中山大學人類染色質標本的制備與觀察報告

O二一年七月二十九日O二一年七月二十九日X時間：二時間：二O二一年七月二十九日張皓予15335203一、試驗目的把握人體口腔黏膜上皮細胞制備的方法。正確識別巴氏小體的特征及其所在位置。說明人體細胞中核內X染色體的數(shù)目和性染色體數(shù)目之間存在的關系。二、試驗原理X染色質呈現(xiàn)于女性體細胞間期細胞核內。在口腔黏膜細胞、羊水脫落細胞、皮膚結締組織等細胞中均可檢出。用苯酚品紅改進染液染色后，即可觀看到染色較濃，多位于核膜內側緣，1μm40%~60%。Barr和Bertram〔1949〕在雌性貓的神經細胞核中覺察，在多數(shù)核中部有一個小的深染的小體，而在雄性貓的同樣細胞中只能偶而觀看到這種小體，此后很多人的爭論指出這種與性別有關的兩型現(xiàn)象在有袋類、偶蹄類、食肉類和靈長類等動物的多數(shù)組織細胞中存在，而在噬齒類中只在少數(shù)組織中可以觀看到。這種染色質小表達在稱為“性染色質”(sexchromatin)，或稱為“巴氏小體”(Barrbody)。這種小體常位于核膜的內概況，呈Feulgen陽性反響，標明是DNA質的存在是由于在雌性哺乳動物核中存在兩個X個XX則上男性不該有性染色質。但假設一個男人有XXY會有一共性染色質，雖然表示為男性。同樣，XXX個巴氏小體。因此，性染色質實質上是一個失活的X什么失活的X染色體會以巴氏小體的形式顯示出來?目前，已有很多證據(jù)證明，在雌性個體中那根失活的X染色體已經異染質化，成為功能性異染質。使用放射自顯影的方法已經證明，失活的X染色體的固縮周期與其它染色體是分歧步的，它在S的。此外，人們也已覺察，晚復制的這根X沿，這個位置也正好是巴氏小體消滅的位置。三、試驗儀器與試劑顯微鏡，水浴鍋，牙簽，載玻片，蓋玻片，鑷子，吸水紙。95%乙醇，1mol/L四、試驗資料男性和女性人體口腔黏膜細胞。五、試驗步調受檢者用水漱口，用牙簽刮取受檢者口腔頰部黏膜，把第一次刮取物棄去，然后再次用牙簽刮取黏膜，將其次次刮取物均勻涂布到干凈的載玻片上，晾干。9520min，取出晾干。1MHCl3720min，取出后自來水緩緩沖洗。8min，不枯燥，輕輕蓋上蓋玻片，用吸水紙蓋住輕輕壓片。鏡檢，從低倍鏡到高倍鏡依次觀看。六、試驗結果1、2、3女性口腔上皮細胞被染色的細胞核與巴氏小體〔箭頭〕41、23角的有一不明顯的深色斑塊，可能是巴氏小體。4氏小體。50個女性細胞有21個有42%；500七、爭論1、鏡檢時覺察女性上皮細胞標本中的細胞數(shù)較少，密度低較分散〔圖3比照圖4〕?？赡苁怯捎谕科瑫r不敷均勻，大局部涂在玻片邊沿導致在后續(xù)固定、沖洗、染色、壓片等步調時有細胞流失。也有可能是染色時間不敷或者刮取細胞時刮得太少所致。2、觀看覺察女性上皮細胞當中的巴氏小體形態(tài)多有些模糊，且染色較淺，可能是由于染色時間較短導致。本試驗染色時間為8min，后續(xù)試驗可以適當延長染色時間〔>10min〕以使試驗效果更加明顯。八、思考題1、男性沒有巴氏小體的理論根底為維持雌雄兩性生物基因表達全都，細胞中存在一種劑量抵償效應，使細胞中只含有一份有活性的X染色體，而多余的染色體失活形成巴氏小體，雌性的兩個X染色體所攜帶的兩份基因的遺傳效應即可與雄性一個X染色體所具有的一份基因的遺傳效應基內幕當。而由于男性自己就只有一條X染色體，所以不需要使多出的X2、男變女的變性手術后，該女性有無巴氏小體？沒有，由于變性手術只是轉變了個體的外在表型如個別器官的外形和功能等，不克不及轉變其細胞內染色體的構成，故該個體仍只有一條X3、鑒定巴氏小體有什么臨床意義？巴氏小體的臨床意義在于能夠用來鑒別性別。例如可以通過對胎兒羊水中取得的脫落的細胞的檢查推斷性別，如有巴氏小體，胎兒為女性，假設細胞中無巴氏小體，胎兒為男性。原男性變性運發(fā)動介入女子工程，可通過檢查其白細胞中有無巴氏小體而確定其性別。通過巴氏小體檢查可確定胎兒性別和查出性染色體特別的患時間：二O二一年七月二十九日者，如克氏〔Klinefelter′s〕綜合征患者外貌為男性，但有一個巴氏小體，可判定患者的核型是