動物檢疫學高致病性禽流感演示文稿

動物檢疫學高致病性禽流感演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有62頁\編輯于星期五動物檢疫學高致病性禽流感現(xiàn)在是2頁\一共有62頁\編輯于星期五3高致病性禽流感是禽流行性感冒的簡稱，它是由A型流感病毒引起的一種禽類傳染病。禽流感病毒感染后可以表現(xiàn)為輕度的呼吸道和消化道癥狀，死亡率較低；或表現(xiàn)為較嚴重的全身性、出血性、敗血性癥狀，死亡率較高?，F(xiàn)在是3頁\一共有62頁\編輯于星期五4

非致病性禽流感

不會引起明顯癥狀，僅使染病的禽鳥體內產生病毒抗體。

低致病性禽流感

可使禽類出現(xiàn)輕度呼吸道癥狀,食量減少、產蛋量下降，出現(xiàn)零星死亡。

高致病性禽流感

最為嚴重，發(fā)病率和死亡率高。感染的雞群常?！叭姼矝]”。

按病原體的致病性，禽流感可分為:現(xiàn)在是4頁\一共有62頁\編輯于星期五5高致病性禽流感因其在禽類中傳播快、危害大、病死率高等特點，被國際獸疫局定為A類傳染病，又稱真性雞瘟或歐洲雞瘟?，F(xiàn)為通報性疫病，我國將其列為一類動物疫病。現(xiàn)在是5頁\一共有62頁\編輯于星期五6近年來出現(xiàn)了禽流感病毒感染人的事例：1997年中國香港禽流感爆發(fā)，有12人感染H5N1型禽流感病毒，6人死亡，這是世界上首次證實禽流感感染人類；2003年4月荷蘭發(fā)生H7N7型禽流感，人類感染者達89人，并出現(xiàn)了死亡病例；2003年11月27日，香港一男童感染禽流感；現(xiàn)在是6頁\一共有62頁\編輯于星期五72003年12月至2004年2月，韓國、中國臺灣、日本、越南、印尼、巴基斯坦、老撾、泰國、中國大陸、美國和加拿大等國家和地區(qū)相繼爆發(fā)禽流感，其中在越南和泰國又出現(xiàn)了禽流感（H5N1）感染人類的病例，并出現(xiàn)了死亡。2004年禽流感的大爆發(fā)，給世界人民帶來極大的恐慌?，F(xiàn)在是7頁\一共有62頁\編輯于星期五82005年4月，我國青海湖自然保護區(qū)候鳥感染H5N1毒株，約6000多只候鳥死亡。2006年亞洲、歐洲、亞洲均有H5N1亞型HPAI爆發(fā)。最近國內外有H5N1血清型引起的禽流感發(fā)病率和死亡率都很高，危害巨大?，F(xiàn)在是8頁\一共有62頁\編輯于星期五9病原禽流感病毒屬于正粘病毒科流感病毒屬的A型流感病毒。病毒的基因組屬于單股負鏈RNA。典型的A型流感病毒粒子呈圓球形，有囊膜，對乙醚、氯仿、丙酮等脂溶劑敏感?，F(xiàn)在是9頁\一共有62頁\編輯于星期五10雞瘟病毒現(xiàn)在是10頁\一共有62頁\編輯于星期五11根據(jù)流感病毒的血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)的抗原性差異，可將其分為不同的亞型。迄今為止，A型禽流感病毒的HA已發(fā)現(xiàn)16種，NA有9種，分別以H1--H16、N1—N9命名。所有的禽流感病毒均屬A型，不同毒株的致病性有差異。現(xiàn)在是11頁\一共有62頁\編輯于星期五12禽流感病毒能在雞胚上生長繁殖。以尿囊腔、羊膜腔或絨毛囊膜上感染時，強毒株病毒初代感染雞胚后26-36h死亡。禽流感病毒通過雞胚繼代后增強毒力。除雞胚外，本病毒也能感染鴨胚和鴿胚。犬腎細胞（MDCK）廣泛用于流感病毒的分離培養(yǎng)。非洲綠猴腎細胞（Vero）也適用于A型流感病毒的分離培養(yǎng)?，F(xiàn)在是12頁\一共有62頁\編輯于星期五13流感病毒能凝集雞、豚鼠、貓、小白鼠、馬、綿羊、人和其他動物紅細胞。對干燥和低溫的抵抗力強。低溫和凍干狀態(tài)下可保存病毒。不耐熱，病毒經(jīng)55℃、1h滅活，60℃經(jīng)20min滅活，100℃2分鐘即被滅活?，F(xiàn)在是13頁\一共有62頁\編輯于星期五14常用消毒劑容易將其滅活，如氧化劑、稀酸、漂白粉和碘劑等都能迅速破壞其活性。現(xiàn)在是14頁\一共有62頁\編輯于星期五15流行病學各種家禽（火雞、雞、珠雞、石雞、鶴鶉、雉、鵝及鴨）和野禽（包括鴨、鵝、磯鷸、燕鷗、鷺、海鷗、天鵝等）均易感。從遷徙水禽，尤其是鴨中分離的病毒最多；流感在家禽中對火雞和雞的危害最嚴重。

現(xiàn)在是15頁\一共有62頁\編輯于星期五16現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，禽流感病毒能直接感染人，并可引起發(fā)病甚至死亡。在實驗室人工試驗中，豬、水貂、猴、貓等均可被禽流感病毒感染?，F(xiàn)在是16頁\一共有62頁\編輯于星期五17禽流感病毒可通過消化道和呼吸道進入人體傳染給人，也可經(jīng)過眼結膜和破損皮膚引起感染。人類直接接觸受禽流感病毒感染的家禽及其糞便或直接接觸禽流感病毒也可以被感染，并可引起發(fā)病甚至死亡?，F(xiàn)在是17頁\一共有62頁\編輯于星期五18流行特點：發(fā)病急、傳播快、流行范圍廣，常呈地方性或大面積流行，其中高致病性禽流感的發(fā)病率與死亡率均可高達100%。

該病一年四季均可流行，但以冬季和氣溫驟冷驟熱的季節(jié)更易暴發(fā)?，F(xiàn)在是18頁\一共有62頁\編輯于星期五19臨床檢疫

1、臨床癥狀禽流感的癥狀依感染禽類的品種、年齡、性別、并發(fā)感染程度、病毒毒力和環(huán)境因素等而有所不同，主要表現(xiàn)為呼吸道、消化道、生殖系統(tǒng)或神經(jīng)系統(tǒng)的異?！，F(xiàn)在是19頁\一共有62頁\編輯于星期五20病雞頭部腫脹，冠和肉髯發(fā)黑，眼分泌物增多，眼結膜潮紅、水腫，羽毛蓬松無光澤，體溫升高；下痢，糞便黃綠色并帶多量的黏液或血液；呼吸困難，歪頭；產蛋率急劇下降或幾乎完全停止，蛋殼變薄、褪色、無殼蛋、畸形蛋增多；雞腳鱗片下呈紫紅色或紫黑色。在發(fā)病后的5d～7d內死亡率幾乎達到100%。少數(shù)病程較長或耐過未死的病雞出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，包括轉圈、前沖、后退、頸部扭歪或后仰望天等。

現(xiàn)在是20頁\一共有62頁\編輯于星期五21現(xiàn)在是21頁\一共有62頁\編輯于星期五22肉髯發(fā)紺現(xiàn)在是22頁\一共有62頁\編輯于星期五23雞冠和肉垂腫脹發(fā)紺現(xiàn)在是23頁\一共有62頁\編輯于星期五24現(xiàn)在是24頁\一共有62頁\編輯于星期五25現(xiàn)在是25頁\一共有62頁\編輯于星期五26腳磷片下出血現(xiàn)在是26頁\一共有62頁\編輯于星期五27現(xiàn)在是27頁\一共有62頁\編輯于星期五28現(xiàn)在是28頁\一共有62頁\編輯于星期五29神經(jīng)癥狀

呼吸癥狀現(xiàn)在是29頁\一共有62頁\編輯于星期五30禽流感病鴨具有神經(jīng)癥狀現(xiàn)在是30頁\一共有62頁\編輯于星期五31現(xiàn)在是31頁\一共有62頁\編輯于星期五322、病理變化

最急性型病雞常無眼觀變化。急性者可見頭部和顏面浮腫，雞冠、肉髯腫大達三倍以上；皮下有黃色膠樣浸潤、出血，胸、腹部脂肪有紫紅色出血斑；心包積水，心外膜有點狀或條紋狀壞死，心肌軟化；病雞胸部肌肉有出血點或出血斑。消化道變化表現(xiàn)為腺胃乳頭水腫、出血，肌胃角質層下出血，肌胃與腺胃交界處呈帶狀或環(huán)狀出血；肝、脾、腎瘀血腫大，有灰黃色小壞死灶；現(xiàn)在是32頁\一共有62頁\編輯于星期五33呼吸道有大量炎性分泌物或灰黃色干酪樣壞死；胸腺萎縮，有不同程度的點、斑狀出血；法氏囊萎縮或呈黃色水腫，有充血、出血；母雞卵泡充血、出血，卵黃液變稀薄；嚴重者卵泡破裂，卵黃散落到腹腔中，形成卵黃性腹膜炎，腹腔中充滿稀薄的卵黃。輸卵管水腫、充血，內有漿液性、黏液性或干酪樣物質?，F(xiàn)在是33頁\一共有62頁\編輯于星期五34現(xiàn)在是34頁\一共有62頁\編輯于星期五35現(xiàn)在是35頁\一共有62頁\編輯于星期五36現(xiàn)在是36頁\一共有62頁\編輯于星期五37現(xiàn)在是37頁\一共有62頁\編輯于星期五38現(xiàn)在是38頁\一共有62頁\編輯于星期五39現(xiàn)在是39頁\一共有62頁\編輯于星期五40現(xiàn)在是40頁\一共有62頁\編輯于星期五41現(xiàn)在是41頁\一共有62頁\編輯于星期五42腳鱗出血（嚴重病例）現(xiàn)在是42頁\一共有62頁\編輯于星期五43發(fā)病雞胸肌出血產蛋雞輸卵管中的粘液滲出物流感病雞心冠脂肪出血現(xiàn)在是43頁\一共有62頁\編輯于星期五44現(xiàn)在是44頁\一共有62頁\編輯于星期五45現(xiàn)在是45頁\一共有62頁\編輯于星期五46禽流感病鴨胰腺白壞死點

現(xiàn)在是46頁\一共有62頁\編輯于星期五47鵝流感胰現(xiàn)在是47頁\一共有62頁\編輯于星期五48實驗室檢疫診斷技術：我國已建立瓊脂擴散（AGP）技術、亞型分型技術、病毒分子診斷與檢測技術。國家監(jiān)測標準：《流行性感冒診斷標準及處理原則》

現(xiàn)在是48頁\一共有62頁\編輯于星期五491、樣品采集：（1）病料樣品：至少從5只病禽和病死禽中采集病料樣品。樣品應包括：泄殖腔（新鮮糞尿樣）棉拭子和氣管棉拭子（置于緩沖液體中）；氣管和肺的混樣；腸管及內容物的混樣；肝、脾、腎、腦等其他組織樣品（不能混樣）?，F(xiàn)在是49頁\一共有62頁\編輯于星期五50組織和氣管拭子懸液中加入青霉素（2000IU/ml）、鏈霉素（2mg/ml）或慶大霉素（50μg/ml）。腸管及內容物、糞便樣品和泄殖腔棉拭子所用的抗生素濃度應提高5倍?，F(xiàn)在是50頁\一共有62頁\編輯于星期五51（2）血樣：分別采集至少10只病禽的，并單獨存放，不能混合?，F(xiàn)在是51頁\一共有62頁\編輯于星期五522、電鏡觀察禽流感病毒一般為球形，直徑為80~120nm，但也常有同樣直徑的絲狀形態(tài)，長短不一。病毒表面有10~12nm的密集釘狀物或纖突覆蓋，病毒囊膜內有螺旋形核衣殼。兩種不同形狀的表面釘狀物是HA（棒狀三聚體）和NA（蘑菇形四聚體）。

現(xiàn)在是52頁\一共有62頁\編輯于星期五533、病毒分離鑒定將感染雞胚或病禽氣管、脾、肺、腎和腦等可用磷酸緩沖液或肉湯培養(yǎng)基制成10倍乳劑，加抗菌素抑菌；如系泄殖腔拭子，可將拭子在溶液中浸漬后去掉拭子，然后用2500-3000r/min離心30min，除殘渣，濾過液接種9-11d的SPF雞胚尿囊腔分離病毒。現(xiàn)在是53頁\一共有62頁\編輯于星期五54在35-37℃孵化箱內孵育，18h后每8h觀察雞胚死亡情況。病毒收獲：無菌收取18h以后的死胚及96h仍存活的雞胚尿囊液，作血凝試驗，以鑒定病毒。陽性反應說明可能有正粘病毒科的流感病毒；若無血凝活性或血凝價很低，則用尿囊液繼續(xù)傳2-3代，并重復以上血凝試驗，若仍陰性，則認為病毒分離陰性。

現(xiàn)在是54頁\一共有62頁\編輯于星期五554、血清學檢查瓊脂擴散試驗（AGP）：用于流感病毒型的鑒定，是用病毒的核蛋白抗原檢查血清中的抗體。既可以定性(如免疫雙擴散及免疫電泳中以沉淀線判定)，又可以定量(如單輻射擴散)。比較簡便、快捷?，F(xiàn)在是55頁\一共有62頁\編輯于星期五56血凝試驗（HA）與血凝抑制試驗（HI）：證實流感病毒的血疑活性及排除NDV，也可用病毒抗原鑒定流感病毒的亞型。簡單的方法是：取1滴1：10稀釋的正常雞血清(最好是SPF雞)和1滴ND抗血清，分別滴于瓷板上，再各加1滴有血凝活性的雞胚尿囊液，混勻后各加1滴5﹪的雞紅細胞懸液，若兩份血清均出現(xiàn)血凝現(xiàn)象，則表明尿囊液中不含有新城疫病毒(NDV)；如果ND抗血清出現(xiàn)HI現(xiàn)象，表明尿囊液中含NDV?，F(xiàn)在是56頁\一共有62頁\編輯于星期五57神經(jīng)氨酸酶抑制試驗（NIT）：

利用流感病毒的糖蛋白神經(jīng)氨酸酶與底物的反應來檢測病毒的存在與否。用于鑒定AIV另一種表面抗原——神經(jīng)氨酸酶（NA）的亞型?，F(xiàn)在是57頁\一共有62頁\編輯于星期五58具體方法是：在96孔聚苯乙烯平板反應孔中分別加入已稀釋好的羊膜尿囊液25μl，然后分別加入1-9型已處理的NA抗血清25μl，振蕩混勻，室溫靜置1h，每孔加入25μl胎球蛋白，37℃孵育3h，每孔加入25μl砷試劑至最先出現(xiàn)棕色的孔褪色，最后每孔加入100μl1.6%硫酸巴比妥，將反應板用56℃水漂洗30-60min后判定結果，呈粉紅色為抗血清NI陰性，無粉紅色為抗血清NI陽性。根據(jù)結果判定AIV亞型。NIT實驗一般需在AI中心實驗室方可進行?，F(xiàn)在是58頁\一共有62頁\編輯于星期五59ELISA：具有較高的敏感性，既可以檢測抗體，又可以檢測抗原。尤其適合于大批樣品的血清學調查，可以標準化而且結果易于分析。在流感的控制、撲滅、檢疫中很有用途?，F(xiàn)在是59頁\一共有62頁\編輯于星期五60中和試驗以中和試驗(NT)來鑒定或滴定流感病毒時，常用雞胚或組織培養(yǎng)細胞，操作方法與其他病毒(如NDV)的中和試驗相同。取9-10日齡雞胚接種后37℃孵育3-4d，雞胚死亡出現(xiàn)HA活性