2023年高考生物沖刺專題卷專題30基因工程（含解析）

2023年高考生物沖刺專題卷專題30基因工程（含解析）PAGEPAGE1專題30基因工程一、選擇題〔20小題〕1．以下物質(zhì)或過程不影響磷酸二酯鍵數(shù)目變化的是〔〕A.RNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶B.DNA聚合酶、DNA連接酶、限制酶C.遺傳信息的翻譯、PCR中DNA解鏈D.cDNA文庫的構(gòu)建、染色體的結(jié)構(gòu)變異【答案】C【題型】選擇題【難度】較易2．以下有關(guān)基因工程和酶的相關(guān)表達(dá)，正確的選項(xiàng)是〔〕A．同種限制酶既可以切割目的基因又可以切割質(zhì)粒，因此不具備專一性B．運(yùn)載體的化學(xué)本質(zhì)與載體蛋白相同C．限制酶不能切割煙草花葉病毒的核酸D．DNA連接酶可催化脫氧核苷酸鏈間形成氫鍵【答案】C【解析】一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子，表達(dá)酶的專一性。既可以切割目的基因又可以切割質(zhì)粒，說明含有目的基因的DNA片段和質(zhì)粒上均含有該限制酶的識別序列，A錯誤；運(yùn)載體的化學(xué)本質(zhì)是DNA，而細(xì)胞膜上載體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，B錯誤；限制酶能識別并切割DNA分子，而煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，C正確；DNA連接酶可以催化連接被限制酶切割開的核苷酸之間的磷酸二酯鍵，不催化氫鍵的形成，D錯誤。【題型】選擇題【難度】一般3．假設(shè)要利用某目的基因〔見圖甲〕和P1噬菌體載體〔見圖乙〕構(gòu)建重組DNA〔見圖丙〕，限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ〔A↓GATCT〕、EcoRⅠ〔G↓AATTC〕和Sau3AⅠ〔↓GATC〕。以下分析合理的是〔〕A．用EcoRⅠ切割含目的基因的DNA和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割含目的基因的DNA和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割含目的基因DNA和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因DNA和P1噬菌體載體【答案】D【題型】選擇題【難度】較難4．以下關(guān)于“分子運(yùn)輸車〞的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是〔〕A．常見種類只有質(zhì)粒和動植物病毒B．能夠在受體細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，但不能整合到染色體DNA上C．質(zhì)粒上的抗生素抗性基因有利于質(zhì)粒與外源基因連接D．在基因工程操作中真正被用作載體的質(zhì)粒都是進(jìn)行過人工改造的【答案】D【解析】基因工程中運(yùn)載目的基因的“分子運(yùn)輸車〞常見種類有質(zhì)粒和動植物病毒及噬菌體等，A錯誤；載體能夠在受體細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，也可能整合到染色體DNA上，B錯誤；質(zhì)粒上的抗生素抗性基因有利于檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)，C錯誤；在基因工程操作中真正被用作載體的質(zhì)粒都是進(jìn)行過人工改造的，D正確。【題型】選擇題【難度】一般5．某環(huán)狀DNA分子共含2000個堿基，其中腺嘌呤占30%，用限制性核酸內(nèi)切酶BamHI〔識別序列為〕完全切割該DNA分子后產(chǎn)生2個片段，那么以下有關(guān)表達(dá)中，正確的選項(xiàng)是〔〕A．一個該DNA分子連續(xù)復(fù)制2次，共需游離的胞嘧啶脫氧核苷酸1600個B．含限制性核酸內(nèi)切酶BamHI的溶液中參加雙縮脲試劑A液振蕩后即出現(xiàn)紫色C．一個該DNA分子含有2個BamHI的識別序列D．一個該DNA分子經(jīng)BamHI完全切割后產(chǎn)生的核酸片段，共含有8個游離的磷酸基團(tuán)【答案】C【題型】選擇題【難度】較難6．以下為形成cDNA過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。據(jù)圖分析，以下說法正確的選項(xiàng)是〔〕A．催化①過程的酶是DNA聚合酶B．④過程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C．催化②⑤過程的酶都必須能耐高溫D．過程③需要解旋酶【答案】B【解析】圖示為形成cDNA過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖，其中①是由RNA形成單鏈DNA的過程，為逆轉(zhuǎn)錄過程，所以催化①過程的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，A錯誤；④是復(fù)性過程，發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合，B正確；②是以單鏈DNA合成雙鏈DNA的過程，是DNA分子復(fù)制過程。催化⑤過程的酶都必須能耐高溫，C錯誤；③④⑤是多聚酶鏈?zhǔn)椒错憯U(kuò)增DNA片段，其中③是變性過程，加熱使DNA變性，不需要解旋酶，D錯誤?！绢}型】選擇題【難度】一般7．PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)，以下有關(guān)PCR過程的表達(dá)，不正確的選項(xiàng)是〔〕A．變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵B．復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原那么完成C．延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸D．PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高【答案】C【題型】選擇題【難度】較易8．農(nóng)桿菌中含有一個大型的Ti質(zhì)粒(如下圖)，在侵染植物細(xì)胞的過程中，其中的T-DNA片段轉(zhuǎn)入植物的基因組。假設(shè)想用基因工程并通過農(nóng)桿菌向某種植物中導(dǎo)入抗旱基因，以下分析不合理的是()A．假設(shè)用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體，目的基因的插入位置應(yīng)該在T-DNA片段內(nèi)，且要保證復(fù)制起始點(diǎn)和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞B．將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌中時，可以用Ca2＋處理細(xì)菌C．轉(zhuǎn)基因抗旱植物培育是否成功的最簡單檢測方法是看該植物是否具有抗旱性狀D．假設(shè)能夠在植物細(xì)胞中檢測到抗旱目的基因，那么說明該基因工程工程獲得成功【答案】D【解析】假設(shè)用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體，目的基因的插入位置應(yīng)該在T-DNA片段內(nèi)，且要保證復(fù)制起始點(diǎn)、終止點(diǎn)和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞，否那么不會成功；將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌中時，可以用Ca2＋處理細(xì)菌，便于完成轉(zhuǎn)化；轉(zhuǎn)基因抗旱植物培育是否成功的最簡單檢測方法是看該植物是否具有抗旱性狀；能夠在植物細(xì)胞中檢測到抗旱目的基因，并能成功表達(dá)出抗旱性狀，才說明基因工程工程獲得成功。故D符合題意?！绢}型】選擇題【難度】一般9.在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟中，不需要的是〔〕A.用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞B.用選擇培養(yǎng)基篩法導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞C.用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生物質(zhì)融合D.用適當(dāng)比例的生長素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽【答案】C【題型】選擇題【難度】一般10．以下有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是〔〕A．表達(dá)載體中的胰島素基因可通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B．表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動于復(fù)制原〔起〕點(diǎn)C．借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來D．啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用【答案】C【解析】人肝細(xì)胞中胰島素基因不表達(dá)，因而不存在胰島素mRNA，A錯誤；復(fù)制原點(diǎn)是基因表達(dá)載體復(fù)制的起點(diǎn)，而胰島素基因表達(dá)的起點(diǎn)位于啟動子，B錯誤；借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來，C正確；啟動子與RNA聚合酶結(jié)合，啟動轉(zhuǎn)錄過程，終止密碼子那么參與終止翻譯過程，D項(xiàng)誤。【題型】選擇題【難度】一般11．MyoD是成肌細(xì)胞分化為骨骼肌細(xì)胞過程中的一種關(guān)鍵蛋白。將MyoD基因轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞中表達(dá)，成纖維細(xì)胞就能表現(xiàn)出骨骼肌細(xì)胞的特征。以下說法正確的選項(xiàng)是〔〕A．可用Ca2+處理成纖維細(xì)胞使其成為感受態(tài)B．MyoD基因只存在于骨骼肌細(xì)胞中C．骨骼肌細(xì)胞只表達(dá)MyoD的基因D．MyoD基因在正常成纖維細(xì)胞中不表達(dá)【答案】D【題型】選擇題【難度】較易12．以下圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌〞的示意圖，所用載體為質(zhì)粒A。細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá)。以下說法正確的選項(xiàng)是〔〕A．將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B常用的方法是顯微注射法B．將完成導(dǎo)入過程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長的只是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌C．將完成導(dǎo)入過程后的細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，能生長的就是導(dǎo)入了質(zhì)粒A的細(xì)菌D．目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長【答案】C【解析】將目的基因?qū)爰?xì)菌時，常用Ca2+處理細(xì)菌，使之處于感受態(tài)，從而能夠吸收重組質(zhì)粒，A錯誤；由于抗氨芐青霉素基因未被破壞，所以在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌和導(dǎo)入普通質(zhì)粒的細(xì)菌，B錯誤；由于抗四環(huán)素基因被破壞，所以能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長的是導(dǎo)入普通質(zhì)粒A的細(xì)菌，C正確；目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是工程菌生產(chǎn)出人的生長激素，D錯誤。【題型】選擇題【難度】一般13．基因工程是在DNA分子水平進(jìn)行設(shè)計施工的，在基因操作的以下步驟中,不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的是〔〕①人工合成目的基因②E．coliDNA連接酶結(jié)合目的基因與載體③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞④目的基因的檢測和表達(dá)⑤個體生物學(xué)水平的鑒定A．①③B．①⑤C．③⑤D．②③④【答案】C【題型】選擇題【難度】一般14．纖維素分子不能進(jìn)入酵母細(xì)胞，為了使酵母菌能夠利用環(huán)境中的纖維素為原料生產(chǎn)酒精，構(gòu)建了含3種不同基因片段的重組質(zhì)粒，下面是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運(yùn)輸?shù)氖疽鈭D。以下相關(guān)表達(dá)錯誤的選項(xiàng)是〔〕A.菌株Ⅰ未獲得纖維素酶基因，無法合成纖維素酶B.菌株Ⅱ因缺乏信號肽編碼序列，合成的纖維素酶無法分泌C.菌株Ⅲ核糖體合成的纖維素酶可直接進(jìn)入高爾基體內(nèi)分揀包裝后分泌到細(xì)胞外D.菌株Ⅳ的纖維素酶可以固定于細(xì)胞壁外表與A基因片段有關(guān)【答案】C【題型】選擇題【難度】較難15．玫瑰有5000多年的人工栽培歷史，迄今已培育出2500多個品種。玫瑰沒有生成藍(lán)色翠雀花素所需的“黃酮類化合物3，5—?dú)溲趸辅暤幕?，因此藍(lán)玫瑰被認(rèn)為是不可能培育成功的。但日本科研人員將藍(lán)三葉草中的藍(lán)色素基因植入普通玫瑰而成功培育出了藍(lán)玫瑰，這株玫瑰的花瓣中所含的色素為藍(lán)色。以下有關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔〕A．藍(lán)色翠雀花素分布于藍(lán)玫瑰花瓣細(xì)胞的液泡和葉綠體中B．培育藍(lán)玫瑰用到的工具酶是限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶C．藍(lán)色素基因在所有玫瑰細(xì)胞中都能控制合成藍(lán)色翠雀花素D．藍(lán)玫瑰的培育成功意味著人類創(chuàng)造了一個新的物種【答案】B【解析】藍(lán)色翠雀花素分布于藍(lán)玫瑰花瓣細(xì)胞的液泡中，葉綠體中有光合色素，A錯誤；日本科研人員將藍(lán)三葉草中的藍(lán)色素基因植入普通玫瑰而成功培育出了藍(lán)玫瑰，此為轉(zhuǎn)基因操作，故用到的工具酶是限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶，B正確；藍(lán)色素基因在玫瑰花瓣細(xì)胞中能控制合成藍(lán)色翠雀花素，在其他細(xì)胞不表達(dá)，C錯誤；藍(lán)玫瑰與其他玫瑰未產(chǎn)生生殖隔離，沒有產(chǎn)生新物種，D錯誤。【題型】選擇題【難度】一般16．α1-抗胰蛋白酶缺乏癥是北美常見的一種單基因遺傳病，患者成年后會出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴(yán)重者甚至死亡。利用基因工程技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫眩罱K培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人α1-抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更容易獲得這種酶。以下關(guān)于該過程的表達(dá)中錯誤的選項(xiàng)是〔〕A．載體上綠色熒光蛋白基因〔GFP〕的作用是便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞B．將目的基因?qū)胙虬螂准?xì)胞中，將會更加容易得到α1-抗胰蛋白酶C．培養(yǎng)出的轉(zhuǎn)基因羊的所有細(xì)胞中都含有該目的基因，故該羊有性生殖產(chǎn)生的后代也都能產(chǎn)生α1-抗胰蛋白酶D．目的基因與載體重組過程需要DNA連接酶的催化作用【答案】C【題型】選擇題【難度】一般17.轉(zhuǎn)基因食品已大量進(jìn)入我們的日常生活，如轉(zhuǎn)基因西紅柿、轉(zhuǎn)基因草莓等，涉及的問題甚至關(guān)系到國家之間的貿(mào)易競爭，如圖為“霸占中國市場的轉(zhuǎn)基因大豆油〞的局部圖示。以下關(guān)于轉(zhuǎn)基因大豆的表達(dá)不正確的選項(xiàng)是()A．培育過程中可能用到抗病、抗蟲等抗性基因B．目的基因的受體細(xì)胞可以是大豆受精卵，也可以是體細(xì)胞C．轉(zhuǎn)基因大豆的種植過程中減少了農(nóng)藥等的使用量，生產(chǎn)本錢更低D．固氮菌的固氮基因也是必需的目的基因之一【答案】D【解析】培育轉(zhuǎn)基因大豆過程中可能用到抗病、抗蟲等抗性基因，A正確；為育成轉(zhuǎn)基因大豆新品種，導(dǎo)入目的基因時，受體細(xì)胞可以是大豆受精卵，也可以是體細(xì)胞，B正確；轉(zhuǎn)基因大豆中抗蟲、抗病等抗性基因可以減少農(nóng)藥的使用，既保護(hù)了環(huán)境，又使生產(chǎn)本錢更低，C正確；與豆科植物共生的根瘤菌中有固氮基因，因此固氮基因不是目的基因，D錯誤。

【題型】選擇題【難度】一般18．科學(xué)家將控制某藥物蛋白合成的基因轉(zhuǎn)移到白色來亨雞胚胎細(xì)胞的DNA中，發(fā)育后的雌雞就能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋，在每一只雞蛋的蛋清中都含有大量的藥物蛋白；而且這些含該藥物蛋白的雞蛋孵出的雞，仍能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋。據(jù)此分析不正確的一項(xiàng)為哪一項(xiàng)〔〕A．這些雞是基因工程的產(chǎn)物B．這種變異屬于可遺傳的變異C．該過程屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)D．該種變異屬于定向變異【答案】C【題型】選擇題【難度】一般19．豬的胰島素用于人體降低血糖濃度效果不明顯，原因是豬胰島素分子中有一個氨基酸與人的不同。為了使豬胰島素臨床用于人治療糖尿病，用蛋白質(zhì)工程進(jìn)行蛋白分子設(shè)計的最正確方案是〔〕A．對豬胰島素進(jìn)行一個不同氨基酸的替換B．將豬胰島素和人胰島素進(jìn)行拼接組成新的胰島素C．將豬和人的胰島素混合在一起治療糖尿病D．根據(jù)人的胰島素設(shè)計制造一種全新的胰島素【答案】A【解析】基因定點(diǎn)誘變技術(shù)是蛋白質(zhì)工程常用的技術(shù)，根據(jù)題干信息“豬胰島素分子中有一個氨基酸與人的不同〞可知，用蛋白質(zhì)工程的蛋白質(zhì)分子設(shè)計的最正確方案是對豬胰島素進(jìn)行一個不同氨基酸的替換?！绢}型】選擇題【難度】較易20.從某海洋動物中獲得一基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前在P1的根底上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是〔〕A．合成編碼目的肽的DNA片段B．構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體C．依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽D．篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽【答案】C【題型】選擇題【難度】一般二、綜合題〔5小題〕21.某一質(zhì)粒載體如下圖，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活〔Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因〕。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，參加DNA連接酶進(jìn)行連接反響，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。答復(fù)以下問題：〔1〕質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的根本條件有______________〔答出兩點(diǎn)即可〕。而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述根本條件外，還需具有啟動子和終止子?！?〕如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是______________；并且______________和______________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是_____________。在上述篩選的根底上，假設(shè)要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有是_____________的固體培養(yǎng)基。〔3〕基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于_____________【答案】〔1〕能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個至多個限制酶切割位點(diǎn)〔答出兩點(diǎn)即可〕〔2〕二者均不含氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上都不能生長含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)?！不虼鸷兄亟M質(zhì)粒〕二者都含氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長四環(huán)素〔3〕受體細(xì)胞【解析】〔1〕質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的根本條件有：能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個至多個限制酶切割位點(diǎn)等。

〔3〕噬菌體時專門寄生細(xì)菌細(xì)胞中的病毒。在基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于受體細(xì)胞?！绢}型】綜合題【難度】一般22．人參是一種名貴藥材，具有良好的滋補(bǔ)作用。口服α-干擾素在慢性乙肝、丙肝及局部腫瘤的治療中有一定療效。以下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程，①～④表示相關(guān)的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶，它們的識別序列及切割位點(diǎn)如表所示。請答復(fù)以下問題：〔1〕步驟①中，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時，設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是_________________?？蒲腥藛T還在兩種引物的一端分別加上了______________和_____________序列，以便于后續(xù)的剪切和連接?！?〕過程②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需結(jié)構(gòu)還有_________________，過程③中需先用_________處理農(nóng)桿菌，以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。〔3〕過程④中，科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后，先通過________________過程獲得DNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增，假設(shè)最終未能檢測出干擾素基因，其可能原因是_____________________________________?！?〕治療中發(fā)現(xiàn)，用于口服的α-干擾素在胃中會受到一定程度的破壞，影響其成效，需要利用__________________________技術(shù)加以改造，以到達(dá)滿意效果。【答案】〔1〕干擾素基因兩端的局部核苷酸序列GAATTCGGATCC〔2〕復(fù)制原點(diǎn)Ca2+〔3〕逆轉(zhuǎn)錄干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細(xì)胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄〔4〕蛋白質(zhì)工程【解析】【題型】綜合題【難度】一般23．為解除柑橘黃龍病對柑橘產(chǎn)業(yè)的嚴(yán)重影響，美國科學(xué)家近日從菠菜中獲得了一種能抵抗柑橘黃龍病的蛋白質(zhì)的基因，并已經(jīng)成功地進(jìn)行了一系列培育轉(zhuǎn)基因植株的研究。其過程大致如下，請分析后作答?！?〕有兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從菠菜基因組DNA上切下目的基因并取代Ti質(zhì)?！?．0kb〕上相應(yīng)的EF區(qū)域〔0．2kb〕形成重組質(zhì)粒，該過程還必須用到的酶是，形成的重組質(zhì)粒〔填“能〞或“不能〞〕被E酶切割。〔2〕假設(shè)圖中Ti質(zhì)粒上限制酶G切割位點(diǎn)與E的切割位點(diǎn)距離0．9kb，限制酶H切割位點(diǎn)距F切割位點(diǎn)0．5kb，分別用限制酶G和限制酶H酶切兩份重組質(zhì)粒樣品，結(jié)果如下表。據(jù)此可判斷目的基因的大小為kb；并將目的基因內(nèi)部的限制酶H切割位點(diǎn)標(biāo)注在以下圖中。GH1．8kb3．2kb1．3kb3．7kb〔3〕在上述培育過程中兩次用到農(nóng)桿菌，它與柑橘細(xì)胞相比擬，在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是，導(dǎo)入重組質(zhì)粒后的農(nóng)桿菌的作用是?！敬鸢浮俊?〕DNA連接酶能〔2〕1．2標(biāo)記如圖〔3〕無核膜包被的細(xì)胞核感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中【解析】〔1〕將兩個DNA片段連接起來需要DNA連接酶；重組質(zhì)粒中含有E酶的識別序列和切割位點(diǎn)，因此形成的重組質(zhì)粒能被E酶切割。〔3〕農(nóng)桿菌屬于原核生物，柑橘屬于真核生物，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞最主要的區(qū)別是，它與柑橘細(xì)胞相比擬，在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是原核細(xì)胞無核膜包被的細(xì)胞核，導(dǎo)入重組質(zhì)粒后的農(nóng)桿菌的作用是感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中?！绢}型】綜合題【難度】較難24．嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶〔BglB〕是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開展了以下試驗(yàn)：Ⅰ．利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶〔1〕PCR擴(kuò)增BglB基因時，選用桿菌基因組DNA作模板?！?〕上圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。BglB基因不含圖中限制酶識別序列。為使PCR擴(kuò)增的BglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的BglB基因兩端需分別引入和不同限制酶的識別序列。〔3〕大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后那么獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)?。Ⅱ．溫度對BglB酶活性的影響〔4〕據(jù)圖1、2可知，80℃保溫30分鐘后，BglB酶會；為高效利用BglB酶降解纖維素，反響溫度最好控制在〔單項(xiàng)選擇〕。A．50℃B．60℃C．70℃D．80℃Ⅲ．利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性在PCR擴(kuò)增BglB基因的過程中，參加誘變劑可提高bglB基因的突變率。經(jīng)過篩選，可獲得能表達(dá)出熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。〔5〕與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽胞桿菌相比，上述育種技術(shù)獲得熱穩(wěn)定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR過程中〔多項(xiàng)選擇〕。A．僅針對BglB基因進(jìn)行誘變B．BglB基因產(chǎn)生了定向突變C．BglB基因可快速累積突變D．BglB基因突變不會導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目改變【答案】〔1〕嗜熱土壤芽孢〔2〕NdeⅠBamHⅠ〔3〕轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶〔4〕失活B〔5〕A、C【解析】〔3〕大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后那么獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)檗D(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。〔4〕由圖2可知，在80℃保溫30分鐘后，BglB酶會失活；由圖1中看出，60～70℃時該酶的相對活性最高，而由圖2中看出，隨著保溫時間的延長，70℃條件下的酶活性下降明顯，因此為高效利用BglB酶降解纖維素，反響溫度最好控制在60〔5〕PCR過