培養(yǎng)基的制備課件

第三章培養(yǎng)基的制備主要內(nèi)容第一節(jié)、培養(yǎng)基的類型及功能第二節(jié)、工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基第三節(jié)、淀粉水解糖的制備第四節(jié)、其他原料一、培養(yǎng)基的類型和用途二、培養(yǎng)基的選擇三、培養(yǎng)基的配制原則四、培養(yǎng)基成分配比的選擇培養(yǎng)基：是提供微生物生長繁殖和生物合成各種代謝產(chǎn)物所需要的、按一定比例配制的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。發(fā)酵培養(yǎng)基的作用：滿足菌體的生長促進產(chǎn)物的形成第一節(jié)培養(yǎng)基的類型及功能按物理狀態(tài)不同劃分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑，使其成為固體狀態(tài)，瓊脂含量一般為1.5%-2.0%瓊脂含量一般為0.2%-0.7%不加任何凝固劑半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基常用來進行微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)及菌種保藏

觀察微生物的運動特征、分類鑒定及噬菌體效價滴定

大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)及在實驗室進行微生物的基礎(chǔ)理論和應(yīng)用方面的研究按使用目的不同劃分基礎(chǔ)培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基微生物產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基特殊營養(yǎng)物質(zhì)包括血液、血清、酵母浸膏、動植物組織液等在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長按用途不同劃分孢子培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供制備孢子用的培養(yǎng)基

種子培養(yǎng)基滿足菌種生長的培養(yǎng)基

滿足大生產(chǎn)中大量菌體生長和繁殖以及代謝產(chǎn)物積累的營養(yǎng)基質(zhì)

特點：1.富含有機氮源，少含或不含糖分。有機氮有利于菌體的生長繁殖，能獲得更多的細胞。2.對于放線菌或霉菌的產(chǎn)孢子培養(yǎng)基，則氮源和碳源均不宜太豐富，否則容易長菌絲而較少形成孢子。3.斜面培養(yǎng)基中宜加少量無機鹽類，供給必要的生長因子和微量元素。種子培養(yǎng)基(包括搖瓶種子和小罐種子培養(yǎng)基)：

培養(yǎng)種子的目的：1.擴大培養(yǎng)，增加細胞數(shù)量；同時也必須培養(yǎng)出強壯、健康、活性高的細胞。為了使細胞迅速進行分裂或菌絲快速生長。種子培養(yǎng)基特點：1.必須有較完全和豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，特別需要充足的氮源和生長因子。2.種子培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度不必太高。供孢子發(fā)芽生長用的種子培養(yǎng)基，可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。3.種子培養(yǎng)基成分還應(yīng)考慮與發(fā)酵培養(yǎng)基的主要成分相近。二、發(fā)酵培養(yǎng)基選擇的依據(jù)

根據(jù)微生物的特點選擇培養(yǎng)基細菌、酵母菌、霉菌、放線菌四類根據(jù)發(fā)酵方式選擇培養(yǎng)基從生產(chǎn)實踐和科學(xué)試驗的不同要求選擇從經(jīng)濟效益方面考慮選擇培養(yǎng)基(1)必須提供合成微生物細胞和發(fā)酵產(chǎn)物的基本成分。(2)有利于減少培養(yǎng)基原料的單耗，即提高單位營養(yǎng)物質(zhì)所合成產(chǎn)物數(shù)量或最大產(chǎn)率。(3)有利于提高培養(yǎng)基和產(chǎn)物的濃度，以提高單位容積發(fā)酵罐的生產(chǎn)能力。(4)有利于提高產(chǎn)物的合成速度，縮短發(fā)酵周期。(5)盡量減少副產(chǎn)物的形成，便于產(chǎn)物的分離純化。(6)原料價格低廉，質(zhì)量穩(wěn)定，取材容易。7)所用原料盡可能減少對發(fā)酵過程中通氣攪拌的影響，利于提高氧的利用率，降低能耗。(8)有利于產(chǎn)品的分離純化，并盡可能減少產(chǎn)生“三廢”的物質(zhì)。三、發(fā)酵培養(yǎng)基的配制原則

根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要營養(yǎng)成分的恰當(dāng)比例滲透壓pH值氧化還原電位注意的幾個問題。四、培養(yǎng)基成分配比的選擇培養(yǎng)基的組分、配比、緩沖能力、黏度、消毒是否徹底、消毒后營養(yǎng)破壞的程度及原料中雜質(zhì)的含量都對菌體生長和產(chǎn)物形成有影響。理論+經(jīng)驗數(shù)學(xué)分析方法正交實驗設(shè)計，方差分析因素水平玉米粉（％）A豆餅粉（％）B蛋白胨（％）CPH

D10.540.55.021.050.65.531.560.76.0正交表因素水平第一節(jié)、培養(yǎng)基的類型及功能第二節(jié)、工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基第三節(jié)、淀粉水解糖的制備第四節(jié)、其他原料一、培養(yǎng)基的類型和用途二、培養(yǎng)基的選擇三、培養(yǎng)基的配制原則四、培養(yǎng)基成分配比的選擇一、工業(yè)上常用的碳源二、工業(yè)上常用的氮源三、無機鹽四、生長因子五、前體物質(zhì)和促進劑碳源：供給菌體生命活動所需的能量和構(gòu)成菌體細胞以及代謝產(chǎn)物的基礎(chǔ)。有糖類、脂肪、某些有機酸等等。氮源：主要構(gòu)成菌體細胞物質(zhì)和代謝產(chǎn)物，即蛋白質(zhì)、氨基酸等之類的含氮代謝物?？煞譃橛袡C氮源和無機氮源。功能：構(gòu)成菌體成分；作為酶的組成分或維持酶的活性；調(diào)節(jié)滲透壓、PH值、氧化還原電位等。無機鹽：鉛、鎂、硫、磷、鉀、鈉、氯、鋅、鈷、錳。特殊生長因子：其功能是構(gòu)成輔酶的組成分，促進生命活動的進行。如生物素、硫胺素、肌醇等，但需要量是極少的。水：體內(nèi)各種生化作用必須在水溶液中進行。營養(yǎng)物質(zhì)必須溶解于水中，才能透過細胞膜被微生物利用。誘導(dǎo)劑、前體和促進劑：胞外酶合成需要誘導(dǎo)物。一、工業(yè)上常用的碳源1、作用提供微生物菌種的生長繁殖所需的能源和合成菌體所必需的碳成分

提供合成目的產(chǎn)物所必須的碳成分2、來源糖類、油脂、有機酸、正烷烴③淀粉、糊精使用條件：微生物必須能分泌水解淀粉、糊精的酶類缺點：難利用、發(fā)酵液比較稠、一般>2.0%時加入一定的α-淀粉酶成分比較復(fù)雜，有直鏈淀粉和支鏈淀粉等等。優(yōu)點：來源廣泛、價格底難利用，可以解除葡萄糖效應(yīng)李江華，無錫輕工大學(xué)學(xué)報，2004(半纖維素酶)(1.5g麩皮)二、氮源

氮源主要用于構(gòu)成菌體細胞物質(zhì)（氨基酸，蛋白質(zhì)、核酸等）和含氮代謝物。常用的氮源可分為兩大類：有機氮源和無機氮源。

1、無機氮源種類：氨鹽、硝酸鹽和氨水特點：微生物對它們的吸收快，所以也稱之謂迅速利用的氮源。但無機氮源的迅速利用常會引起pH的變化如：(NH4)2SO4

→2NH3+2H2SO4

NaNO3+4H2

→NH3+2H2O+NaOH

無機氮源被菌體作為氮源利用后，培養(yǎng)液中就留下了酸性或堿性物質(zhì)，這種經(jīng)微生物生理作用（代謝）后能形成酸性物質(zhì)的無機氮源叫生理酸性物質(zhì)，如硫酸胺，若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的則此種無機氮源稱為生理堿性物質(zhì)，如硝酸鈉。正確使用生理酸堿性物質(zhì)，對穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程的pH有積極作用。所以選擇合適的無機氮源有兩層意義：

滿足菌體生長穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程中的pH2、有機氮源來源：工業(yè)上常用的有機氮源都是一些廉價的原料，花生餅粉、黃豆餅粉、棉子餅粉、玉米漿、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、魚粉、蠶蛹粉、尿素、廢菌絲體和酒糟。成分復(fù)雜：除提供氮源外，有些有機氮源還提供大量的無機鹽及生長因子。例玉米漿：①可溶性蛋白、生長因子（生物素）、苯乙酸②較多的乳酸③硫、磷、微量元素等培養(yǎng)基成分用量的多少大部分根據(jù)經(jīng)驗而來。但對于主產(chǎn)物代謝途徑清楚的物質(zhì)如酒精，可通過物料平衡計算加以確定。對于次級代謝產(chǎn)物，生物合成途徑了解有限，根據(jù)化學(xué)計算比較困難，但也有人根據(jù)物料平衡計算了碳源轉(zhuǎn)化為青霉素的得率。培養(yǎng)基在大規(guī)模生產(chǎn)中用量很大，在選用時應(yīng)盡量地利用較豐富的廉價原料，設(shè)法降低成本。例如，賴氨酸（lys）生產(chǎn)中用山芋淀粉，后改為用山芋粉為碳源，這樣不僅價廉，而且山芋粉中還含有生物素、鎂鹽等；省去了原來所加的玉米漿、硫酸鎂，并使整個成本降低15%。用于生產(chǎn)疫苗的培養(yǎng)基，通常是用牛血清蛋白、牛肉汁等蛋白質(zhì)作為碳源。三、無機鹽1、作用：各種不一樣2、來源：C、N源，以鹽的形式補充3、用量：根據(jù)具體的產(chǎn)品，以實驗決定4、使用注意點A.對于其它渠道有可能帶入的過多的某種無機離子和微量元素在發(fā)酵過程中必須加以考慮.B、使用時注意鹽的形式（pH的變化）例：黑曲酶NRRL-330,生產(chǎn)α-淀粉酶，P對酶活的影響pH酶活不加4.25120分鐘加K2HPO45.4530分鐘加KH2PO44.6275分鐘１、磷酸鹽磷是某些蛋白質(zhì)和核酸的組成成分。工業(yè)上常用K3PO4.3H20、K3PO4和Na2HPO4.12H2O、NaH2PO4.2H2O等磷酸鹽，也可用磷酸（使用時應(yīng)先用NaOH或KOH中和后加入）。玉米漿、糖蜜、淀粉水解糖等原料中還有少量的磷。２、硫酸鎂鎂是某些細菌的葉綠素的組成成分。雖不參加任何細胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)的組成，但它的離子狀態(tài)是許多重要的酶的激活劑。硫，含硫蛋白質(zhì)的組分；酶的活性基。硫酸鎂２、鉀鹽鉀不參加細胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)的組成，但它是許多酶的激活劑。３、微量元素銅、錳、鋅、鉬、碘、溴等。避免有害離子加入到培養(yǎng)基中。四、生長因子

從廣義上講，凡是微生物生長不可缺少的微量的有機物質(zhì)，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等均稱生長因子。

提供生長因子的農(nóng)副產(chǎn)品原料：（1）玉米漿：玉米漿是用亞硫酸浸泡玉米而得的浸泡液的濃縮物，也是玉米淀粉生產(chǎn)的副產(chǎn)品。一般用量為0.4－0.8%。（2）麩皮水解液：可以代替玉米漿，但蛋白質(zhì)、氨基酸等營養(yǎng)成分比玉米漿少。用量一般為1%（干麩皮計）左右。（3）糖蜜

前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，能直接在生物合成過程中合成到產(chǎn)物分子中去，而其自身的結(jié)構(gòu)并沒有多大變化，但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。五、前體物質(zhì)和促進劑青霉素：分子量356苯乙酸:分子量136１、前體在抗生素發(fā)酵中大多數(shù)的前體物質(zhì)對生產(chǎn)菌體有毒，故一次加入量不宜過大。苯乙酸，一般基礎(chǔ)料中僅僅添加0.07%。為避免前體物質(zhì)濃度過大，一般采取間隙分批添加或連續(xù)滴加的方法加入。

所謂產(chǎn)物促進劑是指那些非細胞生長所必須的營養(yǎng)物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑。

２、產(chǎn)物促進劑

促進劑提高產(chǎn)量的機制還不完全清楚，其原因是多方面的。有些促進劑本身是酶的誘導(dǎo)物；有些促進劑是表面活性劑，可改善細胞的透性，改善細胞與氧的接觸從而促進酶的分泌與生產(chǎn)，也有人認為表面活性劑對酶的表面失活有保護作用；有些促進劑的作用是沉淀或螯合有害的重金屬離子。

在發(fā)酵過程中添加促進劑的用量極微，選擇得好，效果較顯著，但一般來說，促進劑的專一性強，往往不能相互套用。

能產(chǎn)生抑制作用的物質(zhì)。

3、抑制劑在發(fā)酵過程中加入某些抑制劑會抑制某些代謝途徑的進行，同時會使另一個代謝途徑活躍，從而獲得人們所需的某種產(chǎn)物或使正常代謝的某一中間物積累起來。抑制劑對代謝的抑制作用是發(fā)生在代謝鏈分枝代謝途徑上。e.g.（1）四環(huán)素發(fā)酵過程中，添加NaBr,可以抑制金霉素的生物合成，從而提高四環(huán)素的產(chǎn)率。（2）頭孢霉素C，添加L—Met，可以抑制頭孢霉素N的生物合成，從而提高頭孢霉素C的產(chǎn)率。幾個發(fā)酵培養(yǎng)基例子

代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基衣康酸甘蔗糖蜜，150g/L；ZnSO4，1.0g/L；MgSO4，3.0g/L；CuSO4，0.01g/L赤霉素葡萄糖，20g/L；MgSO4，1.0g/L；NH4NO3，1.0g/L；KH2PO4，5.0g/L；FeSO4·7H2O，0.01g/L；MnSO4·4H2O，0.01g/L；ZnSO4·7H2O，0.01g/L；CuSO45H2O，0.01g/L；玉米漿（干固形物），7.5g/L核黃素大豆油，20mL/L；甘油，20mL/L；葡萄糖，20g/L；玉米漿，12mL/L；酪蛋白，12g/L；KH2PO4，1.0g/L青霉素葡萄糖或糖蜜，總量的10%；玉米漿，總量的4%－5%；苯乙酸，總量的0.5%－0.8%；豬油或植物油、消泡劑，總量的0.5%第一節(jié)、培養(yǎng)基的類型及功能第二節(jié)、工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基第三節(jié)、淀粉水解糖的制備第四節(jié)、其他原料一、工業(yè)上常用的碳源二、工業(yè)上常用的氮源三、無機鹽四、生長因子五、前體物質(zhì)和促進劑一、淀粉水解糖的制備方法二、淀粉酸水解原理三、淀粉酸水解工藝四、雙酶水解法制糖五、水解糖液的質(zhì)量要求

許多微生物由于其本身的生理生化特性而決定了其代謝所需的底物只能使葡萄糖等單糖，主要有下列菌種：酵母：G、F、蔗糖、半乳糖、以及部分麥芽糖等大部分的細菌：GA（沒食子酸）產(chǎn)生菌、Lys產(chǎn)生菌、蘇云金芽孢桿菌等；其中：地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌則可以以淀粉為原料。霉菌：大部分的霉菌可以直接使用淀粉為原料，他們本身具有淀粉的水解能力。第三節(jié)、淀粉水解糖的制備作為Glu發(fā)酵原料的水解糖液，必須具備以下條件：①糖液中還原糖的含量要達到發(fā)酵用糖的標準。②糖液潔凈、杏黃色或黃綠色，有一定的透光度。③糖液中不含糊精。④糖液不能變質(zhì)。原料：薯類（甘薯、木薯等）、玉米、小麥、大米（或碎米粉）例一、淀粉水解糖的制備方法酸解法以酸為催化劑，在高溫高壓下將淀粉轉(zhuǎn)化為葡萄糖的方法。酸酶法先將淀粉用酸水解成糊精或低聚糖，再用糖化酶水解成葡萄糖。酶酸法將淀粉先用α—淀粉酶液化，然后用酸水解成葡萄糖。雙酶法用淀粉酶和糖化酶將淀粉水解成葡萄糖的工藝。１、酸解法：以酸為催化劑，在高溫高壓下將淀粉轉(zhuǎn)化為葡萄糖的方法。優(yōu)點：生產(chǎn)方便，設(shè)備要求簡單，水解時間短、設(shè)備生產(chǎn)能力大等。缺點：設(shè)備？淀粉轉(zhuǎn)化率？淀粉原料？淀粉乳濃度？要求有耐腐蝕、耐高壓、耐高溫的設(shè)備。酸水解過程化學(xué)反應(yīng)復(fù)雜，副反應(yīng)多，淀粉轉(zhuǎn)化率低。酸水解法對淀粉原料要求較嚴格，淀粉顆粒不宜過大，大小要均勻。淀粉乳濃度不宜過高，濃度高，淀粉轉(zhuǎn)化率低。２、雙酶法：用淀粉酶和糖化酶將淀粉水解成葡萄糖的工藝。優(yōu)點：設(shè)備？淀粉轉(zhuǎn)化率？淀粉乳濃度？糖液質(zhì)量？缺點：酶解反應(yīng)時間長(48h)，需要的設(shè)備多；而且酶本身也是蛋白質(zhì)，易引起糖液過濾困難。反應(yīng)條件溫和，不需耐腐蝕、耐高壓、耐高溫的設(shè)備，便于就地取材，容易運作。酶作用專一性強，淀粉水解的副反應(yīng)少，因而水解糖液的純度高，淀粉轉(zhuǎn)化率高?？稍谳^高淀粉乳濃度下水解，而且可采用粗原料。該法制得的糖液較純凈，質(zhì)量高，有利于糖液的充分利用。３、酸酶法：先將淀粉用酸水解成糊精或低聚糖，再用糖化劑水解成葡萄糖。對于淀粉顆粒堅硬的原料４、酶酸法將淀粉先用α—淀粉酶液化，然后用酸水解成葡萄糖。對于顆粒不均勻的原料。

表：酸法與雙酶法糖液質(zhì)量比較項目酸水解法雙酶法項目酸水解法雙酶法葡萄糖值(DE值)葡萄糖含量(干基)灰分蛋白質(zhì)羥甲基糠醛色度淀粉轉(zhuǎn)化率工藝條件9186％1.6%0.08%0.30%10.090%高溫高壓9897%0.1%0.1%0.003%0.298%高溫過程能耗副產(chǎn)物生產(chǎn)周期設(shè)備規(guī)模防腐要求葡萄糖收得率適合發(fā)酵生產(chǎn)工藝情況多多短小高較低差少少長大低交酸法高10％有利總結(jié)優(yōu)缺點？二、淀粉酸水解原理三、淀粉酸水解工藝１、淀粉酸水解的工藝流程⑴、淀粉乳濃度的選擇淀粉乳的濃度越低，水解液的葡萄糖值越高，色澤越淡。２、淀粉酸水解條件控制及對糖液質(zhì)量的影響淀粉乳濃度/oBx2624222019181716DE值89.1789.2789.9291.1091.392.7792.8193.01Bx(玻利克斯)：

定義：某一溶液的Bx，表示該溶液的比重和相同濃度（為Bx%）的蔗糖溶液的比重相等。⑵、酸的種類和用量工業(yè)上普遍使用鹽酸、硫酸和草酸。一般用鹽酸量占干淀粉的0.6%～0.7%，pH值調(diào)至1.5左右。⑶、糖化的壓力和時間壓力與水解速率成正比。中和：降低糖液的酸度，調(diào)節(jié)pH值，使糖液中膠體物質(zhì)析出，便于過濾除去。中和劑：純堿、燒堿。脫色、除雜活性炭吸附法、離子交換法、新型磺化煤脫色壓濾一般采用60～70°C溫度壓濾。３、水解糖液質(zhì)量的中和脫色除雜四、雙酶水解法制糖糊化液化糖化（一）液化1、淀粉酶的水解作用。2、淀粉液化的條件及液化程度的控制淀粉的糊化與老化液化的方法與選擇老化：淀粉的老化實際上是分子間氫鍵已斷裂的糊化淀粉重新排列形成新的氫鍵的過程，也就是復(fù)結(jié)晶過程。各類液化方法的比較液化方法基本條件優(yōu)點缺點酸法液化淀粉乳含量30％，pH值1.8~2.0,液化溫度135，10min，液化DE值15％～18％適合任何精制淀粉，所得的糖液過濾性能好有色物質(zhì)及復(fù)合糖類生成，淀粉轉(zhuǎn)化率低，糖液質(zhì)量差，糖化液中含有微量醇和不溶性糊精酶法液化間歇液化法（升溫液化法）淀粉乳含量30％，pH值6.5,0.01mol/L,液化溫85~90,30~60min，液化DE值15％～18％設(shè)備要求低，操作容易。液化效果一般，經(jīng)糖化后的糖化液過濾性能差，糖濃度低半連續(xù)液化法（高溫液化法）淀粉乳含量30％，pH值16.5,液化溫度90，30~60min，液化DE值15％～18％設(shè)備要求低，操作容易，效果比直接升溫好料液容易濺出，操作安全性差，蒸汽用量大，液化溫度未達到高溫酶的最適溫度，液化效果一般，糖化液過濾性能差噴射液化法淀粉乳含量30％，pH值6.5,液化溫度95~14010~120min，液化DE值15％～17％液化效果好，液化液質(zhì)量好，葡萄糖的收率高3、蒸汽噴射液化工藝工藝流程①在配料罐內(nèi)，淀粉加水調(diào)制成淀粉乳，用Na2CO3調(diào)pH值處于5.0~7.0之間。②加入0.15%的氯化鈣作為淀粉乳的保護劑和激活劑，再加入耐溫α─淀粉酶，攪拌勻后用泵打入噴射液化器。③從噴射器中出來的料液和高溫蒸汽直接接觸，料液在很短時間內(nèi)升溫至95~97度。④此后料液進入保溫罐保溫60min，溫度維持在95~97度，然后進行二次噴射。3、工藝及條件

蒸汽噴射液化工藝流程：調(diào)漿

配料

一次噴射液化

液化保溫

95-97℃60min

二次噴射

高溫維持

二次液化145℃3-5min95-97℃30min

冷卻

糖化碳酸鈉調(diào)pH、CaCl2、酶水蒸汽噴射液化工藝⑤在第二只噴射器內(nèi)料液和蒸汽直接接觸，使溫度迅速升至145度以上，并在維持罐內(nèi)維持該溫度3～5min左右，徹底殺死耐高溫α─淀粉酶。⑥料液經(jīng)真空閃急冷卻系統(tǒng)進入二次液化罐，將溫度降低到95～97度。⑦在二次液化罐中加入耐高溫α─淀粉酶，液化約30min，用碘呈色試驗合格后，結(jié)束液化。特點：短時間內(nèi)快速升溫，完成糊化、液化，使形成的不溶性淀粉顆粒在高溫下分散，數(shù)量也大為減少，從而使所得的液化液透明又易于過濾，淀粉的出糖率也高。采用真空閃急冷卻，增高了液化液的濃度噴射液化法1、糖化酶的水解作用2、糖化的工藝條件及控制（二）、糖化1、糖