尿液分析儀分析項目測定標準操作規(guī)程

尿常規(guī)項標準操作干化學（一）標本的采集保存尿常規(guī)檢驗通常以新鮮晨尿為宜，但門診患者可以隨機留尿。尿液標本采集應使用潔凈帶蓋的一次性容器，避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便混入。標本留取后要及時送檢。對于不能立即檢查的標本，在冰箱內一般可保存6-8小時。要根據(jù)檢驗項目的需要，選擇不同的防腐及保存方法。（二）校準1校準試紙條：與儀器配套的試紙條2校準方法：一2條校準試紙條，只作為日常校準用，一般只用一條，另一條為備（三）檢測項目1葡萄1.1原理采用葡萄糖氧化酶法原理。在有氧條件下，葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖醛酸和過氧化氫后者在過氧化物酶的催化下釋放出初生態(tài)氧使色原鄰甲聯(lián)苯（或碘化鉀呈現(xiàn)不同的顏色變化顏色深淺與尿液中葡萄糖含量有關。本法檢測范圍為微（±約5.6mm/L;弱陽+約13.8mmol/L,陽（++約mmol/L,強陽（+++約最強陽（約111mmol/L.1.2注意項維生素能干擾低濃度的尿液葡萄糖測定使結果呈假陰性?？蓪⒛蛞褐蠓袛?shù)分鐘以排出維生素C的干擾。酮體能降低葡萄糖檢測的敏感度或使檢測呈假陰性。干化學葡萄糖氧化酶法對尿液葡萄糖監(jiān)測的靈敏度和特異性有所不同僅是一般的定量過篩試驗此對于糖尿病患者最好采用葡萄糖定量試驗。1.3參考值正常人腎糖閾為，一般情況下血糖濃度比較恒，空腹是為mmol/L，進餐后8.88-9.99mmol/。精神小球濾過的葡萄糖幾乎全部由腎小管重吸收，僅有極其微量的葡萄糖隨尿液排出，一般定性試驗為陰性。1.4臨床意義生理性糖尿生理性糖尿包括飲食性糖尿、應急性糖尿和妊娠性糖尿，呈一過性，當去除生理因素后即可恢復。病理性糖尿病理性糖尿分原發(fā)真性糖尿和繼發(fā)性高血糖性糖尿前者如糖尿病腎性糖尿??；后者如甲狀腺功能抗進、垂體功能亢進、嗜鉻細胞瘤、胰島細胞瘤、庫欣綜合癥、胰腺疾病、嚴重肝功能衰竭。2膽紅素2.1原理

++++采用重氮反應法原理，在強酸介質中，膽紅素與重氮化的雙氯苯胺偶聯(lián)，形成紫紅色的重氮色素其顏色深淺與尿中膽紅素濃度有關本法檢測范圍為弱陽性（+）約8.6umol/L；陽性（++）約；強陽性（+++）約。2.2注意事尿液標本宜新鮮免陽光直射而使膽紅素轉變成膽綠素導致檢測結果呈假陽性。高濃度維生素C和亞硝酸鹽可抑制偶氮反應，導致膽紅素檢測結果假陰性，吡啶、吲哚酸在pH值條件下可導致假陽性反應。楊酸鹽、阿司匹林也可使本試驗結果2.3參考值陰性2.3臨床意尿膽紅素陽性見于阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、病毒性（或中毒性）肝炎、肝硬化以及其他肝病。3酮體3.1原理在堿性條件下亞基鐵氰化鈉與尿液中乙酰乙酸作用產生紫色放映其顏色深淺與酮體含量有關。本法檢測范圍為微量（±）約0.9mmol/;弱陽性（+）約1.7mmol/L,陽（++約8.6mmol/L,強陽性（+++）約，最強陽性（++++）約111mmol/L.3.2注意項本法只檢測尿液中的乙酰乙酸，不與丙酮或或羥丁酸反應，故與傳統(tǒng)的化學法結果略有差異。檢測敏感度為。不同病因引起的酮癥，其酮體成分有所不同。在糖尿病酮癥酸中毒早期患者中，主要酮體形式是B-羥丁酸，乙酰乙酸很少或缺乏。因此，干化學分析可出現(xiàn)假陰性結果或對總酮體量的估計不足相反在糖尿病酮癥酸中毒癥狀緩解之后，乙酰乙酸含量反而比初始急性期增高。乙酰乙酸受熱易分解成丙酮，故尿液標本宜及時送檢。尿液含量有大量色素或大量左旋多巴代謝產物時，可導致假陽性結果。3.3參考陰性3.4臨床義尿酮體陽性見于糖尿病酮癥酸中毒、饑餓、劇烈運動、營養(yǎng)不良等。4相對度4.1原理高分子電解質共聚體的解離常數(shù)（pKa隨尿液離子濃度而變化，離子濃度越高，其酸性基團（H）解離越多H可與酸堿指示劑反應，通過溴麝香酚藍的顏色改變，顯示尿液的相對密度值。尿液中離子濃度較低時，呈藍綠色，離子濃度升高則轉向黃綠色。4.2注意項電解質共聚體有多甲乙烯酸馬來酐和甲氧乙烯順丁烯二酸兩種者更為常用。本法檢測范圍從開始，每隔0.005遞增，至1.030止，低于前者或超過后者，報告“≤1.005”或“≥干化學分析測定尿液相對密度不受葡萄糖含量的影響對尿中蛋白質較敏感。尿中蛋白質含量每增加1%則尿液相對密度增加。

另外，X線造影劑可使含防腐劑的尿液相對密度增加到本法受尿液值得影響較大pH≥6.5時，應在測定結果上增加0.005作為因尿液pH影響的補償。干化學分析尿液相對密度檢測范圍為1.005-1.030生兒尿液相對密度在之間。由于本法檢測結果的數(shù)據(jù)間隔較大對尿液相對密度過高或過低的標本檢測不夠敏感，因此，僅限于篩選試驗。本法的參比方法為折射儀法。4.3參考正常人尿液相對密度主要受尿液中所含氯化鈉和尿素的影響常飲食條件下，尿液相對密度波動在1.015-1.025之間。4.4臨床義病理狀態(tài)下，尿液相對密度隨尿液中所含的溶質成分而改變。因此，尿液相對密度檢測時了解腎臟濃縮功能的一項簡易指標。尿液相對密度增高見于急性腎炎、糖尿病、蛋白質、高熱等。尿液相對密度降低見于慢性腎炎、尿崩癥、原發(fā)性醛固酮增多癥及腎功能不全多尿期。慢性尿崩癥時，由于尿量極大，尿液外觀如水，相對密度極地，幾乎等于1。尿液相對密度連續(xù)測定較一次測定更有價值慢性腎功能不全患者可呈現(xiàn)持續(xù)性低相對密度尿。5PH值5.1原理將甲基紅PH4.6-6.2）和溴麝香酚藍PH6.0-7.6）適量配合，組成復合型指示劑呈色范圍為（橘黃色-藍色色變化與尿液pH值相關。本法檢測范圍限于pH4.5-9，每隔0.5單位遞增。5.2注意項尿液pH值主要取決于尿中磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉的相對含量，并因飲食情況而異。每當進食后，由于胃黏膜分泌大量鹽酸以助消化，此時尿液值顯一過性增高。夜間人睡后，由于呼吸變慢呈輕微的酸中毒，故尿中pH發(fā)生變化。標本不宜久置，以免細菌分解尿液成分，使pH發(fā)生改變?？衫媚蛞簆H值測定，對尿蛋白、尿相對密度等易受值影響的干化學分析加以監(jiān)控。5.3參考．進食肉類或蛋白質多者呈弱酸性，進食植物性食物多者呈堿性。5.4臨床義酸性尿見于尿路結核、代謝性酸中毒、糖尿病酮癥酸中毒和服用氯化銨、氯化鈣、稀鹽酸機體內蛋白質分解增加、痛風等。酸堿尿見于劇烈嘔吐、堿中毒、腎功能不全、原發(fā)性醛固酮增多癥、腎小管性酸中毒、尿路感染及服用堿性藥物等情況。另外尿液值變化與尿結石的形成關系密切應用尿液pH值測定監(jiān)測腎結石患者的尿液酸堿度變化可以指導臨床用藥尿酸和胱氨酸結石在酸性條件下容易形成，而磷酸鈣結石在堿性條件下容易形成。6蛋白6.1原理

根據(jù)PH指示劑蛋白質誤差原理而設計。尿液中蛋白質陽離子基團（白蛋白）與指示劑四溴酚藍（或四氯粉絲溴酚酞）陰離子基團結合，導致指示劑進一步電離，從而產生顏色變化，其顏色變化與尿液蛋白質含量有關。本法檢測范圍為弱陽性（+）約0.3g/L;陽性（++）約強陽性（+++）約；最強陽性（++++）約6.2注意項干化學分析檢測尿蛋白有類不同的方法，除指示劑蛋白質誤差外，還有Urine-TP和法。前者類似考馬斯亮藍法，能同時檢測白蛋白、球蛋白及本-周蛋白；后者雖采用層析擴散和免疫技術，也只能檢測白蛋白。本法檢測球蛋白的敏感性僅為白蛋白的基水楊酸法對白蛋白和球蛋白的敏感性基本一致。因此，推薦璜基水楊酸法最為干化學分析的參比方法但必須注意璜基水楊酸法易受尿中存在的某些鹽類結晶的干擾。干化學分析及其他化學檢測尿蛋白由于試劑組成不同，其檢測敏感度也有較大差異。四溴酚藍法為與加熱乙酸法相當，但低于璜基水楊酸法（四氯酚四溴酚酞法為干化學分析均不能檢出本-周蛋白。6.2..4尿液pH值變化對檢測結果影響較大，特別是服用奎寧、奎尼丁和嘧啶等藥物者的強堿性尿液會出現(xiàn)假陽性反應此外斯匹林青霉素慶大霉素、氯丙嗪、灰黃霉素、干擾素、利福平、磺胺類、潑尼松、非激素消炎劑、造影劑等均可導致假陽性反應。尿液標本如含有其他分泌物或較多細胞成分也可出現(xiàn)假陽性反應。6.3參考正常人終尿蛋白質含量很少，用干化學法分析檢測為陰性。6.4臨床義正常人血漿內分子量＞μ的蛋白質極少從腎小球濾過0μ的蛋白質可自由的從腎小球濾過95%-96%被腎小管重吸收尿中蛋白質含量很少。6.4.1生理性蛋白尿生理性蛋白尿又稱功能性蛋白尿指泌尿系統(tǒng)并無器質性變化尿液中暫時出現(xiàn)蛋白尿。由于劇烈運動、長時間直立、高溫、和受寒冷等因素，引起腎血管痙攣或充血，導致腎小球通透性增加而致。此種蛋白尿多為一過性。6.4.2病理性蛋白尿病理性蛋白尿是指器質性病變導致尿液中持續(xù)出現(xiàn)蛋白質可分為腎小球性蛋白尿、腎小管性蛋白尿、混合蛋白尿和溢出性蛋白尿。腎小球性蛋白尿：因炎癥等因素導致腎小球毛細血管通透性增加，血漿蛋白大量濾出超過腎小管沖吸收能力引起蛋白尿見于原發(fā)性與繼發(fā)性腎小球疾病，如腎淀粉樣變、糖尿病腎病、急、慢性腎炎、腎病綜合征等。腎小管性蛋白尿：因炎癥或中毒引起腎近曲小管對低分子蛋白質的重吸收障礙，導致尿中出現(xiàn)蛋白質。見于間質性腎炎、腎盂腎炎、中毒性腎病及腎移植后的排斥反應等。混合性蛋白尿：腎臟病變同時累及腎小球和腎小管，使蛋白質濾出增加且重吸收減少引起蛋白尿。見于慢性腎炎、慢性腎功能不全、狼瘡性腎炎、多發(fā)性骨髓瘤、糖尿病腎病等。溢出性蛋白尿：腎臟正常，腎外疾病導致循環(huán)中低分子量的蛋白質增多，

使腎小球濾出增多出腎小管重吸收能力引起的蛋白質于多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥、急性血管內溶血及單核細胞白血病。6尿膽原7.1原理根據(jù)偶氮結合法原理，尿膽原在強酸條件下和重氮鹽偶聯(lián)形成胭脂紅色素，其顏色深淺與尿膽原含量有關。7.2注意項7.2.1本法的敏感度為7.2.2正常人每天尿膽原排出量波動較大，夜間和上午較少，午2點-4點時達最高峰，并與尿液值成正比。7.2.3尿液標本宜新鮮陽光照射使尿膽原氧化成尿膽素呈假陽性反應。7.2.4磺胺類藥物對本法有干擾，尿中含有甲醛可是結果呈假陰性反。7.3參考尿膽原主要來自膽紅素的分解。生理情況下腸道細菌分解形成的膽素原族化合物，絕大部分隨糞便排出，約有10%-20%入腸肝循環(huán)，其中僅有極少部分進入體循環(huán)后隨尿排出正常尿液中只含有少量尿膽（3-16mol/L7.4臨床義尿膽原濃度增高見于溶血性及肝細胞性黃疸。阻塞性黃疸患者尿膽原試驗呈陰性。8亞硝酸鹽8.1原理反應依賴于尿中革蘭氏陽性細菌把硝酸鹽還原成亞硝酸鹽硝酸鹽與對氨基苯砷酸反應生成重氮化合物氮化合物再與萘基乙二胺二鹽酸結合呈現(xiàn)桃紅色。8.2注意項8.2.1本法僅可見出硝酸鹽還原酶陽性的細菌，敏感度為0.6-1.0mg/L亞硝酸鹽，檢出率約80%。但尿液中在膀胱內儲留時間不足4小時或飲食中缺乏硝酸鹽時，盡管尿液中存在還原酶陽性菌，檢測結果仍然可為陰性。8.2.2含維生素C或對密度高的尿液可呈假陰性。含色素尿檢測結果可呈假陽性。8.2.3法陰性不能排除硝酸鹽還原酶陰性的其他細菌感染。但陽性結果則肯定是尿路感染，應進一步作細菌培養(yǎng)和藥敏試驗，以便確定有效的抗生素治療。8.3參考陰性8.4臨床義尿液亞硝酸鹽陽性見于腸肝均可細菌應起的尿路感染如膀胱炎、腎盂腎炎等。9紅細胞9.1原理紅細胞內含有亞鐵血紅素基團，具有過氧化物酶活性，可催化過氧化氫釋放初生態(tài)氧色原鄰甲聯(lián)苯胺呈藍色反應顏色深淺與血紅蛋白含量有關。本法檢測范圍為弱陽性（）5-10個紅細胞μl；陽性++）50個紅細胞/μl；

強陽性（+++）250個紅細胞/μl。9.2注意項9.2.1法既可測定完整紅細胞內的血紅蛋白，又可測定破碎紅細胞釋放的游離血紅蛋白。因此，檢測結果與鏡檢可不一致，應綜合分析判斷。9.2.2劑組成，其檢測敏感度也不相同。四甲基聯(lián)苯胺二異丙苯-二氫過氧化酶檢測敏感度為0.15-0.62mg/L白質相當于個完整紅細胞/μl。四甲基聯(lián)苯胺-2，5-二甲基-2，5-二氫過氧化乙烷檢測敏感度為紅細胞/μl或10個紅細胞/μl的血紅蛋白。9.2.3尿液中含有易熱酶時可致假陽性結果須將尿液煮沸在進行檢測。9.2.4尿液中含有大量維生素，可出現(xiàn)假陰性反應。蛋白尿、相對密度高的尿液及亞硝酸鹽均可導致假陽性結果。9.2.5本與紅細胞鏡檢不完全相關，但當檢測結果少于10紅細胞μl時，可以省去顯微鏡檢查。9.3參考陰性9.4臨床義檢測結果陽性具有兩種含義，即血尿和血紅蛋白尿。血尿：見于腎結石、腎小球腎炎、腎結核、腎盂腎炎、膀胱炎、腫瘤、創(chuàng)傷、化學或藥物中毒、劇烈運動。血紅蛋白尿：見于輸血反應、溶血性貧血、嚴重燒傷、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿。10白細胞10.1理采用粒細胞酯酶反應原理尿中粒細胞特異性質沒能水解吲哚酚酯并與重氮鹽偶聯(lián)形成紫色縮合物，其顏色深淺與粒細胞數(shù)量有關。10.2注意事項10.2.1中性粒細胞內含有特異性酯酶，而淋巴細胞、單核細胞、無此酶。因此，尿中以淋巴細胞為主時的腎移植排異反應患者，可出現(xiàn)假陽性結果。10.2.2不同試劑組成其檢測敏感度和檢出范圍也不同如萘酚氧化乙酸、重氮鹽法和吡咯氨基酸酯、重氮鹽法的檢測范圍為微量（±）約15個白細胞/μl；弱陽性（+）70個白細胞/μl；陽性（++）125個白細胞/μl；強陽性（+++）500個白細胞l而吲哚酚羧基酚酯、重氮鹽法檢測范圍如下弱陽（+25個白細胞/μl陽++100白細胞/μl陽（+++）500個白細胞/μl.萘酚AS-D化乙酸、2-氯-4-苯甲酰胺-5甲基、苯基氯化重氮苯法檢測范圍為：弱陽性+）25個白細胞/μl；陽性++）75白細胞/μl；強陽性（+++）500個白細胞/μl。10.2.3使用甲醛、呋喃可致假陽性反應，使用慶大霉素、先鋒霉素V可致假陰性反應。10.2.4蛋白尿、糖尿、高相對密度尿均可導致假陰性反應或使陽性結果減弱。10.3參考值正常人尿液通常為陰性。測定結果為±時其臨床意義有時可疑，但措辭出現(xiàn)±結果提示可能有問題。陽性結果偶見于一些被陰道分泌物污染的隨機尿標本。10.4臨床意義

尿液白細胞陽性見于尿路感染如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎以及腎結核、腎腫瘤病發(fā)感染等。11維生素C11.1原理維生素（即抗壞血酸具有12-烯二醇還原性基團在酸性條件下能將，6-二氯定靛酚還原成2，二氯二對酚胺，顏色由粉紅色轉變成無色，其顏色變化與維生素C含量有關。本法檢范圍為弱陽性（+）0.56mmol/L(100mg/L；陽性（