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實(shí)驗(yàn)一培養(yǎng)基的制備消毒與滅菌及超凈工作臺(tái)的使用詳解(Jie)演示文稿第一頁,共二十一頁。優(yōu)(You)選實(shí)驗(yàn)一培養(yǎng)基的制備消毒與滅菌及超凈工作臺(tái)的使用第二頁,共二十一頁。課堂紀(jì)(Ji)律嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度嚴(yán)肅課堂紀(jì)律不允許無故曠課、早退(1次)遲到(3次)不能做與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的事第三頁,共二十一頁。實(shí)驗(yàn)室安全(Quan)和衛(wèi)生安全實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)禁吸煙。注意用水、防電和防火正確使用化學(xué)試劑和儀器衛(wèi)生每次實(shí)驗(yàn)需留下6位同學(xué)值日,協(xié)助保持實(shí)驗(yàn)室清潔第四頁,共二十一頁。1、了解培養(yǎng)基(Ji)的概念、種類和用途,明確培養(yǎng)基(Ji)的配制原理。2、學(xué)習(xí)掌握培養(yǎng)基配制的一般方法和步驟。3、掌握高壓蒸汽滅菌的原理和方法步驟。實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊弧⑴囵B(yǎng)基的配制第五頁,共二十一頁。
培養(yǎng)基(culturemedium)是指人工配制的、適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。自然界中微生物種類繁多,營(yíng)養(yǎng)類型多樣,加之實(shí)驗(yàn)和研究目的不同,所以培養(yǎng)基的種類很多,不同種類的培養(yǎng)基一般都應(yīng)含有微生物生長(zhǎng)所需的碳源、氮源、能源、無機(jī)(Ji)鹽、生長(zhǎng)因子和水六大營(yíng)養(yǎng)要素,且各成分比例應(yīng)合適。為了滿足微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的要求,還必須控制培養(yǎng)基合適的pH。
實(shí)驗(yàn)原理第六頁,共二十一頁。常用凝固(Gu)劑是瓊脂,固(Gu)體培養(yǎng)基瓊脂加量通常為1.5%-2%;半固(Gu)體培養(yǎng)基瓊脂加量為0.5%-0.8%。實(shí)驗(yàn)原理常用培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng);高氏一號(hào)培養(yǎng)基用于培養(yǎng)放線菌;麥芽汁培養(yǎng)基和豆芽汁培養(yǎng)基通常用于酵母菌的培養(yǎng);馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)霉菌。第七頁,共二十一頁。實(shí)驗(yàn)分組安(An)排5-6人一組,配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基每組配500mL牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基斜面1支(每人),其余分裝在兩個(gè)500mL三角瓶。
第八頁,共二十一頁。第九頁,共二十一頁。第十頁,共二十一頁。第十一頁,共二十一頁。第十二頁,共二十一頁。包(Bao)扎:
加塞后,試管通常每7支一起,包上一層牛皮紙或兩層報(bào)紙,用線繩扎緊。三角瓶加塞后也用牛皮紙包扎。
以活結(jié)形式扎緊,以便使用時(shí)容易解開。
用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期、配制人或?qū)嶒?yàn)組。滅菌時(shí)包牛皮紙、報(bào)紙第十三頁,共二十一頁。滅(Mie)菌:
培養(yǎng)基滅菌一般采用壓力蒸汽滅菌
通常滅菌條件為1.05kg/cm2,121℃滅菌20-30分鐘;含糖量高的培養(yǎng)基,如馬丁氏培養(yǎng)基則為0.56kg/cm2,115℃滅菌30分鐘。第十四頁,共二十一頁。二、消毒與(Yu)滅菌第十五頁,共二十一頁。第十六頁,共二十一頁。第十七頁,共二十一頁。紫外線滅菌----紫外線波長(zhǎng)在200-300nm,具有殺菌作(Zuo)用,其中以265-266nm殺菌力最強(qiáng)。無菌室或無菌接種箱空氣可用紫外線燈照射滅菌。第十八頁,共二十一頁。干熱滅(Mie)菌電烤箱1、干熱滅菌2、壓力蒸汽滅菌第十九頁,共二十一頁。干熱滅(Mie)菌1、裝入待滅菌物品2、升溫:接通電源,加熱升溫至160-170℃。3、恒溫:保持160-170℃2小時(shí)。4、降溫:切斷電源,自然降溫。5、開箱取物:待烤箱溫
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