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實(shí)驗(yàn)二食物抗壞血酸含量的測(cè)定第1頁(yè)/共12頁(yè)目的:
新鮮食物中的抗壞血酸主要以還原型形式存在,測(cè)定還原型抗壞血酸可粗略了解該食品中抗壞血酸的濃度。通過本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),使學(xué)生掌握還原型抗壞血酸的測(cè)定原理及其測(cè)定方法。一、還原型抗壞血酸的測(cè)定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)第2頁(yè)/共12頁(yè)實(shí)驗(yàn)原理用標(biāo)準(zhǔn)碘酸鉀溶液標(biāo)定抗壞血酸溶液;用已標(biāo)定的抗壞血酸溶液標(biāo)定2,6-二氯酚靛酚染料,再用此染料滴定樣品中的抗壞血酸。第3頁(yè)/共12頁(yè)3C6H6O6+KIO3→C6H4O6+KI+3H2OH0-C=C-OH具有強(qiáng)還原性,極容易被氧化,能把+5價(jià)的碘還原成-1價(jià)的碘離子用標(biāo)準(zhǔn)碘酸鉀溶液標(biāo)定抗壞血酸溶液IO3-+5I-+6H+=3I2+3H2O
第4頁(yè)/共12頁(yè)滴定樣品標(biāo)定溶液第5頁(yè)/共12頁(yè)【實(shí)驗(yàn)儀器與試劑】1.儀器:組織搗碎機(jī)、5.0ml微量滴定管、100m1容量瓶、50m1具塞量筒。2.試劑(1)1%草酸溶液、2%草酸溶液、白陶土。(2)0.01mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:(3)0.0001mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液:
(4)1%淀粉溶液:(5)6%碘化鉀溶液:(6)抗壞血酸溶液:(7)碳酸氫鈉溶液:(8)2,6-二氯酚靛酚溶液:第6頁(yè)/共12頁(yè)【操作步驟】(1)標(biāo)定抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:吸取抗壞血酸溶液(20μg/m1)5.0m1于錐形瓶中,加入6%碘化鉀溶液0.5m1,1%淀粉溶液3滴,再以0.000lmol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,終點(diǎn)為藍(lán)色。
V1-滴定時(shí)所消耗0.001mol/L碘酸鉀溶液的體積(ml)V2-所取抗壞血酸溶液的體積(ml)0.0528-0.0001mol/L的碘酸鉀1.0ml相當(dāng)于抗壞血酸0.0528mg第7頁(yè)/共12頁(yè)(2)標(biāo)定2,6-二氯酚靛酚溶液:取已標(biāo)定的抗壞血酸溶液5.0m1,1%草酸溶液5.0m1于錐形瓶中,搖勻,用欲標(biāo)定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至呈淡紅色,15s不褪色為止。C-抗壞血酸溶液的濃度(mg/ml)V1-抗壞血酸溶液的體積(ml) V2-滴定時(shí)消耗的2,6-二氯酚靛酚的體積(ml)第8頁(yè)/共12頁(yè)2.樣品測(cè)定
(1)取樣品100g剪碎后置搗碎機(jī)中,按1:1(w/v)加入2%草酸制成勻漿。(2)稱取勻漿10g于小燒杯中,倒入50m1具塞量筒中,用1%草酸溶液沖洗燒杯,稀釋至刻度,振搖。如有泡沫影響定容可加數(shù)滴戊醇。第9頁(yè)/共12頁(yè)2.樣品測(cè)定
(3)將振搖后上層清液約20m1倒入100m1錐形瓶中,加白陶士一勺,振搖數(shù)次,使充分脫色,靜置。同時(shí),取一錐形瓶,加入1%草酸20m1,加白陶士一勺,振搖數(shù)次作為空白。(4)
取靜置后上清液過濾,吸取濾液5.0m1,以標(biāo)定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定,至溶液呈淡紅色,l5s內(nèi)不變化,記錄染料的用量。第10頁(yè)/共12頁(yè)【實(shí)驗(yàn)計(jì)算】式中:V0-空白實(shí)驗(yàn)消耗的染料體積(m1)V1-滴定樣品消耗的染料體積(ml)T-單位體
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