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關(guān)于微生物驗(yàn)證自發(fā)突變?nèi)齻€(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)第1頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四基因突變一、基因突變簡(jiǎn)稱突變,指細(xì)胞內(nèi)(或病毒粒內(nèi))遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)或數(shù)量突然發(fā)生的可遺傳的變化。(一)類型1、根據(jù)表型劃分第2頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四突變類型自發(fā)突變
誘發(fā)突變低劑量多因素突變互變異構(gòu)效應(yīng)物理誘變化學(xué)誘變定向培育和馴化第3頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四微生物基因突變的特點(diǎn)自發(fā)性:沒(méi)有人為誘變因素可自發(fā)產(chǎn)生稀有性:突變率比較低,范圍10-6~10-9獨(dú)立性:某基因突變率不受別的基因影響。多基因同時(shí)突變幾率極低。可誘變性:誘變劑可提高突變率穩(wěn)定性:突變后新性狀是穩(wěn)定的、可遺傳的。規(guī)律性:特定性狀具有較穩(wěn)定的突變率的規(guī)律??赡嫘裕阂吧屯蛔冃驼蛲蛔兓貜?fù)突變第4頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四不對(duì)應(yīng)性:突變的性狀與引起突變的原因(環(huán)境)之間無(wú)直接的關(guān)系。兩種觀點(diǎn):抗生素、紫外線或高溫誘變產(chǎn)生相對(duì)應(yīng)的突變性狀(非自發(fā)性)。認(rèn)為突變是通過(guò)生物對(duì)某特定環(huán)境(例如化學(xué)藥物、抗生素和高溫等)的適應(yīng)而產(chǎn)生的,這種環(huán)境正是突變的誘因,所產(chǎn)生的抗性性狀是與該環(huán)境因素相對(duì)應(yīng)的,并認(rèn)為這就是環(huán)境因素對(duì)生物體的“馴化”、“馴養(yǎng)”、“蒙導(dǎo)”或“定向變異”??股?、紫外線或高溫淘汰原有非突變個(gè)體(自發(fā)性)??剐酝蛔兪强梢宰园l(fā)產(chǎn)生的,即使誘發(fā)產(chǎn)生,其產(chǎn)生的性狀與誘變因素間也是不對(duì)應(yīng)的,即最終適應(yīng)了的化學(xué)藥物等不良因素并非誘變因素,而僅僅是一種用于篩選的環(huán)境而已。
第5頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四基因突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的證明突變是通過(guò)適應(yīng)而產(chǎn)生的,突變的原因與性狀間是相對(duì)應(yīng)的。
突變是自發(fā)的,與環(huán)境是不相對(duì)應(yīng)的。
PK第6頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四微生物突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性證明取敏感于噬菌體的E.coli指數(shù)期的肉湯培養(yǎng)物,用新鮮培養(yǎng)稀釋成濃度為103/mL的細(xì)菌懸液,然后在甲、乙兩試管各裝10mL。
1、變量實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:E.coli對(duì)于phageT1的抗性變異波動(dòng)實(shí)驗(yàn)。第7頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四接著把甲管中的菌液先分裝在50支小試管中(每管0.2mL),保溫24-36h。
微生物突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性證明第8頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四把各小管的菌液分別倒在50個(gè)預(yù)先涂滿噬菌體T1的平板上,經(jīng)培養(yǎng)后分別計(jì)算各皿上所產(chǎn)生的抗噬菌體的菌落數(shù)。
微生物突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性證明第9頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四乙管中的10mL菌不經(jīng)分裝先整管保溫24—36h,然后分成50份分別倒在同樣涂滿T1的平板上,經(jīng)同樣培養(yǎng)后,也分別計(jì)算各皿上所產(chǎn)生的抗噬菌體菌落數(shù)
。
微生物突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性證明第10頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四結(jié)果:在來(lái)自甲管的50皿中,各皿出現(xiàn)的抗性菌落數(shù)相差極大,而來(lái)自乙管的則各皿上抗性菌落數(shù)基本相同
。
微生物突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性證明第11頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四結(jié)論:E.coli抗噬菌體性狀的產(chǎn)生,并非由所抗的環(huán)境因素(即噬菌體T1)誘導(dǎo)出來(lái)的,而是在它接觸T1前,在某次細(xì)胞分裂過(guò)程中自發(fā)產(chǎn)生的
。
微生物突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性證明第12頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四2、涂布實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:第13頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四(2)實(shí)驗(yàn)原理:若抗性是在接觸噬菌體以后產(chǎn)生的,那么噴噬菌體以前的重新涂布無(wú)非使細(xì)菌所處的位置發(fā)生改變,而不會(huì)因?yàn)橥坎即蟠蟮馗淖兗?xì)菌對(duì)于噬菌體的反應(yīng),因此兩組培養(yǎng)皿上出現(xiàn)的抗性菌落數(shù)應(yīng)相等;若抗性發(fā)生在接觸噬菌體以前,那么在噴上噬菌體以前某些菌落中的抗性突變型細(xì)菌已經(jīng)分裂若干次,在不經(jīng)重新涂布的培養(yǎng)皿上形成一個(gè)菌落,在重新涂布的培養(yǎng)皿上出現(xiàn)若干菌落。(3)結(jié)果:重新涂布的培養(yǎng)皿上出現(xiàn)的抗性菌落多余未經(jīng)重新涂布的。(4)結(jié)論:抗性突變的發(fā)生在接觸噬菌體之前。第14頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四3、影印培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:第15頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期四(2)實(shí)驗(yàn)原理:通過(guò)蓋印章的方式,在未接觸抗性因素的條件下篩選出的抗性突變株。由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有接觸過(guò)抗性因素,所以直接證明了基因突變的自發(fā)性。(3)結(jié)果:得到越
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