臍帶間充質(zhì)干細胞月季培訓課件

臍帶間充質(zhì)干細胞月季度培訓課件演示文稿當前1頁，總共34頁。（優(yōu)選）臍帶間充質(zhì)干細胞月季度培訓課件當前2頁，總共34頁。什么是臍帶間充質(zhì)干細胞？臍帶間充質(zhì)干細胞（MesnchymalStemCells，MSCs）是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細胞，它能分化成許多種組織細胞。當前3頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞間充質(zhì)干細胞（mesenchymalstemcells，MSC）是干細胞家族的重要成員，來源于發(fā)育早期的中胚層和外胚層。MSC最初在骨髓中發(fā)現(xiàn)，因其具有多向分化潛能、造血支持和促進干細胞植入、免疫調(diào)控和自我復制等特點而日益受到人們的關注。當前4頁，總共34頁。臍帶——獲取干細胞的另一來源我國科學家2006年首次從新生嬰兒廢棄的臍帶組織中得到了一種多能干細胞，稱作臍帶間充質(zhì)干細胞(UC-MSC)。UC-MSC具有胚胎干細胞類似的增殖能力和多向分化潛能，且來源豐富、取材方便、低病毒感染率、無倫理障礙，又沒有胚胎干細胞產(chǎn)生畸胎瘤的問題，并且抗原性很低。不產(chǎn)生免疫排斥反應，異體使用無需HLA配型。當前5頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞治療疾病的原理替代和修復死亡和受損傷的細胞；激活休眠和處于抑制狀態(tài)的細胞；旁分泌作用（分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子、抗凋亡因子等）當前6頁，總共34頁。涉及病癥肝臟疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病心血管疾病血液系統(tǒng)疾病骨關節(jié)疾病燒傷糖尿病MSCs可能用于治療以下疾病間充質(zhì)干細胞多向分化作為種子細胞，臨床上主要用于治療機體無法自然修復的組織細胞和器官損傷的多種難治性疾病是關鍵鑒于間充質(zhì)干細胞具有多向分化潛能、能支持造血和促進造血干細胞植入、調(diào)節(jié)免疫以及分離培養(yǎng)操作簡便等特點作為免疫調(diào)節(jié)細胞，治療免疫排斥和自身免疫性疾病當前7頁，總共34頁。臍帶間充質(zhì)干細胞具有臨床應用價值?

泌尿系統(tǒng)：腎實質(zhì)的修復；?

消化系統(tǒng)：肝組織的修復；?

內(nèi)分泌系統(tǒng)：胰島細胞的修復；?

神經(jīng)系統(tǒng)：腦、脊髓損傷的修復；?

血液系統(tǒng)：化療、放療后造血系統(tǒng)的修復；?

循環(huán)系統(tǒng)：心肌修復、血管修復；?

免疫系統(tǒng)：調(diào)節(jié)免疫，移植治療時可降低免疫排斥反應；?

衰竭器官的結(jié)構(gòu)和功能的修復和再生：最終替代組織和器官移植。當前8頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞治療途徑腰穿途徑靜脈途徑局部種植介入途徑當前9頁，總共34頁。優(yōu)勢1、取材方便：采集過程簡單、無痛苦，不影響母子健康；2、細胞數(shù)量豐富：增值能力強，可為組織器官的修復和再生提供所需的大量細胞；3、免疫原性低：具有獨特的免疫調(diào)節(jié)功能，自體使用不引起免疫排斥反應，異體移植還可降低免疫反應；4、不涉及社會、倫理及法律方面的更多爭議。當前10頁，總共34頁。前景干細胞治療是繼藥物治療、手術治療之后的又一場醫(yī)療革命。目前，發(fā)達國家已經(jīng)開始將干細胞治療技術用于臨床治療自身免疫性疾病、心肌梗死、脊髓損傷、心力衰竭等疾病。當前11頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞前景干細胞的魅力在于：一旦身體需要，這些細胞可按照發(fā)育途徑通過分裂而產(chǎn)生分化成熟的體細胞。也許在某一天，人們突然發(fā)現(xiàn)，人體器官可以在實驗室按需要、按流程生產(chǎn)，血細胞、腦細胞、骨骼、心肌細胞、肝臟、神經(jīng)等的更換都不成問題，即使患上白血病、帕金森氏癥和癌癥這些不治之癥也能絕處逢生。當前12頁，總共34頁。供者篩選供者需要提供供者的既往病史、現(xiàn)病史、家族史等資料。當前13頁，總共34頁。樣本采集運輸要求臍帶采集標準：

1.臍帶長度不得低于20cm2.臍帶兩端均在2-3cm處結(jié)扎

3.臍帶保存液在有效期內(nèi)，并且無明顯顏色變化

4.臍帶保存瓶無漏液現(xiàn)象，密封嚴實、無裂橫

5.采集套裝內(nèi)容完整，無缺失

6.采集信息登記完整、字跡清楚易辨認

7.臍帶運輸時間在規(guī)定范圍內(nèi)

8.溫度控制在適度范圍內(nèi)（0度-25度）當前14頁，總共34頁。樣本接收標準臍帶的接收標準：

1.樣本信息一致、無誤，并能追溯至臍帶所有人。2.母血采集量≥5ml臍血檢測樣本采集量≥5ml3.采集套裝內(nèi)容完整，無缺失；采集信息登記完整、字跡清楚易辨認。4.無可能造成供者基因型異常的家族史。5.供者健康調(diào)查表登記信息無異常。當前15頁，總共34頁。

間充質(zhì)干細胞的制備方式間充質(zhì)干細胞的制備原理：臍帶華通氏膠內(nèi)富含間充質(zhì)干細胞，通過分離獲得華通氏膠后，并進行體外培養(yǎng)，利用間充質(zhì)干細胞貼壁生長和可體外擴增特性，可獲得更多的間充質(zhì)干細胞。組織塊分離法免疫五項檢測均為陰性當前16頁，總共34頁。工藝流程簡介供者篩選采集接收制備培養(yǎng)凍存復蘇發(fā)放運輸臨床應用信息反饋當前17頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞的制備方式華通氏膠的提取與培養(yǎng)華通氏膠提?。?.消毒2.清洗3.分離出兩條動脈和一條靜脈4.剝?nèi)∪A通氏膠5.剪碎華通氏膠（大小1mm3）6.接種至培養(yǎng)皿培養(yǎng)（密度2-3g/10cm皿）當前18頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞原代培養(yǎng)細胞補液和換液（原代培養(yǎng)）

1.制備五天補液（觀察是否有細胞爬出）2.八天換液當前19頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞的凍存細胞收集前須給檢測送樣做細菌檢測和流式（CD90+、CD105+、CD166+）冷凍保護劑（胎牛血清+DMSO）配制：DMSO10%冷凍方式深低溫冰箱梯度降溫當前20頁，總共34頁。細胞治療程序1、治療前咨詢：明確診斷，明確疾病處于哪一期；

2、治療風險：分析利弊；可能的副作用；獲益

3、知情同意：當前21頁，總共34頁。治療前準備1).安全檢測:菌檢；

2).個體化治療方案設計：每一位病人的治療方案，都根據(jù)其評價結(jié)果具體制定;

3).需要的細胞數(shù)量；4).細胞的使用方法；5).可能出現(xiàn)的不良反應及應對措施。當前22頁，總共34頁。間充質(zhì)干細胞質(zhì)量要求細菌檢測內(nèi)毒素檢測革蘭氏檢測支原體檢測活性檢測≥90%陰性當前23頁，總共34頁。細胞發(fā)放1.細胞的保存(基質(zhì)：生理鹽水或者保存液）2.運輸要求：時間、溫度3.病人信息填寫完整4.樣本檢測合格當前24頁，總共34頁。MSC治療禁忌證：

1.懷孕。2.精神病。3.嚴重的心、肝、腎、肺功能不全。

3.不能控制的嚴重感染。

4.合并其他有致命危險的疾病。5.一般受者年齡不超過65歲（個別患者>65歲）。6.自體免疫性疾病晚期。7.惡性腫瘤。8.HIV陽性當前25頁，總共34頁。當前26頁，總共34頁。案例分析當前27頁，總共34頁。干細胞臨床應用

一、肝硬化細胞移植有可能成為肝硬化治療的最佳備選方案。越來越多的體內(nèi)外實驗表明MSC可以橫向分化為功能性肝細胞，動物研究表明臍帶MSC可以抑制誘導型的肝硬化發(fā)生，并促進肝硬化的消退。

當前28頁，總共34頁。臨床資料本組男10例，女2例，年齡38-63歲。均為慢性乙型肝炎，肝硬化,Child-Pugh分級B級9例，C級3例。健康嬰兒臍帶提取間充質(zhì)干細胞經(jīng)實驗室傳代、擴增，取108制成40ml混懸液，第一次經(jīng)肝動脈注入，第二次以后為靜脈輸注，每周一次，共4次。4周后復查生化指標。當前29頁，總共34頁。結(jié)果食欲改善、體力好轉(zhuǎn)11例（91.66%）；腹脹減輕11例（91.66%）；腹水減少、下肢浮腫減輕10例（83.33%）。12例患者術中均未發(fā)生嚴重并發(fā)癥，術后無不良反應。當前30頁，總共34頁。12例肝硬化患者臍帶間充質(zhì)干細胞移植前后實驗室指標變化

ALB(g/L)ALT(U/L)TBIL(μmol/L)PT(s)移植前

30.69±4.32122.78±89.3235.32±21.6117.89±4.49移植后4周

36.28±5.8165.67±20.6333.75±19.7115.68±4.14P值

<0.01<0.05>0.05<0.05當前31頁，總共34頁。MSC治療肝硬化的機制

主要有以下幾個方面：1)MSC分化形成正常肝細胞，補充肝細胞數(shù)量，改善肝功能；2)MSC分泌細胞因子/生長因子、抑制炎癥反應；3)MSC抑制肝星形細胞，活化、阻止細胞外基質(zhì)的生成；4)MSC激活卵原細胞，促進肝細胞再生；5)MSC降解肝內(nèi)過量的細胞外基質(zhì)。

當前32頁，總共34頁。二、脊髓損傷臨床資料本組男11例，女4例。年齡11-48