中醫(yī)藥在生殖技術(shù)的作用

第第頁(yè)中醫(yī)藥在生殖技術(shù)的作用1中醫(yī)藥對(duì)體外受精及胚胎發(fā)育的影響

體外受精和胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液對(duì)受精和胚胎發(fā)育具有重要作用。在培養(yǎng)液中加入有效的中藥成分，可對(duì)受精和胚胎發(fā)育產(chǎn)生正面影響。曾金雄等［8］將灌服中藥還精方(由黃芪、山茱萸、女貞子等組成)的大鼠血清加入培養(yǎng)液中培養(yǎng)人精子，發(fā)現(xiàn)含藥血清可顯著提高卵子受精率、受精指數(shù)(均P＜0.01)，表明補(bǔ)腎中藥具有提高人精子受精能力的作用。陳怡等［9］分別將灌服壽胎丸(由桑寄生、川斷、杜仲、菟絲子組成)及其4個(gè)單味藥的大鼠血清分別加入培養(yǎng)液中，發(fā)現(xiàn)在8細(xì)胞后的發(fā)育率壽胎丸復(fù)方血清組高于4個(gè)單味藥組，而4個(gè)單味藥組明顯高于空白血清組(P＜0.01，P＜0.05)，提示復(fù)方藥療效優(yōu)于單味藥;各組在2細(xì)胞至4細(xì)胞的發(fā)育比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2中醫(yī)藥對(duì)子宮內(nèi)膜容受性的影響

胚泡著床障礙是以IVF-ET為代表的ART妊娠成功率不高的一個(gè)重要原因。因此，改善子宮內(nèi)膜容受性、提高胚泡著床率，在治療中十分重要。張樹(shù)成等［10］對(duì)服用補(bǔ)腎生血方(由山茱萸、熟地黃、龜甲膠、阿膠、當(dāng)歸等組成)、補(bǔ)腎調(diào)經(jīng)方(由當(dāng)歸、熟地黃、菟絲子、枸杞子、五靈脂等組成)及女貞孕育湯(由菟絲子、女貞子、枸杞子、當(dāng)歸、丹參等組成)］3種補(bǔ)腎助孕方藥的臨床排卵障礙性不孕者，分別于用藥前后的排卵前2天及排卵后7、10天進(jìn)行子宮內(nèi)膜組織活檢取材，采用自身對(duì)照方法觀察內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)表現(xiàn)，血管表皮生長(zhǎng)因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子白血病抑制因子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子/成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子共4種血管生成因子，以及血管表皮生長(zhǎng)因子受體、表皮生長(zhǎng)因子受體、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體(TGFR)、內(nèi)皮糖蛋白CD105、血小板源性生長(zhǎng)因子受體α共5種血管生成因子受體的變化。結(jié)果表明，補(bǔ)腎助孕中藥對(duì)人子宮內(nèi)膜組織的血管生成活性和作用均具有強(qiáng)烈的正向促進(jìn)作用，組織中具有旺盛的血管生成表現(xiàn);除TGF和TGFR外，其他7種因子的表達(dá)強(qiáng)度均明顯增強(qiáng)。提示補(bǔ)腎助孕中藥具有明確的促血管生成作用，從而可以改善子宮內(nèi)膜容受性，提高胚泡著床率。黃冬梅等［11］通過(guò)掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎益氣和血方(由桑寄生、丹參、黃芪、當(dāng)歸、川芎等組成)可以促進(jìn)米非司酮所致胚泡著床障礙小鼠子宮內(nèi)膜表面胞飲突的表達(dá)，顯著提高妊娠率(55%vs25%，P＜0.05)及平均著床胚泡數(shù)(12.3vs7.7，P＜0.01)。表明補(bǔ)腎益氣和血方促進(jìn)子宮內(nèi)膜容受性和改善胚泡著床，可能與促進(jìn)子宮內(nèi)膜表面胞飲突的表達(dá)有關(guān)。吳云霞等［12－14］通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎益氣活血湯(由桑寄生、黃芪、當(dāng)歸、丹參等組成)能明顯提高吲哚美辛致著床障礙小鼠的著床率(50%vs20%)，增加子宮重量(均P＜0.05);改善子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)，使內(nèi)膜成熟蛻膜化細(xì)胞和血管數(shù)量增多，炎性細(xì)胞減少;輕度促進(jìn)雌激素受體α(estrogenreceptorα，Erα)的表達(dá)。提示補(bǔ)腎益氣活血方可能是通過(guò)雌激素樣活性加強(qiáng)E2及其受體作用而有利于發(fā)動(dòng)蛻膜化從而促進(jìn)著床。王素霞等［15］實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，安胎合劑(由菟絲子、苧麻根、續(xù)斷、黃芩等藥物組成)可以改善GnRHa長(zhǎng)周期輔助超排卵小鼠子宮內(nèi)膜組織形態(tài)，使子宮內(nèi)膜間質(zhì)疏松，血管豐富，腺體數(shù)目增多，腺腔增大，有利于胚泡種植;使子宮內(nèi)膜胞飲突數(shù)量、發(fā)育同步性均優(yōu)于模型組。張明敏等［16－21］實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎安胎方(由菟絲子、桑寄生、川續(xù)斷、黃芪、當(dāng)歸、丹參等組成)可以顯著提高吲哚美辛所致胚泡著床障礙小鼠妊娠率和著床點(diǎn)數(shù)(分別為72.7%vs27.3%、10.7vs5.3，P＜0.05)，具有改善胚胎著床障礙的作用，其機(jī)制可能與該方能改善甾體激素水平，促進(jìn)子宮內(nèi)膜雌、孕激素受體和VEGF及其受體的表達(dá)，促進(jìn)著床位點(diǎn)的類(lèi)肝素結(jié)合樣表皮生長(zhǎng)因子及其受體EGFR、前列環(huán)素I2(prostacyclinI2，PGI2)及其核受體過(guò)氧化物酶體增殖激活因子受體δ(PPARδ)的表達(dá)，調(diào)節(jié)著床位點(diǎn)的環(huán)氧化酶(cy-clooxygenase-2，COX-2)的表達(dá)，促進(jìn)子宮LIF及其受體的同步表達(dá)有關(guān)。曹蕾等［22］實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎健脾中藥復(fù)方(由菟絲子、桑寄生、黨參、白術(shù)等組成)可以明顯提高羥基脲致腎虛模型大鼠動(dòng)情期血清孕酮(progesterone，P)含量和內(nèi)膜LIF表達(dá)(均P＜0.05)，改善腎虛模型大鼠子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞功能，調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜自然殺傷(NK)細(xì)胞亞群含量，從而改善其子宮內(nèi)膜容受性。劉麗等［23］實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，保胎液(由續(xù)斷、桑寄生、菟絲子、阿膠、杜仲、白芍組成)能顯著提高米非司酮致胚泡著床障礙模型小鼠血清雌孕激素水平(P＜0.05)，從而改善著床障礙小鼠子宮內(nèi)膜容受性，促進(jìn)胚泡著床。楊楨等［24］采用曲普瑞林注射制備小鼠模型，預(yù)防性給予當(dāng)歸散(由當(dāng)歸、芍藥、川芎、白術(shù)、黃芩組成)及其拆方，于排卵后24、48h測(cè)定子宮內(nèi)膜中孕酮受體(proges-teronereceptor，PR)、整合素β3水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，48h時(shí)當(dāng)歸散組和歸－芩組的PR表達(dá)明顯上調(diào)，達(dá)到正常組水平;當(dāng)歸散組和當(dāng)歸黃芩組整合素β3在2個(gè)時(shí)間點(diǎn)表達(dá)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與正常組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。說(shuō)明當(dāng)歸散和當(dāng)歸－黃芩能抑制曲普瑞林引起的PR過(guò)早下調(diào)，抑制整合素β3的提前表達(dá)，從而改善子宮內(nèi)膜容受性。

3針刺在ART中的實(shí)驗(yàn)研究

電針可以影響中樞神經(jīng)肽，特別是β－內(nèi)啡肽(β-endorphin，β-EP)水平［25］，從而對(duì)下丘腦促性腺激素釋放激素的分泌產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用，由此再對(duì)整個(gè)下丘腦－垂體－卵巢產(chǎn)生影響。電針可以影響病理狀態(tài)下卵巢神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nervegrowthfactor，NGF)的表達(dá)［26］，以及卵巢、腎上腺受體α1、β2和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子p75受體的表達(dá)［27］，通過(guò)調(diào)節(jié)卵巢交感神經(jīng)活動(dòng)來(lái)調(diào)節(jié)其神經(jīng)內(nèi)分泌狀態(tài)，增加卵巢血流量［28］。劉新玉等［29］采用針刺療法，取穴足三里、三陰交及太沖，干預(yù)米非司酮致胚泡著床障礙大鼠。結(jié)果顯示，與模型組比較，針刺療法可顯著提高胚泡著床障礙大鼠妊娠率(75%vs45%，P＜0.05)，增加平均著床胚泡數(shù)(7.3vs3.5，P＜0.01)以及子宮、卵巢、單個(gè)胚泡重量(P＜0.01，P＜0.05)，改善子宮內(nèi)膜狀況。

4評(píng)價(jià)與展望

目前在ART中與中醫(yī)藥聯(lián)系較緊密的環(huán)節(jié)主要是超促排卵和胚胎移植。中醫(yī)藥合理應(yīng)用于ART，可以充分發(fā)揮整體協(xié)調(diào)機(jī)體生殖環(huán)境的作用，與西醫(yī)學(xué)ART微觀治療相輔相成。通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果推測(cè)，中醫(yī)藥應(yīng)用于ART增加妊娠成功率，可能與促進(jìn)卵泡發(fā)育及排卵、改善精子和卵細(xì)胞質(zhì)量、促進(jìn)受精和胚胎發(fā)育、改善子宮內(nèi)膜的容受性等有關(guān)。

目前中醫(yī)藥在ART中的實(shí)驗(yàn)研究仍然存在不足之處，如實(shí)驗(yàn)對(duì)象較為局限，實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)欠規(guī)范，研究不夠深入，對(duì)作用的微觀機(jī)制研究甚少，主要從對(duì)卵細(xì)胞質(zhì)量、體外受精、胚胎發(fā)育及子宮內(nèi)膜容受性的影響著手，以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)居多，間接探討中醫(yī)藥在體內(nèi)對(duì)卵泡發(fā)育和卵子質(zhì)量，以及胚胎發(fā)育與種植的作用機(jī)制。直接探討中醫(yī)藥在ART中作用機(jī)制的體外研究報(bào)道較少。今后應(yīng)從深入實(shí)驗(yàn)研究，規(guī)范實(shí)驗(yàn)隨機(jī)對(duì)照設(shè)計(jì)，以及加強(qiáng)機(jī)理探討等方面著手，將中醫(yī)藥介入ART方面的研究深入到分子、基因水平，揭示其微觀機(jī)制，促進(jìn)中醫(yī)藥在ART中的