河科大儀器分析實驗教案

10河南科技大學(xué)?儀器分析試驗?教案〔周山校區(qū)用〕韓建國化工與制藥學(xué)院2023.9試驗一 水樣pH值的測定、目的要求了解電位法測定水樣pH值的原理和方法。生疏和了解pHS-3E 型酸度計、25型酸度計和pHS-3C型酸度計。學(xué)會使用pHS-25型酸度計。練習(xí)使用pHS-3E 型酸度計、pHS-3C型酸度計測量溶液的pH值。二、測定原理將指示電極玻璃電極與參比電極插入被測溶液組成原電池(-)Ag|AgC1HCl(0.1mo1 ?L-1)|玻璃膜|H+xmo1?L-1)KCl(飽和)|Hg2Cl2,Hg(+)玻璃電極 試液 鹽橋 甘汞電極在肯定條件下，測得電池的電動勢就是pH的直線函數(shù)E＝K十0.059pH(25 ℃)由測得的電動勢就能算出被測溶液的pH值。但因上式中的K值是由內(nèi)外參比電極電位及難于計算的不對稱電位和液接電位所打算的常數(shù)，實際不易求得，因此在實際工作中，用酸度計測定溶液的pH值直接用pH刻度時，首先必需用pH值的標(biāo)淮溶液來校正酸度計也叫定位。校正時應(yīng)選用與被測溶液的pH值接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖涪液，以削減在測量過程個可能由于液接電位、不對稱電位及溫度等變化而引起的誤差。一支電極應(yīng)當(dāng)用兩種不同pH值的緩沖溶液校正。在用一種pH值的緩沖溶液定位后pH0.05pH單位之內(nèi)。粗略測量中用一種pH值緩沖溶液校正即可，但必需保證電極斜率在允許誤差范圍內(nèi)。經(jīng)過校正后的酸度計就可以直接測量水或其它溶液的pH值。用離子活度計測量溶液的pH值，其原理仍舊是依據(jù)能斯特方程，測量電池在標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中的電動勢為：Es＝K’spHs同樣，在樣品溶液中電池電動勢為：Ex＝KspHx上述兩式相減得到：pHx＝pHsExEs/s=pHs+ΔE/s在離子計上儀器的示值依據(jù)ΔEss的調(diào)整路線。當(dāng)用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液對儀器進(jìn)展校正后，樣品溶液的pHx即可從儀器示值上直接讀出。留意：指針式與數(shù)字式酸度計的差異。高、中、低檔酸度計之間的差異。旋鈕式、鐘表式、齒輪式溫度補償器的使用方法。緊固式、彈球式、自鎖式電極插口的使用留意事項。復(fù)合電極與單電極的差異。將復(fù)合電極接口變換成單電極接口需要電極轉(zhuǎn)換接頭附件來完成。三、試劑與儀器1．pH＝4.00標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(20℃)2．pH＝6.88標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(20℃)3.pH＝9.22標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(20℃)4．pHS-25型酸度計，23l型玻璃電極，232型甘汞電極.5.pHS-3E 型、pHS-3C型型酸度計。6．100mL 燒杯四只。KHCKHCHO8 4 4?L-16.9846.9516.9236.9006.8816.8646.8536.8446.8386.833KHPO-NaHPO2 4 24?L-19.4649.3959.3329.2769.2259.1829.1399.1029.0689.011NaBO?10HO2 4 72溫度℃0510152025303540500.050mol-14.0033.9993.9983.9994.0034.0084.0154.0244.0354.060四、測定步驟依據(jù)所使用儀器的操作方法進(jìn)展操作。預(yù)熱儀器到達(dá)穩(wěn)定。測量標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液溫度，確定該溫度下的pHs值，將儀器的溫度補償旋鈕調(diào)整到該溫度上。將電極和燒杯用水沖洗干凈后，用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液蕩洗l～2次〔電極用濾紙吸干)。將電極浸入標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液內(nèi)，待到達(dá)穩(wěn)定讀數(shù)后，調(diào)整定位旋鈕使儀器示值為pHs值。將電極取出，用水樣將電極和燒杯沖洗屢次。測量水樣溫度，將儀器的溫度補償旋鈕調(diào)整至該溫度。將沖洗過的電極置于水樣中，待讀數(shù)穩(wěn)定后，從標(biāo)尺或數(shù)字顯示器上讀出水樣的pHx值。測定完畢后，將電極〔甘汞電極套上電極帽〕和燒杯沖洗干凈妥當(dāng)保存。為了檢驗儀器示值的準(zhǔn)確性，可以在測定樣品溶液之前對儀器的示值準(zhǔn)確性進(jìn)展測定。即用其中某一標(biāo)準(zhǔn)pH溶液對儀器進(jìn)展定位，測定另一pH標(biāo)準(zhǔn)溶液，按下式計算測量誤差示值測量誤差=pH pH測量 s假設(shè)儀器帶有斜率旋鈕，可以通過斜率旋鈕進(jìn)展校正。五、試驗的留意事項鄰苯二甲酸氫鉀緩沖溶液、磷酸鹽緩沖溶液和硼酸鈉緩沖溶液的pH值隨溫度不同稍有差異〔如上表〕用蒸餾水或去離子水沖洗電極時，應(yīng)當(dāng)用濾紙吸去玻璃膜上的水分而不是擦拭電極。由于玻璃電極內(nèi)阻很高，使用電磁攪拌可能引起電磁干擾，攪拌引起的渦流可能使液接電位波動，因此用玻璃電極測量pH值時一般不使用電磁攪拌。正確的操作是將電極浸入溶液后，用手搖動一下測量杯或開啟攪拌使電極與溶液充分接觸，然后停頓攪拌進(jìn)展測量。玻璃電極球泡很薄，留神打碎。思考題電位法測定水的pH值的原理是什么?酸度計為什么要用pH值的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液校正校正時應(yīng)留意什么?標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的pH值受那些因素的影響？如何保證其pH值恒定不變?玻璃電極在使用前應(yīng)如何處理?為什么？玻璃電極、甘汞電極在使用時應(yīng)留意什么?安裝電極時，應(yīng)留意哪些問題?試驗二 用氟離子選擇性電極測定水中微量 F-離子——標(biāo)準(zhǔn)曲線法、目的要求學(xué)習(xí)氟離子選擇性電極測定微量F-離子的原理和測定方法。學(xué)習(xí)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量分析。學(xué)習(xí)PXD-2、PXD-12 型離子計的使用方法。二、根本原理氟離子選擇性電極的敏感膜為LaF 單晶膜(摻有微量EuF 利于導(dǎo)電)，電極3 2管內(nèi)放入NaF+NaCl 混合溶液作為內(nèi)參比液，以Ag-AgCl作內(nèi)參比電極。當(dāng)將氟電極浸入含F(xiàn)-離子溶液中時，在其敏感膜內(nèi)外兩側(cè)產(chǎn)生膜電位Δφ .mΔφ =K-0.059lg α *(25℃)m F-以氟電極作指示電極，SCE為參比電極，浸入試液組成工作電池Hg,Hg Cl|KCl(飽和)‖F(xiàn)-試液|LaF|NaCl,NaF( 均為0.1mol?L-1)|AgCl,Ag2 2 3E=K′-0.059lgα (25℃)F-在測量時參加以HAc，NaAc，檸檬酸鈉和大量NaCl配制成的總離子強度調(diào)整緩沖液(TISAB)，由于參加了高離子強度的溶液本試驗所用的TISAB液其離子強度I＞1．2)，可以在測量過程中維持離子強度恒定，因此工作電池電動勢與F-離于濃度的對數(shù)成線性關(guān)系。本試驗承受標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定F離子濃度，即配制成不同濃度的F-*離子標(biāo)準(zhǔn)溶液測定工作電池的電動勢并在同樣條件下測得試液的Ex由E-pF〔或E-lgc 〕F-曲線查得未知試液中的F-離子濃度。假設(shè)用E-c 曲線，必需用半對數(shù)座標(biāo)紙。當(dāng)F-試液組成較為簡單時，則應(yīng)承受標(biāo)推參加法或Gran作圖法測定之。氟電極的適用酸度范圍為pH=5～6100～10-6mol?L-1

范圍內(nèi)．Δφm與lgc 呈線性響應(yīng)，電極的檢測下限在10-6mol?L-1左右〔隨著電極的不斷老化，F(xiàn)-檢測下限會不斷上升〕氟離子選擇性電極是比較成熟的離子選擇性電極之一，其應(yīng)用范圍比較廣泛。本試驗所介紹的測定方法，完全適用于人指甲中F-離子的測定指甲需先經(jīng)適當(dāng)?shù)念A(yù)處理)，為診斷氟中毒程度供給科學(xué)依據(jù)；實行適當(dāng)措施，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可以直接測定雪和雨水中的痕量F-離子，磷肥廠的廢渣，經(jīng)HCl分解，即可用來快速、簡便地測定其F-離子含量；用標(biāo)準(zhǔn)參加法不需預(yù)處理即可直接測定尿中的無機氟及河水中的F-離子，通過預(yù)處理，則可測定尿和血中的總氟含量；大米、玉米、小麥粒經(jīng)磨碎、枯燥、并經(jīng)HClO 浸取后，不加TISAB，即可用標(biāo)準(zhǔn)參加法測定4其中的微量氟；本法還可測定兒童食品中的微量氟，因此，是食品分析的國標(biāo)方法。三、儀器PXD-2 型通用離子計 PXD-12 型數(shù)字式離子計 或其他型號離子計氟離子選擇性電極飽和甘汞電極電磁攪拌器容量瓶 1000mL，塑料瓶1000mL6 個吸量管 10mL 8支塑料燒杯50mL8 支四、試劑10.100molL-1F-離子標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取120℃枯燥2h并經(jīng)冷卻的優(yōu)級純NaF4.20g于小燒杯中，用水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中配成水溶液，然后轉(zhuǎn)入洗凈、枯燥的塑料瓶中。2總離子強度調(diào)整緩沖液(TISAB) 于1000mL 燒杯中參加500mL水和57mL冰乙酸，58gNaCl，12g檸檬酸鈉(NaCHO?2HO)，攪拌至溶解。將燒杯置于冷3 6 5 7 2水中，在pH計的監(jiān)測下，緩慢滴加6mol?L-1NaOH溶液，至溶液的pH＝5.0～5.5,冷卻至室溫，轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。轉(zhuǎn)入洗凈、枯燥的容量瓶中。3．F離子試液〔自來水〕，濃度約在10-4～10-5mol?L-1。五、試驗步驟按PXD-2 和PXD-12 型離子計操作步驟，調(diào)試時各按下mV按健。摘去甘汞電極的橡皮帽，并檢查內(nèi)電極是否浸入飽和KCl應(yīng)補充飽和KCl溶液。安裝電極，清洗氟電極空白電位值至300mV以上。氟電極空白電位值受制備工藝、內(nèi)參比液中F-離子濃度、水質(zhì)純度、電極老化程度、離子計型號等因素的影響，因此，視狀況清洗到空白電位值最大即可。準(zhǔn)確吸取0.100mol?L-1F-離子標(biāo)準(zhǔn)液10．00mL，置于100mL 容量瓶中，參加TISAB液10.0mL，用水稀釋至刻度,搖勻，得pF=2.00 溶液。吸取pF=2．00溶液10．00mL置于100mL 容量瓶中參加TISAB9.0mL ，用水稀釋至刻度，搖勻，得pF=3.00溶液。仿照上述步驟，配制pF=4.00，pF＝5.00和pF=6.00 的溶液。將配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列由低濃度到高濃度逐個轉(zhuǎn)入塑料小燒杯中，并放入氟電極和飽和甘汞電極及攪拌子，開動攪拌器，調(diào)整至適當(dāng)?shù)臄嚢杷俣?，攪?min，至指針無明顯移動時，讀取各溶液的mV值，讀數(shù)時留意使眼睛、指針和刻度三者在始終線上。吸取F-離子試液10.00mL50mL容量瓶中，參加10.0mLTISAB液，用水稀釋至刻度，搖勻。按標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定步驟，將電極重清洗到最大空白電位值后，測定其試液的電位值。六、數(shù)據(jù)及處理pFpF值E/mV1.002.003.004.005.006.00試液以電位值為縱坐標(biāo)，pF值為橫坐標(biāo)，繪制E-pF標(biāo)準(zhǔn)曲線。在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出與Ex值相應(yīng)的pF值，求得原始試液中氟離子的含量，g·L-1表示?；?qū)?shù)據(jù)輸入微機，以Excel一元線性回歸方程求出F離子含量。思考題本試驗測定的是F-離子的活度，還是濃度為什么?測定F-離子時，參加的TISAB 由那些成分組成？各起什么作用?測定F離子時，為什么要掌握酸度，pH值過高或過低有何影響7測定標(biāo)準(zhǔn)溶液系列時，為什么按從稀到濃的挨次進(jìn)展?為什么要反復(fù)清洗空白電位值？試驗三 用氯離子選擇姓電極測定微量氯離子——標(biāo)準(zhǔn)參加法和Gran作圖法、目的要求學(xué)習(xí)標(biāo)準(zhǔn)參加法的根本原理和測定技術(shù)，學(xué)習(xí)Gran作圖法的根本原理和數(shù)據(jù)處理方法。二、根本屬理氯離子選擇性電極是由AgCl和AgS的粉末混合物壓制成的敏感薄膜，固定2在電極管的一端，用焊錫或?qū)щ娔z封接于敏感膜內(nèi)側(cè)的銀箔上，裝配成無內(nèi)參比溶液的全固態(tài)型電極。當(dāng)將氯離子選擇性電極浸入含C1-離子溶液中，它可將溶液中的氯離子活度α 轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的膜電位Δφ ：Cl- m Km

2.303RTnF

lga

Cl-測定Cl-離子時，不能使用通常的飽和甘汞電極作參比電極，由于電極內(nèi)的Cl-離子將通過陶瓷芯或玻璃砂芯等多孔物質(zhì)向試濃中集中，而干擾分析測定，為避開這一影響，應(yīng)在飽和甘汞電極上連接可卸的非KC1鹽橋套管，內(nèi)盛適當(dāng)?shù)囊航右后w(本試驗承受KNO 溶液)，即構(gòu)成雙鹽橋飽和甘汞電極，作為參比電極。3以氯離子選擇性電極、雙鹽橋飽和甘汞電極和試液組成工作電池：Hg,HgCl2 2

KCl飽和KNO3

Cl-試液AgCl-AgS2其電動勢

EK,

2.303RTnF

lga

Cl-即在一定條件下，工作電池的電動勢E與溶液中Cl-離子活度的對數(shù)值成線性關(guān)系。K與溫度、參比電極電位以及膜的特性等有關(guān)，在試驗中K為一常數(shù)。分析工作中常需測定離子的濃度，依據(jù)a

Cl

c

，在試驗中參加離子強度調(diào)整緩沖液(ISAB)，使溶液的離子強度保持恒定，從而使活度系數(shù)數(shù)，則工作電池電動勢E可寫作：

為一常Ek,

2.303RTnF

lgc

Cl-Ec

的對數(shù)值成線性關(guān)系。氯離子選擇電極宜在pH=2～7的酸度范圍內(nèi)使用，濃度在l～10-4molL-1范圍內(nèi)，電極呈線性電位響應(yīng)。依據(jù)上述關(guān)系式，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法，測定微量C1-離子含量，操作簡便，數(shù)據(jù)處理也很簡潔，是較常用的一種定量方法。但是標(biāo)準(zhǔn)曲線法的適用范圍有其局限性，在分析測定較簡單體系實際試樣而配制標(biāo)準(zhǔn)溶液系列時，應(yīng)考慮到試樣基體和其它共存組分及其含量所引起的離子強度變化等狀況，以便標(biāo)準(zhǔn)溶液與實際試液的成分盡量保持全都，明顯，這種狀況下使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法試驗操作將變得簡單，有時甚至不行能，而承受標(biāo)準(zhǔn)加入法和Gran作圖法則是抑制這一困難的有效途徑。標(biāo)準(zhǔn)參加法是先測量電極在未知試液中的電位值E，然后參加小體積欲測組1分的標(biāo)準(zhǔn)溶液，要求參加的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度約為試樣中欲測組分的100入的體積V 可以很小，一般約為試液體積V 的1％，混合均勻后再測量電極在混s x合液中的電位E，依據(jù)兩次測量值的增量ΔE，按下式計算欲測組分的濃度c 。2 xc c x 10ES11式中ccV s s

VV，0 s

EE2

E，S2.303RT/nF1Gran作圖法與上述標(biāo)準(zhǔn)參加法相類似．只是屢次參加欲測組分的標(biāo)推溶液，測量電位值E，并計算每次參加標(biāo)準(zhǔn)溶液后的V0

V10ES值，然后以其為縱座s標(biāo)，以V 為橫座標(biāo)作圖，延長各試驗點的聯(lián)線，得出與橫座標(biāo)軸的交點V。由下s s式計算推測組分的濃度：c cV /Vx s s 0Gran作圖法中V0

V10ES的計算較繁，假設(shè)承受特制的半反對數(shù)座標(biāo)紙，可s將試驗數(shù)據(jù)直接標(biāo)在圖紙上，不需要計算，即可求得V 值。sGran圖所示的座標(biāo)紙是以取100mL 試液進(jìn)展測定和假設(shè)電極響應(yīng)的斜率s58mV(對一價離子為依據(jù)而設(shè)計的，橫座標(biāo)每一大格表示參加1ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，縱座標(biāo)每一大格表示電位變化值ΔE5mV。當(dāng)電極響應(yīng)斜率s不是58mV時，可以用圖左方的ΔE校正圖，將測得的E測

與實際的s值聯(lián)線并且延長與E 的校座標(biāo)相交，然后以交點的數(shù)值E校

作圖。為了校正由于標(biāo)準(zhǔn)溶液的參加而引起的稀釋效應(yīng)，縱軸上同一位置的分度值間距從左向右漸漸增大〔即向上傾斜〕Gran圖的實際應(yīng)用中，可以按100mL0.5倍，1.5倍，2.0倍適當(dāng)擴大或縮小，本試驗承受0.5倍進(jìn)展測定。由于Gran作圖法是通過屢次測量電位值進(jìn)展求其欲測組分濃度的定準(zhǔn)確度，尤其是對于含量較低的試樣，參加標(biāo)準(zhǔn)溶液后，欲測組分濃度增加，于是在較高濃度進(jìn)展電位測量，電極易于到達(dá)平衡，測得的電位較穩(wěn)定，因而試驗的重現(xiàn)性也較好。標(biāo)準(zhǔn)參加法和Gran作圖法都是在有其它組分共存狀況下進(jìn)展測量的際上減免了共存組分的影響，所以這兩種方法都適合于成分不明或組成簡單試樣的測定。氯離子選擇性電極使用便利，是應(yīng)用較廣的一種離子選擇性電極，在化學(xué)工業(yè)、食品工業(yè)以及環(huán)境科學(xué)等很多領(lǐng)域都有實際應(yīng)用。三、儀器pHS-3E 型酸度計，601B型酸度計氯離子選擇性電極雙液接〔雙鹽橋〕飽和甘汞電極電磁攪拌器滴定管 50mL吸量管 0.5mL，1mL，5mL，10mL大肚移液管50mL容量瓶100mL燒杯150mL四、試劑1．離子強度調(diào)整緩沖液(ISAB) 稱取42.5gNaNO

〔M=84.9947 〕于燒杯中，3加水溶解后，加濃HNO 調(diào)整至pH=3～4，以pH試紙試驗確定，稀釋至1000mL，3配成0.5mo1?L-1

NaNO

溶液。也可以配成0.1mol?L-13

KNO

〔M=101.107 〕溶液稱310g)來使用。2．0.05mol?L-1NaCl標(biāo)準(zhǔn)溶液取優(yōu)級純NaCl于高溫爐中在500～600燒半小時，放置于枯燥器中冷卻，準(zhǔn)確稱取NaCl〔M=58.44〕2.9222g于小燒杯中，用水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中配成水溶液。1.00mol?L-1NaCl標(biāo)準(zhǔn)溶液 稱取上述灼燒并放置冷卻后的NaCl14.61g于小燒杯中，用水溶解后，轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中配成水溶液。待測試液 自來水五、試驗步驟pHS-3E型和601B型酸度計操作步驟所述，調(diào)試儀器，按下mV按鍵。摘去飽和甘汞電極的橡皮帽，并檢查內(nèi)電極是否浸入飽和KCl溶液中，如未浸入，應(yīng)補充飽和KCl溶液。安裝電極，并用濾紙吸去電極上的水滴?？瞻兹芤旱臏y定由滴定管準(zhǔn)確放出去離子水45.00mL，置于100mL 燒杯中，參加ISAB液5.00mL〔總體積為50mL〕，插入氯離子選擇性電極和雙鹽橋飽和甘汞電極，放入攪拌子，開動攪拌器，調(diào)整至適當(dāng)?shù)臄嚢杷俣?，待電位穩(wěn)定后，讀取電位值。用刻度吸管向燒杯中參加0.05mol?L-1NaCl標(biāo)推溶液0.5mL，待電位穩(wěn)定后，讀取電位位。然后每加0.5mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液，測量一次電位值，連續(xù)測量5~6次。待測溶液的測定 由滴定管準(zhǔn)確放出試樣45.00mL，以下按步驟2操作，連續(xù)測量5~6次。一次標(biāo)準(zhǔn)參加法準(zhǔn)確吸取試樣45.00mLISAB10.00mL氯離子選擇性電極和飽和甘汞電極，放入攪拌子，開動攪拌器，調(diào)整至適當(dāng)?shù)臄嚢杷俣?，待電位穩(wěn)定后，讀取電位值。于上述燒杯中參加1.00mol?L-1NaCl標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50mL，待電位穩(wěn)定后，讀取電位值。六、數(shù)據(jù)及處理將測量數(shù)據(jù)填入下表V＝45.00mL，C＝0.050mol?L-1x s標(biāo)準(zhǔn)溶液參加量Vs/mL去離子水電位E/mV水樣電位E/mV

0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0將試驗數(shù)據(jù)直接標(biāo)在Gran 圖上，從圖上查出Vs值并計算結(jié)果。依據(jù)參加標(biāo)準(zhǔn)溶液前和0.50mL1.00 mol?L-1NaCl標(biāo)準(zhǔn)溶液后的兩次電位測量值，用以下公式計算原始試液中C1-的質(zhì)量濃度，以mg?L-1表示。c

cV 1 s s x 10E/S1

V Vx

10E/S1 1.000.50 50.000.50

0.0099 110E10EE1 2/59110EE1 2/591mg?L-1表示。思 考題1. 本試驗為什么要使用枯燥的燒杯？試比較標(biāo)準(zhǔn)曲線法，標(biāo)準(zhǔn)參加法和Gran作圖法的優(yōu)缺點。本試驗選擇甘汞電極作為參比電極對測定結(jié)果有何影響？應(yīng)當(dāng)承受什么樣的參比電極較適宜？為什么？留意事項:假設(shè)被測溶液中C1-離子的含量偏低，將會使曲線的下限發(fā)生彎曲，此時應(yīng)承受參加標(biāo)準(zhǔn)溶液較多的上限數(shù)值連線。試驗四 電位滴定法測定水中氯離子的含量—、目的要求穩(wěn)固電位滴定法的理論學(xué)問。了解沉淀滴定過程中溶液電位變化與離子濃度變化的關(guān)系。了解電位滴定法測定廢水中氯離子的原理和方法。學(xué)會用電位滴定法測定廢水中氯化物的含量。二、測定原理用電位滴定法測定水中C1-時，用雙液接甘汞電極作參比電極最好用玻璃電極作參比電極，由于在滴定過程中溶液的pH值根本上保持不變，更沒有干擾離子的存在)，銀電極作指示電極，用AgNO 溶液滴定。在滴定過程中用ZD-2型自3動電位滴定計測量兩個電極間電動勢的變化，當(dāng)C1-含量高時用E～V曲線法，含量低時用一次微分曲線法確定滴定終點。當(dāng)C1-、Br-、I共存時，可以利用它們的溶度積不同連續(xù)滴定，形成三個突躍〔Ksp =1.8×10-10、Ksp =5.2×10-13、AgCl AgBrKsp =8.3×10-17〕。AgI在測定C1-時，水中含少量的I-、Br-、高鐵氰化物，會使結(jié)果偏高。Fe3的含量假設(shè)超過C1-的含量，也有影響。Cr3+、Fe3、PO3沒有干擾。4嚴(yán)峻污染的水樣， —般需要預(yù)處理，如污染較小，參加HNO 就可破壞一3些污染物。三、試劑與儀器1．0.01mo1?L-1AgNO 標(biāo)準(zhǔn)溶液 溶解1.6991gAgNO 于蒸餾水中，并稀釋3 31000mL。必要時可以用NaCl標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定AgNO。32．6mo1?L-1HNO KNO 或Ba(NO ) 固體3 3 32ZD-2型自動電位滴定計。銀電極、甘汞電極〔〕6. 攪拌磁子 20mL 移液管 100mL 燒杯四、操作步驟移取20.00mL 水樣于100mL 的燒杯內(nèi)。滴加3滴濃HNO 酸化，然后參加約32克的硝酸鉀作為離子強度調(diào)整劑，必要時可加水稀釋。把攪拌棒和電極都浸入水樣內(nèi)，開頭攪拌，待硝酸鉀溶解完后，依據(jù)儀器使用方法作必要調(diào)整，把選擇開關(guān)調(diào)到適當(dāng)位置以測量兩個電極間的電動勢。先預(yù)作一遍，找出滴定突躍的大致范圍，然后另取一份樣品進(jìn)展細(xì)作，并記錄每參加肯定體積后所對應(yīng)的電位值。繪出E-V滴定曲線,找出終點電位值和對應(yīng)的終點體積計算含量。并對儀器設(shè)置終點電位值進(jìn)展第三次自動滴定。五、結(jié)果計算cVc s sx VmgL-1

x表示。思考題玻璃電極是H+濃度的指示電極，為什么可以在這里用作參比電極?試液滴定前為什么要用HNO3酸化?試驗五 鄰二氮菲分光光廢法測定微量鐵的條件試驗、目的要求通過本試驗學(xué)習(xí)確定試驗條件的方法。學(xué)習(xí)721型和722型分光光度計的使用方法。二、根本原理在可見光分光光度測定中，通常是將被測物質(zhì)與顯色劑反響，使之生成有色物質(zhì)，然后測其吸光度，進(jìn)而求得被測物質(zhì)含量。因此，顯色反響的完全程度和吸光度的物理測量條件都影響到測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。顯色反應(yīng)的完全程度取決于介質(zhì)的酸度、顯色劑的用量、反響的溫度和時間等因素。在建立分析方法時，需要通過試驗確定最正確反響條件。為此，可轉(zhuǎn)變其中一個因素(例如介質(zhì)的pH值)，臨時固定其它因素，顯色后測定相應(yīng)溶液的吸光度，通過吸光度—pH曲線確定顯色反響的適宜酸度范圍。其它幾個影響因素的適宜值，也可按這一方式分別確定。本試驗以鄰二氮菲為顯色劑，找出測定微量鐵的適宜顯色條件，反響式如下：NNNN2+NNNNFe2++ 3

Fe3 橙紅色三、儀器1．722型和72l型分光光度計容量瓶 50mL吸量管 1mL，2mL，5mL，10mL四、試劑1．鐵鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg?mL-1〔配制方法見試驗教材〕2．0.15％鄰二氮菲又稱鄰菲啰琳水溶液3．10％鹽酸羥胺水溶液4．1mol?L-1NaAc 溶液(pH=4～6)5．0.2mol?L-1NaOH 溶液6．1mol?L-1HCl溶液7．廣泛pH試紙和不同范圍的周密pH試紙五、試驗步驟顯色反響時間的影響及有色溶液的穩(wěn)定性放置時間/min013510306090120150吸光度A取2只50mL容量瓶，分別參加0，5.00mL 鐵標(biāo)液，分別參加10％鹽酸羥胺1mL，搖勻，稍停，再參加NaAc溶液5mL，鄰二氮菲溶液2mL，登記稀釋至刻度后的時刻(0min)，馬上以不含F(xiàn)e2+離子，但其余試劑用量完全一樣的試劑空白作參比，在波長510nm 處測定溶液吸光度。然后依次測量放置0、1、3、5、10、30、60、90、120和150min 時溶液的吸光度，每放置時間/min013510306090120150吸光度A酸度影響A750mL容量瓶中，然后按下表分別配制溶液再分別用蒸餾水稀釋到刻度，搖勻，放置10min1cm比色皿并以蒸餾水作參比，在波長510nm處測定各溶液的吸光度。并先用廣泛pH試紙粗略測定所配制各溶液的pH值，再用周密pH試紙準(zhǔn)確測定各溶液的pH值。AoNo123456710μg?mL15.005.005.005.005.005.005.001011111111mol?L-1HCl1.01.01.01.01.01.01.00.2mol?L-1NaOH04.06.08.012.016.020.00.15％鄰二氮菲pH2222222顯色劑用量的影響A同理，按下表配制不同顯色劑用量的溶液，用蒸餾水分別稀釋至刻度，搖勻，放置10min，以蒸餾水為參比溶液，在波長510nm 處測量各溶液的吸光度。AoNo12345678鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5.005.005.005.005.005.005.005.0010111111111mol?L-1NaAc555555550.15％鄰二氮菲00.10.51.01.52.03.04.0六、數(shù)據(jù)及處理依據(jù)上列三組數(shù)據(jù)分別繪制：A—pH曲線吸光度為縱坐標(biāo))；A—V 用量曲線吸光度為縱坐標(biāo))；RA—t曲線吸光度為縱坐標(biāo)。從上列三條曲線上確定顯色反響適宜的pH值范圍、顯色劑用量范圍和適宜的顯色時間范圍。思 考題依據(jù)什么原則從吸光度pH曲線確定顯色的適宜pH值范圍？假設(shè)選擇不當(dāng)，其后果怎樣？在從吸光度反響時間曲線選定適宜的顯色時間范圍時，主要應(yīng)考慮什么問題？假設(shè)時間選擇過短或過長對測定有何影響?顯色劑用量的選擇原則是什么？試驗六鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵〔選作〕、試驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)722型和721型分光光度計的使用方法，學(xué)習(xí)繪制吸取光譜曲線的方法。把握利用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)展微量成分分光光度測定的根本方法和有關(guān)計算。二、根本原理鄰二氮菲簡寫作Phen)pH值為2～9的溶液中，F(xiàn)e2離子與鄰二氮菲發(fā)生以下顯色反響：Fe2+十3Phen=Fe(Phen) 3]2+生成的橙紅色絡(luò)合物格外穩(wěn)定，1gK=21.3(20℃)，其溶液在510nm 處有最大吸取峰，摩爾吸光系數(shù)K510＝1.1×104L?cm-1?mol-1，利用上述反響可以測定微量鐵。顯色反應(yīng)的適宜pH值范圍很寬(2～9)，酸度過高(pH＜2)反響進(jìn)展較慢；假設(shè)酸度過低，F(xiàn)e2+離子將水解，通常在pH值約為5NaAc緩沖介質(zhì)中測定。鄰二氮菲與F2離子反響的選擇性很高，相當(dāng)于含鐵量5倍的Co2+、Cu2+離子，20倍量的Cr3，Mn2，PO43，V(Ⅴ離子，甚至40倍量的A13，Ca2，Mg2，SiO32，Sn2+和Zn2+離子都不干擾測定。本試驗以鹽酸羥胺為復(fù)原劑，也可使用抗壞血酸將Fe3復(fù)原為Fe2+。4Fe3++2NH2OH―→4Fe2++4H++H2O利用分光光度法進(jìn)展定量測定時，一般是選擇與被測物質(zhì)或經(jīng)顯色反響后產(chǎn)生的物質(zhì))最大吸取峰相應(yīng)單色光的波長為測量吸光度的波長。明顯，該波長下的摩爾吸光系數(shù)最大，測定的靈敏度也最高。為了找出物質(zhì)的最大吸取蜂所在的波長，需測繪有關(guān)物質(zhì)在不同波長單色光照耀下的吸光度曲線，即吸取曲線或稱吸取光譜)。通常采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)展定量測定，即先配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的反響條件下使被測物質(zhì)顯色，測得相應(yīng)的吸光度，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或稱工作曲線)。另取試液經(jīng)適當(dāng)處理后，在與上述一樣的條件下顯色，由測得的吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得被測物質(zhì)的含量。由于鄰二氮菲與Fe2+離子的反響選擇性高，顯色反響所生成的有色絡(luò)合物的穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性也好，因此在我國的國家標(biāo)準(zhǔn)(GB)中，測定鋼鐵、錫、鉛焊料、鉛錠等冶金產(chǎn)品和工業(yè)硫酸、工業(yè)碳酸鈉、氧化鋁等化工產(chǎn)品中的鐵含量，都承受鄰二氮菲顯色的分光光度法。三、儀器1．722型和72l型分光光度計容量瓶 50mL吸量管 1mL，2mL，5mL，10mL四、試劑1．鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10μgmL-12．0.15％鄰二氮菲水溶液3．10％鹽酸羧胺水溶液4．1mol?L-1NaAc 溶液五、試驗步驟測量Fe2+-Phen 吸取曲線用吸量管吸取10μg?mL-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)液5.00mL 于一只50mL容量瓶中，另一只不加鐵標(biāo)準(zhǔn)液，然后分別參加1mL鹽酸羥胺溶液，搖勻，再加入5mLNaAc緩沖溶液和2mL鄰二氮菲溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻．放置10min，以1cm比色皿，試劑空白溶液(即上述不加標(biāo)準(zhǔn)鐵的溶液)為參比溶液，在分光光度計上，在450～550nm 波長區(qū)間測定溶液的吸光度隨波長的變化。在510nm 四周須每隔2nm測量一次。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線用吸量管分別吸取10μg?mL-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL650mL容量瓶中，依次各參加1mL鹽酸羥胺、5mLNaAc緩沖溶液、2mL鄰二氮菲溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。放置10min，用1cm比色皿，以不加鐵的試劑空白溶液為參比溶液，在試驗步驟1所得到的最大吸取波長下，分別測量各溶液的吸光度。試樣中微量鐵的測定準(zhǔn)確稱取試樣0.4~0.5g(如鐵含量較高，則適當(dāng)削減稱樣量)于小燒杯中，加少量蒸餾水潤濕，蓋上外表皿，留神滴加3mol?L-1HCl溶液至試樣溶解，轉(zhuǎn)移試樣至50mL容量瓶中，用少量蒸餾水淋洗燒杯，一并轉(zhuǎn)移至容量瓶中。然后依次參加1mL鹽酸羥胺、5mLNaAc 緩沖溶液、2mL鄰二氮菲溶液，以蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10min．以試劑空白溶液作參比溶波，用1cm比色皿，在試驗步驟1所得到的最大吸取波長下，測量吸光度。六、數(shù)據(jù)及處理將測量結(jié)果填入下表波長450460470480490500502504506508510512514516518520530540550波長450460470480490500502504506508510512514516518520530540550λ/nm吸光度A標(biāo)準(zhǔn)曲線VV/mL0.002.004.006.008.0010.00V鐵標(biāo) 鐵樣m /mg鐵吸光度A試樣編號＿＿＿，試樣的稱量記錄，繪圖及計算以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制Fe-Phen 吸取曲線，并求出最大吸取峰的波長λ 。一般選用λ 作為分光光度法的測量波長。max max以顯色后的50mL溶液中的含鐵量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制測定鐵的標(biāo)準(zhǔn)曲線。依據(jù)試樣的吸光度，計算試樣中鐵的百分含量。思 考題鄰二氮菲分光光度法測鐵的原理是什么?用該法測出的鐵含量是否為試祥中亞鐵的含量？吸取曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線各有何有用意義？測繪Fe2+-phen 吸取曲線時，在510nm 四周，測量間隔為什么要密一些？本試驗所用的參比溶液為什么選用試劑空白，而不用蒸餾水？試擬出以鄰二氮菲分光光度法分別測定試樣中微量Fe2+、Fe3+離子含量的分析方法。試驗七 利用紫外吸取光譜檢查物質(zhì)的純度、目的要求學(xué)習(xí)利用紫外吸取光譜檢查物質(zhì)純度的原理和方法，嫻熟紫外可見分光光度計的操作。二、根本原理由于物質(zhì)的紫外吸取光譜是物質(zhì)分子中生色團(tuán)和助色團(tuán)的奉獻(xiàn)，也是物質(zhì)整個分子的特征表現(xiàn)。例如具有π電子的共扼雙鍵化合物、芳香烴化合物等，在紫外光譜區(qū)都有猛烈吸取，其摩爾吸光系數(shù)ε可達(dá)104~105

數(shù)量級，這與飽和烴化合物有明顯的不同。利用這一特性，可以很便利地檢查純飽和烴化合物中是否含有共軛雙鍵、芳香烴等化合物雜質(zhì)。假設(shè)乙醇中含有微量苯，會在波長230～270nm處消滅苯吸取帶，而純乙醇在該波長范圍內(nèi)不消滅苯的吸取帶。因此可利用物質(zhì)的紫外吸取光譜的不同，檢查物質(zhì)的純度。紫外吸取光譜可以定量分析、推斷有機化合物的分子構(gòu)造和檢查物質(zhì)純度。圖1曲線1.純乙醇紫外光譜 圖2蒽醌(曲線1)和鄰苯二甲酸酐曲線2.苯在乙醇中的紫外光譜 (曲線2)在甲醇中的紫外吸取光譜從圖1的曲線1和曲線2可以看出由于乙醇中含有微量苯，故在波長230～270nm處消滅B吸取帶而純乙醇在該波長范圍內(nèi)不消滅苯的B吸取帶。因此可利用物質(zhì)的紫外吸取光譜的不同，檢查物質(zhì)的純度。如圖2所示的蒽醌和鄰苯二甲酸酐的紫外吸取光譜，由于在蒽醌分子構(gòu)造中的雙鍵共軛體系大于鄰苯二甲酸酐，因此，蒽醌的吸取帶紅移比鄰苯二甲酸酐大，且吸取帶外形及其最大吸取波長各不一樣，由此得到鑒定。三、儀器752、752C、752N、UV-2023 型紫外可見分光光度計四、試劑苯、無水乙醇 分析純苯的正庚烷溶液和苯的乙醇溶液取二只50mL容量瓶各注入10苯，然后分別用正庚烷和乙醇稀釋至刻度，搖勻。五、試驗條件1. 波長范圍220~280nm石英比色皿1cm六、試驗步驟依據(jù)試驗條件，將各儀器按操作步驟進(jìn)展調(diào)整，假設(shè)儀器狀態(tài)正常，即可測定各試驗的紫外吸取光譜，假設(shè)測得紫外吸取光譜的吸取峰為平頭蜂或太小，可適當(dāng)轉(zhuǎn)變試液濃度。使用分光光度計測定時，因儀器無自動波長掃描及記錄裝置；因此應(yīng)先測定各試液在不同波長下的吸光度，然后繪制吸光度對波長的曲線，即得紫外吸取光譜。測定時要求先間隔10nm測量一次吸光度，在峰值吸取四周。間隔逐步改5nm、2nm、lnm、0.5nm等，以便較準(zhǔn)確測繪紫外吸取光譜。七、數(shù)據(jù)及處理記錄試驗條件通過紫外吸取光譜的比照，說明檢查純度的可行性。思 考題如何利用紫外吸取光譜進(jìn)展物質(zhì)的純度檢查？在紫外光譜區(qū)飽和烷烴為什么沒有吸取蜂？為什么紫外吸取光譜可用于物質(zhì)的純度檢查？試驗八 原子吸取分光光度法測定自來水中鈣、鎂的含量——標(biāo)準(zhǔn)曲線法、目的要求學(xué)習(xí)原子吸取分光光度法的根本原理；了解原子吸取分光光度計的根本構(gòu)造及其使用方法，把握應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定自來水中鈣、鎂的含量。二、根本原理標(biāo)準(zhǔn)曲線法是原子吸取分光光度分析中一種常用的定量方法．常用于未知試液中共存的基體成分較為簡潔的狀況．假設(shè)溶液中共存基體成分比較簡單．則應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)溶液中參加一樣類型和濃度的基體成分，以消退或削減基體效應(yīng)帶來的干擾，必要時須承受標(biāo)準(zhǔn)參加法而不用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。標(biāo)準(zhǔn)曲線法的標(biāo)準(zhǔn)曲線有時會發(fā)生彎曲現(xiàn)象。造成標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲緣由有：當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍時，待測元素基態(tài)原子相互之間或與其它元素基態(tài)原子之間的碰撞幾率增大，使吸取線半寬度變大，中心波長偏移，吸取選擇性變差，致使標(biāo)準(zhǔn)曲線向濃度座標(biāo)軸彎曲(向下。因火焰中共存大量其它易電離的元素，由這些元素原子的電離所產(chǎn)生的大量電子，將抑制待測元素基態(tài)原子的電離效應(yīng)，使測得的吸光度增大．使標(biāo)準(zhǔn)曲線向吸光度座標(biāo)軸方向彎曲(向上?？招年帢O燈中存在雜質(zhì)成分．產(chǎn)生的輻射不能被待測元素基態(tài)原子所吸取，以及雜散光存在等因素，形成背景輻射，在檢測器上同時被檢測，使標(biāo)準(zhǔn)曲線向濃度座標(biāo)軸方向彎曲向下。由于操作條件選擇不當(dāng)，如燈電流過大，將引起吸光度降低，也使標(biāo)準(zhǔn)曲線向濃度座標(biāo)軸方向彎曲?？傊?，要獲得線性好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，必需選擇適當(dāng)?shù)脑囼灄l件，并嚴(yán)格實行。三、儀器原子吸取分光光度計 3200型(上海器廠)或其它型號鈣、鎂空心陰極燈無油空氣壓縮機或空氣鋼瓶乙炔鋼瓶通風(fēng)設(shè)備容量瓶、移液管四、試劑金屬鎂或碳酸鎂 均為優(yōu)級純無水碳酸鈣 優(yōu)級純濃鹽酸 優(yōu)級純，稀鹽酸溶液1mol?L-1純水 去離子水或重蒸餾水標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 首先配成1000μg?mL

-1儲藏液，然后鈣稀釋成100μg?mL

-1，鎂稀釋成50μg?mL

-1使用液〔參看試驗教材〕五、試驗條件3200型原子吸取分光光度計為例，假設(shè)使用其它型號，試驗條件應(yīng)依據(jù)具體儀器而定)指標(biāo)鈣鎂1./nm422.7285.2空心陰極燈電流I/d/mmmA100.2〔2擋〕100.08〔1擋〕4.燃燒器高度h/mm6.04.05.Q/L?min-10.50.56.Q/L?min-14.54.5六、試驗步驟配制標(biāo)準(zhǔn)溶液系列鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液系列準(zhǔn)確吸取2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL 上述鈣標(biāo)準(zhǔn)使用液〔100μg?mL-1〕，分別置于5只50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻備用。該標(biāo)準(zhǔn)溶液系列鈣的濃度分別為4.008.0012.0016.0020.00μg?mL -1。鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液系列準(zhǔn)確吸取1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL上述鎂標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于550mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻備用。該標(biāo)準(zhǔn)溶液系列鎂的濃度分別為1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μg?mL-1。配制自來水樣溶液準(zhǔn)確吸取適量視未知鈣、鎂的濃度而定自來水置于50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。依據(jù)試驗條件，將原子吸取分光光度計按儀器操作步驟進(jìn)展調(diào)整，待儀器電路和氣路系統(tǒng)到達(dá)穩(wěn)定，記錄儀基線平直時，即可進(jìn)樣。測定各標(biāo)難溶液系列溶液的吸光度。在一樣的試驗條件下，分別測定自來水樣溶液中鈣、鎂的吸光度。七、數(shù)據(jù)及處理記錄試驗條件儀器型號吸取線波長(nm)空心陰極燈電流(mA)狹縫寬度(mm)燃燒器高度(mm)乙炔流量〔L?min-1)空氣流量(Lmin-1)燃助比乙炔:空氣=列表記錄測量鈣、鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液系列溶液的吸光度(A)，然后以吸光度為縱座標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度為橫座標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測量自來水樣溶液的吸光度(A)，然后在上述標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得水樣中鈣、鎂的濃度μg?mL-1)。假設(shè)經(jīng)稀釋需乘上相應(yīng)倍數(shù)求得原始自來水中鈣、鎂含量。或?qū)?shù)據(jù)輸入微機，以一元線性回歸計算程序，計算鈣、鎂的含量。思 考題簡述原子吸取分光光度分析的根本原理。原子吸取分光光度分析為何要用待測元素的空心陰極燈作光源？能否用氘燈或鎢燈代替？為什么？如何選擇最正確的試驗條件？試驗九 氣相色譜定性分析——純物質(zhì)比照法1、目的要求了解氣相色譜儀的根本構(gòu)造、工作原理與操作方法學(xué)習(xí)利用保存值進(jìn)展色譜比照的定性方法二、根本原理各種物質(zhì)在肯定的色譜條件(肯定的固定相與操作條件等)下有各自確定的保存值，因此保存值可作為一種定性指標(biāo)。對于較簡潔的多組分混合物，假設(shè)其中全部待測組分均為，它們的色譜峰均能分開，則可將各個色譜峰的保存值與各相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)樣品在同一條件下所得的保存值進(jìn)展比照比較，就能確定各色譜蜂所代表的物質(zhì)，這就是純物質(zhì)比照法定性的原理。該法是氣相色譜分析中最常用的一種定性方法。以保存值作為定性指標(biāo)，雖然簡便，但由于保存值的測定，受色譜操作條件的影響較大，而相對保存值，僅與所用的固定相和溫度有關(guān)，不受其它色譜操作條件的影響，因而更適合用于色譜定性分析。相對保留值ri,s

t”r Rii,s t”Rs

t tR Mit tR Ms還應(yīng)留意，有些物質(zhì)在一樣的色譜條件下，往往具有相近的甚至一樣的保存值，因此在進(jìn)展具有相近保存值物質(zhì)的色譜定性分析時，要求使用高柱效的色譜柱，以提高分別效率，并且承受雙柱法(即分別在兩根具有不同極性的色譜柱上測定保存值)。在沒有標(biāo)準(zhǔn)樣品可作比照的狀況下，可借助于保存指數(shù)(Kováts指數(shù))文獻(xiàn)值進(jìn)展定性分析。對于組分簡單的混合物，承受更為有效的方法，即與其它鑒定力量強的儀器聯(lián)用，如氣相色譜/質(zhì)譜、氣相色譜/紅外吸取光譜聯(lián)用等手段進(jìn)展定性分析。本試驗以甲苯作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，利用保存值和相對保存值進(jìn)展苯、乙苯和1,2,3-三甲苯的定性分析。三、儀器氣相色譜儀7890Ⅱ型氮氣或氫氣鋼瓶色譜柱2mm×2mOV-101 或SE-30 不銹鋼柱微量進(jìn)樣器1μL、5μL100μL注射器四、試劑苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、對二甲苯、間二甲苯〔或正己烷、正庚烷、正辛烷=1:1:1〕五、試驗條件色譜柱2mm×2m〔i.d〕OV-101或SE-30 不銹鋼柱流淌相氫氣流量為35mL?min-13. 柱溫80℃氣化溫度150℃檢測器TCD 檢測溫度100℃橋電流80mA進(jìn)樣量0.5μL六、試驗步驟在四只10mL容量瓶中，按1:100(V/V)比例分別配制:苯:甲苯;甲苯:乙苯; 甲苯:鄰二甲苯;甲苯:對二甲苯;甲苯:間二甲笨;甲苯:1,2,3-三甲苯溶液，搖勻備用。依據(jù)試驗條件，將色譜儀按儀器操作步驟調(diào)整至可進(jìn)樣狀態(tài)，待儀器上的電路和氣路系統(tǒng)到達(dá)平衡，記錄儀上基線平直時，即可進(jìn)樣。分別吸取以上各種混合液0.5μL，依次進(jìn)樣，并在色譜工作站上，于進(jìn)樣信號四周標(biāo)明混合液組分名稱。重復(fù)進(jìn)樣三次。為測定死時間，在一樣的試驗條件下，取100μL 空氣進(jìn)樣，記錄色譜圖，并重復(fù)進(jìn)樣三次。試驗完畢，用乙醚或無水乙醇抽洗微量注射器數(shù)次，并按儀器操作步驟中的有關(guān)細(xì)節(jié)關(guān)閉儀器。七、數(shù)據(jù)及處理記錄試驗條件測量各色譜圖中各組分的保存時間，空氣保存時間死時間)。并計算各組分的調(diào)整保存時間、相對保存時間以甲苯作標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和各組分在該柱上的n和H ，并把數(shù)據(jù)列于表中(以min作單位)。思 考題為什么可以利用色譜峰的保存值進(jìn)展色譜定性分析？在測繪空氣的色譜圖時，假設(shè)不嚴(yán)格掌握一樣試驗條件，會發(fā)生什么后果?利用r 進(jìn)展色譜定性時，對試驗條件是否可以不必嚴(yán)格掌握，為什么？i,s用同一根色譜柱，分別不同組分時，其塔板數(shù)是否一樣，為什么？試驗十 氣相色譜定性分析——純物質(zhì)比照法2—、目的要求學(xué)習(xí)利用保存值和相對保存值進(jìn)展色譜比照的定性方法生疏色譜儀器操作二、根本原理各種物質(zhì)在肯定的色譜條件(肯定的固定相與操作條件等)下有各自確定的保存值，因此保存值可作為一種定性指標(biāo)。對于較簡潔的多組分混合物，假設(shè)其中全部待測組分均為且它們的色譜峰均能分開，則可將各個色譜峰的保存值與各相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)樣品在同一條件下所得的保存值進(jìn)展比照比較，就能確定各色譜蜂所代表的物質(zhì)，這就是純物質(zhì)比照法定性的原理。該法是氣相色譜分析中最常用的一種定性方法。以保存值作為定性指標(biāo)，雖然簡便，但由于保存值的測定受載氣流速等色譜操作條件的影響較大，牢靠性較差；假設(shè)承受僅與所用的固定相種類和柱溫有關(guān)而不受其它色譜操作條件影響的相對保存值ri,s

作為指標(biāo)，則更適合用于色譜定性分析。相對保存值ri,s

定義為：t”r Rii,s t”Rs

t tR Mit tR Mst

t”MRMi

t”Rs

分別為死時間、被測組分i及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)s的調(diào)整保存時間；t tR Ri

為被測組分i及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)s的保存時間。還應(yīng)留意，有些物質(zhì)在一樣的色譜條件下，往往具有相近的甚至一樣的保存值，因此在進(jìn)展具有相近保存值物質(zhì)的色譜定性分析時，要求使用高柱效的色譜柱，以提高分別效率，并且承受雙柱法即分別在兩根具有不同極性的色譜柱上測定保存值)。在沒有標(biāo)準(zhǔn)樣品可作比照的狀況下，可借助于保存指數(shù)(Kováts指數(shù))文獻(xiàn)值進(jìn)展定性分析。對于組分簡單的混合物，則應(yīng)承受更為有效的方法，即與其它鑒定力量強的儀器聯(lián)用，如氣相色譜質(zhì)譜、氣相色譜-紅外吸取光譜聯(lián)用等手段進(jìn)展定性分析。本試驗以正庚烷作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，利用保存值和相對保存值進(jìn)展丁酮、環(huán)己烷、甲苯和乙酸正丁酯的定性分析。三、儀器氣相色譜儀 7890Ⅱ型氫氣鋼瓶色譜柱2mm×2mOV-101 或SE-30 不銹鋼柱微量進(jìn)樣器5μL50μL注射器四、試劑丁酮、環(huán)己烷、甲苯、乙酸正丁酯正庚烷均為分析純五、試驗條件12平均值tM/min〔〕丁酮:正庚烷環(huán)己烷:正庚烷甲苯:正庚烷乙酸正丁酯:正庚烷12平均12平均112平均值tM/min〔〕丁酮:正庚烷環(huán)己烷:正庚烷甲苯:正庚烷乙酸正丁酯:正庚烷12平均12平均12平均12平均值值值值t/minRit/minRst”R/minit”R/minsri,s流淌相氫氣流量為35mL?min-13. 柱溫70℃氣化溫度150℃檢測器TCD 檢測溫度100℃橋電流80mA進(jìn)樣量0.5μL六、試驗步驟在四只10mL容量瓶中，按1:1(V:V比例分別配制:丁酮:正庚烷、環(huán)己烷:正庚烷、甲苯:正庚烷、乙酸正丁酯:正庚烷溶液，搖勻備用。依據(jù)試驗條件，將色譜儀按儀器操作步驟調(diào)整至可進(jìn)樣狀態(tài)，待儀器上的電路和氣路系統(tǒng)到達(dá)平衡，記錄儀上基線平直時，即可進(jìn)樣。分別吸取以上各種混合液1μL，依次進(jìn)樣，并在色譜工作站上，于進(jìn)樣信號四周標(biāo)明混合液組分名稱。重復(fù)進(jìn)樣1次。為測定死時間，在一樣的試驗條件下，取30μL空氣進(jìn)樣，記錄色譜圖，并重復(fù)進(jìn)樣1次。試驗完畢，用乙醚或無水乙醇抽洗微量注射器數(shù)次，并按儀器操作步驟中的有關(guān)細(xì)節(jié)關(guān)閉儀器七、數(shù)據(jù)及處理記錄試驗條件記錄各色譜圖中各組分的保存時間tR

，正庚烷的保存時間tR

、空氣保存時間死時間t

i s)。并計算各組分的調(diào)整保存時間、相對保存時間以正庚烷作標(biāo)準(zhǔn)M物質(zhì)和各組分在該柱上的n

H有效

，并把數(shù)據(jù)列于表中min作單位。測量未知試樣中各組分的t

并計算t”R

ri,s

值，然后與上表所列數(shù)據(jù)進(jìn)展比照比較，確定未知試樣中的各個組分。思 考題為什么可以利用色譜峰的保存值進(jìn)展色譜定性分析？在利用相對保存值進(jìn)展色譜定性時，對試驗條件是否可以不必嚴(yán)格掌握，為什么?除了利用氣相色譜的保存值〔包括相對保存值和調(diào)整保存值〕定性外，還有哪些定性方法？測定結(jié)果rr

如下：r丁酮，正庚烷1.0；r

0.4；r環(huán)己烷，正庚烷1.5；r

0.75；2.0正庚烷，正庚烷

甲苯，正庚烷

乙酸正丁酯，正庚烷試驗十一火焰光度法測定樣品中的鉀、鈉—、目的要求學(xué)習(xí)和生疏火焰光度法測定樣品中鉀、鈉地方法。加深對火焰光度法原理的理解。了解火焰光度計的構(gòu)造及使用方法。二、試驗原理以火焰為激發(fā)源的原子放射光譜法叫火焰光度法，它是利用火焰光度計測定元素在火焰中被激發(fā)時放射出的特征譜線的強度來進(jìn)展定量分析。火焰光度法又叫火焰放射光譜法。當(dāng)樣品溶液經(jīng)霧化后噴入燃燒的火焰中，溶劑在火焰中蒸發(fā)，試樣熔融后轉(zhuǎn)化為氣態(tài)分子，連續(xù)加熱又離解為原子，再由火焰高溫激發(fā)而放射特征光譜，用單色器把元素所放射的特定波長的光分別出來，經(jīng)光電檢測系統(tǒng)進(jìn)展光電轉(zhuǎn)換，再由檢流計測出特征譜線的強度。用火焰光度法進(jìn)展定量分析時，假設(shè)激發(fā)的條件保持肯定，則譜線的強度與待測元素的濃度成正比，可以用下式表示：I ac式中：a――與待測元素的激發(fā)電位、激發(fā)溫度及試樣組成等有關(guān)的系數(shù)，當(dāng)試驗條件固定時，a為常數(shù)；b譜線的自吸取系數(shù)。當(dāng)濃度很低時，自吸現(xiàn)象可無視不計，此時，b=1，則I ac通過測量待測元素特征譜線的強度，即可進(jìn)展定量分析。K、Na元素通過火焰燃燒簡潔激發(fā)輻射出不同能量的譜線，用火焰光度計測定K原子放射的766.5nm 和Na原子放射的589.0nm 的這兩條譜線的相對強度，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可進(jìn)展K、Na的定量測定。為抵消K、Na間的相互干擾，其標(biāo)準(zhǔn)溶液可配成K、Na混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。本試驗可使用汽油-空氣或液化石油氣-空氣火焰。三、試驗用品儀器火焰光度計吸量管〔5mL，10mL〕曲頸小漏斗振蕩機燒杯〔100mL，250mL，500mL〕o量瓶〔10mL，50mL，100mL，250mL〕可調(diào)溫電熱板分析天平〔0.1mg〕 聚乙烯帶塞錐形瓶〔100mL〕漏斗臺秤試劑(1)1.000g· L-1K的貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液 稱取0.9534g 于105℃烘干4～6h的KCl(AR)，溶于水后，移入500mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)入聚烯中貯存。(2)1.000g· L-1Na的貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液 稱取1.270g 于110℃烘干4～6h的NaCl(AR)，溶于水后，移入500mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)入聚烯中貯存。(3)K，Na混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液“1”移取5.00mLK 貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液，2.50mLNa貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液于50mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。此標(biāo)準(zhǔn)溶液含100mg·L-1K，含50mg·L-1Na。(4) 三酸混合溶液 HNO3(ρ=1.42g·cm-3)，H2SO4(ρ=1.84g·cm-3)，HClO4(60%)8:1:1的比例混合而成。K，Na混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液“2”〔假設(shè)不是測定土壤樣品此溶液不必配制〕。移取5.00mLK 貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液，12.50mLNa 貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液于100mL 容瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。此標(biāo)準(zhǔn)溶液含50mg·L-1K，含125mg·L-1Na。Al2(SO4)3溶液 稱取34gAl2(SO4)3或66gAl2(SO4)3·18H2O溶于水中稀釋至1L。K標(biāo)準(zhǔn)工作溶液吸取5.00mLK 貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液于100mL 容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，配成50mg·L-1。Na標(biāo)準(zhǔn)工作溶液吸取10.00mLNa貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液于100mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，配成100mg·L-1?；旌纤嵯篐NOHClO4:1比例混合而成。3 41%HCl溶液其它定量濾紙 植物樣品玻璃球四、操作步驟植物樣品[1]中K，Na含量的測定樣品的預(yù)處理植物樣品通常用濕消化法處理成分析試液。準(zhǔn)確稱取1.000g通過40目篩的干樣品，置于錐形瓶中，參加2～3粒玻璃球以防暴沸，瓶口加一曲頸小漏斗，移10.0mL三酸混合溶液，在通風(fēng)櫥中于電熱板上低溫消化40min后，上升溫度使HClO冒白煙分解，此過程2～3min即可完成，見到硫酸回流，即呈現(xiàn)縷狀白4煙時取下錐形瓶，稍冷后，加20mL左右1%HCl溶液，加熱至沸以溶解殘渣，趁熱用快速濾紙過濾至50mL容量瓶中，用熱的1%HCl溶液洗滌沉淀三次，洗至濾液近刻度后加水定容，搖勻。此溶液一般可直接用于測Na，用逐級稀釋法稀釋100倍后測K。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制在五個50mL容量瓶中，分別參加1.00mL2.00mL3.00mL4.00mL和5.00mLK，Na混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液“1K，Na含量的測定按使用方法開動儀器并點火，選擇適當(dāng)?shù)撵`敏度并用蒸餾水噴霧調(diào)零，用標(biāo)準(zhǔn)曲線中濃度最大的溶液調(diào)整儀器滿刻度。儀器預(yù)熱10～20min后，由稀到濃依次測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和未知試樣溶液的放射強度I，每個溶液要測定三次，取平均值。五、數(shù)據(jù)處理以濃度為橫坐標(biāo)，K，Na的放射強度為縱坐標(biāo)，分別繪制K，Na的標(biāo)準(zhǔn)曲線。由未知試樣的放射強度求出樣品中的K，Na含量〔用質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示〕注釋假設(shè)為土壤樣品或食物樣品可分別按下法測定。土壤樣品中水溶性K，Na含量的測定土壤樣品的預(yù)處理土壤樣品通常用浸提法處理。待測溶液中Ca對K的干擾不大，而對Na的干擾較大，可以用Al(SO)抑制鈣的激發(fā)削減干擾。2 43稱取10g通過1mm篩孔烘干土樣放入100mL帶塞的錐形瓶中，加水50mL蓋好瓶蓋，在振蕩機上振蕩3min馬上過濾，依據(jù)具體狀況吸取肯定體積浸出液，放入50mL容量瓶中，加1mLAl (SO) 溶液，定容，搖勻備用。2 43標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制及測定在九個50mL容量瓶中，分別加入0.00mL2.00mL4.00mL6.00mL8.00mL，10.00mL，12.00mL，16.00mL，20.00mLK ，Na混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液“2”，分別參加1mLAl (SO) 溶液，定容，各瓶中分別含K為0mg·L-1，2mg·L-1，4mg·L-1，2 436mg·L-1，8mg·L-1，10mg·L-1，12mg·L-1，16mg·L-1，20mg·L-1Na0mg·L-1，5mg·L-1，10mg·L-1，15mg·L-1，20mg·L-1，25mg·L-1，30mg·L-1，40mg·L-1，50mg·L-1。儀器預(yù)熱10～20min后，由稀到濃依次測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中K，Na的放射強度，每個溶液要測定三次，取平均值。然后在火焰光度計上測定未知液，記錄檢流計讀數(shù)，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。食物樣品中K，Na含量的測定食物樣品通常用濕消化法處理成分析試液。食物樣品的預(yù)處理準(zhǔn)確稱取均勻樣品〔0.5～1g干樣或1～2g濕樣或3～5g飲料〕于250mL高型燒杯中，加20～30mL 混合酸消化液，蓋上外表皿，置于電熱板或電沙浴上加熱消化。如消化不完全，再補加幾毫升混合酸消化液，連續(xù)加熱消化，直至無色透亮為止。加幾毫升去離子水，加熱以除去多余的HNO。待燒杯中的液體接32～3mL時，取下冷卻。用水洗并轉(zhuǎn)移到10mL刻度試管中，定容至刻度。取與消化樣品一樣的混合酸消化液，按上述操作做試劑空白測定。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制及測定吸取0.00mL，0.50mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，2.50mLK 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別置于250mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。將消化樣液、試劑空白液、K標(biāo)準(zhǔn)系列溶液分別導(dǎo)入火焰光度計，測定放射強度。吸取0.00mL，1.00mL，2.00mL，3.00mL，4.00mLNa標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。將消化樣液、試劑空白液、Na標(biāo)準(zhǔn)系列溶液分別導(dǎo)入火焰光度計，測定放射強度。思考題火焰光度計中的濾光片有什么作用？假設(shè)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度范圍過大，則標(biāo)準(zhǔn)曲線會彎曲，為什么會有這種情況？試驗十二 熒光光度分析法測定維生素B2—、目的要求學(xué)習(xí)和把握熒光光度分析法的根本原理和方法生疏熒光分光光度計〔或熒光光度計〕的構(gòu)造和使用方法二、試驗原理在紫外光或波長較短的可見光照耀后，一些物質(zhì)會放射出比入射光波長更長的熒光。以測量熒光強度和波長為根底的分析方法叫做熒光分光光度分析法。對同一物質(zhì)而言，假設(shè)alc<<0.05，即對很稀的溶液，熒光強度F與該物質(zhì)的濃度c有以下的關(guān)系F=2.3ФI alcf 0Ф式中： ──熒光效率；I──入射光強度；a──熒光分子的吸取系數(shù)；l──Фf 0試液的吸取光程。0I l不變時，0F=Kc式中K為常數(shù)。因此，在低濃度的狀況下，熒光物質(zhì)的熒光強度與濃度呈線性關(guān)系。維生素B2

〔即核黃素〕在430～440nm 藍(lán)光的照耀下，發(fā)出綠色熒光，其峰值波長為535nm。維生素B2

的熒光在pH=6～7pH=11時消逝。熒光分析試驗首先選擇激發(fā)光單色器波長和熒光單色器波長，根本原理是使測量獲得最強熒光，且受背景影響較小。激發(fā)光譜是選擇激發(fā)光單色器波長的依據(jù)，熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜是指在熒光最強的波特長，轉(zhuǎn)變激發(fā)光單色器的波長測量熒光強度，用熒光強度對激發(fā)光波長作圖所得的譜圖。大多數(shù)狀況下，熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜與其吸取光譜一樣。熒光光譜是選擇熒光單色器波長的主要依據(jù)，熒光物質(zhì)的熒光光譜是將激發(fā)光單色器波長固定在最大激發(fā)光波特長，轉(zhuǎn)變熒光單色器波長測量熒光強度，用熒光強度對熒光波長作圖所得的譜圖。以下圖為維生B的吸取〔〕光譜及熒光〔放射〕光譜示意圖。2110.75A0.50.25AF0200300400/nm500600圖VB 的吸取〔激發(fā)〕光譜及熒光光譜示意圖2A──吸取光譜；F本試驗承受標(biāo)準(zhǔn)曲線法來測定維生素B2的含量。激發(fā)光單色器波長選440nm.熒光單色器波長選535nm，可將440nm的激發(fā)光及水的拉曼光〔360nm〕濾除，從而避開了它們的干擾。三、試驗用品儀器國產(chǎn)930型〔或其它型號〕熒光光度計 容量瓶〔50mL，1L〕吸量管〔5mL〕 棕色〔500mL〕藥品(1) 100.0 mg·L-1

維生素B2

標(biāo)準(zhǔn)貯備液 準(zhǔn)確稱取0.1000g 維生素B2

溶解于少量的1%乙酸中，轉(zhuǎn)移至1L容量瓶中，用1%乙酸稀釋至刻度，搖勻。5.00 mg·L-1維生素B2

工作標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確移取50.00mL 100.0mg· L-1維生素B2

標(biāo)準(zhǔn)貯備液于1L容量瓶中，用1%乙酸稀釋至刻度，搖勻。待測液取市售維生素B2

1%乙酸溶液溶解，在1L容量瓶中定容。以上溶液均應(yīng)裝于棕色中，置于冰箱冷藏保存。四、操作步驟標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制50mL容量瓶中，分別參加1.00mL，2.00mL，3.00mL，4.00mL和5.00mL5.00mg· L-1維生素B2

工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的測定開啟儀器電源，預(yù)熱約10min.用蒸餾水做空白，從稀到濃依次測量標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的熒光強度。未知試樣的測定取2.50mL 待測液置于50mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。用測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液時一樣的條件，測量其熒光強度。五、數(shù)據(jù)處理用標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的熒光強度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。依據(jù)待測液的熒光強度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得其濃度。計算藥片中維生素B2mg/片表示。思考題怎樣選擇激發(fā)光單色器波長和熒光單色器波長？熒光光度計中為什么不把激發(fā)光單色器和熒光單色器安排在一條直線上？附：721型分光光度計簡介721型分光光度計是72型分光光度計的改進(jìn)型，將穩(wěn)壓電源裝置、光源燈、單色器、比色皿架、光電管暗盒電子放大器和微安表等部件全部裝成一體，裝置緊湊，操作簡便。儀器工作波長范圍是360～800nm，是用于近紫外和可見光區(qū)的分光光度計。721型分光光度計，儀器用鎢絲白熾燈做光源，棱鏡作色散元件．承受自準(zhǔn)式光路，以GD-7型光電管為光電轉(zhuǎn)換元件，微弱的光電流信號通過微電流放大器放大后，由微安表顯示出來。1.721 型分光光度計操作步驟接通電源前，將各旋鈕調(diào)整至起始位置，微安表的指針應(yīng)在“0”位，否則旋轉(zhuǎn)校正螺絲加以調(diào)整。接通電源，翻開比色皿暗箱蓋，選擇適當(dāng)?shù)臏y量波長和相應(yīng)的靈敏度檔，調(diào)整透光率“0”電位旋鈕，使微安表指“0”。放大器的靈敏度共有5檔，“1”檔最低，以后漸漸增大，在能使參比溶液調(diào)到100％的狀況下，應(yīng)盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩(wěn)定性。在轉(zhuǎn)變靈敏度檔后，應(yīng)重校正“0”和“100”。將參比溶液和待測溶液分別倒入比色皿中，合上比色皿暗箱蓋，此時選定的單色光透過參比溶液照耀到光電管上，旋轉(zhuǎn)“100％”電位器，使微安表指針在滿刻度四周，并預(yù)熱儀器20min“0和“100％。將比色皿拉桿拉出一格，使待測溶液進(jìn)入光路，微安表的讀數(shù)即為該溶液的吸光度或透光率，讀取讀數(shù)后，馬上翻開比色皿暗箱蓋。重復(fù)操作，校核讀數(shù)，再依次測量其它溶液的吸光度。測量完畢，取出比色皿，洗凈擦干，將各旋鈕回復(fù)到起始位置，開關(guān)置于關(guān)處，撥下電源插頭，罩好儀器罩。2．721型分光光度計的維護(hù)留意事項照試驗室電源電壓波動較大，為確保儀器工作狀態(tài)穩(wěn)定，最好外加穩(wěn)壓電源，同時儀器保持接地良好。應(yīng)常常檢查枯燥簡內(nèi)的枯燥刑是否已變色失效，假設(shè)失效應(yīng)準(zhǔn)時烘干處理或換裝的枯燥劑。儀器長時間不用時，在儀器罩內(nèi)也應(yīng)放置數(shù)袋防潮的硅膠。儀器工作一段或經(jīng)搬動后，要檢查波長的準(zhǔn)確性，以保證測定的牢靠性。3. 比色皿吸取池使用留意事項．比色皿要配對使用，由于一樣規(guī)格的比色皿仍有或多或少的差異，致使光通過比色溶液時，吸取狀況將有所不同。．留意保護(hù)比色皿的透光面，拿取時，手指應(yīng)捏住其毛玻璃的兩面，以免沾污或磨損透光面。．在已配對的比色皿上，于毛玻璃面上作好記號，使其中一只專置參比溶液，另一只專置試液。同時還應(yīng)留意比色皿放入比色皿槽架時應(yīng)有固定朝向。．假設(shè)試液是易揮發(fā)的有機溶劑，則應(yīng)加蓋后，放入比色皿架上。．倒入溶液前，應(yīng)先用該溶液淋洗內(nèi)壁三次，倒入量不宜過多，以比色皿高度的4/5為宜。．每次使用完畢后，應(yīng)用蒸餾水認(rèn)真淋洗，并以吸水性好的軟紙吸干外壁水珠，放回比色皿盒內(nèi)。．不能用強堿或強氧化劑浸洗比色皿，而應(yīng)用稀鹽酸或有機溶劑，再用水洗滌，最終用蒸餾水淋洗三次。722光柵分光光度計的使用方法722型光柵分光光度計能在近紫外，可見光譜區(qū)域內(nèi)對樣品物質(zhì)作定性和定量的分析。其色散元件為衍射光柵，波長精度比721好，且數(shù)字顯示讀數(shù)。操作方法及留意事項：將靈敏度旋鈕調(diào)整“1〔放大倍率最小〕開啟電源，指示燈亮，儀器預(yù)熱20分鐘，選擇開關(guān)置于“T”翻開試樣室蓋〔光門自動關(guān)閉〕，調(diào)整“0%T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0將裝有溶液的比色皿放置比色架中。旋動儀器波長手輪，把測試所需的波長調(diào)整至刻度線處。蓋上樣品室蓋，將參比溶液比色皿置于光路，調(diào)整透過率“100%T使數(shù)字顯示為“100.0T〔假設(shè)顯示不到100%T，則可適當(dāng)增加靈敏度的檔數(shù)，同時應(yīng)重復(fù)“3”，調(diào)整儀器的“00.0〕將被測溶液置于光路中，數(shù)字表上直接讀出被測溶液的透過率〔T〕(8)吸光度A的測量，參照“36”調(diào)整儀器的“00.0100.0擇開關(guān)置于A旋動吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為.000，然后移入被測溶液，顯示值即為試樣的吸光度A值。濃度C的測量，選擇開關(guān)由A旋至C，將已標(biāo)定濃度的溶液移入光路，調(diào)整濃度按鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測溶液移入光路，即可讀出相應(yīng)的濃度值。儀器在使用時，應(yīng)常參照本操作方法中“36”進(jìn)展調(diào)“00.0”和“100.0”的工作。每臺儀器所配套的比色皿不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)換。本儀器數(shù)字顯示后背部，帶有外接插座，可輸出模擬信號，插座1腳為正，2腳為負(fù)接地線。假設(shè)大幅度轉(zhuǎn)變測試波長時，需等數(shù)分鐘后才能正常工作。〔因波長由長波向短波或短波向長波移動時，光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)較慢，需一段光響應(yīng)平衡時間。附：典型紫外-可見光分光光度計簡介紫外-可見光分光光度計有很多型號，分單光束和雙光束兩大類型，目前應(yīng)用都很普遍。其主要部件兩者大致一樣，多以氫燈和鎢燈分別作紫外光和可見光的光源，以棱鏡或光柵作色散元件，通過狹縫分出測定波長的單色光，由切換鏡把肯定強度的紫外光或可見光引入光路，經(jīng)吸取池吸取后，透過的光被光電管檢測，轉(zhuǎn)變成電信號，有些儀器承受記錄儀記錄溶液的吸光度或透光率，同時用數(shù)字顯示，或者直接從刻有吸光度或透光率的轉(zhuǎn)盤上讀取。主要部件光源 常用的有鎢燈和氫燈或氘燈，供給連續(xù)光譜的波長范圍分別為760～400nm 和400～200nm， 其中H656.28nm 和H486.13nm 譜線常用作校正光柵或棱鏡位置，以提高分光光度計波長讀數(shù)的準(zhǔn)確性。另外，為了獲得穩(wěn)定的具有肯定強度的光源，儀器上還配有穩(wěn)壓電源和穩(wěn)流電源設(shè)備。通常光源在使用前需預(yù)熱15mim。單色器 單色器是分光光度計重要部件之一，主要由色散元件(光柵或棱鏡)、狹縫、準(zhǔn)直鏡等組成，其作用是輸出測定所需的某一波長的單色光。目前很多分光光度計承受光柵作色散元件，與棱鏡相比。光柵無論在長波長方向或短波長方向都具有一樣的倒線色散率，因此．在固定狹續(xù)寬度后，所獲得的單色光都具有同樣寬的譜帶，并且受溫度影響較小，使波長具有較高的準(zhǔn)確度，而棱鏡則不一樣，在短波長方向倒線色散率小，而長波長方向大，因而在固定狹縫寬度后，所獲的不同波長的單色光的譜帶寬度不同。狹縫是分光光度計上格外周