氣相色譜定性定量分析

氣相色譜定性定量分析一.定性分析氣相色譜的優(yōu)點(diǎn)是能對(duì)多種組分的混合物進(jìn)行分離分析，（這是光譜、質(zhì)譜法所不能的）。但由于能用于色譜分析的物質(zhì)很多，不同組分在同一固定相上色譜峰出現(xiàn)時(shí)間可能相同，進(jìn)憑色譜峰對(duì)未知物定性有一定困難。對(duì)于一個(gè)未知樣品，首先要了解它的來(lái)源、性質(zhì)、分析目的；在此基礎(chǔ)上，對(duì)樣品可有初步估計(jì)；再結(jié)合已知純物質(zhì)或有關(guān)的色譜定性參考數(shù)據(jù)，用一定的方法進(jìn)行定性鑒定。（一）利用保留值定性已知物對(duì)照法各種組分在給定的色譜柱上都有確定的保留值，可以作為定性指標(biāo)。即通過(guò)比較已知純物質(zhì)和未知組分的保留值定性。如待測(cè)組分的保留值與在相同色譜條件下測(cè)得的已知純物質(zhì)的保留值相同，則可以初步認(rèn)為它們是屬同一種物質(zhì)。由于兩種組分在同一色譜柱上可能有相同的保留值，只用一根色譜往定性，結(jié)果不可靠。可采用另一根極性不同的色譜柱進(jìn)行定性，比較未知組分和已知純物質(zhì)在兩根色譜柱上的保留值，如果都具有相同的保留值，即可認(rèn)為未知組分與已知純物質(zhì)為同一種物質(zhì)。利用純物質(zhì)對(duì)照定性，首先要對(duì)試樣的組分有初步了解，預(yù)先準(zhǔn)備用于對(duì)照的已知純物質(zhì)（標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品）。該方法簡(jiǎn)便，是氣相色譜定性中最常用的定性方法。相對(duì)保留值法對(duì)于一些組成比較簡(jiǎn)單的已知范圍的混合物或無(wú)已知物時(shí)，可選定一基準(zhǔn)物按文獻(xiàn)報(bào)道的色譜條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算兩組分的相對(duì)保留值：（5）式中：i-未知組分；s-基準(zhǔn)物。并與文獻(xiàn)值比較，若二者相同，則可認(rèn)為是同一物質(zhì)。（ris僅隨固定液及柱溫變化而變化。）可選用易于得到的純品，而且與被分析組分的保留值相近的物質(zhì)作基準(zhǔn)物。2.保留指數(shù)法又稱為Kovats指數(shù)，與其它保留數(shù)據(jù)相比，是一種重現(xiàn)性較好的定性參數(shù)。保留指數(shù)是將正構(gòu)烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)物，把一個(gè)組分的保留行為換算成相當(dāng)于含有幾個(gè)碳的正構(gòu)烷烴的保留行為來(lái)描述，這個(gè)相對(duì)指數(shù)稱為保留指數(shù)，定義式如下：（6）IX為待測(cè)組分的保留指數(shù)，z與z+n為正構(gòu)烷烴對(duì)的碳數(shù)。規(guī)定正己烷、正庚烷及正辛烷等的保留指數(shù)為600、700、800,其它類推。在有關(guān)文獻(xiàn)給定的操作條件下，將選定的標(biāo)準(zhǔn)和待測(cè)組分混合后進(jìn)行色譜實(shí)驗(yàn)(要求被測(cè)組分的保留值在兩個(gè)相鄰的正構(gòu)烷烴的保留值之間)。由上式計(jì)算則待測(cè)組分X的保留指數(shù)IX，再與文獻(xiàn)值對(duì)照，即可定性。聯(lián)用技術(shù)氣相色譜對(duì)多組分復(fù)雜混合物的分離效率很高，但定性卻很困難。而質(zhì)譜、紅外光譜和核磁共振等是鑒別未知物的有力工具，但要求所分析的試樣組分很純。因此，將氣相色譜與質(zhì)譜、紅外光譜、核磁共振譜聯(lián)用，復(fù)雜的混合物先經(jīng)氣相色譜分離成單一組分后，再利用質(zhì)譜儀、紅外光譜儀或核磁共振譜儀進(jìn)行定性。未知物經(jīng)色譜分離后，質(zhì)譜可以很快地給出未知組分的相對(duì)分子質(zhì)量和電離碎片，提供是否含有某些元素或基團(tuán)的信息。紅外光譜也可很快得到未知組分所含各類基團(tuán)的信息。對(duì)結(jié)構(gòu)堅(jiān)定提供可靠的論據(jù)。近年來(lái)，隨著電子計(jì)算機(jī)技術(shù)的應(yīng)用，大大促進(jìn)了氣相色譜法與其它方法聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展。二.定量分析在一定的色譜操作條件下，流入檢測(cè)器的待測(cè)組分i的含量mi(質(zhì)量或濃度)與檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)(峰面積A或峰高h(yuǎn))成正比：mi=fiAi或mi=fihi式中，fi為定量校正因子。要準(zhǔn)確進(jìn)行定量分析，必須準(zhǔn)確地測(cè)量響應(yīng)信號(hào)，確求出定量校正因子fi。此兩式是色譜定量分析的理論依據(jù)。峰面積的測(cè)量峰高乘半峰寬法：對(duì)于對(duì)稱色譜峰，可用下式計(jì)算峰面積：(7)在相對(duì)計(jì)算時(shí)，系數(shù)1.06可約去。峰高乘平均峰寬法：(8)對(duì)于不對(duì)稱峰的測(cè)量，在峰高0.15和0.85處分別測(cè)出峰寬，由下式計(jì)算峰面積：此法測(cè)量時(shí)比較麻煩，但計(jì)算結(jié)果較準(zhǔn)確。（3）自動(dòng)積分法具有微處理機(jī)（工作站、數(shù)據(jù)站等），能自動(dòng)測(cè)量色譜峰面積，對(duì)不同形狀的色譜峰可以采用相應(yīng)的計(jì)算程序自動(dòng)計(jì)算，得出準(zhǔn)確的結(jié)果，并由打印機(jī)打出保留時(shí)間和A或h等數(shù)據(jù)。定量校正因子由于同一檢測(cè)器對(duì)不同物質(zhì)的響應(yīng)值不同，所以當(dāng)相同質(zhì)量的不同物質(zhì)通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，產(chǎn)生的峰面積（或峰高）不一定相等。為使峰面積能夠準(zhǔn)確地反映待測(cè)組分的含量，就必須先用已知量的待測(cè)組分測(cè)定在所用色譜條件下的峰面積，以計(jì)算定量校正因子。（9）式中：fi稱為絕對(duì)校正因子，即是單位峰面積所相當(dāng)?shù)奈镔|(zhì)量。它與檢測(cè)器性能、組分和流動(dòng)相性質(zhì)及操作條件有關(guān)，不易準(zhǔn)確測(cè)量。在定量分析中常用相對(duì)校正因子，即某一組分與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的絕對(duì)校正因子之比，即：（10）式中：Ai、As分別為組分和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積；mi、ms分別為組分和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量。mi、ms可以用質(zhì)量或摩爾質(zhì)量為單位，其所得的相對(duì)校正因子分別稱為相對(duì)質(zhì)量校正因子和相對(duì)摩爾校正因子，用fm和fM表示。使用時(shí)常將相對(duì)二字省去。校正因子一般都由實(shí)驗(yàn)者自己測(cè)定。準(zhǔn)確稱取組分和標(biāo)準(zhǔn)物，配制成溶液，取一定體積注入色譜柱，經(jīng)分離后，測(cè)得各組分的峰面積，再由上式計(jì)算fm或fM。定量方法（1） 歸一化法：如果試樣中所有組分均能流出色譜柱，并在檢測(cè)器上都有響應(yīng)信號(hào)，都能出現(xiàn)色譜峰，可用此法計(jì)算各待測(cè)組分的含量。其計(jì)算公式如下：（11）歸一化法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，進(jìn)樣量多少不影響定量的準(zhǔn)確性，操作條件的變動(dòng)對(duì)結(jié)果的影響也較小，尤其適用多組分的同時(shí)測(cè)定。但若試樣中有的組分不能出峰，則不能采用此法。（2） 內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)法是在試樣中加入一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物來(lái)測(cè)定組分的含量。內(nèi)標(biāo)物應(yīng)選用試樣中不存在的純物質(zhì)，其色譜峰應(yīng)位于待測(cè)組分色譜峰附近或幾個(gè)待測(cè)組分色譜峰的中間，并與待測(cè)組分完全分離，內(nèi)標(biāo)物的加入量也應(yīng)接近試樣中待測(cè)組分的含量。具體作法是準(zhǔn)確稱取m（g）試樣，加入ms（g）內(nèi)標(biāo)物，根據(jù)試樣和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量比及相應(yīng)的峰面積之比，由下式計(jì)算待測(cè)組分的含量：（12）（13）由于內(nèi)標(biāo)法中以內(nèi)標(biāo)物為基準(zhǔn)，則fs=1。內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)是定量準(zhǔn)確。因?yàn)樵摲ㄊ怯么郎y(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的峰面積的相對(duì)值進(jìn)行計(jì)算，所以不要求嚴(yán)格控制進(jìn)樣量和操作條件，試樣中含有不出峰的組分時(shí)也能使用，但每次分析都要準(zhǔn)確稱取或量取試樣和內(nèi)標(biāo)物的量，比較費(fèi)時(shí)。為了減少稱量和測(cè)定校正因子可采用內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)化內(nèi)標(biāo)法：在一定實(shí)驗(yàn)條件下，待測(cè)組分的含量mi與Ai/As成正比例。先用待測(cè)組分的純品配置一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入相同量的內(nèi)標(biāo)物；再將同樣量的內(nèi)標(biāo)物加入到同體積的待測(cè)樣品溶液中，分別進(jìn)樣，測(cè)出Ai/As，作Ai/Asm或Ai/AsC圖，由Ai（樣）/As即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得待測(cè)組分的含量。（3）外標(biāo)法：取待測(cè)試樣的純物質(zhì)配成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別取一定體積，進(jìn)樣分析。從色譜圖上測(cè)出峰面積（或峰高）以峰面積（或峰高）對(duì)含量