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細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程1.細(xì)胞的全能性(1)定義:細(xì)胞經(jīng)分裂和后,仍然具有產(chǎn)生或分化成其他的潛能。(2)在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,并不是所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性,這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和條件下,細(xì)胞中的基因會(huì)地表達(dá)。2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)理論基礎(chǔ):。3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)前提:的植物器官、組織或細(xì)胞等。4.植物組織培養(yǎng)技術(shù)結(jié)果:脫分化形成,再誘導(dǎo)其再分化成胚狀體,長(zhǎng)出和,進(jìn)而發(fā)育成完整的植株。5.生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值高時(shí):6.植物體細(xì)胞雜交:將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成,并把培育成新的技術(shù)。7.去壁:用去除植物細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體。8.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法①物理法:等。②化學(xué)法:融合法、融合法等。9.植物體細(xì)胞雜交的原理原生質(zhì)體融合的過(guò)程利用了細(xì)胞膜的性,雜種細(xì)胞發(fā)育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的。10.意義:打破、實(shí)現(xiàn)育種,培育植物新品種。第2課時(shí)植物細(xì)胞工程的應(yīng)用1.快速繁殖概念:用于快速繁殖優(yōu)良品種的技術(shù),也叫作繁殖技術(shù)。2.作物脫毒選材部位:植物頂端附近的部位(如)。3.單倍體育種原理:細(xì)胞的和。第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程第1課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、和動(dòng)物細(xì)胞核移植等,其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)條件①營(yíng)養(yǎng)條件eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(無(wú)機(jī)物:無(wú)機(jī)鹽,有機(jī)物:糖類(lèi)、氨基酸、等,天然成分:等))將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按種類(lèi)和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基,稱(chēng)為。培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用培養(yǎng)基,也稱(chēng)為。②無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換,以便清除,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。③溫度、pH和滲透eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(溫度:哺乳動(dòng)物細(xì)胞多以為宜,pH:多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞適宜pH為,滲透壓))④氣體環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(O2:細(xì)胞代謝所必需的,CO2:))在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有和5%CO2的混合氣體的中進(jìn)行培養(yǎng)。4.懸液中分散的細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上,這一現(xiàn)象叫。5.當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞的現(xiàn)象,叫作。6.干細(xì)胞的來(lái)源:、骨髓和等多種組織和器官中。7.成體干細(xì)胞特點(diǎn):具有組織性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,發(fā)育成完整個(gè)體的能力。8.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞:通過(guò)體外誘導(dǎo)等細(xì)胞,獲得類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,被稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng)細(xì)胞)。第2課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體9.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)原理:。10.誘導(dǎo)融合的方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(PEG融合法,法,法))11.制備過(guò)程制備特異性B淋巴細(xì)胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①用特定抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,②從小鼠的脾中得到能產(chǎn)生,特定抗體的))?獲得雜交瘤eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①將骨髓瘤細(xì)胞與多種B淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)融合,②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出,細(xì)胞,該雜種細(xì)胞既能,,又能))?培養(yǎng)和檢測(cè)?將雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)或注射到小鼠內(nèi)增殖?提取單克隆抗體:從細(xì)胞或小鼠中提取12.單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):第3課時(shí)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物13.體細(xì)胞核移植概念將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的移入去核的中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成,繼而發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。14.動(dòng)物細(xì)胞核移植的原理:第3節(jié)胚胎工程第1課時(shí)胚胎工程的理論基礎(chǔ)15.胚胎工程的概念(1)操作對(duì)象:動(dòng)物、受精卵或細(xì)胞。(2)技術(shù)基礎(chǔ):如、胚胎移植、等。16.受精場(chǎng)所:哺乳動(dòng)物的內(nèi)。17.精子獲能在內(nèi)完成18.受精的標(biāo)志是19.受精完成的標(biāo)志為20.透明帶的反應(yīng)發(fā)生在21.卵細(xì)胞膜的反應(yīng)是22.早期胚胎發(fā)育各階段的特點(diǎn)(1)卵裂:細(xì)胞分裂方式為,細(xì)胞的數(shù)量不斷增加,胚胎的總體積,在內(nèi)進(jìn)行。(2)桑葚胚:每個(gè)細(xì)胞都是。(3)囊胚:細(xì)胞逐漸,將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成,隨著胚胎的進(jìn)一步發(fā)育,出現(xiàn)囊胚腔。(4):囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致破裂,胚胎從其中伸展出來(lái)。(5)原腸胚:原腸胚表面的細(xì)胞層為,向內(nèi)遷移的細(xì)胞形成,一部分細(xì)胞在內(nèi)、外兩個(gè)胚層之間形成,這三個(gè)胚層將逐漸分化形成各種組織、器官等。第2課時(shí)胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用23.胚胎工程技術(shù):胚胎工程技術(shù)目前在醫(yī)學(xué)和生產(chǎn)上應(yīng)用較多的是體外受精、和等。24.胚胎移植①移植對(duì)象:通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎。②移植條件:、相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)。25.胚胎移植時(shí)兩次使用激素:第一次用激素對(duì)進(jìn)行,第二次用激素對(duì)供體進(jìn)行處理。26.胚胎移植過(guò)程中進(jìn)行兩次檢查的時(shí)間和目的分別是第一次檢查在后檢查的發(fā)育狀況;第二次檢查在后,對(duì)受體母牛進(jìn)行是否檢查。27.請(qǐng)就移植胚胎的可能來(lái)源思考其生殖方式。胚胎的來(lái)源生殖方式核移植體外受精體內(nèi)受精28.胚胎分割實(shí)質(zhì):動(dòng)物的繁殖或克隆。29.主要儀器設(shè)備:和30.操作程序(1)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的或,移入盛有的培養(yǎng)皿中。(2)在顯微鏡下用或分割刀分割,在分割囊胚階段的胚胎時(shí),注意將均等分割。(3)還可用分割針?lè)指睿鯠NA分析,鑒定性別。(4)分割后的胚胎可以直接移植給受體,或經(jīng)后,再移植給受體。3細(xì)胞工程第1節(jié)植物細(xì)胞工程1.細(xì)胞的全能性(1)定義:細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。(2)在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,并不是所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性,這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和空間條件下,細(xì)胞中的基因會(huì)選擇性地表達(dá)。2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞的全能性。3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)前提:離體的植物器官、組織或細(xì)胞等。4.植物組織培養(yǎng)技術(shù)結(jié)果:脫分化形成愈傷組織,再誘導(dǎo)其再分化成胚狀體,長(zhǎng)出芽和根,進(jìn)而發(fā)育成完整的植株。5.生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值高時(shí):促進(jìn)根的分化、(抑制芽的形成)6.植物體細(xì)胞雜交:將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。7.去壁:用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體。8.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法①物理法:電融合法、離心法等。②化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等。9.植物體細(xì)胞雜交的原理原生質(zhì)體融合的過(guò)程利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,雜種細(xì)胞發(fā)育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。10.意義:打破生殖隔離、實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,培育植物新品種。第2課時(shí)植物細(xì)胞工程的應(yīng)用1.快速繁殖概念:用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù),也叫作微型繁殖技術(shù)。2.作物脫毒選材部位:植物頂端分生區(qū)附近的部位(如莖尖)。3.單倍體育種原理:細(xì)胞的全能性和染色體變異。第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程第1課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞核移植等,其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)條件①營(yíng)養(yǎng)條件eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(無(wú)機(jī)物:無(wú)機(jī)鹽,有機(jī)物:糖類(lèi)、氨基酸、維生素等,天然成分:血清等))將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按種類(lèi)和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基,稱(chēng)為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基,也稱(chēng)為培養(yǎng)液。②無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換,以便清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。③溫度、pH和滲透壓eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(溫度:哺乳動(dòng)物細(xì)胞多以36.5±0.5℃為宜,pH:多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,滲透壓))④氣體環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(O2:細(xì)胞代謝所必需的,CO2:維持培養(yǎng)液的pH))在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。4.懸液中分散的細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上,這一現(xiàn)象叫細(xì)胞貼壁。5.當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象,叫作接觸抑制。6.干細(xì)胞的來(lái)源:早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。7.成體干細(xì)胞特點(diǎn):具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。8.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞:通過(guò)體外誘導(dǎo)成纖維等細(xì)胞,獲得類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,被稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng)iPS細(xì)胞)。第2課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體9.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。10.誘導(dǎo)融合的方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(PEG融合法,電融合法,滅活病毒誘導(dǎo)法))11.制備過(guò)程制備特異性B淋巴細(xì)胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①用特定抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,②從小鼠的脾中得到能產(chǎn)生,特定抗體的B淋巴細(xì)胞))?獲得雜交瘤細(xì)胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①將骨髓瘤細(xì)胞與多種B淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)融合,②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤,細(xì)胞,該雜種細(xì)胞既能迅速大量增殖,,又能產(chǎn)生抗體))?克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)?將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖?提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取12.單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備。第3課時(shí)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物13.體細(xì)胞核移植概念將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。14.動(dòng)物細(xì)胞核移植的原理:動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性第3節(jié)胚胎工程第1課時(shí)胚胎工程的理論基礎(chǔ)15.胚胎工程的概念(1)操作對(duì)象:動(dòng)物生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞。(2)技術(shù)基礎(chǔ):如體外受精、胚胎移植、胚胎分割等。16.受精場(chǎng)所:哺乳動(dòng)物的輸卵管內(nèi)。17.精子獲能在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)完成18.受精的標(biāo)志是在透明帶和卵細(xì)胞膜之間觀(guān)察到兩個(gè)極體19.受精完成的標(biāo)志為雌、雄原核的融合。20.透明帶的反應(yīng)發(fā)生在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間。21.卵細(xì)胞膜的反應(yīng)是拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)。22.早期胚胎發(fā)育各階段的特點(diǎn)(1)卵裂:細(xì)胞分裂方式為有絲分裂,細(xì)胞的數(shù)量不斷增加,胚胎的總體積并不增加,在透明帶內(nèi)進(jìn)行。(2)桑葚胚:每個(gè)細(xì)胞都是全能細(xì)胞。(3)囊胚:細(xì)胞逐漸分化,內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織,
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