家兔腸缺血再灌注損傷

家兔腸缺血再灌注損傷第1頁/共19頁【理論復(fù)習(xí)】缺血再灌注損傷的定義缺血再灌注與缺血再灌注損傷的區(qū)別影響缺血再灌注損傷發(fā)生的因素缺血再灌注損傷的發(fā)生機制第2頁/共19頁掌握缺血再灌注損傷模型的復(fù)制，比較缺血損傷和缺血再灌注損傷的區(qū)別觀察缺血再灌注損傷的表現(xiàn)，理解缺血再灌注損傷發(fā)生的機制

【目的要求】第3頁/共19頁【實驗動物】

家兔（性別、體重）

第4頁/共19頁【實驗設(shè)計原理】通過腸系膜上動脈結(jié)扎，即SMAO(SuperiorMesenteryArteryOcclusion)來阻斷部分腸的血液供應(yīng)一段時間后再恢復(fù)血流灌注，以復(fù)制腸缺血/再灌注損傷的動物模型，探討缺血/再灌注損傷的發(fā)生機制第5頁/共19頁Ⅰ組：持續(xù)缺血組結(jié)扎腸系膜上動脈

2hⅡ組：再灌損傷組結(jié)扎腸系膜上動脈

1h，再恢復(fù)血流1h

【實驗分組】第6頁/共19頁【實驗方法與步驟】1.稱重2.全麻（耳緣靜脈注射3%戊巴妥鈉1ml/kg）★注意：從耳緣靜脈的遠心端開始注射，排盡氣泡，速度不宜太快★麻醉效果：角膜反射基本消失，鉗夾家兔大腿肌肉無反應(yīng)第7頁/共19頁3.仰臥固定（背部交叉）、備皮頸部正中（甲狀軟骨下緣→胸骨上切跡）腹部正中（劍突下1.5cm起向下5cm）★注意：平貼皮膚剪毛，勿拎起皮膚！第8頁/共19頁4.頸部正中切口行動脈插管切口范圍：頸部正中，甲狀軟骨下緣→胸骨上切跡，長約5cm分離左側(cè)頸總動脈：胸骨舌骨肌與胸鎖乳突肌之間深面的頸動脈鞘內(nèi)，與氣管平行，顏色鮮紅、較細、觸之有搏動感，長約2-3cm，穿線備用第9頁/共19頁注意：（1）鈍性分離（2）辨清頸A鞘內(nèi)的血管神經(jīng)血管插管先結(jié)扎遠心端，后夾閉近心端，剪口部位盡量靠近遠心端，成45度角朝向近心端剪一小口，約為管徑的1/3-1/2，插管方向朝向近心端，插入1-1.5cm第10頁/共19頁【插管的注意事項】插管內(nèi)事先應(yīng)加入少量肝素以防凝血；排凈氣泡，記錄前應(yīng)關(guān)閉三通管插管易滑脫，應(yīng)雙線固定，結(jié)扎牢靠勿使插管尖端與血管壁形成角度，避免刺破血管第11頁/共19頁5.腹部正中切口：腹正中線自劍突下1.5cm起向下做5cm切口※6.尋找腸系膜上動脈：將家兔腹腔內(nèi)臟左移，找到齊右腎門對側(cè)垂直向腹主動脈分出的腸系膜上動脈，穿雙線備用第12頁/共19頁腸系膜上動脈示意圖第13頁/共19頁1.移動內(nèi)臟時，動作要輕柔2.分離腸系膜上A時需小心細致，不要使用銳利器械，以免損傷血管造成大出血3.腸系膜上A夾閉要徹底，缺血再灌注組結(jié)扎時注意墊橡皮管，恢復(fù)血流灌流（復(fù)流）要完全【注意】第14頁/共19頁6.分組進行試驗并記錄以下指標

第15頁/共19頁【結(jié)果分析】各組的模型復(fù)制是否成功？缺血-再灌注血壓變化的機制是什么？各組動物指標變化的機制是什么？第16頁/共19頁（1）盡早恢復(fù)血流灌流，縮短缺血時間（2）再灌注時遵循低溫、低壓、低鈣的原則（3）清除活性氧（4）Ca2+拮抗劑的使用（5）減少白細胞的激活和炎性介質(zhì)的釋放（6）補充能量及促進能量生成（7）啟動細胞內(nèi)源性保護機制【如何防治I/R】第17頁/共19頁1、實驗?zāi)康?、實驗原理3、實