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(優(yōu)選)章核苷酸和核酸現(xiàn)在是1頁\一共有28頁\編輯于星期二2.脫氧核苷酸的水解——脫嘌呤現(xiàn)在是2頁\一共有28頁\編輯于星期二3.紫外線和一些化學(xué)因子、烷化劑對(duì)DNA的損傷現(xiàn)在是3頁\一共有28頁\編輯于星期二亞硝酸現(xiàn)在是4頁\一共有28頁\編輯于星期二烷化劑:乙基甲烷磺酸(EMS)現(xiàn)在是5頁\一共有28頁\編輯于星期二紫外線誘導(dǎo)胸腺嘧啶二聚體現(xiàn)在是6頁\一共有28頁\編輯于星期二4.與嵌合劑的反應(yīng)現(xiàn)在是7頁\一共有28頁\編輯于星期二現(xiàn)在是8頁\一共有28頁\編輯于星期二溴乙啶丫啶橙
放線菌素D
現(xiàn)在是9頁\一共有28頁\編輯于星期二二、DNA的酶法甲基化(methylation)甲基供體:S—腺苷甲硫氨酸甲基受體:被修飾堿基(A、C多于G、T)堿基的甲基化修飾不是隨機(jī)的,而是限于一定的順序或DNA的某一區(qū)域,在甲基化酶的作用下進(jìn)行,甲基化是可逆的。甲基化的意義:幫助細(xì)胞識(shí)別和區(qū)分自身DNA和外來DNA;調(diào)節(jié)基因表達(dá);幫助DNA修復(fù)等。現(xiàn)在是10頁\一共有28頁\編輯于星期二第八節(jié)
核酸酶和DNA限制性內(nèi)切酶現(xiàn)在是11頁\一共有28頁\編輯于星期二一、核酸酶(nuclease)能水解核酸的酶為核酸酶核酸酶都是磷酸二酯酶(phosphodiesterases)現(xiàn)在是12頁\一共有28頁\編輯于星期二核酸酶的分類按底物專一性分類:核糖核酸酶(RNase)和脫氧核糖核酸酶(DNase)按作用方式分類:內(nèi)切核酸酶和外切核酸酶內(nèi)切核酸酶:從核酸的內(nèi)部切割核酸鏈,產(chǎn)生核酸鏈片段。外切核酸酶:從核酸鏈的一端逐個(gè)切斷磷酸二酯鍵,釋放單核苷酸。按磷酸二酯鍵斷裂方式:3’-核酸酶和5’-核酸酶現(xiàn)在是13頁\一共有28頁\編輯于星期二現(xiàn)在是14頁\一共有28頁\編輯于星期二核酸酶對(duì)其底物的作用具有特異性現(xiàn)在是15頁\一共有28頁\編輯于星期二現(xiàn)在是16頁\一共有28頁\編輯于星期二二、限制性內(nèi)切酶(restrictionendonuclease)
限制性內(nèi)切酶是從細(xì)菌中分離的一類專門識(shí)別和水解特定核苷酸序列的內(nèi)切酶類。這類酶在原核生物體內(nèi),用于“防御”外來DNA的入侵,將外來DNA以獨(dú)特的方式切成無感染能力的片段,而自身不受損害(甲基化作用)?,F(xiàn)在是17頁\一共有28頁\編輯于星期二1.限制性內(nèi)切酶的分類Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
基因工程技術(shù)中常用Ⅱ型現(xiàn)在是18頁\一共有28頁\編輯于星期二不需要ATP參加;不對(duì)DNA進(jìn)行甲基化或其它方式修飾。專門識(shí)別和切割特定的核苷酸序列,這個(gè)序列一般含4—6個(gè)核苷酸殘基,并具回文結(jié)構(gòu)“落鶴島上島落鶴,垂柳岸邊岸柳垂”。
2.II型限制性內(nèi)切酶
現(xiàn)在是19頁\一共有28頁\編輯于星期二Ⅱ類酶識(shí)別序列特點(diǎn)
回文結(jié)構(gòu)palindrome現(xiàn)在是20頁\一共有28頁\編輯于星期二切口(kerf):粘端,平端現(xiàn)在是21頁\一共有28頁\編輯于星期二現(xiàn)在是22頁\一共有28頁\編輯于星期二現(xiàn)在是23頁\一共有28頁\編輯于星期二3.限制性內(nèi)切酶的種類(約1000多種)
現(xiàn)在是24頁\一共有28頁\編輯于星期二Hin
dⅢ
屬
系
株序Haemophilusinfluenzaed株流感嗜血桿菌d株的第三種酶命名naming第一個(gè)字母取自產(chǎn)生該酶的細(xì)菌屬(genus)名,用大寫;第二、第三個(gè)字母是該細(xì)菌的種(species)名,用小寫;第四個(gè)字母代表株(strain);用羅馬數(shù)字表示發(fā)現(xiàn)的先后次序(sequence)。現(xiàn)在是25頁\一共有28頁\編輯于
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