(3.9)-9、B淋巴細(xì)胞病理學(xué)生理學(xué)課件

前情回顧

1、簡述HLA基因復(fù)合體結(jié)構(gòu)和HLA分子的結(jié)構(gòu)、分布和功能特點(diǎn)；2、簡述MHCⅠ類和Ⅱ類分子的區(qū)別。第九章B淋巴細(xì)胞

Blymphocytes主要內(nèi)容第一節(jié)B細(xì)胞的分化發(fā)育

第二節(jié)B細(xì)胞的表面分子及其作用第三節(jié)B細(xì)胞的分類第四節(jié)

B細(xì)胞的功能B細(xì)胞：由哺乳動物骨髓（Bonemarrow）或禽類法氏囊（Bursaoffabricius）中的淋巴干細(xì)胞分化發(fā)育。B淋巴細(xì)胞成熟B細(xì)胞定居于外周淋巴器官的淋巴濾泡內(nèi)。約占外周淋巴細(xì)胞總數(shù)的20%。功能：產(chǎn)生抗體一、BCR的基因結(jié)構(gòu)及其重排二、抗原識別受體多樣性產(chǎn)生的機(jī)制三、B細(xì)胞在中樞免疫器官中的分化發(fā)育四、B細(xì)胞中樞免疫耐受的形成

——B細(xì)胞發(fā)育過程中的陰性選擇

第一節(jié)B細(xì)胞的分化發(fā)育B細(xì)胞表面抗原識別受體（BCR）的表達(dá)自身耐受的形成（陰性選擇）。B淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育主要事件BCR（Bcellreceptor）：B細(xì)胞表面的mIg，輔助B細(xì)胞識別抗原，啟動機(jī)體體液免疫應(yīng)答（B細(xì)胞特有標(biāo)記）。一、B細(xì)胞在中樞免疫器官中的分化發(fā)育1.祖B細(xì)胞（pro-Bcell）2.前B細(xì)胞（pre-Bcell）3.未成熟B細(xì)胞4.成熟B細(xì)胞（初始B細(xì)胞）B細(xì)胞的發(fā)育階段成熟B細(xì)胞表達(dá)μ,δ鏈表達(dá)輕鏈mIgMmIgD輸向外周B細(xì)胞庫未成熟B細(xì)胞表達(dá)μ鏈表達(dá)輕鏈mIgM結(jié)合自身抗原克隆清除中樞免疫耐受B淋巴細(xì)胞在骨髓中的發(fā)育過程前B細(xì)胞表達(dá)μ鏈表達(dá)Pre-B受體祖B細(xì)胞重鏈基因重排Ig/Ig二、BCR的基因結(jié)構(gòu)及其重排1.BCR的胚系基因結(jié)構(gòu)2.BCR的基因重排及其機(jī)制3.等位排斥（allelicexclusion）

同種型排斥（isotypeexclusion）編碼BCR的基因群在胚系階段是分隔的；B細(xì)胞的發(fā)育過程中，數(shù)量眾多的基因片段發(fā)生重排和組合1.BCR的胚系基因結(jié)構(gòu)Ig的基本結(jié)構(gòu)四肽鏈結(jié)構(gòu)，二硫鍵連接兩條相同的重鏈（H鏈）兩條相同的輕鏈（L鏈）氨基端（N端）和羧基端（C端）可變區(qū)和恒定區(qū)抗原膜型分泌型BCRB細(xì)胞漿細(xì)胞抗體知識回顧重鏈基因：14號染色體長臂由V、D、J（編碼可變區(qū)）基因片段和C（編碼恒定區(qū)）基因片段構(gòu)成。輕鏈基因（無D基因片段）

①κ鏈：2號染色體長臂，由V、J、C基因片段構(gòu)成。②λ鏈：22號染色體短臂，由V、J、C基因片段構(gòu)成。(48)(25)1.BCR的胚系基因結(jié)構(gòu)V、D、J基因片段之間由內(nèi)含子隔開，在淋巴細(xì)胞發(fā)育的過程中，通過基因片段的重排，形成VDJ重排后的DNA，轉(zhuǎn)錄為RNA，翻譯為新生多肽，再經(jīng)過加工、糖基化，產(chǎn)生Ig的重鏈或輕鏈。重鏈的基因重排：D基因和J基因—DJ+V基因—VDJ+C基因--VDJC輕鏈的基因重排：V基因和J基因—VJ+C基因—VJC2.BCR的基因重排及其機(jī)制(48)等位排斥(allelicexclusion)：指B細(xì)胞中一條染色體上的重鏈或輕鏈基因重排成功后，抑制另一條同源染色體上等位基因的重排。保證了一個B細(xì)胞克隆只表達(dá)單一特異性的BCR。3、等位排斥和同型排斥2號22號κκ肽同種型排斥

λNO同型排斥(isotypeexclusion)：指κ輕鏈和λ輕鏈之間的排斥，κ鏈基因的表達(dá)成功即抑制λ鏈基因的表達(dá)

。保證了一個Ig分子中只含有一種輕鏈。胚系階段分隔的基因片段，在細(xì)胞發(fā)育過程中通過多種機(jī)制發(fā)生重排，產(chǎn)生數(shù)量巨大的特異性抗原受體，以識別不同的抗原。組合多樣性；連接多樣性；受體編輯（receptorediting）；體細(xì)胞高頻突變（somatichypermutation）。三、抗原識別受體多樣性產(chǎn)生的機(jī)制1、組合多樣性眾多V區(qū)基因片段的組合。在V、（D）、J基因片段重排時，只取用眾多V、（D）、J基因片段中的1個。人VH排列組合的種類可達(dá)：48（VH）×23（VD）×6（VJ）=6624種Vκ和Vλ的組合種類分別達(dá)200和120種。理論上IgV區(qū)基因片段的多樣性約為2.12×106。(48)4866242、連接多樣性重排過程中V、D、J片段之間的連接并不準(zhǔn)確，可以插入、替換或缺失核苷酸，從而產(chǎn)生新的序列，顯著增加BCR和Ig的多樣性。密碼子錯位，后序列不變；框架移位，后序列完全改變；N序列插入：N-核苷酸插入待接DNA斷端。一些完成基因重排并成功表達(dá)BCR（mIgM）的B細(xì)胞識別自身抗原后未被克隆清除，而是發(fā)生RAG基因重新活化，導(dǎo)致輕鏈VJ基因再次重排，合成新的輕鏈，替代自身反應(yīng)性輕鏈，從而使BCR獲得新的特異性。若受體編輯失敗，則細(xì)胞凋亡。3.受體編輯（receptorediting）4、體細(xì)胞高頻突變（somatichypermutation）在已完成基因重排的基礎(chǔ)上，成熟B細(xì)胞在外周淋巴器官的生發(fā)中心接受抗原刺激后，編碼V區(qū)CDR部位的基因序列發(fā)生堿基的點(diǎn)突變?？蓪?dǎo)致抗體的親和力成熟。前B細(xì)胞發(fā)育至未成熟B細(xì)胞，膜表面開始表達(dá)mIgM，接受自身抗原刺激，形成免疫耐受。

①克隆清除（clonedeletion）；②受體編輯③失能四、B細(xì)胞中樞免疫耐受的形成

——B細(xì)胞發(fā)育過程中的陰性選擇

只表達(dá)mIgM的未成熟B細(xì)胞若與骨髓中基質(zhì)細(xì)胞表面的多價自身抗原結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，形成克隆清除，這是B細(xì)胞發(fā)生自身耐受的主要機(jī)制。克隆清除敵我不分------克隆清除未成熟B細(xì)胞與單價的可溶性自身抗原結(jié)合引起mIgM表達(dá)下調(diào)，這類細(xì)胞雖然可以進(jìn)入外周淋巴器官，但對抗原刺激不產(chǎn)生應(yīng)答，稱為失能。失能第二節(jié)B細(xì)胞的表面分子及其作用一、B細(xì)胞抗原受體（BCR）復(fù)合物二、B細(xì)胞共受體三、共刺激分子四、其他表面分子BCR復(fù)合物：mIg+Igα（CD79a）/Igβ（CD79b）。1個mIg分子與2個Igα/Igβ二聚體組成一個BCR復(fù)合物。組成：BCR和Igα/Igβ一、B細(xì)胞抗原受體（BCR）復(fù)合物B細(xì)胞表面最重要的分子具有識別、結(jié)合抗原及傳遞信號的作用1.B細(xì)胞特征性表面標(biāo)記2.能特異性結(jié)合抗原3.不能直接傳遞信號到胞內(nèi)，需要其他分子輔助完成信號傳遞4.分化為漿細(xì)胞后不表達(dá)（一）膜表面免疫球蛋白（mIg）不成熟B細(xì)胞表達(dá)mIgM，成熟B細(xì)胞表達(dá)mIgM和mIgD，漿細(xì)胞不表達(dá)mIg。1.均屬免疫球蛋白超家族2.有胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞質(zhì)區(qū)3.胞質(zhì)區(qū)含有免疫受體酪氨酸激活基序（二）Igα/Igβ（CD79a/CD79b）轉(zhuǎn)導(dǎo)信號B細(xì)胞表面的CD19與CD21及CD81非共價相聯(lián)，形成B細(xì)胞的多分子共受體，能增強(qiáng)BCR與抗原結(jié)合的穩(wěn)定性并與Igα/Igβ共同傳遞B細(xì)胞活化的第一信號。二、B細(xì)胞共受體（CD19/CD21/CD81）CD21表達(dá)于成熟的B細(xì)胞，可結(jié)合C3d，形成CD21-C3d-抗原-BCR復(fù)合物。CD21也是EB病毒（EBV）受體，與病毒選擇性感染相關(guān)增強(qiáng)B細(xì)胞對抗原刺激信號的敏感性：至少提高1000倍。CD19：傳遞活化信號CD21-C3d-抗原-BCR復(fù)合物B細(xì)胞活化的第一信號：BCR復(fù)合物+共受體1.CD40

表達(dá)于成熟B細(xì)胞。配體為CD40L（CD154），表達(dá)于活化T細(xì)胞。兩者結(jié)合是B細(xì)胞活化的第二信號，調(diào)節(jié)B細(xì)胞分化成熟和抗體產(chǎn)生。三、共刺激分子（多種）僅有第一信號不足以讓B細(xì)胞活化，還需要第二信號（共刺激信號）。第二信號主要由Th細(xì)胞和B細(xì)胞表面的共刺激分子相互作用產(chǎn)生。三、共刺激分子2.CD80（B7-1）和CD86（B7-2）

活化的B細(xì)胞高表達(dá)B7分子，其相應(yīng)配體是T細(xì)胞上的CD28和CTLA4。T細(xì)胞是否能激活，取決于APC能否向T細(xì)胞提供協(xié)同刺激信號（第二信號）?；罨疊細(xì)胞是抗原提呈細(xì)胞（APC），通過表達(dá)CD80和CD86，為T細(xì)胞提供協(xié)同刺激信號。CD28提供活化第二信號CTLA-4抑制T細(xì)胞活化信號3.黏附分子ICAM-1（CD54）LFA-1（CD11a/CD18）四、其他表面分子2.CD20B特異性標(biāo)記表達(dá)于漿細(xì)胞外所有B細(xì)胞調(diào)控鈣離子跨膜流動，從而調(diào)控增殖分化，是治療性單抗識別的靶分子。1.CD19B細(xì)胞特異性標(biāo)志；是BCR識別抗原中關(guān)鍵的信號傳遞分子。4.CD32有a、b兩個亞型CD32b即FcγRⅡB，負(fù)反饋調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化及抗體的分泌3.CD22特異表達(dá)于B細(xì)胞胞內(nèi)含有ITAMB細(xì)胞抑制性受體，負(fù)調(diào)控CD19/CD21/CD81共受體四、其他表面分子與B細(xì)胞活化雙信號刺激有關(guān)的CD分子1.BCR-CD792.CD19CD21CD81

3.CD404.CD80（B7-1）

CD86（B7-2）(B7.1/B7.2)一、BCR復(fù)合物+共受體

二、共刺激分子第三節(jié)B細(xì)胞的分類一、根據(jù)所處的活化階段分類二、根據(jù)反應(yīng)特異性分類三、根據(jù)BCR類型分類一、根據(jù)所處的活化階段分類指從未接受過抗原刺激的B細(xì)胞。初始B細(xì)胞接受抗原刺激分化而成，介導(dǎo)再次免疫應(yīng)答。是抗體的主要來源，并介導(dǎo)體液免疫的發(fā)生。注：抗體不能直接殺死靶細(xì)胞，調(diào)理作用，激活補(bǔ)體等方式1.初始B細(xì)胞2.記憶B細(xì)胞3.效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞）根據(jù)是否表達(dá)CD5分子，分為CD5+B1

細(xì)胞和CD5-B2細(xì)胞兩個亞群。B1細(xì)胞表面表達(dá)CD5，由于發(fā)育中出現(xiàn)較早，故稱為B1細(xì)胞，主要產(chǎn)生低親和力的IgM，為多反應(yīng)性抗體，發(fā)揮固有免疫功能。B2細(xì)胞即為通常所指的B細(xì)胞，個體發(fā)育中出現(xiàn)較晚，產(chǎn)生特異性抗體，發(fā)揮適應(yīng)性免疫功能（體液免疫）。二、根據(jù)反應(yīng)特異性分類B1細(xì)胞和B2細(xì)胞亞群的比較三、根據(jù)BCR類型分類2.mIgG+/mIgA+/mIgE+B細(xì)胞已活化并已分別發(fā)生過類別轉(zhuǎn)換的B細(xì)胞。未成熟B細(xì)胞與初始B細(xì)胞都是mIgM+B細(xì)胞。1.mIgM+B細(xì)胞43Ig的類別轉(zhuǎn)換（Igclassswitching）Ig分子的可變區(qū)不變，但其重鏈恒定區(qū)發(fā)生改變，即結(jié)合抗原的特異性相同，而Ig類別發(fā)生變化的過程，稱為Ig的類別轉(zhuǎn)換。IgM→→IgG、IgA、IgE，抗體的V區(qū)不發(fā)生改變。第四節(jié)B細(xì)胞的功能1.產(chǎn)生抗體