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文檔簡介
C檢驗標本采集運送第1頁/共100頁分析前的質(zhì)量保證
檢驗報告是臨床醫(yī)師診治疾病,判斷預后,評估健康狀況的重要依據(jù)。檢驗數(shù)據(jù)的價值首先體現(xiàn)在它的準確性上,只有準確的檢驗結果才能正確指導臨床診療。而檢驗結果的準確與否,除了受檢驗過程中(檢驗中)各種因素的影響外,還受到檢驗前許多因素的影響,如采集標本前病人的狀態(tài),標本采集是否規(guī)范,標本的存貯和運輸是否合理等。國內(nèi)外均有報道,檢驗結果誤差中70%左右來自檢驗前(分析前),而且檢驗前(分析前)誤差是儀器、試劑、質(zhì)控品和標準品等再好也無法解決的。另一方面,檢驗數(shù)據(jù)的價值還體現(xiàn)在檢驗報告的正確應用上,正確地解讀檢驗結果是正確應用檢驗報告的前提。臨床醫(yī)師拿到檢驗報告后,首先要對檢驗數(shù)據(jù)做全面的分析,排除各種干擾因素,才能做出正確判斷。第2頁/共100頁實驗前質(zhì)量控制主要包括:
*患者的準備;*標本的采集; *標本的儲存;*標本的運送;*標本送出及簽收;*標本的處理;*已知的和需考慮的生物因素和干擾因素等。第3頁/共100頁1、患者的準備
一般要求患者處于安靜狀態(tài);晨起時的精神、體力、情緒等因素的影響較小,是大部分標本采集的最佳時間;如可能,患者最好停服干擾檢測的藥物;根據(jù)項目和標本類別選擇相應的容器。許多檢測對飲食、飲水和藥物有特殊要求第4頁/共100頁2、標本的采集2.1正確的采集標本是保證檢驗質(zhì)量的基礎(1)避免干擾物污染,特別是定量分析標本;(2)標本采集部位和方法要正確;(3)標本標識一定要清晰無誤;(4)無人為的溶血和混濁因素;(5)合理使用抗凝劑及防腐劑;(6)收集區(qū)溫度最好不超過20℃;(7)微生物檢驗標本采集嚴格無菌概念;(8)標本采集后要盡快送至實驗室。第5頁/共100頁2.2標本采集時間:(1)空腹標本:一般指空腹8h后采集的標本。清晨空腹血液標本常用于臨床生化定量測定,受飲食、體力活動、生理活動等的影響較小,易于發(fā)現(xiàn)和觀察病理情況,而且重復性較好。(2)隨時或急診標本:指無時間限制或無法規(guī)定時間而必須采集的標本,被檢者一般無法進行準備。隨時或急診標本主要用于體內(nèi)代謝比較穩(wěn)定以及受體內(nèi)因素干擾少的物質(zhì)的檢查,或者急診、搶救病人必須做的檢查。(3)指定時間標本:即指定采集時間的標本,根據(jù)不同的檢測要求有不同的指定時間,如24h尿蛋白定量、葡萄糖耐量試驗、內(nèi)分泌腺的興奮或抑制試驗、腎臟清除率試驗等。第6頁/共100頁2.3采集方法
具體方法見血標本采集作業(yè)指導書。第7頁/共100頁3、標本的儲存
標本采集后應盡快送至實驗室,若不能及時送檢,已采集的標本要按檢驗規(guī)定的貯存條件,如室溫(18-25°C)、冷藏(常規(guī)2-8°C)、冰浴、溫浴或防腐貯存,將標本直立置于穩(wěn)定、干燥、避光、密閉的環(huán)境中,避免振搖,以免標本滲漏或溶血影響檢測結果。血液標本采集后應及時分離血清或血漿,否則可發(fā)生紅細胞與血清之間成分的相互轉移,或紅細胞中的某些酶分解待測物等,從而影響檢驗結果。第8頁/共100頁4、標本的運送
必須保證運送后標本所分析的結果與剛采集標本后分析的結果一致。如未及時送檢,可能導致血細胞與血清長時間接觸,發(fā)生下列變化:(1)由于血細胞的酵解作用,血糖以每小時5%~15%的速率降低,即使在真空采血管中在較低溫度下每小時也會降低1.9%,糖酵解產(chǎn)物乳酸和丙酮酸升高。第9頁/共100頁
(2)由于紅細胞膜通透性增加和溶血加重,紅細胞內(nèi)化學成分發(fā)生轉移和釋放,酶活性受影響,血清無機磷、鉀、鐵、乳酸脫氫酶、天門冬氨酸轉移酶、肌酸激酶等升高。(3)由于酯酶作用,膽固醇酯因分解而減少,游離脂肪酸增加。(4)酸性磷酸酶測定血標本室溫放置1~2h測定結果降低50%。(5)電解質(zhì)測定血標本未及時分離血清和血漿,可導致血鉀測定結果偏高。第10頁/共100頁標本采集的基本原則
1、申請單填寫要點每個檢驗項目或組合檢驗項目送一份標本,每一份標本附一張申請單。按照檢驗項目申請單的要求,采集特定的標本,并將標本送到指定的實驗室。因此,檢驗申請單是實驗檢查的第一步。第11頁/共100頁
(1)病人身份識別信息:申請者必需清楚填寫病人的姓名、性別、年齡、或其它有效識別身份的編號;(2)病人的病歷信息:申請者必需清楚填寫病人所在臨床科室名稱、病歷號、床號、臨床診斷、樣本類型、樣本的采集日期和時間(年、月、日、時、分)、申請者姓名、申請檢驗日期;第12頁/共100頁
(3)申請的檢驗項目:申請者必需清楚填寫檢驗項目名稱,項目名稱應規(guī)范、準確,特別是申請組套項目時,一定要與組套內(nèi)容一致,否則需填寫具體單項;
備注:有關的臨床和治療信息,特別是用藥信息是檢驗師評價結果的必要條件。藥物可能在體外影響分析方法或在體內(nèi)引起病理變化,因此,要特別注意在申請單上提供此類信息。第13頁/共100頁2、關于實驗室標本拒收規(guī)定
有下列情況時可考慮標本拒收:
2.1標本屬性不清、標記錯誤或無標記、標本標識與申請單標識不符;
2.2抗凝劑比例錯誤;
2.3標本收集管使用錯誤:第14頁/共100頁
(1)血沉(ESR0應使用1:4枸櫞酸鈉(黑帽)抗凝管,不能使用其他管;(2)凝血功能檢測使用1:9枸椽酸鈉(藍帽)抗凝管,不能使用其他管;第15頁/共100頁
(3)K+、Na+、Ca2+可用非抗凝血,絕對不能使用EDTA2K、枸椽酸鈉、草酸鈉抗凝血,推薦使用肝素抗凝血;(4)全血細胞分析、ABO血型測定必須用EDTA(紫帽)抗凝管。第16頁/共100頁2.4微生物室拒收標準:(1)手工申請單無檢驗項目或檢驗項目不清楚的標本,項目非本實驗室檢驗的標本;(2)申請單病人姓名和標本上的姓名不一致,可能為病人入院后修改過姓名,但是無法確認標本正確歸屬的,實驗室可以拒收;(3)申請單和標本已經(jīng)分離,標本容器上又無明確患者標識信息等;第17頁/共100頁
(4)空管,標本量過少,未達到規(guī)定要求的;(5)收集容器不正確,所有標本微生物培養(yǎng)均應用潔凈、無菌、加蓋、封閉容器收集送檢。(6)檢驗申請項目與標本類型不符的。如:申請為血培養(yǎng),實際送檢為胸水標本。(7)標本外部有嚴重的遺灑、滲漏,懷疑標本可能有交叉污染的。(8)經(jīng)詢問確認標本采集部位不正確。第18頁/共100頁
(9)經(jīng)詢問,確認標本超過標本允許送達時間的,室溫保存不超過2小時,4℃冷藏保存時間不得超過8小時;但血培養(yǎng)、淋球菌培養(yǎng)標本不能冷藏保存,應保溫立即送檢并接種(10)經(jīng)詢問確認標本保存、運輸方式不正確的。(11)如果原始標本不可替代或很關鍵,如腦脊液和組織標本等,拒收應慎重。這些標本在拒收前與臨床醫(yī)生進行充分的溝通,以求發(fā)現(xiàn)彌補的辦法。第19頁/共100頁3、微生物標本采集基本原則
(1)發(fā)現(xiàn)感染應及時采集微生物標本作病原學檢查,三級醫(yī)院微生物標本送檢率不應低于70%。(2)盡量在抗菌藥物使用前采集標本。(3)標本采集時應嚴格執(zhí)行無菌操作,減少或避免機體正常菌群及其他雜菌污染。(4)標本采集后應立即送至實驗室。床邊接種可提高病原菌檢出率。第20頁/共100頁
(5)以棉拭子采集的標本如咽拭、肛拭或傷口拭子送檢后應立即接種。(6)混有正常菌群的標本如咳痰、尿液、傷口拭子,不可置肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢。(7)盛標本容器須經(jīng)滅菌處理,但不得使用消毒劑。(8)送檢標本應注明來源和檢驗目的,使實驗室能正確選用相應的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。第21頁/共100頁
(9)一些對環(huán)境敏感的細菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應保溫并立即送檢。(10)厭氧性標本應放在專門的運送瓶或試管內(nèi)運送,有時可直接用抽取標本的注射器運送。(11)其他所有的標本采集后最好在2h之內(nèi)送到實驗室。若不能及時送檢,標本應置于一定環(huán)境中保存,如支氣管洗液、心包液、痰、尿等標本應保存在4℃環(huán)境中,腦脊液等則要在25℃保存。第22頁/共100頁
(12)患者標本中可能含有大量致病菌,不管標本運送距離遠近,都必須注意安全防護。標本切勿污染容器的瓶口和外壁,容器必須包裝好,防止送檢過程中倒翻或碰破流出。第23頁/共100頁標本采集要求和方法1、血液檢驗標本采集方法按照血標本采集部位的不同,分為靜脈血、動脈血和毛細血管血三種。第24頁/共100頁1.1靜脈血采集方法、注意事項
(1)止血帶或壓脈器:采集靜脈血時,止血帶壓迫靜脈時間不宜過長,以不超過40秒為宜,否則容易引起淤血、靜脈擴張,并且影響某些指標的檢查結果,如乳酸升高、pH值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。(2)采血時間與部位:大多數(shù)化驗檢查要求清晨、空腹、采集靜脈血應盡可能避免在輸液同時取血,輸液不僅使血液稀釋,而且對實驗室檢查結果發(fā)生嚴重干擾,特別是血糖和電解質(zhì)。第25頁/共100頁
(3)避免溶血、雜質(zhì)污染:采血器具必須無菌、干燥、潔凈,避免特別用力抽吸和推注、避免化學污染和細菌污染引起的溶血。因為紅細胞的某些成分與血清(漿)不同,樣本溶血可使紅細胞某些成分釋放,影響實驗室檢查結果。(4)血樣的采集:血樣要求在每一天的同一時間采集,理想的時間是早晨7:00到8:00,尤其是以監(jiān)測為目的時,更要保證標本采集時間的統(tǒng)一。最后一次食物和液體攝入應在前一天下午6:00到7:00(急診檢驗例外)。第26頁/共100頁
(5)標本采集后須立即送檢,放置過久影響檢驗結果。當取血不順利時,切忌在同一處反復穿刺,易導致標本溶血或有小凝塊,影響檢測結果。(6)采集血培養(yǎng)標本時應先注射厭氧瓶,盡量減少接觸空氣時間。(7)微量元素測定采集標本的注射器和容器不能含游離金屬第27頁/共100頁1.2臨床化學/免疫檢驗標本
臨床化學/免疫檢驗多用非抗凝血標本,最好使用真空負壓采血管。標本采集主要注意事項:(1)化學項目大多數(shù)需要空腹采靜脈血,多個單項化學檢測項目組合檢驗時一般可采一管血;(2)采血量視檢查項目多少不同而異,通常為4.0~5.0ml;第28頁/共100頁
(3)多個組合檢測項目同時采血時應按下列順序采血:血培養(yǎng)→無添加劑管→凝血管→有添加劑管有添加劑管的順序為:櫞酸鹽管→肝素管→EDTA管→草酸鹽/氟化鈉管不論是抗凝血還是非抗凝血,為了縮短血清或血漿與血細胞的接觸時間,血液標本收集后,須盡可能早地送檢。第29頁/共100頁1.3紅細胞沉降率(血沉,ESR)檢測標本
靜脈采集枸櫞酸鈉(109mmol/L,即32.06g/L)抗凝血(枸櫞酸鈉1:4抗凝管采血),黑帽管。采血注意事項: (1)單獨采1管血,準備采血至2ml刻度線(抗凝劑:全血=1:4);(2)采血后立即上下顛倒混合5~10次;(3)采血后應盡快送檢(必須2h內(nèi)檢測)第30頁/共100頁1.4血常規(guī)(全血細胞分析)檢驗標本
一般用EDTA2K1.5~2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。采血注意事項:(1)采血后立即上下顛倒混勻,5~10次,不可用力震蕩;(2)應按抗凝管刻度采血至2ml,可不用空腹;(3)采血后應盡快送檢(需顯微鏡觀察形態(tài)的標本采血后應及時推片固定,因為超過2小時WBC形態(tài)會發(fā)生改變);(4)血型與血常規(guī)可采1管血。第31頁/共100頁1.575克葡萄糖耐量試驗(OGTT)/胰島素釋放試驗/C-肽釋放試驗1.5.1病人準備:試驗前3日,每日進食碳水化合物量不低于250-300克,且維持正?;顒?,影響試驗的藥物(如:咖啡因、口服避孕藥、水楊酸鹽等)應在3日前停用,試驗前病人應10~16小時不進食。第32頁/共100頁1.5.2標本采集:臨床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服75克葡萄糖,再于給糖后0.5、1、2小時各采血2ml/1次(共4次)。
1.5.3標本保存:采血后1小時內(nèi)分離血清并及時冷藏送檢或采用血糖專用抗凝管采血,于2~8℃保存。第33頁/共100頁1.6高血壓系列檢驗標本1.6.1高血壓四項,屬外送項目(金域檢驗)(1)病人準備:β-阻斷劑、血管擴張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內(nèi)腎素水平,一般要在停藥后2周測定腎素活性(PRA),利血平等代謝慢的藥物應在停藥3周測定。不宜停藥的病人改服胍乙啶等影響PRA較小的降壓藥。鈉攝入量影響機體PRA水平,故病人測定PRA前3天應適當減少食鹽攝入量,最好同時測定取血前24小時尿鈉含量,以供分析PRA結果時參考;。第34頁/共100頁
(2)標本采集:靜脈取血4~5ml,拔除針頭后緩慢注入到專用抗凝管中,蓋好管塞后上下顛倒5次,混勻后2500轉/分,離心5~10分鐘,分離血漿,將血漿裝入專用血漿管后低溫送檢。如不能立即送檢,需盡快冰凍保存(-15℃)。溶血標本不能檢測;
(3)標本類型、標本量:專用抗凝管采血(EDTA2K抗凝管),分離血漿,取2ml送檢;第35頁/共100頁
(4)注意事項:申請單上應注明抽血時的體位(臥位:病人在早上6-8時起床前,取靜脈血;立位:病人起床后活動3小時,取靜脈血。)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);標本未及時分離血漿、反復凍融、溶血、保存不當、使用過期抗凝管等均可使結果受到影響。第36頁/共100頁1.6.2醛固酮,屬外送項目(金域檢驗)。(1)病人準備:留樣前應停服利尿劑至少3周,停服抗高血壓藥物1周;(2)標本采集:血漿醛固酮測定應采用肝素抗凝,采集后立即分離血漿,置-20℃保存待測;尿液標本則留取24小時尿量,用10~15mL濃鹽酸防腐;(3)申請單上注明:抽血時的體位(臥位、立位)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);尿液標本要準確記錄24小時尿量。第37頁/共100頁1.7皮質(zhì)醇標本采集及注意事項,屬外送項目(金域檢驗)。正常人皮質(zhì)醇的分泌存在晝夜節(jié)律,一般為早上8點、下午4點和晚上12點采血,送檢時請務必在申請單上注明采血時間。第38頁/共100頁1.8T細胞亞群標本采集及注意事項,屬外送項目(金域檢驗)。
1.8.1標本類型:必須用肝素鈉抗凝血。
1.8.2標本量:2ml。
1.8.3該項目在不同年齡段的參考值不盡相同,所以送檢時請務必在申請單上注明病人年齡。第39頁/共100頁1.9微量元素檢測標本采集要求
1.9.1采血時不能戴乳膠手套(對鋅有污染),可使用“PE”(塑料)手套(或不戴手套把手洗干凈)。
1.9.2必須使用檢測儀器廠家提供的專用管,使用專用管前,請檢查管中是否有蛋白沉淀劑。
1.9.3采集方法:采集手指末梢血,擦去第一滴血后用定量專用吸管準確吸起20ul血液注入專用管中送檢。(一般持檢查單到檢驗科采血)
1.9.4如不能及時送檢,應放置室溫保存。
1.9.5溶血對結果影響較大,應盡量避免。若血漿為溶血標本,視為不合格標本。第40頁/共100頁1.10遺傳學檢測標本采集要求,屬外送項目(金域檢驗)。
1.10.1標本采集:外周血標本可使用遺傳專用采血管(一般為肝素抗凝管)和采血針進行采集,采集后立即將試管輕輕顛倒混勻,以免凝血;臍帶血標本、骨髓標本可以在穿刺成功后,打開遺傳專用肝素抗凝管蓋,將臍帶血或骨髓注入采集管中,立即將試管輕輕顛倒混勻,以免凝血,請注意無菌操作,不要污染管蓋。胸腹水標本可在采集后注入廢棄生理鹽水注射液瓶中,并用75U/ml的肝素抗凝。請避免使用注射器采集標本后直接注入采集管的方式進行標本采集,以免引起溶血;請勿使用EDTA等抗凝管采集標本。第41頁/共100頁1.10.2標本量:外周血、臍帶血、骨髓各4ml;胸腹水100ml。
1.10.3標本送檢:合格標本須于采血后當天送至遺傳實驗室,故請于標本采集前及時與檢驗科聯(lián)系,通知金域檢驗中心工作人員接收標本;標本有溶血、凝血現(xiàn)象,也視為不合格標本。
1.10.4申請單填寫:請完整填寫申請單,尤其是標本采集時間、性別、病史、臨床診斷等。第42頁/共100頁1.11基因檢測標本采集要求:
1.11.1所有用于基因診斷的標本必須用無菌試管或容器留取,嚴禁使用肝素抗凝管,采集標本時注意無菌操作。
1.11.2為避免污染,送檢基因診斷標本項目需單人單項目單管。第43頁/共100頁1.11.3采集方法:(1)血液標本抽取病人靜脈血,置無菌試管中室溫自然凝固或2000轉/分離心,取分離出的血清置2~8℃保存,不超過24小時,血清標本不宜反復凍融;(2)女性分泌物標本①分泌物標本采樣應在非月經(jīng)期進行;采樣前3天內(nèi)不使用陰道內(nèi)藥物,不沖洗陰道;24小時內(nèi)不應有性行為;第44頁/共100頁②采集時先用棉簽將宮頸口或尿道口過多的分泌物輕輕擦去,更換棉拭子,將棉拭子伸入宮頸,通過上皮交界處,旋轉3~5周,以保證取得較多的柱狀上皮標本,對于懷疑HPV感染的患者,盡量采集病變部位標本,可提高HPV的檢出率。將取樣后的棉拭子放入配套的采集管中,旋緊管蓋;③男性分泌物標本:先清潔尿道口,將棉拭子伸入男性尿道1cm,旋轉3~5次獲得標本,將取樣后的棉拭子放入配套的軟管中,旋緊管蓋;第45頁/共100頁④皰疹液或疣體標本:對于生殖器或肛周有疣狀體增生,懷疑為尖銳濕疣者,采集疣體表面脫落細胞。用生理鹽水潤濕棉拭子,用力來回擦拭疣狀組織表面三次,取得脫落細胞。將取樣后的棉拭子放入配套的軟管中,旋緊管蓋。第46頁/共100頁1.12骨髓檢查的要求和注意事項
1.12.1涂片要求:二張血片,六張骨髓片,懷疑白血病則需八張骨髓片。骨髓血片注明“B”,骨髓片注明“M”,以示區(qū)別。
1.12.2申請單注意事項:(1)病例摘要:應填寫全面,尤其是肝、脾、淋巴結、出血狀況等與血液病相關的癥狀以及藥物的應用等均應填寫清楚;(2)化驗結果:血常規(guī)結果一定不能缺,如果可能,MCV、MCH、MCHC及分類也一并填上;第47頁/共100頁
(3)采取骨髓部位也應填上,如果采取骨髓時不順,應重抽,以免耽誤病人;(4)寫上主治醫(yī)生聯(lián)系方式,如科室電話、手機號碼等(以便與臨床密切聯(lián)系)。第48頁/共100頁2、尿液常規(guī)檢驗標本采集
2.1尿標本種類按檢查目的,常可采用下列標本:*晨尿:最好,安靜狀態(tài)下留取清晨第一次尿,該標本為濃縮尿.其細胞和管型等形態(tài)完整,適合做各種有形成分的檢查和尿蛋白、尿糖等項目的測定。*隨機尿:較常用,適用于門診和急診病人常規(guī)檢驗.結果易受多種因素影響。*24h尿:用于尿液成分定量檢查分析。第49頁/共100頁
(1)24h尿采集方法:留尿當日早晨8時排空尿液,之后每次排尿均收集于一大容器內(nèi).至次日早晨8時最后一次尿液共24小時之間的所有尿液全部收集于潔凈容器內(nèi)。在收集期內(nèi)第一次尿收集后加入防腐劑甲苯混勻,放陰涼處保存,全部收集完畢測量并記錄24h總尿量,混勻后取20-30毫升置于有蓋容器內(nèi)送檢即可。(2)24h尿可用于檢測CRE、BUN、K、Na、CL、Ca、P、UP等第50頁/共100頁*特殊實驗尿(如3h、8h、12h等計時尿和餐后尿等),則應按醫(yī)囑要求進行留尿,并注明用藥時間,便于分析比對。*清潔尿(中段尿、導管尿、膀胱穿刺尿):用于病原微生物學培養(yǎng)、鑒定和藥敏。第51頁/共100頁2.2尿液標本收集容器要求(1)清潔、干燥、有蓋、便于標記和轉送、一次性使用,有較大開口便于收集;(2)避免陰道分泌物、精液、糞便等污染,還應注意避免煙灰、紙屑等異物混入;(3)無干擾化學物質(zhì)(如表面活性劑、消毒劑)混入,不可使用未經(jīng)洗滌的裝藥物或試劑的器皿收集標本;(4)能收集足夠尿液,最好大于50ml,如收集定時尿,容器應足夠大,并加蓋,必要時加防腐劑;(5)如需培養(yǎng)應在無菌條件下,用無菌容器收集中段尿液。第52頁/共100頁2.3尿液采集方法尿液常規(guī)檢查標本應按以下原則進行采集:(1)尿液檢驗最好留取新鮮標本及時檢查,否則尿液生長細菌,使其中的化學成分發(fā)生變化。新鮮晨尿最佳,以清晨第一次尿為宜,較濃縮,條件恒定,便于對比。門、急診患者亦可隨機留取。在留取24h或12h尿液時,根據(jù)檢測目的加入防腐劑。(2)尿標本的采集方法多采用自然排尿法,需要注意避免陰道分泌物、精液、糞便等污染;對自然排尿困難或需細菌培養(yǎng)者,可在無菌操作下用導尿法或膀胱穿刺法采集。第53頁/共100頁
(3)尿中某些化學物質(zhì)及有形成分不穩(wěn)定,一經(jīng)排出后易發(fā)生物理、化學變化;而尿中原有或污染的細菌生長也可導致成分改變,如葡萄糖被分解。因此,采集的尿應加蓋后盡快送檢,在采集后2h內(nèi)完成有關檢查。(4)如不能及時送檢或收集較長時段尿樣,可采取化學防腐(不能用于微生物檢查)、冷藏等保存措施;尿液標本冰箱可保存6~8h但細胞等有型成分會有破壞,會有結晶析出。第54頁/共100頁
(5)根據(jù)不同檢測目的選擇不同的防腐劑:臨床最多用的尿液防腐劑為:
1.甲醛(formalin),用于尿液有形成分檢查,濃度為400mg/L尿液,即40%;
2.甲苯(toluene),常用于尿糖和尿蛋白等化學成分的定性或定量檢查,5~20m1/L尿液;
3.濃鹽酸(hydrochloricacid),用于定量測定尿醛固酮、兒茶酚胺等,濃度為1m1/L尿液。第55頁/共100頁
(6)沉渣檢查:清晨空腹第一次尿,應在1h內(nèi)送檢。標本置于干燥、潔凈的容器尿杯中,至少10ml。一般情況下,由患者自己采集中段尿。女性患者應清洗外陰部后留取。(7)特殊試驗外,晨尿或隨機尿要留取中段尿送檢,女性在經(jīng)期不宜做尿液檢查。第56頁/共100頁3、糞便常規(guī)檢驗標本采集糞便常規(guī)檢查標本采集方法及注意事項:(1)采集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別,一般檢驗留取新鮮的自然排出的糞便3~5g,必要時可肛拭子采取,放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi),貼好標識送檢。標本容器最好用內(nèi)層涂蠟的硬紙盒,便于檢查后焚毀。細菌檢查的糞便標本應收集于滅菌封口的容器內(nèi),勿混入消毒劑及其它化學藥品。(2)盛糞便標本的容器必須有蓋,有明顯標記。要選取糞便的膿、血、黏液等異常成分進行檢查,表面無異常時應從糞便表面、深處及糞端多處取材;采取標本后及時送檢,否則可因PH及消化酶等影響,而使糞便中細胞成分破壞分解。第57頁/共100頁
(3)不應留取尿壺或便盆中的糞便標本。若標本中混入尿液,可導致某些項目檢測結果出現(xiàn)錯誤。糞便標本中也不可混入植物、泥土、污水等異物,易混淆實驗結果。不應該從衛(wèi)生紙或衣褲、紙尿褲等物品上留取標本,不能用棉簽有棉絮端挑取標本。(4)做大便隱血試驗時,應囑患者于檢查前3d內(nèi)禁食肉類、含動物血的食物、某些蔬菜,禁服鐵劑和維生素C等對實驗有干擾作用的藥物。選取外表及內(nèi)層糞便收集于合格容器內(nèi)及時送檢,長時間放置可使反應的敏感度降低。第58頁/共100頁
(5)檢查蟯蟲卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前,于肛門周圍皺襞處拭取標本,并立即送檢。(6)檢查血吸蟲卵時應取黏液、膿、血部分,如須孵化毛蚴應留取不少于30g的糞便,并盡快送檢.必要時留取整份糞便送檢。(7)檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體時,應床邊留取新排出的糞便,從膿血和稀軟部分取材,并立即保溫送實驗室,并且實驗室接受標本后應立即進行檢查。(8)細菌檢驗用標本應全部用無菌操作收集于滅菌封口的容器內(nèi)。特殊檢驗項目留取標本時請預先聯(lián)系。第59頁/共100頁4、漿膜腔積液檢驗標本采集
4.1漿膜腔積液檢查標本(1)漿膜腔積液標本一般由臨床醫(yī)生行無菌穿刺術采集標本。(2)送檢標本量:理學檢查、化學檢查、細胞學檢查各留取2mI;細菌學檢查用無菌管采集標本,厭氧茵培養(yǎng)留取1mI,結核菌檢查留取10ml。第60頁/共100頁
(3)標本采集后必須立即送檢(否則可出現(xiàn)細胞變性,標本凝集,細菌溶解)。(4)用于細胞學檢查時,可在標本中加適量EDTA鹽抗,但還需留取1管不加抗凝劑的標本用于觀察積液的凝固性;化學檢查標本宜用肝素抗凝。第61頁/共100頁4.2腦脊液標本采集(1)由臨床醫(yī)師行腰椎穿刺術采集標本。(2)采集后的腦脊液分別收集于3個無菌試管中,每管1~2ml,第一管作細菌培養(yǎng),第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查(腦脊液常規(guī))。(3)標本必須立即送檢,放置過久影響結果,如細胞破壞、變性或細胞包裹于纖維蛋白凝塊中,使細胞計數(shù)降低,分類不準確等;存放的腦脊液葡萄糖會分解,使檢測結果降低。第62頁/共100頁4.3胸、腹水標本采集
(1)由臨床醫(yī)師行無菌穿刺術,最好留取中段液體于消毒容器內(nèi),立即送檢。(2)為防止出現(xiàn)凝塊、細胞變性、細菌破壞自溶等,標本中應加入抗凝劑。常規(guī)及細胞學檢查宜用EDTA-2K抗凝,生化檢查標本宜用肝素抗凝。第63頁/共100頁4.4關節(jié)腔穿刺液標本采集后第1管作微生物及一般性狀檢查,第2管用肝素抗凝作細胞學及化學檢查。第64頁/共100頁4.5前列腺和精液檢查前列腺液標本應由臨床醫(yī)師進行前列腺按摩術采集,可直接滴在玻片上;若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液。疑為前列腺結核、膿腫或腫瘤的患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失敗或檢查結果陰性,而明確有臨床指征者,可隔3~5天后重新復查。精液采集最好在實驗室附近,室溫應控制在20~35℃,采集標本前禁欲3~7天.采集精液前排凈尿液??捎檬忠ɑ蚱渌椒ǎ瑢⒁淮紊涑龅娜烤褐苯优湃霛崈?、干燥的容器內(nèi)。因精子生成日間變動較大,不能僅憑一次檢查結果做診斷。一般應間隔1~2周檢查一次,連續(xù)檢查2~3次。第65頁/共100頁4.6細菌培養(yǎng)之腦脊液、胸腹水穿刺液、關節(jié)腔穿刺液標本采集(1)應在用藥前采集,由臨床醫(yī)生以無菌條件下進行腰椎穿刺采集腦脊液3~5ml,因腦膜炎球菌易自溶,流感嗜血桿菌也易死亡,故盛于無菌試管或小瓶中保溫立即送檢?;?qū)⒛X脊液5ml直接注射于血培養(yǎng)兒童瓶中送檢即可。第66頁/共100頁
(2)穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節(jié)液及鞘膜液。一般由臨床醫(yī)生穿刺抽取。標本的采集應在患者用藥之前,或停藥1~2天后進行。胸水、腹水可抽取5~10ml,心包液、關節(jié)可抽取2~5ml,將所得穿刺液分別盛于含有和不含有抗凝劑的無菌試管或小瓶中,充分混勻后,立即送檢。第67頁/共100頁5、微生物檢驗標本采集微生物學檢驗標本的正確采集、運送及處理,與細菌的培養(yǎng)、鑒定結果有十分密切的關系;對可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS、炭疽、肺鼠疫等)患者采集標本時,必須按國家規(guī)范化要求嚴格注意生物安全;醫(yī)生、護士、檢驗人員均應重視微生物學檢驗標本正確采集的有關問題,并有責任向患者及其家屬進行正確采集標本的宣傳和指導。第68頁/共100頁5.1微生物學檢驗標本采集、運送、驗收和處理注意事項
5.1.1標本采集(1)申請單標記必須清楚(姓名、性別、年齡、病例號、臨床診斷、標本來源、采集時間、檢查項目、抗生素應用情況等),以便實驗室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基;第69頁/共100頁
(2)盡量在抗生素應用前采集標本,以提高陽性檢出率和避免漏檢;(3)標本采集應嚴格執(zhí)行無菌操作;(4)咽拭、肛拭、傷口拭子等拭子標本,應插入運送培養(yǎng)基送檢;(5)痰、尿液、傷口拭子等混有正常菌群的標本,不可放入肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢;(6)采集標本的容器必須經(jīng)滅菌處理,但不可用消毒劑。第70頁/共100頁5.1.2標本運送(1)標本采集后應盡快送到微生物實驗室;(2)標本采集后在室溫下超過2h未送達實驗室,可視為不合格標本。第71頁/共100頁5.1.3注意事項(1)微生物檢驗樣本必須按要求采集轉運,否則將影響檢查結果.并給評價其意義帶來麻煩甚至誤導。(2)微生物樣本極易被污染,污染的樣本雜菌大量繁殖抑制病原菌生長,條件致病菌也是致病菌,如污染條件致病菌將誤導臨床,造成對患者的損害以及經(jīng)濟和時間的浪費。第72頁/共100頁
(3)某些標本離體極易死亡,應在床邊采取和接種或立即保溫送至實驗室檢驗。室溫放置或延遲送檢,可使檢出的陽性率降低;不能使用冷藏的樣本檢驗。(4)厭氧菌樣本采取必須隔絕空氣,混入空氣的樣本影響檢驗結果,不能使用。第73頁/共100頁5.2.2糞便標本采集和處理(1)采集時間:①腹瀉患者于急性期,盡量在用藥前采集糞便;②傷寒患者于發(fā)病2w以后采集糞便;③懷疑霍亂時立即采集糞便送檢。(2)采集方法:①自然排便法:取新鮮糞便的黏液、膿血、或絮狀物等有意義成分,2~3g或1~2ml,盛無菌容器內(nèi)或置于保存液或增茵液內(nèi)送檢;若疑似霍亂者應置于堿性蛋白胨水中(PH8.6)。②直腸拭子法:難以獲得糞便或排便困難患者及幼兒可采用此法,將拭子前端用無菌甘油或生理鹽水濕潤,然后插入肛門約4~5cm(幼兒2~3cm),輕輕在直腸內(nèi)旋轉。擦取直腸表面粘液后取出,盛于無菌試管中或保存液中送檢。第74頁/共100頁5.2.3痰及下呼吸道標本采集和處理(1)自然咳痰法:①晨痰為佳;②先冷開水洗漱、清潔口腔和牙齒;③再用力咳出呼吸道深部的痰,吐至無菌容器中;④痰量不得少于1ml;⑤痰咳出困難時可先霧化吸入NaCI溶液(100g/L,加溫到45℃)使痰容易咳出。查結核分枝桿菌,應留取24小時痰。第75頁/共100頁
(2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。(3)支氣管鏡、支氣管穿刺、支氣管肺胞灌洗等采集法,此采集方法必須由醫(yī)生操作。①氣管導管法:氣管插管吸取下呼吸道痰液。②氣管鏡采集法:用氣管鏡在肺內(nèi)病灶附近用導管吸取或活用支氣管刷直接取得。第76頁/共100頁
(4)呼吸道標本采集方法:鼻咽拭子法,先用清水漱口,對光坐,頭向上仰,口張大,用壓舌板輕壓舌根,用棉拭子在病人咽后壁,懸雍垂后側涂抹數(shù)次,立即放入無菌試管中。注意事項:痰經(jīng)過口腔,所以患者應用清水漱口數(shù)次,盡量排除口腔內(nèi)大量雜菌。第77頁/共100頁5.2.4血液及骨髓培養(yǎng)標本(1)血培養(yǎng)標本采集指征:對入院的危重患者未進行系統(tǒng)性抗生素治療前,應及時進行血液培養(yǎng),患者出現(xiàn)以下體征可作為血培養(yǎng)的重要指征:發(fā)熱(≥38℃)或低熱(≤36℃)寒熱白細胞增多(>10×109/L,特別是在有“核左移”未成熟的或帶狀的白細胞增多時)④粒細胞減少(成熟的多核白細胞<1×109/L)⑤血小板減少⑥皮膚粘膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭第78頁/共100頁
(2)最常用的方法為血液增菌培養(yǎng)法。培養(yǎng)瓶分為需氧瓶和厭氧瓶兩種。每瓶需要8~10ml。兒童瓶為需氧瓶每瓶需血液1~3ml,另外,腦脊液和胸腹水也可用血液增菌培養(yǎng)瓶,但僅需要兒童瓶,標本量與血液相同。①抗生素治療前,嚴格無菌靜脈采血8~10ml(兒童l~4ml);②無菌注入專用培養(yǎng)瓶(成人、兒童、需氧菌、厭氧茵、L型茵需要不同培養(yǎng)瓶)中送檢;第79頁/共100頁③如已用抗生素不能停用時,可于48h內(nèi)分別于下次用抗生素之前,采取3份6瓶血液標本送檢;④必要時可需氧菌、厭氧茵(占10%)和L型菌同時培養(yǎng);⑤疑為心內(nèi)膜炎時,為提高陽性檢出率,可酌情不同部位、不同時間,多次采血或動脈采血進行培養(yǎng);⑥必要時可取骨髓l~2ml,無菌注入專用培養(yǎng)瓶中送檢。第80頁/共100頁
注意事項:血液在正常情況下為無菌標本,應嚴格按照無菌操作,避免雜菌污染。一般病人在發(fā)病初期1~2天或發(fā)熱高峰時采集血液標本,用一次性注射在肘靜脈采血,采血前局部皮膚應徹底消毒。對亞急性細菌性心內(nèi)膜炎等病人,應從肘動脈或股動脈采血為宜。第81頁/共100頁5.2.5腦脊液(1)采集時間:懷疑腦膜炎時應立即采集腦脊液,最好是在應用抗生素之前采集腦脊液。(2)采集方法:無菌腰穿采集腦脊液3~5ml分裝到3個無菌小瓶中(各1~2ml)。用于細菌和病毒檢測時腦脊液量不少于1ml;用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。第82頁/共100頁5.2.6穿刺液培養(yǎng)標本(1)穿刺液培養(yǎng)標本包括胸水、腹水、心包液、關節(jié)液、鞘膜液等。(2)采集時間:一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前,或在停止使用抗菌藥物之后2~3d采集標本。第83頁/共100頁
(3)采集方法①無菌操作穿刺抽取標本或外科手術采集標本;②標本采集量應>1ml(結核分支桿菌培養(yǎng)時應為l~5ml);③標本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中立即送檢;④可在盛器中先加入滅菌肝素然后再加入穿刺液,以防止穿刺液凝固(0.5ml肝素可抗凝5ml標本)。第84頁/共100頁5.2.7胃液及膽汁培養(yǎng)標本抽取空腹胃液5ml,置無菌管內(nèi)送檢;膽汁培養(yǎng)標本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術中留取膽汁,采集膽汁量為5ml,置無菌管內(nèi)送檢;胃液和膽汁采集后必須立即送檢。第85頁/共100頁
5.2.8膿汁和病灶分泌物培養(yǎng)標本采集前局部消毒后無菌采取膿汁或病灶分泌物或組織。標本采集后立即置無菌管內(nèi)送檢。第86頁/共100頁5.2.9眼、耳、鼻、咽拭子培養(yǎng)標本(1)采集眼分泌物:先用無菌生理鹽水沖洗眼部,然后用棉拭子拭干,再用無菌棉拭子采集分泌物。(2)采集咽分泌物:先用清水漱口,用壓舌板將舌向下向外壓,將咽拭子在咽后壁或懸雍垂后側涂抹數(shù)次,切勿接觸口腔和舌粘膜。(3)采集耳、鼻或鼻咽分泌物:直接用拭子涂抹病灶部位,切勿接觸周圍粘膜或皮膚。標本采集過程中應注意避免粘膜上的正常菌群污染,標本采集后連同拭子一起置無菌管內(nèi)送檢。第87頁/共100頁5.2.10泌尿生殖道培養(yǎng)標本(1)尿道分泌物:清洗尿道、采取尿道、溢出的膿性等分泌物,或用無菌拭子插入尿道2-4cm處輕輕轉動后取出,置無菌試管中送檢。(2)陰道、宮頸分泌物、通過陰道擴張器,用滅菌拭子采取陰道口或?qū)m頸管1-2cm處分泌物,置無菌試管中送檢。避免陰道分泌物污染拭子。第88頁/共100頁
(3)宮腔分泌物:在必要時用外套保護膜的滅菌導管抽取。(4)前列腺液:清洗尿道、沖洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液于無菌容器內(nèi)送檢。(5)精液:受檢者應5天未排精,清洗尿道后手淫或體外排精法,射精于無菌容器內(nèi)送檢。(6)潰瘍分泌物:滅菌生理鹽水溶液清洗患處,用無菌拭子取其邊緣或基底部的分泌物,置無菌試管中送檢。第89頁/共100頁5.2.11燒傷感染培養(yǎng)標本燒傷12h后用無菌棉拭子采集標本;要注意從多個創(chuàng)面取樣,燒傷嚴重感染時易發(fā)生敗血癥,創(chuàng)面取樣同時
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