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文檔簡介
婦科腫瘤項目的臨床應(yīng)用第1頁/共23頁檢測項目癌胚抗原(CEA)甲胎蛋白(AFP)糖鏈抗原19-9(CA19-9)糖鏈抗原125(CA125)絨毛膜促性腺激素(HCG)第2頁/共23頁婦科腫瘤項目基本參數(shù)檢測項目英文縮寫實驗方法定標(biāo)液定標(biāo)液量μl定標(biāo)周期(天)線性范圍加樣量單位參考范圍實驗所需時間癌胚抗原CEACLIAD250210.5-10050μlng/ml0-518分鐘甲胎蛋白AFPCLIAD130141.3-100010μlng/ml0-8.118分鐘糖抗原19-9CA19-9CLIA9325281.2-70075μlU/ml0-3750分鐘糖抗原125CA125CLIA15250282-60050μlU/ml0-30.250分鐘絨毛膜促性腺激素HCG酶放大LIAHCG120281.1-100005μlmIU/ml0-1040分鐘第3頁/共23頁實驗方法酶放大化學(xué)發(fā)光直接化學(xué)發(fā)光雙位點夾心免疫分析第4頁/共23頁微粒子直徑0.08+/-0.02mm懸浮于微小反應(yīng)體系中50-100mL分析能力極大的固相表面積~2.45cm2極大的分析物結(jié)合能力50-1000ng/cm2技術(shù)的創(chuàng)新
-----磁顆粒包被技術(shù)微粒子包被第5頁/共23頁代表項目實驗原理第6頁/共23頁X時間發(fā)光信號Y輝光(Glow)坪區(qū)速率法測量原位進(jìn)樣積分法測量閃光(Flash)尖峰化學(xué)發(fā)光信號的類型及測量方式的差別依據(jù)發(fā)光方式分為閃光和輝光第7頁/共23頁AMPPD及其衍生物的化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)(輝光)+*477nm幾十minOOOCH3OPO32-O-OOOCH3OO-OOCH3HCG使用的底物(西門子公司)AlkalinePhosphatase
AMPD中等穩(wěn)定中間體2-30min金剛烷電子轉(zhuǎn)移間氧苯甲酸甲酯陰離子LIGHTDioxetane第8頁/共23頁CH3C=OORN+OH-H+H2O2+H2O+ROH光子+CO2+CH3C=OORNHOCH3C=OORNHOOCH3ONCH3ONC=OOAFP等使用的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)吖啶酯及其衍生物的化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)(閃光)(西門子公司)第9頁/共23頁HCG檢測原理示意圖(一步,單試劑)珠—M-McAbLS-HCG-Ag羊-poly-Ab-ALPB加入底物substrate,發(fā)光,光電倍增管測定離心,分離,液體進(jìn)入夾層一圈30min夾心法SIMENSIMMULITE第10頁/共23頁AFP檢測原理示意圖L-標(biāo)記Ab兔PolyAbML-磁顆粒固相M-McAbMAgSIMENSBAYER*37℃,7.5min*第11頁/共23頁廢液探針吸走SIMENSBAYER光信號檢測系統(tǒng)測定L-標(biāo)記Ab兔PolyAbML-磁顆粒固相M-McAbM*酸性試劑堿性試劑第12頁/共23頁CA125檢測原理示意圖S-AgSIMENSBAYERL-標(biāo)記Ab鼠McAb*37℃,18min標(biāo)記AgAb*ML-磁顆粒固相M-McAb37℃,18minM*磁場分離,酸堿試劑發(fā)光光信號檢測系統(tǒng)測定第13頁/共23頁CA199檢測原理示意圖S-AgSIMENSBAYERL-標(biāo)記Ab鼠McAb*37℃,7.5minML-磁顆粒固相McAb37℃,20minM*酸堿試劑發(fā)光光信號檢測系統(tǒng)測定吸出,洗液1沖洗,去除過量未結(jié)合Ag100μl試劑水懸浮M磁顆粒固相AgAb去除高劑量鉤狀效應(yīng),分離,吸出,洗液洗滌,加試劑水第14頁/共23頁臨床意義—CA199腫瘤相關(guān)抗原診斷和監(jiān)測胰腺腫瘤(良惡性鑒別)胃腸道癌,尤其結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移性胃腸道癌檢測膽管、肝細(xì)胞性、食道和非胃腸道腫瘤監(jiān)測術(shù)后復(fù)發(fā)(>1000腫瘤全切是不可能的)在月經(jīng)與妊娠期15%或10%婦女可有升高第15頁/共23頁影響因素—CA199溶血脂血黃疸蛋白血如為上述情況且程度較重時,結(jié)果變化可達(dá)近4%第16頁/共23頁臨床意義—CA125卵巢癌患者的治療評估、監(jiān)測復(fù)發(fā)絕經(jīng)期婦女結(jié)合超聲,利用CA125可區(qū)分盆腔良惡性腫塊肝硬化、急性胰腺炎、子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎、月經(jīng)、妊娠前3個月1-2%的健康人可出現(xiàn)CA125升高第17頁/共23頁臨床意義—CEA原發(fā)性結(jié)直腸癌胃腸道癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌非惡性疾?。ɡ夏耆?、吸煙者)腫瘤切除后復(fù)發(fā),監(jiān)測和管理癌癥的指標(biāo)第18頁/共23頁臨床意義—AFP肝細(xì)胞癌,卵巢癌、睪丸惡性生殖細(xì)胞腫瘤腸胃癌、胰腺癌、肺癌非精原細(xì)胞細(xì)胞瘤睪丸癌的監(jiān)測(結(jié)合HCG)妊娠中期胎兒開放性神經(jīng)管缺陷第19頁/共23頁臨床意義—HCG胚胎細(xì)胞腫瘤(女性葡萄胎和絨毛膜癌,男性睪丸癌)性腺外胚胎細(xì)胞癌妊娠和異位妊娠的早期診斷自然流產(chǎn)的診斷第20頁/共23頁
五個項目均較穩(wěn)定,線
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