醫(yī)學微生物學 第14講化膿性細菌

化膿性細菌1前言化膿性細菌(purulent/pyogenicbacteria)分為：化膿性球菌和化膿性桿菌常引起創(chuàng)傷感染和醫(yī)院內感染中的化膿性感染。球菌

G(+)G(-)桿菌

多為G(-)2第一節(jié)葡萄球菌屬

(staphylococcus)堆積樣排列，G（+），分布廣泛。大部分為腐物寄生菌病原性球菌一般引起化膿性感染，亦可引起敗血癥，是最常見的化膿性細菌。葡萄球菌屬包括30多個種，以金黃色葡萄球菌(S.aureas)為代表。3一、生物學性狀形態(tài)和染色

球形或橢球形。1μm。典型排列為葡萄串狀。在青霉素作用下可變?yōu)長型。無鞭毛、無芽胞，體外培養(yǎng)一般不形成莢膜。G(+)。4Staphylococcus(SEM)5培養(yǎng)特性

普通培養(yǎng)基生長良好兼性厭氧或需氧；最適溫度37℃；最適pH7.4。液體培養(yǎng)基（肉湯）混濁生長固體培養(yǎng)基見圖血瓊脂平板全透明溶血環(huán)（β溶血環(huán)）一、生物學性狀6培養(yǎng)特性（固體培養(yǎng)基生長現(xiàn)象）7色素（脂溶性）溶血性8金黃色葡萄球菌血平板9葡萄球菌分類按照色素不同金黃色葡萄球菌（金黃色）表皮葡萄球菌（白色）腐生葡萄球菌（檸檬色）10生化反應致病株能分解甘露醇致病菌（+）（—）甘露醇發(fā)酵試驗11抗原構造葡萄球菌A蛋白（staphylococcalproteinA,SPA）莢膜多糖抗原—有利黏附細胞壁多糖抗原—具有群特異性12抗體IgGFc段SPA葡萄球菌IgGFc受體巨噬細胞SPA的作用：抗吞噬作用13SPA的應用：協(xié)同凝集試驗Fab段SPA與IgG分子的Fc段結合抗原葡萄球菌聚集在一起出現(xiàn)凝集現(xiàn)象14抵抗力青霉素耐干燥（2-3月）耐熱（60℃

1h、80℃

30min）耐鹽（10-15%NaCl）抗菌素敏感（易形成耐藥）堿性染料敏感15生化反應觸酶（過氧化氫酶）陽性

抗原結構葡萄球菌A蛋白(staphylococcalproteinA,SPA)莢膜多糖抗原分類一、生物學性狀16S.aureus

借助SPA抵抗調理作用17分類一、生物學性狀性狀金葡菌表皮葡菌腐生葡菌菌落色素金黃色白色白色/檸檬色血漿凝固酶+--α溶血素+--耐熱核酸酶+--A蛋白+--致病性強弱(條件致病)無18

三種葡萄球菌的主要性狀比較無弱或無強致病性——+分解甘露醇兩者兼有甘油型核糖醇型磷壁酸類型——+A蛋白——+耐熱核酸酶——+溶血素——+血漿凝固酶白色或檸檬色白色金黃色色素腐生葡萄球菌表皮葡萄球菌金黃色葡萄球菌性狀19菌落對比20耐熱核酸酶的產生21血漿凝固酶試驗+-22抵抗力強于其他無芽胞細菌。耐鹽性強。耐藥菌株迅速增多，對青霉素G的耐藥菌株已達90%以上。一、生物學性狀23抵抗力青霉素耐干燥（2-3月）耐熱（60℃

1h、80℃

30min）耐鹽（10-15%NaCl）抗菌素敏感（易形成耐藥）堿性染料敏感24生物學性狀抵抗力

在不形成芽胞的細菌中金黃色葡萄球菌抵抗力最強：對某些染料較敏感：如1∶10～20萬倍稀釋的龍膽紫溶液能抑制其生長。對青霉素、金霉素、紅霉素和慶大霉素高度敏感，對鏈霉素中度敏感；但對磺胺、氯霉素敏感性差。耐藥菌株：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistantS.aureus,MRSA）已成為醫(yī)院內感染最常見的致病菌。25二、致病性26酶：凝固酶、耐熱核酸酶、纖維蛋白溶酶等。毒素：細胞毒素（α溶素、殺白細胞素）、腸毒素、表皮剝脫毒素、TSST-1等。細菌結構蛋白。細菌胞壁成分。致病物質27致病物質酶類：血漿凝固酶、脂酶、耐熱核酸酶毒素：溶血毒素殺白細胞素表皮溶解素腸毒素毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）28凝固酶（coagulase）概念使含有枸櫞酸鈉或肝素抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質

性質：

耐熱，100℃，30min或高壓滅菌后仍保持部分活性；但易被旦白酶破壞29

分類：

A：游離凝固酶：分泌至菌體外B：結合凝固酶/凝聚因子，結合于菌體表面不釋放，利于細菌凝集凝固酶原物質凝固酶樣物質纖維旦白原（液態(tài)）纖維旦白（固態(tài)）血漿凝固協(xié)同因子30

與致病關系密切：

A：使周圍血液/血漿中的纖維旦白沉積于菌體表面，阻礙機體吞噬細胞的吞噬，即使被吞，也不易殺滅

B：集聚在細菌四周，保護病菌勿受血清中殺菌物質的破壞

C：細菌不易擴散，使感染易于局限化和形成血栓意義：鑒別有無致病性的重要指標31葡萄球菌溶素（staphylolysin）損傷細胞膜的毒素，主要是溶素溶素，對多種哺乳動物RBC有溶血作用。對白細胞、血小板、肝細胞、成纖維細胞、血管平滑肌細胞等均有損傷作用溶素是一種外毒素，具有良好的抗原性；經甲醛液脫毒后可制成類毒素為異質性蛋白質，不耐熱，65℃，30，滅活32殺白細胞素（leukocidin）只攻擊中性粒細胞和巨噬細胞在抵抗宿主吞噬細胞，增強病菌侵襲力方面有意義33腸毒素（enterotoxin）約1/3臨床分離的金黃色葡萄球菌可產生腸毒素引起急性胃腸炎即食物中毒

A、D型最多見，B、C型次之是一組熱穩(wěn)定的單純旦白質，耐100℃30min；抗胃腸液中旦白酶的水解作用作用機制：到達中樞神經系統(tǒng)后刺激嘔吐中樞而導致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒34表皮剝脫毒素

（exfoliativetoxin）表皮剝脫毒素引起的燙傷樣皮膚綜合征（staphylococcalscaldedskinsyndrome,SSSS），又稱剝脫性皮炎，多見于新生兒、幼兒和免疫功能低下的成人表現(xiàn)為彌漫性紅斑和水皰形成，繼以表皮上層大片脫落，受損部位的炎癥反應輕微具有抗原性，可被甲醛液脫毒成類毒素

35毒性休克綜合征毒素-1

（TSST-1）TSST-1可引起機體發(fā)熱，增加對內毒素的敏感性感染產毒菌株后可引起機體多個器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS）TSST-1可能不是引起TSS的唯一病因，革蘭陰性桿菌內毒素、葡萄球菌腸毒素和溶血素等與TSS的發(fā)病也有密切關系36所致疾病各種化膿性炎癥、中毒和葡萄球菌腸炎。侵襲性疾?。夯撔匝装Y毒素性疾?。菏澄镏卸尽⒓倌ば阅c炎、燙傷樣皮膚綜合征、毒性休克綜合征。局部感染全身感染37所致疾病侵襲性疾病局部感染全身感染毒素性疾病食物中毒假膜性腸炎燙傷樣皮膚綜合征毒性休克綜合征38致病性與免疫性39燙傷樣皮膚綜合征40毛囊炎局部感染及燙傷樣皮膚綜合征癤膿皰病1個1周大早產兒的燙傷樣皮膚綜合征41腎多發(fā)性膿腫42致病性與免疫性

致病物質所致疾病血漿凝固酶侵襲性疾?。浩つw局部的化膿性炎癥；葡萄球菌溶血素

各種器官的化膿性感染；殺白細胞素

全身的感染和敗血癥、膿毒血癥等；腸毒素食物中毒；假膜性腸炎；表皮剝脫毒素燙傷樣皮膚綜合征；中毒性休克綜合征毒素Ⅰ中毒性休克綜合征；

金黃色葡萄球菌的致病物質與所致疾病

43三、免疫性44免疫性天然免疫：有較高的天然免疫力獲得性免疫：獲得性免疫較弱45四、微生物學檢查法標本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)和鑒定葡萄球菌腸毒素檢查46小貓試驗微生物檢查法標本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等分離培養(yǎng)血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶直接涂片鏡檢革蘭陽性葡萄球菌生長現(xiàn)象色素，溶血，生化反應毒素檢查47致病性葡萄球菌的鑒定凝固酶（+）耐熱核酸酶（+）金黃色色素（+）溶血性（+）發(fā)酵甘露醇（+）48五、防治原則注意個人衛(wèi)生、消毒隔離和防止醫(yī)源性感染。據藥敏試驗結果用藥。反復發(fā)作癤病的患者，可試用自身疫苗療法。49防治原則防

注意消毒隔離

注意個人衛(wèi)生

防止醫(yī)源性感染

防止耐藥性產生治

抗菌素藥敏試驗自身菌苗療法50凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)現(xiàn)已證實CNS已經成為醫(yī)源性感染的常見病原菌，且耐藥菌株日益增多。致病性以表皮葡萄球菌的感染最常見。主要引起的感染：泌尿系感染細菌性心內膜炎敗血癥僅次于大腸埃希菌和金葡菌術后感染檢查與防治51概述分布廣泛引起疾病化膿性炎癥、猩紅熱、新生兒敗血癥、細菌性心內膜炎風濕熱、腎小球腎炎等超敏反應性疾病第二節(jié)鏈球菌屬

(streptococcus)52形態(tài)與染色球形或橢圓形，呈鏈狀排列無芽胞，無鞭毛。培養(yǎng)早期（2~4h）形成透明質酸的莢膜，有菌毛，含型特異的M蛋白易被普通的堿性染料著色，革蘭染色陽性53鏈球菌54培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高，需補充血液、血清、葡萄糖等在血清肉湯中易形成長鏈，管底呈絮狀沉淀在血瓊脂平板上，不同菌株溶血不一形成長鏈及絮狀沉淀55α溶血56β溶血57γ反應58草綠色鏈球菌不溶血鏈球菌溶血性鏈球菌59第二節(jié)鏈球菌屬

(streptococcus)鏈球菌分類

據溶血現(xiàn)象據抗原結構據對氧的需要分類甲型溶血性鏈球菌乙型溶血性鏈球菌丙型鏈球菌A、B、C、D、E、F等。需氧兼性厭氧厭氧性60根據溶血現(xiàn)象分為3類甲型溶鏈乙型溶鏈丙型鏈英文名稱αβγ溶血情況甲型/α溶血乙型/β溶血無溶血環(huán)草綠色完全透明無別名草綠色鏈溶血性鏈不溶血性鏈致病性條件致病強一般不致病61生化反應分解葡萄糖，產酸不產氣鏈球菌一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，這兩特性可用來鑒別甲型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌鏈球菌與葡萄球菌不同，不產生觸酶甲鏈肺炎球菌菊糖發(fā)酵實驗（+）（-）62抗原構造蛋白質抗原：或稱表面抗原。具有型特異性，位于C抗原外層。與致病性有關的是M抗原多糖抗原：或稱C抗原。系群特異性抗原，是細胞壁的多糖組分核蛋白抗原：或稱P抗原。無特異性63莢膜細胞壁蛋白質多糖肽聚糖細胞膜細胞質抗原結構

核蛋白抗原，PAg（無特異性）多糖抗原，CAg（群特異性抗原）蛋白質抗原，表面抗原（型特異性抗原）64分類根據溶血現(xiàn)象分類根據抗原結構的分類65根據溶血現(xiàn)象分類甲型溶血性鏈球菌：狹窄草綠色溶血環(huán)稱甲型溶血或溶血，多為條件致病菌乙型溶血性鏈球菌：寬大透明溶血環(huán)稱乙型溶血或溶血，溶血環(huán)中的紅細胞完全溶解，致病力強丙型鏈球菌：無溶血環(huán)，一般不致病66根據抗原結構的分類按多糖抗原，可分成A—V群，共20群。對人致病的鏈球菌菌株，90%左右屬A群鏈球菌的群別與溶血性間無平行關系，但對人類致病的A群鏈球菌多數(shù)呈現(xiàn)乙型溶血各群鏈球菌根據表面抗原（蛋白質）的不同分型，有M、R、T、S四種，主要是M蛋白如A群鏈球菌根據M蛋白抗原的不同可分100多個型67根據對氧氣的需要分類

需氧鏈球菌兼性厭氧鏈球菌厭氧鏈球菌致病菌條件致病菌68抵抗力抵抗力弱60℃

30min抗菌素敏感（較少耐藥）3、消毒劑敏感69一、A群鏈球菌70（一）生物學性狀形態(tài)與染色球形或橢圓形。鏈狀排列。無芽胞，無鞭毛?？稍谂囵B(yǎng)早期形成莢膜。有菌毛樣結構，含型特異性的M蛋白。G(+)。培養(yǎng)特性多數(shù)為兼性厭氧菌。營養(yǎng)需求高。菌落特點。生化反應不分解菊糖，不被膽汁溶解，可將甲型溶鏈與肺炎鏈球菌區(qū)別。不產生觸酶。71化膿性鏈球菌的SEM72鏈球菌和仿真玩具73鏈球菌（革蘭染色）74（一）生物學性狀抗原結構

蛋白質抗原或表面抗原具有型特異性，如Ｍ抗原。多糖抗原或稱為Ｃ抗原具有群特異性核蛋白抗原或稱Ｐ抗原無特異性抵抗力弱。青霉素是鏈球菌感染的首選藥物。75鏈球菌抗原結構模式圖菌毛樣結構莢膜蛋白質多糖肽聚糖細胞質細胞壁76致病物質A群鏈球菌也稱為化膿性鏈球菌，或溶血性鏈球菌，是人類細菌感染常見的病原菌之一。細菌的胞壁成分：LTA、M蛋白、肽聚糖、細菌胞壁受體、F蛋白等。外毒素類：致熱外毒素（紅疹毒素，SPE）、鏈球菌溶素(SLO,SLS)。胞外侵襲酶類：透明質酸酶、鏈激酶(SK)、鏈道酶(SD)。（二）致病性77

二、致病性（一）致病物質

A群鏈球菌產生的毒素及酶最多，故其毒力最強毒力侵襲力毒素胞外酶：透明質酸酶、鏈激酶、鏈道酶等M蛋白（微莢膜）鏈球菌溶血素黏附素：LTA、FBP致熱外毒素鏈球菌溶血素O（SLO）鏈球菌溶血素S（SLS）78致病物質酶類：透明質酸酶、鏈激酶、鏈道酶毒素：鏈球菌溶素O（SLO）鏈球菌溶素S（SLS）

致熱外毒素（SPE）黏附素（細胞壁蛋白）：M蛋白、F蛋白79鏈球菌溶血素（streptolysin）SLO：SLO對O2敏感。測定SLO抗體含量，可作為鏈球菌新近感染指標之一或風濕熱及其活動性的輔助診斷SLS：鏈球菌在血瓊脂平板上菌落周圍的溶血環(huán)是由這種對O2穩(wěn)定的SLS所致。SLS溶解紅細胞慢于SLO80鏈球菌溶血素：溶解紅細胞、破壞白細胞和血小板（1）鏈球菌溶素O（SLO）A：為含-SH的蛋白質，-SH

-S-S-，對氧敏感

O2還原劑B：破壞中性粒細胞，使細胞死亡；引起胞內釋放水解酶，可破壞相鄰組織而加重鏈球菌的感染C：對哺乳動物的血小板、巨噬細胞、神經細胞及心肌細胞均有毒性作用81（2）鏈球菌溶素S（SLS）

A：為小分子糖肽，對氧穩(wěn)定，無抗原性

B：血平板上的的溶血環(huán)即為SLS所致

C：對白細胞、血小板等有破壞作用D：抗原性強，刺激機體產生抗鏈球菌溶素O抗體，即抗“O”測抗“O”的含量，可診斷鏈球菌的近期感染；

抗“O”的效價在1：400以上可輔助診斷“風濕熱”82M蛋白有抗吞噬和抵抗吞噬細胞內的殺菌作用與某些超敏反應疾病有關83透明質酸酶又名擴散因子能分解細胞間質的透明質酸，使病菌易在組織中擴散84鏈激酶（streptokinase;SK）能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，有利于病菌在組織中擴散用于治療急性心肌梗塞患者十分有效85

鏈道酶

（streptodornase;SD）亦稱鏈球菌DNA。能降解膿液中具有高度粘稠性的DNA，使膿液稀薄，促進病菌擴散現(xiàn)已將SK、SD制成酶制劑，臨床上用以液化膿性滲出液86所致疾病A群鏈球菌為主，占90%化膿性中毒性猩紅熱超敏反應性風濕熱急性腎小球腎炎87所致疾病占人類鏈球菌感染的90%。傳播方式：飛沫、皮膚傷口、污染食物?；撔愿腥荆浩つw和皮下組織感染、其他系統(tǒng)感染。中毒性疾?。盒杉t熱、鏈球菌毒素休克綜合癥。超敏反應性疾病：風濕熱、急性腎小球腎炎。（二）致病性88猩紅熱草莓色舌彌散的紅色皮疹89超敏反應性疾病發(fā)病機制：

a：鏈球菌的M蛋白與心肌、腎小球基底膜有共同抗原，所以抗M抗體可與心肌、腎小球基底膜的交叉抗原形成復合物，激活周圍的補體而引發(fā)病理損傷——II型超敏反應b：M蛋白+抗M抗體復合物沉積在心瓣膜、關節(jié)滑膜和腎小球基底膜，引發(fā)III型超敏反應90D群鏈球菌生物學性狀致病性主要有牛鏈球菌和馬鏈球菌正常寄居于皮膚、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道，引起尿路感染，化膿性腹部感染，敗血癥和心內膜炎91甲型溶血性鏈球菌生物學性狀致病性感染性心內膜炎齲齒92對人致病的有變異S、唾液S、米勒S、輕型S和血S五個型。是感染性心內膜炎最常見的致病菌當拔牙或摘除扁桃體時，寄居于口腔、齦隙中的這類菌可侵入血流引起菌血癥，當心瓣膜有病損或人工瓣膜，細菌停留繁殖，引起心內膜炎。除此之外，還可引起腦、肝和腹腔內感染93（三）免疫性A群鏈球菌感染后，血清中出現(xiàn)多種抗體，機體可獲得對同型鏈球菌的特異性免疫力。患過猩紅熱后可產生同型的致熱外毒素抗體，能建立牢固的同型抗毒素免疫。94（四）微生物學檢查法標本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定血清學試驗抗鏈球菌溶素O試驗(ASOtest)，簡稱抗O試驗，常用于風濕熱的輔助診斷（檢測患者血清中抗O抗體）。95血清學診斷——抗“O”試驗：風濕熱患者抗“O”抗體大多在250單位左右，活動期一般超過400單位，故測抗“O”的效價有輔助診斷風濕熱的價值96（五）防治原則及時治療病人和帶菌者注意消毒對急性咽峽炎和扁桃體炎患者，尤其是兒童，須治療徹底，以防止急性腎小球腎炎、風濕熱及亞急性細菌性心內膜炎的發(fā)生。治療A群鏈球菌感染時，青霉素G為首選藥物。97隔離猩紅熱患者抗菌素：首選青霉素1、98二、肺炎鏈球菌

(S.pneumoniae)99（一）生物學性狀形態(tài)與染色

G(+)，呈矛尖狀，多成對排列。無鞭毛、無芽胞。在機體內或含血清的培養(yǎng)基中能形成莢膜。培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高。兼性厭氧。在血平板上的菌落與甲型溶血性鏈球菌很相似。孵育超過48h，菌落中央下陷呈臍狀。生化反應大多數(shù)發(fā)酵菊糖?？赏ㄟ^膽汁溶菌試驗與甲型溶鏈鑒別。100Streptococcuspneumoniae

101生長現(xiàn)象102抗原結構與分型

莢膜多糖抗原菌體抗原：C多糖、M蛋白抵抗力弱（一）生物學性狀103（二）致病性致病物質

莢膜抗吞噬，是主要侵襲力。肺炎鏈球菌溶素O脂磷壁酸神經氨酸酶所致疾病主要引起大葉性肺炎104（三）免疫性肺炎鏈球菌感染后，可以建立較牢固的型特異性免疫，故同型病菌的二次感染少見。免疫機制主要是產生莢膜多糖型特異抗體。某些莢膜多糖能直接激活補體的旁路途徑。105（四）微生物學檢查法標本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定肺炎鏈球菌的鑒定主要與甲型溶鏈鑒別。最常用的試驗：膽汁溶菌試驗、菊糖發(fā)酵和奧普托辛試驗。此外還有動物毒力試驗。106OptochinSensitivity107（五）防治原則國外研制多價肺