細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)課件

細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)培養(yǎng)基常用玻璃器材的準(zhǔn)備培養(yǎng)基的成分和作用培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的制備常用玻璃器材的準(zhǔn)備玻璃器材的種類及用途玻璃器材的清洗★新購置的玻璃器材：1％～2％鹽酸浸泡－→清水清洗★用過的無污染器皿：洗滌劑洗刷－→清水清洗細(xì)菌污染的器材：消毒滅菌后再洗刷★盛培養(yǎng)基試管和平皿：高壓滅菌－→趁熱倒出－→洗滌劑洗刷－→清水沖洗★吸管：3％來蘇浸泡－→清水沖洗★玻片和蓋玻片：3％來蘇和清潔液浸泡－→清水沖洗；染色后的玻片，應(yīng)肥皂水煮沸10min再洗滌★含油脂的器皿：單獨(dú)滅菌培養(yǎng)基的成分和作用培養(yǎng)基：是指人工配制的適合細(xì)菌生長繁殖的綜合營養(yǎng)基質(zhì)。營養(yǎng)物質(zhì)：蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇類、血液、雞蛋和動物血清、生長因子、無機(jī)鹽類水凝固劑：瓊脂、明膠抑制劑指示劑培養(yǎng)基的種類（按用途分類）基礎(chǔ)培養(yǎng)基：培養(yǎng)營養(yǎng)要求不高的細(xì)菌，如普通平板營養(yǎng)培養(yǎng)基：能滿足營養(yǎng)需求較高細(xì)菌的生長，如血平板鑒別培養(yǎng)基：含有某些特定的底物，用于鑒別細(xì)菌，如克氏雙糖培養(yǎng)基（KIA）選擇培養(yǎng)基：具有選擇性抑制作用，用于選擇性的培養(yǎng)目的菌，如SS平板增菌培養(yǎng)基：促進(jìn)目的菌的生長，適用于含菌量較少的標(biāo)本，如葡萄糖肉湯。厭氧培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)厭氧菌培養(yǎng)基的種類（按物理性狀分類）液體培養(yǎng)基：不含凝固劑，用于增菌和接種純種細(xì)菌。半固體培養(yǎng)基：含0.3％～0.5％瓊脂，用于觀察細(xì)菌的動力。固體培養(yǎng)基：含2％～2.5％瓊脂，多用于細(xì)菌的分離培養(yǎng)。培養(yǎng)基pH測定及矯正

材料：待測培養(yǎng)基、pH7.4標(biāo)準(zhǔn)比色管、4孔比色架、0.02％酚紅、氫氧化鈉0.1mol/L、1mol/L）鹽酸（0.1mol/L、1mol/L）蒸餾水試管（與比色管口徑一致）、刻度吸管（5ml、1ml、0.5ml、0.25ml）、pH矯正水培養(yǎng)基培養(yǎng)基比色管酚紅指示劑目視培養(yǎng)基蒸餾水pH矯正過酸相同過堿標(biāo)準(zhǔn)比色管待測管培養(yǎng)基蒸餾水標(biāo)準(zhǔn)比色管待測管培養(yǎng)基蒸餾水標(biāo)準(zhǔn)比色管待測管細(xì)菌的接種與培養(yǎng)無菌技術(shù)細(xì)菌檢驗(yàn)的操作需在無菌室或超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行。無菌室、超凈工作臺使用前后需進(jìn)行消毒。細(xì)菌檢驗(yàn)使用的物品使用前后需嚴(yán)格滅菌標(biāo)本的采集無菌試管、燒瓶的使用細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境細(xì)菌接種法平板劃線接種法：

★目的：使混合的細(xì)菌呈單個(gè)分散生長，形成單個(gè)菌落，以便獲得純菌。

★方法：★分區(qū)劃線法：適用于含菌量較多的標(biāo)本★連續(xù)劃線法：適用于含菌量較少的標(biāo)本液體培養(yǎng)基接種法穿刺接種法:用于觀察細(xì)菌動力斜面接種法傾注培養(yǎng)法:用于細(xì)菌計(jì)數(shù)連續(xù)劃線法細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：★培養(yǎng)溫度：35℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）★培養(yǎng)時(shí)間：18～24h二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌落★定義：指單個(gè)細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長繁殖，形成單一肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)?！锞涮卣鳎捍笮?、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性★菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴(kuò)散生長