第 十一 章鞣質(zhì)課件

第十一章鞣質(zhì)本章重點(diǎn)：1、掌握鞣質(zhì)的的結(jié)構(gòu)類型，理化性質(zhì)2、掌握鞣質(zhì)的提取、分離和檢識(shí)方法本章難點(diǎn)：1、可水解鞣質(zhì)和縮和鞣質(zhì)的區(qū)別2、除去鞣質(zhì)的方法現(xiàn)代含義：

鞣質(zhì)是由沒(méi)食子酸（或其聚合物）的葡萄糖（及其他多元醇）酯、黃烷醇及其衍生物的聚合體以及兩者共同組成的植物多元酚。經(jīng)典含義：

鞣質(zhì)又稱單寧或鞣酸，是一類復(fù)雜的多元酚類化合物的總稱，可與蛋白質(zhì)結(jié)合形成致密、柔韌、不易腐敗又難透水的化合物。

生理活性：鞣質(zhì)在多數(shù)中藥中被視為無(wú)效成分，應(yīng)除去,而在五倍子，地榆中具有活性認(rèn)為是有效成分?？鼓[瘤；清除自由基；抗病毒；抗過(guò)敏；收斂止血、止瀉、治燒傷。合成途徑：

可水解鞣質(zhì)：莽草酸途徑縮合鞣質(zhì)：乙酸-檸檬酸、莽草酸復(fù)合途徑

聯(lián)系理解中藥有效成分和無(wú)效成分的關(guān)系甘草苷

橙皮素

鞣質(zhì)廣泛存在于自然界中，約70％以上的中草藥含有鞣質(zhì)類成分，特別在種子植物中分布很普遍。鞣質(zhì)存在于植物的皮、莖、葉、根、果實(shí)等部位。植物被昆蟲(chóng)傷害后的蟲(chóng)瘺中含有大量的鞣質(zhì)，如五倍子所含鞣質(zhì)高達(dá)70％以上。植物中鞣質(zhì)含量一般隨植物的年齡、存在部位、生長(zhǎng)環(huán)境、生長(zhǎng)季節(jié)等條件不同而異。一年生草本植物一般含鞣質(zhì)較少；木本心材中鞣質(zhì)含量隨年齡增長(zhǎng)而增加；果實(shí)中鞣質(zhì)含量隨其逐漸成熟而下降；植物向陽(yáng)部位的鞣質(zhì)含量叫背陰部位高；溫帶植物較寒帶植物的鞣質(zhì)高。二．鞣質(zhì)結(jié)構(gòu)和分類

根據(jù)鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征把鞣質(zhì)分成三類1.可水解鞣質(zhì)2.縮合鞣質(zhì)3.復(fù)合鞣質(zhì)1、可水解鞣質(zhì)：分子中具有苷鍵和酯鍵，在酸、堿、酶的作用下，可水解成小分子的酚酸類、糖或多元醇。依水解產(chǎn)物不同，可分為以下幾種。沒(méi)食子鞣質(zhì)：逆沒(méi)食子鞣質(zhì)：可水解鞣質(zhì)低聚體：C-苷鞣質(zhì)：咖啡鞣質(zhì)：

(1)沒(méi)食子鞣質(zhì)水解后生成沒(méi)食子酸（3，4，5-三羥基苯甲酸）和糖或多元醇。五倍子鞣質(zhì)為可水解鞣質(zhì)代表，為混合物。以“1，2，3，4，6-五-沒(méi)食子酰葡萄糖”為核心，由五到十二個(gè)沒(méi)食子酰葡萄糖組成，每個(gè)葡萄糖基平均有8.3個(gè)沒(méi)食子?；?。具有收斂止血作用；可治療腹瀉、潰瘍等；水解后得到大量沒(méi)食子酸。

沒(méi)食子鞣質(zhì)五倍子(2)逆沒(méi)食子鞣質(zhì)是六羥基聯(lián)苯二酸與多元醇形成的酯。在植物物中分布最廣泛，是種類最多的一類可水解鞣質(zhì)。

(5)咖啡鞣質(zhì)（P99）咖啡中所含主要成分綠原酸，無(wú)鞣質(zhì)活性，屬于簡(jiǎn)單苯丙素類。少量3，4-；3，5-；4，5-二咖啡酰奎寧酸化合物具鞣質(zhì)活性。2、縮合鞣質(zhì)：在酸、堿、酶的作用下不能水解，但可聚合成大分子的“鞣紅”沉淀，又稱為鞣紅鞣質(zhì)或黃烷醇鞣質(zhì)。黃烷–3--醇類：黃烷–3，4–二醇類：原花色素類縮合鞣質(zhì)分布比可水解鞣質(zhì)廣泛。(1)黃烷-3-醇類（P141）兒茶素為重要化合物，有2，3兩個(gè)手性碳原子。兒茶素不屬于鞣質(zhì)（黃酮類），可作為鞣質(zhì)的前體。

(2)黃烷-3，4-二醇類

(3)原花色素類天然縮合鞣質(zhì)絕大部分為聚合的原花色素原花色素本身無(wú)鞣性，二聚體有不完全鞣性，三聚體開(kāi)始有明顯鞣性。三．鞣質(zhì)性質(zhì)一、物理性質(zhì)1、少數(shù)為結(jié)晶（老鶴草素），大多為灰白色無(wú)定性粉末，多具吸濕性。2、屬極性成分，溶于水、親水性有機(jī)溶劑、乙酸乙酯，難溶或不溶于親脂性有機(jī)溶劑。3、少量水存在可以增加鞣質(zhì)在有機(jī)溶劑的溶解度。二、化學(xué)性質(zhì)1、為強(qiáng)還原劑，能還原斐林試劑等。2、與蛋白質(zhì)產(chǎn)生沉淀?？捎妹髂z提純鞣，可鞣皮成革3、與重金屬鹽沉淀：鉛鹽、銅鹽、鈣、鋇氫氧化物等用于鞣質(zhì)的分離或除鞣。4、與生物堿沉淀：為生物堿沉淀試劑。5、與三氯化鐵產(chǎn)生藍(lán)黑、綠黑反應(yīng)或沉淀。作為工業(yè)原料制造藍(lán)黑墨水。6、與鐵氰化鉀氨溶液反應(yīng)成深紅色，很快變?yōu)樽厣?。四．鞣質(zhì)的提取分離

一、鞣質(zhì)的提取控制提取時(shí)間溫度，快速、完全，使之不破壞鞣質(zhì)。使用新鮮原料，立即浸提，原料用盡可能短時(shí)間干燥，避免鞣質(zhì)的變質(zhì)。

目前最常用的方法為組織破碎提取法。原料

50~70%含水丙酮，室溫下高速離心機(jī)內(nèi)，破碎成勻漿狀，甩濾，藥渣反復(fù)三次丙酮/水提取液減壓濃縮（濃縮過(guò)程有色素沉淀時(shí)可濾除）丙酮提取物（粗總鞣質(zhì)）

二、鞣質(zhì)分離：1、溶劑法：利用鞣質(zhì)易溶于乙酸乙酯而難溶于乙醚分離2、沉淀法：利用鞣質(zhì)與蛋白質(zhì)產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)，可用明膠提純鞣質(zhì)3、柱色譜法：主要利用色譜的吸附過(guò)程4、高效液相色譜法：同流動(dòng)相中，分子量越大，tR(保留時(shí)間)越大

1.明膠沉淀法與改良明膠沉淀法（1）明膠沉淀法：在中藥水煎濃縮液中，加入2%～5%明膠溶液，至不產(chǎn)生沉淀為止，靜置、濾過(guò)除去沉淀，濾液濃縮后，加乙醇，使含量達(dá)75%以上，以除去過(guò)量明膠。（2）改良明膠沉淀法：水煎液濃縮，加入2%～5%明膠后稍經(jīng)放置，不須濾過(guò)即再加入乙醇至含醇量達(dá)70%～80%，靜置過(guò)夜，濾過(guò)即得。

2.醇溶液調(diào)pH值法將中藥的水煎液濃縮加入乙醇，使其含醇量達(dá)80%或更高，放置，濾除沉淀后，用40%氫氧化鈉調(diào)至pH為8，此時(shí)鞣質(zhì)生成鈉鹽且不溶于乙醇而析出，經(jīng)放置，即可濾過(guò)除去。3.聚酰胺除鞣質(zhì)法聚酰胺可與鞣質(zhì)吸附，吸附力很強(qiáng)從而達(dá)到除去的目的。4.鉛鹽沉淀法利用鉛鹽從提取液中沉淀出有效成分或分離除去雜質(zhì)。除去鞣質(zhì)的方法五．鞣質(zhì)鑒別1、明膠沉淀反應(yīng)陽(yáng)性，示有鞣質(zhì)存在2、化學(xué)反應(yīng)：（見(jiàn)P-381）用于兩類鞣質(zhì)的區(qū)別，主要是稀酸水共沸現(xiàn)象3、色譜鑒別:

鞣質(zhì)含酚羥基較多，薄層鑒別一般在展開(kāi)劑中加微量的酸。噴不同顯色劑，根據(jù)顏色判斷鞣質(zhì)的類型。（見(jiàn)P-381）第十二章其他成分第一節(jié)脂肪酸類一、含義

脂肪族中含有羧基的一類化合物。

在生物體內(nèi)多以酯的形式存在，通式：RCOOH二、脂肪酸的結(jié)構(gòu)分類1、飽和脂肪酸

分子中沒(méi)有雙鍵，可促進(jìn)人體對(duì)膽固醇吸收，是血管硬化的主要原因。2、不飽和脂肪酸

（1）單不飽和脂肪酸

分子中有一個(gè)雙鍵。對(duì)人體膽固醇代謝影響不大。

（2）多不飽和脂肪酸

分子中有兩個(gè)以上雙鍵。有良好的降血脂作用

亞油酸、α-亞油酸：必須從食物中攝取，被稱為人

體必須氨基酸。

DHA（二十二碳六烯酸）EPA（二十碳五烯酸）：對(duì)腦細(xì)胞形成生長(zhǎng)有重要作用，可提高記憶力延緩大腦衰老。主存在于深海魚(yú)油中

三．脂肪酸的理化性質(zhì)：

1、溶解性：

不溶于水，溶于有機(jī)溶劑和冷氫氧化鈉。

2、酸性：

可以和堿成鹽，鹽為離子型化合物，可溶于水。

3、酸敗：

脂肪酸在空氣中久置，產(chǎn)生難聞氣味（哈喇）。

4、顯色反應(yīng)：

碘酸鉀-碘化鉀：呈藍(lán)色

溴-麝香草酚藍(lán)：顯藍(lán)色。

四．脂肪酸提取與分離1、提取

親脂性有機(jī)溶劑提取或超臨界流體萃取法。2、分離（1）蒸餾法：常和尿素結(jié)晶法配合使用。（2）丙酮冷凍法：飽和程度不同的脂肪酸在過(guò)冷的丙酮中溶解度不同（DHA和EPA）（3）脂肪酸鹽結(jié)晶法：適用于工業(yè)生產(chǎn)。（4）尿素結(jié)晶法：脂肪酸不飽和程度越低越容易和尿素形成加合物，可提取多不飽和脂肪酸。第二節(jié)有機(jī)含硫化合物

（芥子苷大蒜辣素焊菜素）

第二節(jié)有機(jī)含硫化合物1、芥子苷

分布在十字花科植物中以硫?yàn)檐赵踊衔?。常以鉀鹽（有時(shí)鈉鹽、銨鹽）存在，芥子苷受其共存的芥子苷酶作用生成異硫氰酸酯。2、大蒜

含大蒜新素，具有抗病原微生物、抗腫瘤、降血脂、清除自由基和保肝作用?？捎盟魵庹麴s法得到。第二節(jié)氨基酸、蛋白質(zhì)、環(huán)肽、酶

一．氨基酸1，概述氨基酸是一類既含羧基又含氨基的一類化合物。2，結(jié)構(gòu)與分類（1）根據(jù)氨基處于羧基位置：分為α-氨基酸、β-氨基酸、γ-氨基酸。α-氨基酸為主。（2）根據(jù)氨基和縮基的數(shù)目：

中型氨基酸：羧基=氨基

酸性氨基酸：羧基〉氨基堿性氨基酸：羧基〈氨基

二．理化性質(zhì)

1、性狀：無(wú)色結(jié)晶，熔點(diǎn)較高。2、溶解性：易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑（丙酮、乙醚、氯仿）。3、成鹽：兩性化合物，既有酸性又有堿性，和強(qiáng)酸、強(qiáng)堿都能成鹽；分子內(nèi)也可形成內(nèi)鹽。4、等電點(diǎn)：在氨基酸溶液中，氨基酸分子中氨基和羧基電離趨勢(shì)相等時(shí)溶液的pH值。等電點(diǎn)時(shí)，氨基酸的溶解度最小。5、顯色反應(yīng)：茚三酮加熱多顯紫色，用于氨基酸鑒別、薄層噴霧顯色。三、檢識(shí)主要用茚三酮顯色反應(yīng)，多數(shù)氨基酸、多肽或蛋白質(zhì)顯藍(lán)紫色。注意氨氣、麻黃堿、仲氨、伯胺等產(chǎn)生假陽(yáng)性四、提取分離1、氨基酸提取水或70%乙醇提取，濃縮至無(wú)醇味，過(guò)強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，堿水洗脫。2、氨基酸分離（1）電泳法：電場(chǎng)中，中型氨基酸不動(dòng)，堿性氨基酸（正電荷）移向陰極，酸性氨基酸（負(fù)電荷）移向陽(yáng)極溶液PH越接近等電點(diǎn)，氨基酸移動(dòng)速度越慢（2）離子交換樹(shù)脂法陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上，酸性氨基酸和羥基氨基酸吸附力最弱，中性氨基酸較強(qiáng)，芳環(huán)氨基酸更強(qiáng)，堿性氨基酸最強(qiáng)。2．蛋白質(zhì)和酶的性質(zhì)：1、多數(shù)蛋白質(zhì)、酶不溶于有機(jī)溶劑?？扇苡谒赡z體溶液（大分子溶液），不能透過(guò)半透膜，據(jù)此，可用于蛋白質(zhì)的提純。2、兩性化合物（氨基和羧基）等電點(diǎn)：同氨基酸。3、鹽析：高濃度硫酸銨、氯化鈉生成沉淀，此性質(zhì)可逆，可用于蛋白質(zhì)的提純。變性：與酸、堿或加熱，可使其變性失活。此反應(yīng)不可逆。4、水解：蛋白質(zhì)在酸、堿、酶的作用下可水解成α-氨基酸。5、酶解：酶的高催化活性及專屬性6、沉淀反應(yīng)：可被酸（鞣質(zhì)、苦味酸、硅鎢酸）及多種金屬鹽類（硫酸銅、氯化高汞）沉淀。7、顏色反應(yīng)：堿性溶液中與硫酸銅產(chǎn)生紅色或紫紅色。與2-甲氨基萘5-磺酰氯反應(yīng)，顯黃色熒光。與酸性蒽醌紫顯紫色。（蛋白質(zhì)特有）三．提取分離1．蛋白質(zhì)的提?。?）提取水、5~8%氯化鈉水溶液提取，氯化鈉鹽析即可