管內(nèi)密封，再裝入乙烯塑料袋，根據(jù)保存溫度要求可置冰瓶或冷藏箱內(nèi)運(yùn)送。運(yùn)送過程中應(yīng)避免劇烈震蕩。采樣后須立即送檢的常規(guī)項目：血氨、血沉、血氣分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各種細(xì)菌培養(yǎng)，特別是厭氧菌培養(yǎng)。采樣后0.5h內(nèi)送檢的常規(guī)項目：血糖、電解質(zhì)、血液細(xì)胞學(xué)、凝血試驗、體液細(xì)胞學(xué)、涂片找細(xì)菌、霉菌等。采樣后1?2h內(nèi)送檢的常規(guī)項目：各種蛋白質(zhì)類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測定等。標(biāo)本的保存血液標(biāo)本的保存血液標(biāo)本保存應(yīng)該在規(guī)定的時間內(nèi)、確保標(biāo)本特性穩(wěn)定的條件下，按要求保存。1、 分離后標(biāo)本如不能及時檢測或需要保留以備復(fù)查時，一般應(yīng)置于4°C冰箱；部分需保存一周的檢測項目標(biāo)本，存放于-20C冰箱。標(biāo)本存放時需要加塞，以免水分揮發(fā)而使標(biāo)本濃縮。冷凍標(biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。2、 檢測后的標(biāo)本檢測后的標(biāo)本不能立即處理掉，應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的性質(zhì)和要求按照規(guī)定時間放在冰箱中保存，并且標(biāo)本存放時需要加塞，以備復(fù)查需要。急診標(biāo)本、非急診標(biāo)本需妥善保存，在重新測定時，確保標(biāo)本檢索快速有效。3、 標(biāo)本信息的保存保存檢驗標(biāo)本時應(yīng)包括標(biāo)本信息的保存，且與分離的血漿或血清標(biāo)本相對應(yīng)。尿液標(biāo)本的保存尿標(biāo)本應(yīng)在采集2小時內(nèi)分析完畢，對不能及時檢驗的尿標(biāo)本，必須進(jìn)