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微生物基礎(chǔ)知識為何發(fā)展微生物肥料?微生物肥料作用機(jī)理與效果微生物肥料合理使用提綱微生物和微生物肥料專家講座第1頁一、微生物基礎(chǔ)知識微生物和微生物肥料專家講座第2頁1、微生物定義
微生物(microorganism,microbe):存在于自然界中一群體型細(xì)小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不見,必須借助于特殊儀器放大后才能觀察到微小生物。葡萄球菌
酵母菌(芽痕)棒狀桿菌大腸桿菌弧狀菌鏈球菌微生物和微生物肥料專家講座第3頁2、微生物分類
按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性可分為:
★原核類:僅有原始核質(zhì),無核仁或核膜,細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體等。
★真核類:細(xì)胞核分化程度較高,有核膜、核仁和染色體,細(xì)胞器完整。如真菌(酵母菌和霉菌)、原生動物、顯微藻類?!锓羌?xì)胞類:體積微小,能經(jīng)過除菌過濾器。如病毒和亞病毒等。按其致病性可分為:
★病原性微生物★非病原性微生物微生物和微生物肥料專家講座第4頁3、微生物特點(diǎn)個體小,面積大:小于0.1mm。肉眼不可見。吸收多,轉(zhuǎn)化快:發(fā)酵乳糖細(xì)菌在1小時內(nèi)可分解其自重1000~10000倍乳糖;產(chǎn)朊假絲酵母合成蛋白質(zhì)能力比食用公牛強(qiáng)10萬倍生長旺,繁殖快:微生物有驚人繁殖速度,大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就能夠繁殖一代適應(yīng)性強(qiáng),易變異(耐藥性產(chǎn)生原因)分布廣,種類多(10萬各種)
:自然界中處處都有,如水、空氣、土壤等,
土壤中數(shù)量最多。微生物和微生物肥料專家講座第5頁4、微生物分布土壤:是微生物生活最適環(huán)境水:僅次于土壤微生物分布、定居第二場所空氣:空氣中微生物主要起源于帶有微生物菌體及孢子灰塵,這類微生物大多數(shù)是腐生性,還起源于人和動物,它們大多數(shù)是經(jīng)過呼吸道排出,其中也包含有病原微生物,懸浮在大氣中。
微生物和微生物肥料專家講座第6頁5、微生物作用及危害
1.微生物作用絕大多數(shù)微生物對人和動物是有益,已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè),發(fā)揮了越來越主要作用。比如與我們?nèi)粘I钣H密相關(guān)如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。2.微生物危害微生物中也有一部分能引發(fā)人及動、植物發(fā)生病害,這些含有致病性微生物,稱為病原微生物。如人類許多傳染?。ǜ忻?、傷寒、痢疾、結(jié)核、脊髄灰質(zhì)炎、病毒性肝炎等),均是由病原微生物引發(fā)。從藥品生產(chǎn)衛(wèi)生學(xué)而言,微生物對藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格主要原因。
微生物和微生物肥料專家講座第7頁二、為何發(fā)展微生物肥料?微生物和微生物肥料專家講座第8頁
長久、過量施用化肥危害
危害之一:減弱莊稼生產(chǎn)能力
造成了土壤板結(jié),土壤有機(jī)質(zhì)含量降低,肥力下降,土壤中有益微生物生存空間變小,數(shù)量降低。農(nóng)作物抗病、抗寒、抗旱、抗倒伏能力減弱,病蟲害發(fā)生越來越嚴(yán)重,造成農(nóng)作物品質(zhì)下降,產(chǎn)量降低。微生物和微生物肥料專家講座第9頁危害之二:加劇環(huán)境污染。過多施用肥料假如超出土壤保持能力時,就會流入周圍水中,形成農(nóng)業(yè)面源污染、造成水體富營養(yǎng)化,造成藻類滋生,繼而破壞水環(huán)境。據(jù)統(tǒng)計(jì),中國每年因不合理施肥造成1000多萬噸氮素流失到農(nóng)田之外,直接經(jīng)濟(jì)損失約300億元。過量肥料還會滲透20米以內(nèi)淺層地下水中,使得地下水硝酸鹽含量增加。微生物和微生物肥料專家講座第10頁危害之三:浪費(fèi)大量緊缺資源。假如能夠把浪費(fèi)掉化肥節(jié)約下來,就會緩解我國能源緊缺情況。僅在年,我國化肥生產(chǎn)消耗了大約1億噸標(biāo)準(zhǔn)煤,超出國家能源消耗比重5%。另外,我國化肥生產(chǎn)每年消耗高端磷礦石超出了1億噸,而磷礦石已經(jīng)列入國土資源部年后緊缺資源之列;化肥生產(chǎn)還消耗了我國72%硫資源。微生物和微生物肥料專家講座第11頁
所以在這種情況下,20世紀(jì)70年代,國際上成立了“有機(jī)農(nóng)業(yè)聯(lián)盟”,在世界范圍內(nèi)呼吁不用或者盡可能少用化肥,并主動研究化肥代替品。大家都知道,幾十年前我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)主要施用農(nóng)家肥,最近幾十年主要應(yīng)用化肥,而今后微生物肥料使用量將越來越大,這是生產(chǎn)綠色食品和發(fā)展可連續(xù)農(nóng)業(yè)必定趨勢。微生物和微生物肥料專家講座第12頁
我國微生物肥料產(chǎn)業(yè)近幾年發(fā)展快速,并已成為我國農(nóng)業(yè)生物產(chǎn)業(yè)主要組成部分。當(dāng)前登記微生物肥料產(chǎn)品數(shù)量達(dá)1200個(截止年
10月),應(yīng)用面積在一億畝以上。微生物肥料年產(chǎn)量800萬噸,在國家生態(tài)示范區(qū)、綠色和有機(jī)農(nóng)產(chǎn)品基地中已成為肥料主力軍,其用量超出450萬噸,約占我國微生物肥料年產(chǎn)量50%,且這一數(shù)字還呈不停上升趨勢。微生物和微生物肥料專家講座第13頁國家支持微生物肥料行業(yè)發(fā)展
出臺《促進(jìn)生物產(chǎn)業(yè)加緊發(fā)展若干政策》(國辦發(fā)〔〕45號)實(shí)施《綠色農(nóng)用生物產(chǎn)品高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化專題》(發(fā)改辦高技[]536號;國家高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化示范工程項(xiàng)目(發(fā)改委);國家土壤有機(jī)質(zhì)提升試點(diǎn)補(bǔ)助項(xiàng)目(農(nóng)業(yè)部):秸稈還田中,政府采購腐熟菌劑,提供農(nóng)民使用;中小企業(yè)創(chuàng)新基金:
七大新型戰(zhàn)略產(chǎn)業(yè)之一微生物和微生物肥料專家講座第14頁三、微生物肥料作用機(jī)理與效果微生物和微生物肥料專家講座第15頁微生物種類繁多,在長久生物進(jìn)化和環(huán)境適應(yīng)中,不一樣種類微生物具備了對應(yīng)作用機(jī)理,表現(xiàn)出多樣化功效與效果;選擇和應(yīng)用這些功效微生物,是微生物肥料(農(nóng)用微生物產(chǎn)品)新品種研發(fā)、生產(chǎn)和應(yīng)用基礎(chǔ)。微生物和微生物肥料專家講座第16頁1、微生物肥料定義中國科學(xué)院院士,我國土壤微生物學(xué)奠基人、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)陳華癸教授就微生物肥料含義問題指出,所謂微生物肥料,“是指一類含有活微生物特定制品,應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,能夠取得特定肥料效應(yīng),在這種效應(yīng)產(chǎn)生中,制品中活微生物起關(guān)鍵作用,符合上述定義制品均應(yīng)歸入微生物肥料”。當(dāng)前“國家標(biāo)準(zhǔn)(GB20287-)”定義:微生物肥料(microbialfertilizer/biofertilizer)---含有特定微生物活體制品,應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),經(jīng)過其中所含微生物生命活動,增加植物養(yǎng)分供給量或促進(jìn)植物生長,提升產(chǎn)量,改進(jìn)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)及農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境。
微生物和微生物肥料專家講座第17頁2、微生物肥料種類微生物菌劑:一個或一個以上微生物經(jīng)工業(yè)化生產(chǎn)增殖后直接使用,或經(jīng)濃縮或經(jīng)載體吸附而制成活菌制品(NY/T1113-)。生物有機(jī)肥:是指特定功效微生物與主要以動植物殘體(如禽畜糞便、農(nóng)作物秸稈等)為起源并經(jīng)無害化處理、腐熟有機(jī)物料復(fù)合而成一類兼具微生物肥料和有機(jī)肥效應(yīng)肥料。復(fù)合微生物肥料:是指特定微生物與營養(yǎng)物質(zhì)復(fù)合而成,能提供、保持或改進(jìn)植物營養(yǎng),提升農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量或改進(jìn)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)活體微生物制品(NY/T798-)。微生物和微生物肥料專家講座第18頁3、微生物肥料六大功效機(jī)理NY/T1847-《微生物肥料生產(chǎn)菌株質(zhì)量評價通用技術(shù)要求》中總結(jié)6個方面:提供或活化養(yǎng)分功效;產(chǎn)生促進(jìn)作物生長活性物質(zhì)能力;促進(jìn)有機(jī)物料腐熟功效;改進(jìn)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)功效;增強(qiáng)作物抗逆性功效;改良和修復(fù)土壤功效。
微生物和微生物肥料專家講座第19頁提供或活化養(yǎng)分功效:生物固氮
微生物固氮肥料是微生物肥料中施用歷史最久、應(yīng)用范圍最廣一類。根瘤菌及其制劑產(chǎn)品:如花生根瘤菌[Bradyrhizobiumsp.(Arachishypogae)];大豆根瘤菌(B.japonicum或B.elkanii或Sinorhizobiumfredii);自生固氮菌/聯(lián)合固氮菌及其制劑:圓褐固氮菌(Azotobacterchroococcum)、拜氏固氮菌(Azotobacterbeijerimckii);
巴西固氮螺菌(Azospirilliumbrasilense)、糞產(chǎn)堿菌(Alcaligefaecalis)微生物和微生物肥料專家講座第20頁圖A
大豆根瘤圖B
大豆根瘤菌根瘤菌能與其它生物共生來固定空氣中氮素,并產(chǎn)生很多激素類物質(zhì)來刺激作物生長。圖B花生根瘤菌圖A花生根瘤微生物和微生物肥料專家講座第21頁圓褐固氮菌(帶夾膜)圓褐固氮菌含有較強(qiáng)固氮能力,也能分泌一些維生素及吲哚乙酸等刺激作物根系生長,進(jìn)而促進(jìn)植株生長和果實(shí)發(fā)育,所以,將圓褐固氮菌制成菌劑,施用到土壤中,能夠提升農(nóng)作物產(chǎn)量。它不形成根瘤菌,而是利用土壤中有機(jī)質(zhì)或根系分泌有機(jī)質(zhì)作碳源固定空氣中氮素,也能直接利用銨鹽和硝酸鹽等無機(jī)氮化物,有氮化合物時它不固定分子態(tài)氮。微生物和微生物肥料專家講座第22頁我國磷礦資源缺乏,尤其是高端磷礦;土壤中積累了大量難溶性磷,研究開發(fā)溶磷菌劑十分必要。微生物解磷或溶磷機(jī)理是:經(jīng)過產(chǎn)生有機(jī)酸(如乳酸、檸檬酸)和一些酶類(如植酸酶),使土壤中難溶性磷素如磷酸鐵、磷酸鋁以及有機(jī)磷酸鹽礦化形成作物能夠吸收利用可溶性磷。將分解利用不一樣磷素起源如分解卵磷脂類細(xì)菌稱為有機(jī)磷細(xì)菌,分解磷酸三鈣細(xì)菌稱為無機(jī)磷細(xì)菌。提供或活化養(yǎng)分功效:溶磷微生物和微生物肥料專家講座第23頁當(dāng)前主要研究和應(yīng)用菌種有以下一些種:
細(xì)菌:巨大芽胞桿菌(Bacillusmegatherium);氧化硫硫桿菌(Thiobacillusthiooxidans);假單胞菌屬一些種(Pseudomonasspp.);芽胞桿菌屬或類芽胞桿菌屬一些種(Bacillusspp.或Paenibacillusspp.);
許多真菌:(比如青霉菌、黑曲霉,菌根等)含有非常強(qiáng)溶磷能力。提供或活化養(yǎng)分功效:溶磷微生物和微生物肥料專家講座第24頁巨大芽孢桿菌在肉湯培養(yǎng)基上菌落巨大芽孢桿菌菌體巨大芽孢桿菌能利用各種碳源,營養(yǎng)要求低,生長快,巨大芽孢桿菌在28~37℃都能很好地生長。在營養(yǎng)瓊脂上,生長堆積,有光澤或中度暗淡;隨菌齡增加,有時微起褶皺,常呈黃色色調(diào);長時間培養(yǎng)后,生長和培養(yǎng)基變?yōu)楹稚虻谏ㄒ娋湔掌N⑸锖臀⑸锓柿蠈<抑v座第25頁
一些微生物能分解長石和云母產(chǎn)生有效鉀,這類微生物稱為鉀細(xì)菌或硅酸鹽細(xì)菌。它能將長石、磷礦石、云母等難溶性礦物中磷鉀有效化,分泌能夠刺激作物生長激素。施用硅酸鹽細(xì)菌肥料不但可改進(jìn)作物營養(yǎng)條件,還可提升作物對養(yǎng)分利用能力,可減輕各種作物病害。提供或活化養(yǎng)分功效:解鉀微生物和微生物肥料專家講座第26頁鉀細(xì)菌Bacillusmucilaginosus
鉀細(xì)菌作用機(jī)理:首先,細(xì)菌-礦物復(fù)合體形成,硅酸鹽細(xì)菌在培養(yǎng)基中增殖,產(chǎn)生大量多糖物質(zhì),經(jīng)過其粘結(jié)作用,使礦物顆粒與細(xì)胞物質(zhì)糾結(jié)在一起,進(jìn)而形成細(xì)菌-礦物復(fù)合體;這種復(fù)合體形成促進(jìn)細(xì)菌細(xì)胞與礦物顆粒深入接觸,甚至能夠在小分子如培養(yǎng)基水分子幫助下,使礦物晶格層間域增大,從而有利于鉀離子釋放。微生物和微生物肥料專家講座第27頁難溶性鈣、鎂或硫元素活化,提供給作物利用微生物種類:產(chǎn)生鐵載體:Thiobacillusthiooxidans
(氧化硫硫桿菌)
Rhizopusarrhizus(根霉)提供或活化養(yǎng)分功效:溶解中量元素能力微生物和微生物肥料專家講座第28頁微生物肥料提升化肥利用率,降低化肥使用量微生物肥料與化肥配合使用,可提升化肥利用率,降低化肥流失,從而降低化肥施用量(10%--30%)。巴西、阿根廷種植大豆不施化學(xué)氮肥,美國僅施5Kg/公頃氮肥。我國則施用150Kg/公頃
氮肥,產(chǎn)量比國外低30%以上。有經(jīng)濟(jì)上意義,而且有生態(tài)學(xué)方面價值,對環(huán)境也有益處。微生物和微生物肥料專家講座第29頁產(chǎn)生促進(jìn)作物生長活性物質(zhì)能力種類多:菌種主要有醋桿菌(Acetobacterdiazotrophicus)、氣單胞菌(Aeromonascaviae)、檸檬節(jié)桿菌(Arthrobactercitreus)、巴西固氮螺菌(Azospirllumbrasilense)、自生固氮菌(Azotobacterspp.)、巨大芽胞桿菌(Bacillusmegaterium)、多粘類芽胞桿菌(Paenibacilluspolymyxa)、枯草芽胞桿菌(B.subtilis)、陰溝腸桿菌(Enterobactercloaced)、熒光假單胞菌(P.fluorescens),等。應(yīng)用范圍廣:在農(nóng)業(yè)上有良好應(yīng)用前景,尤其是這類微生物能夠單獨(dú)使用,更能夠與其它微生物種類復(fù)合使用,使促生作用、肥效作用更加好地結(jié)合起來,以提升和加強(qiáng)應(yīng)用效果。這種復(fù)合劑型研制是一個發(fā)展方向。微生物和微生物肥料專家講座第30頁枯草芽孢桿菌菌落表面粗糙不透明,乳白色或微黃色。枯草芽孢桿菌以孢子形式存在,有耐高溫、耐酸堿、耐擠壓和耐溫度改變等特點(diǎn),能夠滿足各種加工要求;
枯草芽孢桿菌能夠產(chǎn)生促進(jìn)作物生長活性物質(zhì),促進(jìn)有機(jī)物料腐熟。微生物和微生物肥料專家講座第31頁促進(jìn)有機(jī)物料腐熟功效
腐熟菌劑產(chǎn)品使用菌種:40個種
細(xì)菌(13):枯草芽孢桿菌、多粘芽孢桿菌、黃褐假單胞菌、嗜熱脂肪地芽孢桿菌、多食鞘氨醇桿菌、戊糖片球菌、解淀粉芽孢桿菌、植物乳桿菌、乳酸乳桿菌、施氏假單胞菌、地衣芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、短小芽孢桿菌;
放線菌(12):白色鏈霉菌、天青鏈霉菌、白淺灰鏈霉菌、熱紫鏈霉菌、唐德鏈霉菌、細(xì)黃鏈霉菌、嗜熱灰色鏈霉菌、灰肉紅鏈霉菌、除蟲鏈霉菌、涇陽鏈霉菌、微白黃鏈霉菌、灰螺鏈霉菌;
霉菌(10):里氏木霉、綠色木霉、黑曲霉、米曲霉、溫特曲霉、帚狀曲霉、雜色曲霉、嗜熱性側(cè)孢霉、米根霉、卷枝毛霉;酵母菌(5):粉狀畢赤酵母、釀酒酵母、熱帶假絲酵母、扣囊擬內(nèi)孢霉、乳酸可魯維酵母。微生物和微生物肥料專家講座第32頁地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)是芽孢桿菌中較具應(yīng)用潛力菌種之一,可產(chǎn)生各種抗性物質(zhì),促進(jìn)有機(jī)物料腐熟。能分泌一定量胞外酶物質(zhì)。PH為4.0~6.0條件下生長穩(wěn)定。產(chǎn)品熱貯穩(wěn)定性很好,在54±2℃溫度下,可貯存14天,常溫貯存穩(wěn)定時最少2年。微生物和微生物肥料專家講座第33頁促進(jìn)有機(jī)物料發(fā)酵腐熟
(除臭、縮短發(fā)酵時間)微生物和微生物肥料專家講座第34頁改進(jìn)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)功效微生物肥料可增加農(nóng)產(chǎn)品有效營養(yǎng)成份,如面粉中面筋含量、不一樣大豆中油脂含量、蛋白質(zhì)含量,蔬菜瓜果中維生素、糖含量。相關(guān)試驗(yàn)表明,微生物肥料不但能使糧食作物增產(chǎn)10%左右,果菜類增產(chǎn)15%左右,而且還可使產(chǎn)品外觀有較大改進(jìn)。
微生物和微生物肥料專家講座第35頁注:左側(cè)--為微生物肥料菌劑產(chǎn)品與常規(guī)施肥(羊糞)配合施用;右側(cè)--為當(dāng)?shù)爻R?guī)施肥(羊糞)示范試驗(yàn)地點(diǎn):山西省平遙長山藥(收獲期)施用微生物菌劑常規(guī)施肥微生物和微生物肥料專家講座第36頁增強(qiáng)作物抗逆性功效減輕作物病蟲害發(fā)生(病情指數(shù))提升作物抗倒伏、抗旱、抗寒克服作物連作障礙等方面能力
微生物和微生物肥料專家講座第37頁甜瓜球腔菌引發(fā)
甜瓜枯霉病經(jīng)過對甜瓜球腔菌引發(fā)枯霉病抑制作用篩選有效菌株微生物和微生物肥料專家講座第38頁對照加功效微生物和有機(jī)載體僅加功效微生物微生物和微生物肥料專家講座第39頁
提升植物耐干旱等抗性能力+微生物肥料-微生物肥料微生物和微生物肥料專家講座第40頁增強(qiáng)植物對重金屬污染抗性微生物和微生物肥料專家講座第41頁改良和修復(fù)土壤功效農(nóng)藥等污染物生物修復(fù)作用:新熱點(diǎn)
微生物因?yàn)閿?shù)量大、種類多,變異快,降解有機(jī)物潛力相當(dāng)大,而且潔凈徹底、無二次污染,幾乎全部能造成環(huán)境污染有機(jī)物都能被微生物所分解、利用,這為我們消除農(nóng)藥殘留環(huán)境污染提供了一條嶄新路徑—農(nóng)藥面源污染微生物修復(fù)(微生物降解全方面性)。生物修復(fù)在美國已經(jīng)形成了一門新興生物技術(shù)產(chǎn)業(yè),有幾十家生物修復(fù)企業(yè),專門提供污染環(huán)境(土壤和水體石油、化工污染)生物修復(fù)技術(shù)方案和產(chǎn)品,在美國生物修復(fù)市場營業(yè)額已經(jīng)到達(dá)了百億美元(新興生物技術(shù)產(chǎn)業(yè))。農(nóng)藥污染是中國等發(fā)展中國家所面臨迫切需要處理問題,國內(nèi)在農(nóng)藥殘留微生物降解方面進(jìn)行了很多研究,逐步在加大應(yīng)用(現(xiàn)實(shí)迫切需要)。微生物和微生物肥料專家講座第42頁美國WIKAssociateInc.開發(fā)Bugs+plus系列用于環(huán)境修復(fù)生物制劑產(chǎn)品
微生物和微生物肥料專家講座第43頁甲基對硫磷降解菌DLL-1(Pseudomonasputida)農(nóng)藥殘留降解微生物分離篩選微生物和微生物肥料專家講座第44頁CK(Noatrazine)AtrazineBATH1BATH1阿特拉津降解菌盆缽試驗(yàn)微生物和微生物肥料專家講座第45頁四、微生物肥料合理使用微生物和微生物肥料專家講座第46頁微生物肥料合理使用
頒布NY/T1535-《肥料合理使用準(zhǔn)則微生物肥料》中,對微生物肥料合理使用作了標(biāo)準(zhǔn)性、技術(shù)性要求;發(fā)揮微生物肥料功效必須注意以下5個方面:1、微生物肥料關(guān)鍵是制品中特定有效活微生物,必須確保有一定數(shù)量有效活菌。另外,還應(yīng)有不一樣微生物特有活性指標(biāo),當(dāng)前相關(guān)活性指標(biāo)尚在試驗(yàn)、探索之中,用什么樣指標(biāo),多大數(shù)字量化需要研究、試驗(yàn)、驗(yàn)證。我國現(xiàn)行由農(nóng)業(yè)部頒布微生物肥料標(biāo)準(zhǔn)對各種微生物肥料產(chǎn)品均要求了對應(yīng)最低活菌含量。
微生物和微生物肥料專家講座第47頁微生物肥料合理使用2、
要從生產(chǎn)到使用都要給產(chǎn)品中有效微生物一個生存適當(dāng)環(huán)境:水分含量、pH、溫度、載體中殘?zhí)呛俊b材料等等,尤其是產(chǎn)品中雜菌含量應(yīng)注意嚴(yán)格控制。產(chǎn)品中水分含量過高易滋生霉菌,過多霉菌??稍斐煞N子霉?fàn)€,造成缺苗斷垅。溫度過高(如長時間在35℃以上)可致產(chǎn)品中有效微生物降低,雜菌增加。產(chǎn)品冰凍或重復(fù)凍融也是造成產(chǎn)品中有效微生物數(shù)量驟減一個主要原因。
微生物和微生物肥料專家講座第48
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