臨床血液學(xué)檢驗：實驗11 TT,3P,DD

TT

3P

D-Dimer

凝血酶因子ⅩⅢa

非交聯(lián)交聯(lián)纖維蛋白原纖維蛋白纖維蛋白

纖溶酶纖溶酶纖溶酶

X、Y、D、E，Bβ1～42，A、B、C、HX’、Y’、D、E’，Bβ15～42，A、B、C、HX’、Y’、D、E’，D-二聚體FPA,FPB標(biāo)準(zhǔn)凝血酶血漿凝血酶時間測定

ThrombinTimeTT原理凝血機制

內(nèi)源

外源

ⅫⅢⅫaⅪⅪaⅨⅨa

Ⅸa,Ca2+,Ⅷa

Ⅶa,Ca2+,ⅢPF3PF3ⅩaⅩ

Ⅹa,Ca2+,ⅤaPF3ⅡⅡaⅠⅠa

(纖維蛋白)

操作1.枸櫞酸鈉1：9抗凝血2ml2.3000rpm離心15min3.將血漿150ul加入試管內(nèi)37℃溫浴1min4.加入150ulTT試劑，同時啟動秒表5.不斷輕輕傾斜試管，記錄凝固時間，重復(fù)2次取均值報告參考值（16-18）S超過正常對照3S為延長臨床意義延長：見于DIC時Fg消耗，異常Fg血癥或先天性低（無）Fg血癥;原發(fā)性纖溶，F(xiàn)DP增高;肝素和類肝素物質(zhì)增多?？s短：少見可作為鏈激酶、尿激酶溶栓治療時的監(jiān)測指標(biāo)，正常的3-5倍注意事項⑴抗凝比例要準(zhǔn)確，±不得超過0.2ml⑵離心速度及時間必須到位，以除去血小板的干擾⑶采血后2小時內(nèi)完成⑷標(biāo)本不得有溶血、凝血⑸標(biāo)本結(jié)果異常應(yīng)密切聯(lián)系臨床⑹凝血酶試劑易失活，4℃可保存3天血漿魚精蛋白副凝固試驗（3P）原理：繼發(fā)性纖溶時，形成可溶性FM-FDP復(fù)合物。魚精蛋白可使FM-FDP解離，F(xiàn)M-FM自行聚合沉淀，出現(xiàn)副凝固。臨床意義：陽性：DIC早、中期陰性：DIC晚期，原發(fā)性纖溶亢進原發(fā)性與繼發(fā)性纖溶鑒別手工操作，檢測時間長，靈敏度低，干擾因素多，現(xiàn)已少用。3P試驗血漿硫酸魚精蛋白副凝固實驗操作:取血漿和(陽性對照血漿)各0.5ml,分別加入0.05ml1%的硫酸魚精蛋白溶液,放37oC30min,觀察有無絮狀沉淀物.陽性:絮狀沉淀物或細(xì)蛋白網(wǎng)意義:纖溶的篩選,但假陽性和假陰性較多,已被D-D取代.血漿D-二聚體檢測主要檢測方法：1.膠乳凝集法2.ELISA法3.免疫比濁法膠乳凝集法原理：D-二聚體+D-二聚體單抗（膠乳顆粒）結(jié)果：正常：陰性血漿D-二聚體>0.5mg/L時陽性操作1.枸櫞酸鈉1：9抗凝血2ml2.3000rpm離心15min3.取20ulD-D膠乳試劑+20ul血漿混勻，同時開啟秒表，輕輕搖動。4.在較強的光線下，3分鐘內(nèi)觀察凝集現(xiàn)象5.做陽性和陰性對照臨床意義

D-D為交聯(lián)纖維蛋白的特異性降解產(chǎn)物，是纖維蛋白形成并發(fā)生降解的特異性分子標(biāo)志物。D-D增高表明體內(nèi)有纖維蛋白形成并發(fā)生溶解。臨床意義診斷DIC的重要依據(jù)鑒別原發(fā)性纖溶與繼發(fā)性纖溶血栓性疾病升高，如深靜脈血栓形成、肺梗塞、心梗、重癥肝炎等對抗凝和溶栓治療的檢測

A.在DIC抗凝治療中，高水平的D-D持續(xù)下降，間接說明凝血過程在減緩或中止，治療有效。

B.開始因血栓迅速溶解而使血中的D-D明顯升高之后D-D則從高水平很快下降。如不下降，呈持續(xù)高水平狀態(tài)，多提示藥物用量不足。作業(yè)書寫ＴＴ實驗報告復(fù)習(xí)思考題內(nèi)源凝血系統(tǒng)、外源凝血系統(tǒng)、國際標(biāo)