生物化學(xué)檢驗(yàn)之心肌損傷疾病檢驗(yàn)

心肌損傷標(biāo)志物——蛋白類標(biāo)志物目錄一、蛋白類標(biāo)志物種類二、心肌肌鈣蛋白三、肌紅蛋白四、CK-MB質(zhì)量測(cè)定一、標(biāo)志物種類蛋白類標(biāo)志物肌紅蛋白（MB）肌酸激酶同工酶質(zhì)量（CK-MB）心肌肌鈣蛋白（cTn）二、心肌肌鈣蛋白1.生物化學(xué)特性心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白稱為心肌肌鈣蛋白（cTn），由心肌肌鈣蛋白C（cTnC）、心肌肌鈣蛋白T（cTnT）和心肌肌鈣蛋白I（cTnI）三個(gè)亞基組成血清cTnI和cTnT濃度升高是心肌損傷特異性、靈敏性的標(biāo)志，cTn被認(rèn)為是目前最好的確診標(biāo)志物，正逐步取代CK-MB成為AMI的診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”二、心肌肌鈣蛋白2.心肌損傷時(shí)血中cTn的變化在心肌細(xì)胞損傷早期，游離于胞漿內(nèi)的cTnI/cTnT快速釋放出來，血清中水平在4～8小時(shí)升高。隨著肌原纖維不斷崩解破壞，以固定形式存在的cTn不斷釋放，血清/血漿中cTn水平在AMI發(fā)生后8～14小時(shí)達(dá)高峰，1～2周后降至正常二、心肌肌鈣蛋白3.測(cè)定方法目前，膠乳增強(qiáng)透射比濁法已有試劑盒供應(yīng)，適用于自動(dòng)化分析儀，通用性強(qiáng)，已應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)4.評(píng)價(jià)最好建立本實(shí)驗(yàn)室參考值。血漿和血清的分析結(jié)果有所差異，要注意試劑盒對(duì)樣本的要求二、心肌肌鈣蛋白5.參考區(qū)間疫學(xué)方法（肝素抗凝血漿）：cTnT＜0.03μg/L微小心肌損傷診斷值為＞0.03μg/L，AMI診斷值為＞0.1μg/L二、心肌肌鈣蛋白6.臨床意義是早期診斷AMI最好的標(biāo)志對(duì)不穩(wěn)定性心絞痛預(yù)后的判斷cTn對(duì)于再灌的評(píng)估不夠理想cTn后期峰值與梗塞面積呈正相關(guān)其他MMD（微小心肌損傷）導(dǎo)致的左心衰時(shí)cTn也可升高cTn被推薦用來評(píng)估圍手術(shù)期心臟受損程度三、肌紅蛋白1.生物化學(xué)特性肌紅蛋白（Mb）主要存于橫紋?。ㄐ募?、骨骼肌）細(xì)胞中，有運(yùn)輸和儲(chǔ)存氧的作用2.心肌損傷時(shí)血中Mb的變化肌紅蛋白是用于心肌損傷的最佳早期標(biāo)志物，在AMI時(shí)可快速入血，故在AMI發(fā)生的1.5～6小時(shí)內(nèi)，通過動(dòng)態(tài)檢測(cè)二次血清肌紅蛋白水平可早期診斷是否有急性心肌梗死發(fā)生三、肌紅蛋白3.測(cè)定方法常用的為膠乳透射免疫比濁法，該法靈敏度高、特異性好、測(cè)定速度快，適用于各型自動(dòng)生化分析儀作用4.評(píng)價(jià)不同廠家的試劑盒對(duì)標(biāo)本的要求也不同，應(yīng)按要求取血。如使用抗凝劑，通常采用肝素抗凝三、肌紅蛋白5.參考區(qū)間依測(cè)定方法的不同而異。免疫學(xué)方法：成年男性＜80μg/L，女性＜60μg/L，診斷限>100μg/L血清Mb水平隨年齡、性別及種族的不同而異，老年人血清Mb水平隨年齡增加而逐漸輕度升高三、肌紅蛋白6.臨床意義Mb是AMI的早期診斷標(biāo)志物Mb是篩查AMI很好的指標(biāo)能用于判斷再梗死Mb是溶栓治療中判斷有無再灌的較敏感而準(zhǔn)確的指標(biāo)四、CK-MB質(zhì)量測(cè)定1.生物化學(xué)特性CK-MB質(zhì)量測(cè)定（CK-MBmass）指用免疫法測(cè)定CK-MB酶蛋白的含量，而非活性測(cè)定，以反映血清CK-MB的水平目前傾向CK-MB質(zhì)量測(cè)定作為心肌損傷常規(guī)檢查項(xiàng)目之一2.測(cè)定方法應(yīng)用最多的是ELISA方法四、CK-MB質(zhì)量測(cè)定3.參考范圍CK-MB質(zhì)量（mass）（免疫學(xué)法）：男性：1.35～4.94μg/L，診斷限>5μg/L女性：0.97～2.88μg/L，診斷限>5μg/L4.臨床意義CK-MB質(zhì)量可以診斷無骨骼肌損傷的心肌梗死，也適用于早期診斷，其臨床特異性高于肌紅蛋白心肌損傷標(biāo)志物——酶類標(biāo)志物逯晉忠目錄一、酶類標(biāo)志物種類二、肌酸激酶及其同工酶三、乳酸脫氫酶及其同工酶四、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶一、標(biāo)志物種類酶類標(biāo)志物乳酸脫氫酶及同工酶（LDH）天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)肌酸激酶及其同工酶(CK)二、肌酸激酶及其同工酶1.生物化學(xué)特性肌酸激酶（CK）廣泛存在于骨骼肌、心肌和腦組織中。CK分子量為86000，是由肌型（M）和腦型（B）亞基組成的二聚體，形成CK-MM、CK-MB、CK-BB三種同工酶成CK進(jìn)入血液后，M亞基C-端的賴氨酸殘基可被血中的羧肽酶水解，根據(jù)水解程度，CK同工酶可形成多種亞型：CK-MM分為CK-MM1、CK-MM2、CK-MM3；CK-MB分為CK-MB1和CK-MB2二、肌酸激酶及其同工酶2.心肌損傷時(shí)血中CK及其同工酶的變化CK總活性變化AMI后，血中CK3～6小時(shí)升高，峰值在12～24小時(shí)之間，2～4天恢復(fù)至正常水平CK同工酶變化CK-MB活性在發(fā)生心肌損傷后3～8小時(shí)升高，16～24小時(shí)達(dá)峰值。目前傾向于用CK-MB質(zhì)量測(cè)定替代CK-MB活性測(cè)定CK同工酶亞型變化當(dāng)AMI時(shí)，心肌釋放CK-MB2增多，CK-MB2在AMI后2小時(shí)即上升，10～18小時(shí)達(dá)峰值，12～24小時(shí)下降。如進(jìn)一步測(cè)定CK-MB1，以CK-MB2>1.0U/L，CK-MB2/CK-MB1比值超過1.5為標(biāo)準(zhǔn)，診斷AMI的特異性可達(dá)95％二、肌酸激酶及其同工酶3.測(cè)定方法化CK-MB用活性表示時(shí)稱為百分CK-MB即CK-MB%；用質(zhì)量表示時(shí)稱為CK-MB百分相對(duì)指數(shù)。CK總活性測(cè)定臨床廣泛應(yīng)用比色法和酶偶聯(lián)速率法。CK-MB活性測(cè)定方法有免疫抑制法、放射免疫法、電泳法等4.評(píng)價(jià)AMI診斷時(shí)注意CK-MB與CK的時(shí)效性二、肌酸激酶及其同工酶5.參考范圍CK總活性：男性：24～195U/L；女性：24～170U/LCK-MB活性：免疫抑制-酶動(dòng)力學(xué)法：10～24U/L，診斷限>25U/L瓊脂糖凝膠電泳法：<6％totalCK，診斷限>6％totalCK二、肌酸激酶及其同工酶6.臨床意義1.CK當(dāng)發(fā)生AMI時(shí)，CK活性在3～8小時(shí)升高，峰值在10～36小時(shí)之間，3～4天后回復(fù)至正常水平CK測(cè)定有助于判斷溶栓治療后是否出現(xiàn)施行心律轉(zhuǎn)復(fù)、心導(dǎo)管和無并發(fā)癥的冠狀動(dòng)脈成形術(shù)等均會(huì)引起CK值的升高心臟手術(shù)和非心臟手術(shù)后都將導(dǎo)致CK活性的增高生理性增高，人體在運(yùn)動(dòng)后將導(dǎo)致CK活性明顯增高在各種肌肉損傷和疾病時(shí)，CK極度升高2.CK同工酶CK-MB是診斷急性心肌梗死最有價(jià)值的酶學(xué)生化指標(biāo)三、乳酸脫氫酶及同工酶1.生物化學(xué)特性乳酸脫氫酶是由心型（H）和肌型（M）亞基組成的四聚體，形成5種同工酶：即LDH1（H4）、LDH2（H3M）、LDH3（H2M2）、LDH4（HM3）及LDH5（M4）2.心肌損傷時(shí)血中LDH的變化AMI發(fā)作后8～12小時(shí)，血中LDH和LDH1開始升高，48～72小時(shí)可達(dá)峰值，7～12天回落至正常如果連續(xù)監(jiān)測(cè)LDH對(duì)于就診較遲且其他主要檢測(cè)無異常的AMI患者有一定參考價(jià)值三、乳酸脫氫酶及同工酶3.測(cè)定方法（1）LDH總活性測(cè)定臨床實(shí)驗(yàn)室常以速率法測(cè)LDH的總活性IFCC推薦的LDH測(cè)定參考方法是基于L→P（還原速率）的反應(yīng)（2）LDH同工酶測(cè)定臨床常以免疫抑制法和電泳法測(cè)其同工酶的活性三、乳酸脫氫酶及同工酶4.參考區(qū)間LDH總活性：100～240U/L（L→P）LDH同工酶：LDH127.6％～36.4％；LDH236.4％～43.0％；LDH313.1％～20.1％；LDH45.2％～9.2％；LDH51.9％～7.1％同工酶的比例為：LDH2>LDH1>LDH3>LDH4>LDH5（小兒有時(shí)可出現(xiàn)LDH1>LDH2）；其中，LDH1/LDH2<0.7，AMI的診斷限為LDH1/LDH2>1.0三、乳酸脫氫酶及同工酶5.臨床意義血清中LDH的增高對(duì)任何單一組織或器官都是非特異的LDH同工酶：通常在AMI后6小時(shí)LDH1開始出現(xiàn)升高，總LDH活性升高略為滯后LDH5增高提示病人心衰伴有肝臟淤血或肝功能衰竭LDH1活性大于LDH2或表現(xiàn)LDH圖形倒置也可出現(xiàn)在心肌炎、巨細(xì)胞性貧血和溶血性貧血在肝實(shí)質(zhì)病變，但同工酶檢查可出現(xiàn)LDH5>LDH4骨骼肌疾病時(shí)LDH5>LDH4肺部疾患可有LDH3升高，白血病時(shí)常有LDH3和LDH4的升高四、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1.生物化學(xué)特性肝內(nèi)的AST有2種同工酶，分別存在于肝細(xì)胞的線粒體（mAST）和胞漿內(nèi)（sAST）。在肝細(xì)胞輕度病變時(shí)，僅sAST釋放入血；而當(dāng)病變嚴(yán)重時(shí)，mAST也會(huì)相繼釋放入血。故血清AST活性隨肝細(xì)胞損害的程度增高四、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶2.心肌損傷時(shí)血中AST的變化當(dāng)心肌細(xì)胞受到損傷，天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶會(huì)大量釋放到人體血液中，導(dǎo)致血液中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶升高；當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷時(shí)，同樣會(huì)檢測(cè)到血液中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的值升高。但在肝病早期和慢性肝炎中，其值升高并不明顯，而嚴(yán)重肝病和肝病后期則有明顯升高四、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶3.參考區(qū)間正常值范圍：0～40U/L四、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶4.臨床意義病理性升高：心肌梗塞發(fā)病6～12小時(shí)顯著升高，增高的程度可反映損害的程度，并在發(fā)作后48小時(shí)達(dá)到最高值，約3～5天恢復(fù)正常各種肝病AST可增高，肝病早期和慢性肝炎增高不明顯，AST/ALT比值小于1。嚴(yán)重肝病和肝病后期增高，AST/ALT比值大于1其他疾病如心肌炎、腎炎及肺炎等AST也輕度升高心臟的生物化學(xué)逯晉忠目錄一、心臟概述二、心臟疾病時(shí)的生化改變?nèi)⑿募p傷標(biāo)志物四、心力衰竭標(biāo)志物一、心臟概述—組織結(jié)構(gòu)心臟主要由呈梭形的心肌纖維（即心肌細(xì)胞）組成與一般細(xì)胞所不同的是，肌細(xì)胞內(nèi)含有眾多的肌原纖維，包括粗細(xì)兩種蛋白微絲，其中細(xì)絲由肌動(dòng)蛋白、原肌球蛋白和心肌肌鈣蛋白3類蛋白質(zhì)組成二、心臟疾病時(shí)的生化改變心肌細(xì)胞損傷后，心肌細(xì)胞胞質(zhì)和細(xì)胞器內(nèi)的一些生化物質(zhì)會(huì)釋放到血液中，由于這些生化物質(zhì)在心肌細(xì)胞存在的方式、部位、分子大小等的不同，在心肌損傷后釋放入血時(shí)間、峰值時(shí)間、維持時(shí)間、血液中含量也各不相同如心肌細(xì)胞胞質(zhì)中游離存在的小分子物質(zhì)最先釋放進(jìn)入血液,而那些與其他物質(zhì)結(jié)合或存在于細(xì)胞器如線粒體內(nèi)的大分子物質(zhì)釋放速度則較慢。這些生化物質(zhì)在血液中含量的變化可在一定程度上反映心肌是否損傷及損傷程度,這類物質(zhì)通常被稱為心肌損傷標(biāo)志物二、心臟疾病時(shí)的生化改變心肌損傷標(biāo)志物,是指當(dāng)心肌細(xì)胞損傷時(shí),可大量釋放至循環(huán)血液中,其血液濃度變化可反映心肌損傷及其程度的特異性物質(zhì)心肌損傷標(biāo)志物正確的檢測(cè)可以為急性心肌梗死及其他伴有心肌損傷疾病的早期診斷、病情判斷、療效觀察提供極其有價(jià)值的信息二、心臟疾病時(shí)的生化改變心臟疾病的診斷技術(shù)：