磺胺類和喹諾酮類藥物的分析課件

第八章

磺胺類和喹諾酮類藥物的分析第一節(jié)磺胺類藥物的分析對氨基苯磺酰胺衍生物N1取代物：母體結(jié)構(gòu)中磺酰氨基上的一個(gè)氫原子被其它基團(tuán)取代后的衍生物。N4取代物：母體結(jié)構(gòu)中對位氨基上的一個(gè)氫原子被其他基團(tuán)取代后的衍生物。N1、N4取代物：母體結(jié)構(gòu)中N1和N4上各有一個(gè)氫原子被取代的衍生物。一、常用藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)常用藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)與芳醛在酸性溶液中縮合：生成有色的希夫堿。N1上的芳雜環(huán)取代基具有堿性，可與有機(jī)堿沉淀劑反應(yīng)：生成沉淀。乙?；磻?yīng)：芳伯氨基經(jīng)醋酐?；螅匆阴；?，在顯微鏡下觀察，都具有特殊的結(jié)晶形狀，可做鑒別反應(yīng)。性質(zhì)二、磺胺類藥物的鑒別1．化學(xué)鑒別法（1）銅鹽反應(yīng)可初步區(qū)別結(jié)構(gòu)類似的磺胺藥表8-1磺胺類藥物與銅鹽的反應(yīng)藥物名稱加入硫酸銅試液后的現(xiàn)象磺胺甲噁唑磺胺異噁唑磺胺嘧啶磺胺多辛生成草綠色沉淀呈淡棕色，放置析出暗綠色絮狀沉淀生成黃綠色沉淀，放置后變?yōu)樽仙牲S綠色沉淀，放置后變淡藍(lán)色（3）芳伯氨基與芳醛的縮合反應(yīng)芳醛：對二甲氨基苯甲醛、香草醛、水楊醛等如：與對二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中生成黃色希夫氏堿。N1取代基為含氮雜環(huán)，有一定堿性，可以和有機(jī)堿沉淀劑生成沉淀。（4）N1取代基的反應(yīng)2．紅外光譜識(shí)別法紅外法具有指紋性，在一定波長下，磺胺類藥物各具有其獨(dú)特的吸收光譜圖，可鑒別本類藥物的特征官能團(tuán)。圖8-1磺胺嘧啶的紅外吸收光譜2．有關(guān)物質(zhì)的檢查目的：控制藥物的純度。方法：薄層色譜法，主成分自身對照法雜質(zhì)的限度：0.5％。3．干燥失重105℃干燥至恒重，減失重量≤0.5％。4．酸度取本品2.0g，加水100mL，置水浴中振搖加熱10分鐘，立即放冷，濾過；分取濾液25mL，加酚酞指示液2滴與氫氧化鈉滴定(0.1mol/L)0.20mL，應(yīng)顯粉紅色。5．熾灼殘?jiān)翰坏眠^0.1％。6．重金屬：不得過百萬分之十。四、含量測定1．亞硝酸鈉滴定法測定原理：利用磺胺類藥物的N1取代物分子中含有芳伯氨基，在0~5℃低溫狀態(tài)下、鹽酸介質(zhì)中可與亞硝酸鹽發(fā)生重氮化反應(yīng)，測定磺胺類藥物的含量。

（1）加入適量KBr（2）酸的種類及用量

芳胺∶鹽酸＝1∶2.5~6mol（3）室溫條件下滴定（4）滴定速度（5）指示終點(diǎn)的方法藥典采用永停法

計(jì)算公式：主要條件：2．非水溶液滴定法含磺酰亞氨基－SO2－NH－R，其N上的H具有一定酸性（R吸電子效應(yīng)越強(qiáng)，N上的H越易失去，酸性越強(qiáng)），故可用非水酸堿滴定法測定。取供試品約0.5g，精密稱定，加二甲基甲酰胺40mL溶解后，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液恰顯藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1mL甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于26.73mg的C11H13N3O3S?；前樊悋f唑（1）測定結(jié)果準(zhǔn)確，終點(diǎn)明顯。（2）甲醇鈉滴定溶液應(yīng)臨用前標(biāo)定。（3）滴定最好在隔絕空氣中二氧化碳的情況下進(jìn)行。計(jì)算公式：討論：磺胺嘧啶片的溶出度測定

取供試品照溶出度測定漿法，以鹽酸溶液(9→1000)1000mL為溶劑，轉(zhuǎn)速為100r/min，依法操作，經(jīng)60min，取溶液5mL濾過，精密量取續(xù)濾液1mL，置50mL量瓶中，加0.01mol/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，在254nm的波長處測定吸收度，按磺胺嘧啶（C10Hl0N4O2S）的吸收系數(shù)（）為866計(jì)算出每片的溶出量，限度為標(biāo)示量的70％，應(yīng)符合規(guī)定。計(jì)算公式如下：檢查方法：復(fù)方磺胺甲噁唑片含量測定處方組成：磺胺甲噁唑400mg甲氧芐啶測定80mg輔料適量測定方法：雙波長分光光度法雙波長分光光度法(雙波長等吸收法)

當(dāng)光譜重疊時(shí)，在其光譜中選擇兩波長，在選定的波長處，干擾組分有相同的吸收；被測組分與干擾組分的吸收有足夠大的差別。則兩波長處吸光度的差值與被測組份的濃度成正比?；前芳讎f唑測定：因?yàn)榛前芳讎f唑在257nm的波長處有最大吸收,甲氧芐啶在此波長處吸收較小，并在304nm波長附近有一等吸收點(diǎn)，故選擇257nm為測定波長（λ2），在304nm波長附近選擇等吸收波長為參比波長（λ1）。甲氧芐啶測定：由甲氧芐啶紫外吸收圖譜可知，在239nm波長處甲氧芐啶有較大吸收，而此波長是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波長附近有一等吸收點(diǎn)，故選擇239nm作為甲氧芐啶的測定波長，在295nm波長附近選擇等吸收波長作為參比波長。波長選擇精密稱取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑?qū)φ掌?0mg與甲氧芐啶對照品10mg，分別置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別作為對照品溶液(1)與對照品溶液(2)取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于磺胺甲噁唑50mg與甲氧芐啶10mg），置100ml量瓶中，加乙醇適量，振搖15分鐘使磺胺甲噁唑與甲氧芐啶溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品母液。對照品溶液配制供試品母液配制計(jì)算公式式中，△AX為供試品溶液稀釋液的吸光度差值；△AR為對照品溶液稀釋液的吸光度差值；

mR為SMZ對照品的稱量（mg）

m為樣品的稱量（g）；為平均片重（g/片）。

第二節(jié)氟喹諾酮類藥物的分析

喹諾酮類藥物是一類化學(xué)合成抗菌藥，由于具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)、使用安全及易于制造等優(yōu)點(diǎn)，發(fā)展迅速。基本母核結(jié)構(gòu)：6-氟-4-喹諾酮-3-羧酸一、幾種常用藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)

環(huán)丙沙星

氧氟沙星常用藥物結(jié)構(gòu)諾氟沙星培氟殺星理化性質(zhì)顯酸堿兩性氟喹諾酮類藥物結(jié)構(gòu)分子中都含有羧基及堿性氮原子溶解性易溶于堿和酸，在水和乙醇中極微溶解。紫外區(qū)有特征吸收具有共軛系統(tǒng)二、諾氟沙星的分析諾氟沙星：臨床常用消炎藥化學(xué)名：1-乙基-6-氟-4-氧代-l,4-二氫-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸結(jié)構(gòu)：性質(zhì)：結(jié)構(gòu)中有羧基顯酸性，有哌嗪基顯堿性，是兩性化合物。1．鑒別試驗(yàn)（1）N1為叔氨基

（2）F6顯有機(jī)氟化物的性質(zhì)

（3）紫外吸收特征：5g/mL本品的0.4％NaOH溶液，λmax＝273nm（4）采用紅外光譜、薄層色譜、HPLC鑒別2．檢查試驗(yàn)（1）溶液的澄清度：目的：控制堿不溶性雜質(zhì)的限量檢查方法：比濁法指標(biāo)要求：5份均應(yīng)澄清；如顯渾濁，與2號濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，均不得更濃。（2）氟：限度：含氟量≥5.4％（理論5.95％）偏低原因：原料制備、副反應(yīng)（3）有關(guān)物質(zhì)：HPLC法

限度：雜質(zhì)A≤0.2%。其他單個(gè)雜質(zhì)≤0.5%。其他各雜質(zhì)的和≤1.0%。（4）干燥失重：本品易吸收水分。

限度：105℃，減失重量不得過1.0%（5）熾灼殘?jiān)K坩堝

限度：遺留殘?jiān)坏眠^0.1%。（6）重金屬

限度：≤15ppm。3．含量測定

原理：利用分子中有哌嗪基團(tuán)顯堿性。

測定方法：取本品約0.25g，精密稱定，加冰醋酸20mL溶解后，加橙黃Ⅳ指示劑，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.1mol/L)滴定至溶液顯紫紅色，并將滴定結(jié)果用空白校正。

注意事項(xiàng)：嚴(yán)格控制醋酐用量

諾氟沙星分子中哌嗪基為仲胺，容易發(fā)生乙酰化反應(yīng)。非水堿量法色譜條件：色譜柱：C18柱流動(dòng)相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.1）-乙腈（87∶13）檢測波長：278nm系統(tǒng)適用性：

諾氟沙星峰與與環(huán)丙沙星峰和依諾沙星峰的分離度均應(yīng)不小于2.0定量方法：外標(biāo)法

高效液相色譜法三、環(huán)丙沙星的分析

化學(xué)名：1-環(huán)丙基-6-氟-l,4-二氫-4-氧-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧基結(jié)構(gòu)：與諾氟沙星的結(jié)構(gòu)區(qū)別是N1上的取代基不同

1．鑒別試驗(yàn)紅外光譜法：與對照的圖譜一致。

TLC法：供試品所顯主斑點(diǎn)的顏色位置與對照品的主斑點(diǎn)相同。

水溶液顯氟化物的鑒別反應(yīng)。

HPLC法：供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。2．檢查試驗(yàn)（1）結(jié)晶性：應(yīng)符合規(guī)定。（2）水分：卡爾-費(fèi)休法

含水量應(yīng)在4.7％～6.7％。（3）有關(guān)物質(zhì)：高效液相色譜法

雜質(zhì)A≤0.3%，雜質(zhì)B,C,D,E均≤0.2%，其他單個(gè)雜質(zhì)≤0.2%，各雜質(zhì)的和≤0.5%。（4）溶液的澄清度與顏色：比色法

應(yīng)澄清無色；如顯色，與黃色或黃綠色4號標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。（5）干燥失重：五氧化二磷干燥法120℃減壓干燥6hr，減失重量≤1.0%（6）)熾灼殘?jiān)恒K坩堝遺留殘?jiān)坏眠^0.1%。（7）重金屬：

含重金屬≤20ppm。色譜條件：色譜柱：C18柱流動(dòng)相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙